增殖细胞核抗原和p53基因在鼻咽癌中的表达及相关性研究

目的:通过免疫组织化学方法检测鼻咽癌(NPC)患者增殖细胞核抗原(PCNA)、p53基因表达,分析其与主要临床指标间的关系。方法:免疫组织化学检测鼻咽活检组织中PCNA、p53蛋白表达,并比较与分析两者和NPC临床分期及颈淋巴结转移的关系。结果:鼻咽部慢性炎性组织中p53阳性率为9.5%,明显低于NPC组织中的阳性率(76.3%)(P<0.01)。NPC伴颈淋巴结转移组p53阳性率(90.9%)明显高于无颈淋巴结转移组(57.7%)(P<0.01),临床Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期p53阳性率(分别为93.3%、80.0%和100.0%)均明显高于临床Ⅰ期(40.0%)(均P<0.01),且表达强度有增加的趋势。随着临床分期的增高,PCNA增殖指数(PI)分级有增高的趋势,NPC伴颈淋巴结转移组中PCNAPI之Ⅰ级所占比例较无颈淋巴结转移组下降,而Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级所占比例增加,但无统计学意义,NPC组织中PCNA表达与p53表达显著相关(P<0.01)。结论:p53蛋白可作为NPC较好的肿瘤标记物,p53阳性的NPC患者较易发生颈淋巴结转移,随着NPC病程的发展,p53表达率及表达强度均增加,PCNAPI可反映NPC的增殖状况,可能与预后相关。     

运用组织芯片技术检测鼻咽癌组织中p27和Cyclin E的表达及临床意义

目的 运用组织芯片技术研究鼻咽癌组织中细胞周期调控因子p27和Cyclin E的表达及其临床意义.方法 采用组织芯片技术制作50例鼻咽癌组织芯片,同时用S-P免疫组织化学方法检测鼻咽癌组织芯片p27和Cyclin E的表达.实验数据的统计分析采用x^2和相关性检验.结果 50例鼻咽癌中,p27阳性12例,强阳性9例,阳性率42% Cyclin E阳性16例,强阳性8例,阳性率48% 有颈淋巴结转移的鼻咽癌Cyclin E阳性表达显著高于无颈淋巴结转移的鼻咽癌（P＜0.01）,而p27阳性表达则明显低于无颈淋巴结转移的鼻咽癌（P＜0.01）.p27阳性的鼻咽癌中Cyclin E的表达低于p27阴性的鼻咽癌.结论 组织芯片技术具有快速、方便、经济、准确的特点.检测结果表明,Cyclin E高表达、p27低表达与鼻咽癌颈淋巴结转移密切相关.     

喉癌组织中CD105标记的微血管密度VEGF及p53蛋白的相关性研究

目的:评价微血管密度(MVD)的临床意义,比较分析CD105、VEGF、p53蛋白之间的相关性,探讨三者在喉癌肿瘤血管生成中的相互关系及临床病理意义。方法:采用免疫组织化学技术检测以CD105标记的MVD(CD105-MVD)、VEGF、p53蛋白在喉癌组织中的表达。结果:40例喉癌组织CD105-MVD为14.90±7.40,明显高于对照组织(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ期喉癌组织的MVD高于Ⅰ、Ⅱ期,颈淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,其差异有统计学意义;VEGF阳性率77.5%。p53蛋白阳性率67.5%。VEGF表达与肿瘤的TNM分期及病理分化有显著相关性(P<0.05)。p53蛋白表达与淋巴结转移呈显著相关(P<0.05)。CD105-MVD与VEGF、p53蛋白之间呈明显正相关(r=0.641,P<0.01;r=0.534,P<0.01)。结论:CD105与肿瘤活性血管生成有密切联系,是肿瘤新生血管的标志;喉癌组织CD105标记MVD的测定可作为预测喉癌患者复发转移及评估预后的重要独立指标;喉癌中VEGF的表达、p53蛋白表达与CD105-MVD呈正相关,三者联合可作为判断喉癌侵袭转移及预后的重要指标。     

