氢气对脑缺血再灌注大鼠海马一氧化氮及其合酶的影响

目的探讨氢气治疗对急性脑缺血再灌注损伤大鼠海马NO和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法选择SD大鼠72只,随机分为3组:假手术组、模型组和治疗组(腹腔注射2%氢气饱和生理盐水),每组24只,每组又分为6、24h2个时间点。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。免疫组织化学方法测定海马NOS的表达;硝酸还原酶法测定海马组织匀浆中NO含量;NOS检测试剂盒检测海马组织提取液中NOS的活性。结果模型组治疗6h海马NOS阳性细胞、NO含量及NOS活性明显高于假手术组,而治疗组上述指标较模型组明显下降(P<0.05);模型组治疗24h海马NOS阳性细胞、NO含量及NOS活性明显高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05),但治疗组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论氢气治疗可减少缺血后海马组织中NO含量及NOS活性,对海马缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。     

一氧化氮合酶及其3剂在脑缺血中的作用

一氧化氮与脑缺血的关系是近年来国内外研究的热点。本文综述了一氧化氮合酶及其抑制剂的分类以及在脑缺血不同时期的不同作用及临床应用前景等问题。     

复方灯盏花滴丸对海马神经元一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的研究复方灯盏花滴丸(FDD)对谷氨酸致大鼠原代海马神经元的NO和一氧化氮合酶的影响。方法取SD大鼠32只,每8只分别用生理盐水、尼莫地平、FDD高、低剂量灌胃,85h后,取每只大鼠股动脉血,制成5%的含药血清。另取新生24h SD乳鼠大脑原代培养海马神经元并鉴定后,随机分为对照组、尼莫地平组、FDD高、低剂量组和模型组,前4组分别加入上述配制对应的药物血清,模型组不加含药血清。以谷氨酸制成损伤模型。采用MTT法测定细胞存活率,酶法检测细胞释放NO量,细胞内总一氧化氮合酶(tNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性。结果与对照组比较,模型组细胞存活率下降,NO、tNOS和iNOS活性增加(P0.01),与模型组比较,FDD高、低剂量组均能明显增加细胞存活率、减少NO释放、降低tNOS活性和iNOS活性(P0.05,P0.01)。结论 FDD对谷氨酸致原代培养大鼠海马神经元损伤有保护作用,其作用机制可能与降低一氧化氮合酶的活性、尤其iNOS活性及减少NO释放有关。     

丹红注射液对大鼠局灶脑缺血后一氧化氮合酶的影响

目的 研究倍通注射液（丹红注射液）对大鼠局灶脑缺血后一氧化氮合酶（NOS）的变化。方法 将SD大鼠随机分为3组，假手术组、局灶脑缺血再灌注对照组（对照组）、倍通注射液治疗组（治疗组），建立大鼠自体血栓局灶脑缺血模型，各组分别于1d、3d、5d取大鼠脑组织，测定NOS及诱导型（iNOS）的活性。结果 治疗组大鼠脑组织总NOS和iNOS活性在造模后的各时间点（1d、3d、5d）均明显低于对照组（P〈0，05）。结论 倍通注射液可通过抑制总NOS和iNOS活性，减少NO释放，对大鼠局灶脑缺血脑细胞起到保护作用。     

大鼠海马脑片缺血-再灌注模型中一氧化氮及一氧化氮合酶的变化

目的 建立器官型海马脑片缺血-再灌注模型,以阐明一氧化氮和一氧化氮合酶(NOS)在脑缺血-再灌注中的作用。 方法 以12只出生7-8 d的Sprague-Dawley乳鼠制备海马脑片,根据培养时间随机分为4组,每组2个微孔膜,每个Millcell-CM微孔膜放置6张脑片,在培养液和气体界面上培养脑片,4组中每组36张脑片。培养14 d后,缺氧、缺糖30 min,再灌注12、24和36 h,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹技术,分别检测脑片组织中一氧化氮、NOS的mRNA和蛋白质水平的变化;用改良镉还原法检测培养液中一氧化氮代谢产物亚硝酸盐含量;生化法榆测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平。 结果 缺血-再灌注模型的脑片组织,诱导性的一氧化氮合酶(iNOS)和神经源性的一氧化氮合酶(nNOS)在mRNA和蛋白质水平均表达上调,培养液中一氧化氮代谢产物亚硝酸盐含量明显高于对照组,差异有显著意义(P<0.05)。同时,培养液中LDH的水平随再灌注时间的延长而升高。结论 一氧化氮及NOS在脑缺血-再灌注损伤中起着重要作用。     

诱导型一氧化氮合酶与脑缺血

研究显示 ,诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)及其所产生的NO参与了脑缺血后的病理生理学过程 ,在脑缺血不同阶段的级联反应中发挥着正负双重效应。文章对iNOS/NO促进