增殖细胞核抗原及Bcl-2蛋白在鼻咽癌中的表达

目的:探讨鼻咽癌组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2表达情况及与主要临床指标间的关系。方法:以免疫组化检测鼻咽活检组织中PCNA、Bcl-2蛋白表达,并比较与分析两者和鼻咽癌临床分期及颈淋巴结转移的关系。结果:鼻咽部慢性炎性组织中Bcl-2阳性率为9.5％,明显低于鼻咽癌组织中的阳性率(83.1％)(P<0.01)。PCNA、Bcl-2在鼻咽癌中的表达呈明显负相关(r_s=-0.41,P<0.01)。随着临床分期的增高,PCNA增殖指数(PI)分级有增高的趋势,鼻咽癌伴颈淋巴结转移组中PI之Ⅰ级所占比例,较无颈淋巴结转移组下降,而Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级所占比例增加,但无统计学意义。结论:PCNA PI可反映鼻咽癌的增殖状况,可能与预后相关,Bcl-2蛋白可作为鼻咽癌较好的肿瘤标记物,在鼻咽癌的发生上可能起重要作用。     

CD44V6及p53蛋白在喉癌中表达的临床研究

目的研究CD44V6和p53在喉癌患者中的表达.方法将喉鳞状上皮癌30例术中取的肿瘤中心组织及癌旁>0. 5cm"正常"黏膜组织新鲜标本分为2组.1组行常规病理定性分析及分级,1组用流式细胞仪分析."正常"组织镜检未发现肿瘤细胞.流式细胞术测定喉癌中心、癌旁 "正常"组织中CD44V6 及p53蛋白的表达.分析各部位CD44V6 和p53表达有无差异,不同临床分期,组织学分级,淋巴结有无转移之间CD44V6与p53表达有无差异.分析CD44V6与p53表达在各期肿瘤及不同分化的肿瘤中有无相关性.结果肿瘤组织中CD44V6及p53表达均高于癌旁"正常"组织 (P<0.01).不同分化程度,各临床分期,有或无淋巴结转移各组间p53的表达及在各临床分期各组间CD44V6表达差异均无显著性(P >0.05).在低分化组与中分化组,低分化组与高分化组,有与无淋巴结转移组间CD44V6的表达差异有显著性(P<0.05,P<0.01). p53蛋白与CD44V6分子间表达无相关(P >0.05),CD44V6的表达与有无淋巴结转移(P<0.01),不同组织分化程度(P<0.05)有等级相关关系.结论在喉鳞状上皮细胞癌组织中p53及CD44V6 异常过度表达.p53及CD44V6 在喉鳞状上皮细胞癌的发生发展中是独立事件.CD44V6 与喉鳞癌的分化程度、转移有关,可以作为临床预测喉癌颈部淋巴结转移趋势和估计预后的主要参考指标之一.对CD44V6高表达的喉鳞状上皮细胞癌患者术中行预防性颈淋巴清扫及术后用放化疗等综合治疗可能是必要的.     

COX-2、PCNA及p53在鼻咽癌中的表达及意义

目的：研究COX-2、PCNA及p53的基因产物在鼻咽癌组织中的表达及与其生物学行为和生存率之间的关系。方法:采用免疫组化SP法检测60例鼻咽癌及30例正常鼻咽组织中COX-2、PCNA 及p53的蛋白表达水平。结果:（1） 鼻咽癌组织COX-2、PCNA 及p53阳性表达率分别为90％、75％和68％ ,明显高于正常鼻咽组织;（2） 鼻咽癌组织COX-2、PCNA及p53的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移相关(P＜0.05);（3） COX-2、PCNA及p53的表达密切相关;（4） 鼻咽癌组织COX-2、PCNA 阳性表达和生存率呈负相关,是鼻咽癌复发的显著预后因素。结论:鼻咽癌组织中COX-2、PCNA表达水平明显上调,与鼻咽癌的发生发展及预后不良有关,免疫组化检测COX-2、PCNA表达可用以判断鼻咽癌患者的预后。     

喉鳞癌微血管密度与颈淋巴结转移及病理临床分期的相关性研究

目的研究喉鳞癌微血管密度与颈淋巴结转移及病理临床分期的相关性。方法采用抗Ⅷ因子相关抗原的抗体标记肿瘤血管内皮细胞并测定喉鳞癌组织微血管密度。结果①颈淋巴结转移组喉鳞癌的微血管密度显著高于非转移组(32.1518±6.489∶18.0672±4.983,P<0.01);②喉鳞癌微血管密度大于均数组则颈淋巴结转移率显著增高(P<0.01);③病理临床分期晚期组喉鳞癌的微血管密度明显高于早期组(P<0.01)。结论喉鳞癌微血管密度可作为预测其颈淋巴结转移的一项指标。     

survivin在喉癌和下咽癌中的表达及与p53、bcl-2蛋白表达的关系

目的:探讨survivin在喉癌和下咽癌中的表达情况及与p53、bcl-2间的相互关系.方法:采用免疫组织化学SP法榆测40例喉及下咽癌和10例声带息肉组织中survivin、p53及bcl-2的表达.结果:survivin、p53及bcl-2在喉癌及下咽癌中的阳性表达率分别为70.0%、57.5%和37.5%,而三者在声带息肉组织中均无表达(P＜0.05).survivin的表达随着病理分化程度的降低而增加,与临床分期、淋巴结转移成正相关(P＜0.05),与年龄无关;bcl-2的表达与临床分期成负相关(P＜0.05),与其他参数无关;p53的表达与各临床病理参数均无明显相关性.survivin在喉癌和下咽癌中的表达与p53的表达成正相关(P＜0.05),而与bcl-2的表达无相关性(P＞0.05).结论:survivin、p53可能参与喉癌及下咽癌的发生、发展并在其中起协同作用,但bcl-2则可能是通过不同的机制参与喉癌及下咽癌的发生.     

基质金属蛋白酶-9和IL-8在鼻咽癌中的表达及其与潜伏膜蛋白-1的相关性研究

目的:研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、IL-8和EB病毒潜伏膜蛋白-1(EBVLMP-1)在鼻咽癌中的表达,探讨它们在鼻咽癌颈淋巴结转移中的意义以及相互关系。方法:应用免疫组织化学技术检测了53例鼻咽癌组织中MMP-9、IL-8、LMP-1的表达情况,同时分析这些指标与患者年龄、性别、病理类型、颈淋巴结转移以及临床分期的相关性。结果:53例鼻咽癌组织中MMP-9的表达率为66.04%(35/53),阳性积分为(33.19±29.73)%;IL-8的表达率为66.04%(35/53),阳性积分为(33.46±30.23)%;LMP-1的表达率为66.04%(35/53),阳性积分为(35.49±29.63)%。MMP-9、IL-8、LMP-1的表达在颈淋巴结转移组中均显著高于无颈淋巴结转移组(均P<0.05),但在年龄、性别、病理类型、临床分期的分组中均差异无统计学意义(均P>0.05)。LMP-1和MMP-9表达存在正相关(r=0.792,P<0.01),LMP-1和IL-8表达也存在正相关(r=0.786,P<0.01)。结论:MMP-9、IL-8、LMP-1的表达和鼻咽癌颈淋巴结转移存在显著相关性;LMP-1和MMP-9、IL-8的表达存在正相关,它可能通过多途径上调MMP-9、IL-8的表达,对鼻咽癌的转移起促进作用。     

RECK和RAGE以及MMP-9在鼻咽癌中的表达及意义

目的:检测伴有kazal域的富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)在鼻咽癌(NPC)组织中的表达情况及其相关性.方法:免疫组织化学方法检测64例NPC(伴颈淋巴结转移者30例,无颈淋巴结转移者34例)和30例慢性鼻咽炎(CNT)组织中RECK、RAGE和MMP-9蛋白的表达.结果:RECK在CNT及NPC组织表达极低,但周边炎症细胞及癌巢周边基质中RECK强表达,在伴与不伴颈淋巴结转移组中的阳性率分别为3.3%(1/30)和11.8%(4/30),2组间差异无统计学意义(P>0.05).RAGE表达阳性率在CNT和NPC组织分别为100%(30/30)和70.3%(45/64),MMP-9则分别为46.7%(14/30)和78.1%(50/64);RAGE在伴与不伴颈淋巴结转移组中的阳性率分别为86.7%(26/30)和55.9%(19/34),MMP-9则分别为90.0%(27/30)和67.7%(23/34),组间差异均有统计学意义(P<0.05);在NPC组织中,RECK与MMP-9的表达呈负相关(r=-0.369,P<0.01), RAGE与MMP-9呈正相关(r=0.471,P<0.01).结论:在NPC组织中,RECK、RAGE较CNT组织表达下调,MMP-9上调;在伴转移的NPC组织,RECK表达下调,RAGE、MMP-9则上调.三者的异常表达可能与NPC的进展有关,RECK、RAGE可能通过调节MMP-9的表达参与NPC的侵袭转移过程.     

鼻咽癌组织中bcl-2及P53蛋白表达的研究

目的 探讨bcl-2和P^53蛋白在鼻咽癌发生发展中的作用。方法 采用抗bcl-2和P^53蛋白的单克隆抗体，对25例鼻咽癌（Nasopharyngeal carcinoma,NPC)标本和16例正常鼻咽上皮（Nasopharyngeal epithelia,NE)标本进行免疫组化检测。结果 bcl-2和P^53蛋白的阳性表达率在鼻咽癌组织中分别为84．0％（21／25）和76．0％（19／25），与正常鼻咽上皮组相比差异有极显著性意义（P＜0．005）；鼻咽癌中有16例同时表达bcl-2和P^53蛋白。此外，bcl-2蛋白多见于分化差的鼻咽癌，而P^53蛋白则在相对分化较好的鼻咽癌中较多。结论 bcl-2原癌基因和P53抑癌基因在鼻咽癌的发病中可能有不同的意义，二种基因的协同作用可能与鼻咽癌持续生长有关。     

MDM 2基因在鼻咽癌中的表达及其与p53蛋白表达、EB病毒潜伏感染的关系

目的：探讨ＭＤＭ２基因在鼻咽癌（ＮＰＣ）中的表达情况及其与ｐ５３蛋白表达、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）潜伏感染的关系。方法：运用非同位素原位杂交、免疫组化和多聚酶链反应技术对４６例ＮＰＣ、１２例慢性鼻咽炎症粘膜（ＣＩＮＥ）分别进行ＭＤＭ２ｍＲＮＡ、ＭＤＭ２蛋白、ｐ５３蛋白及ＥＢＶ－ＤＮＡ的检测。结果：４６例ＮＰＣ中,１４例ｍＲＮＡ及ＭＤＭ２蛋白高表达,３８例为ｐ５３蛋白阳性,４３例为ＥＢＶ－ＤＮＡ阳性,１２     

Bcl-2 and LMP1 expression in nasopharyngeal carcinomas

In vitro studies of B-cells immortalized by Epstein-Barr Virus (EBV) have shown that B-cell leukemia/lymphoma-2 (bcl-2) protein expression is upregulated by the EBV-latency-associated antigen, latent membrane protein 1 (LMP1). The same phenomenon has also been observed in epithelial cells in vitro. However, such correlation between these 2 markers has not been shown in nasopharyngeal carcinoma (NPC), in which EBV infection is a well-known etiologic factor. This retrospective study examined 35 cases of undifferentiated NPC to answer the question of whether LMP1 and/or bcl-2 presence can be used as biomarkers at treatment response, as well as to see the relationship between bcl-2 and LMP in NPC. Of the 35 patients, 26 (74.3%) were bcl-2, and 10 (28.6%) were LMP1-positive. Although a significant correlation was observed between bcl-2 and LMP1 staining (P =.003), it appeared that bcl-2 expression could be independent of LMP1. Statistical analysis showed that cervical lymph node metastasis (P =.04) and cranial nerve involvement (P =.03) are the only variables that significantly affect patient survival. At this time, bcl-2 and LMP1 presence are not significant indicators of outcome; however, although they are not directly related to survival, expression of both bcl-2 and LMP1 was strongly correlated with cervical lymph node metastasis, which is a potent predictor of patient survival.     

鼻咽癌染色体3p14的精细等位基因缺失分析

目的：进一步明确鼻咽癌染色体3p14区区域等位基因杂合性丢失（loss of heterozygosity,LOH)的频率与共同缺失区规范,以便分离该区域内与鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法：选择位于3p14的6个高密度微卫星多态标记,对32例鼻咽癌组织进行LOH分析。结果：71．88％（23／31）的鼻咽癌在至少1个位点发生LOH,丢失频率较高的3个位点是D3S1313（46．43％）、D3S1300（50．0％）和D3S1312（44．44％）,在存在丢失的23例患者中,8例表现为一个连续的非随机的LOH区域,其最小共同缺失区为D3S1313－D3S1312（约3．4个厘摩）。且该区域的缺失与鼻咽癌临床分期、EB病毒感染有明显关系。结论：鼻咽癌在3p14的最小共同缺失区位于D3S1313－D3S1312之间,该区域可能存在一个尚克隆的与鼻咽癌发生发展密切相关的抑瘤基因。     

新疆汉族和维吾尔族鼻咽癌组织的PCR和免疫组化检测比较

目的：了解新疆汉族维吾尔族（维）族鼻咽癌（ＮＰＣ）发病因素的差别。方法：用ＰＣＲ与免疫组化技术对７３例ＮＰＣ组织（汉族４１例,维族３２例）分别进行ＥＢ病毒脱氧核糖核酸（ＥＢＶ－ＤＮＡ）、ＥＢ病毒核抗原（ＥＢＮＡ２）、潜伏膜蛋白（ＬＭＰ－１）检测。     

Latent membrane protein-1 oncogene deletions in nasopharyngeal carcinoma in Caucasian patients

OBJECTIVE: The latent membrane protein-1 (LMP-1) is an Epstein-Barr virus (EBV)-transforming protein expressed in nasopharyngeal carcinoma (NPC). A 30-bp deletion in the LMP-1 oncogene has been described in NPC patients from Asia. The purpose of this study was to evaluate the association between NPC and such an EBV deletion in Caucasian patients. MATERIAL AND METHODS: Twenty-seven patients with a diagnosis of NPC were selected. Most of the NPCs were classified as Stages III and IV using the International Union Against Cancer system. Formalin-fixed, paraffin-embedded NPC specimens were found for these cases. Hematoxylin-eosin slides were reviewed and survival analysis was done using the log-rank method. In situ hybridization for EBV-encoded non-polyadenylated RNAs and expression of LMP-1 by means of immunohistochemistry was also performed. Polymerase chain reaction for LMP-1 oncogene analysis was performed to detect the presence of a 30-bp deletion in NPC specimens and EBV-related controls RESULTS: The 30-bp deletion was identified in 67% of NPC cases and in 30% of controls, a statistically significant difference (p = 0.01, chi2 test). LMP-1 deletion was not statistically associated with a worse prognosis in NPC patients (5-year survival: 33% in wild-LMP-1 strains vs 24% in deleted-LMP-1 strains; p = 0.053, log-rank test). CONCLUSION: A 30-bp deletion in the LMP-1 oncogene is present in more than half of Caucasian NPC cases EBV carrying partial deletions in the LMP-1 oncogene may play a role in the pathogenesis of NPC in Caucasian patients.     

鼻咽癌患者唾液和血清及外周血白细胞中EBV-DNA的定量检测

目的对鼻咽癌患者唾液、血清及外周血白细胞中的EBV-DNA进行检测,分析唾液、血清、外周血白细胞中EB病毒的DNA含量与鼻咽癌的相关性。方法对40例初诊鼻咽癌患者和50例正常人的唾液、血清及外周血白细胞中的EBV-DNA进行荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)检测。结果EBV-DNA在鼻咽癌患者血清中的检出率为67.5%,显著高于正常人血清中的EBV-DNA检出率2%(χ2=44.48,P<0.001);鼻咽癌患者的唾液、外周血白细胞EBV-DNA检出率与正常人相比,无显著性差异;鼻咽癌患者和正常人的唾液EBV-DNA拷贝数与外周血白细胞EBV-DNA拷贝数呈正相关性;鼻咽癌患者血清EBV-DNA拷贝数与TNM分级有关,分级越晚含量越高。结论 EB病毒长期存在于多数人的唾液中,也可存在于外周血B淋巴细胞中。血清EBV-DNA检测在鼻咽癌的临床诊断中具有较高的敏感性和特异性,有助于鼻咽癌的早期诊断;血清EBV-DNA拷贝数与TNM分级有关,可在分子水平对鼻咽癌的TNM分级进行补充。     

抑癌基因p16,p21及p53在鼻咽癌的表达

目的：观察抑癌基因ｐ１６,ｐ２１及ｐ５３在鼻咽癌（ＮＰＣ）的表达,探讨其与ＮＰＣ的发生发展及预后的关系。方法：用免疫组化ＳＰ法检测了１１６例ＮＰＣ组织和１５例无瘤鼻咽（ＮＰ）组织的ｐ１６,ｐ２１及ｐ５３基因的表达情况。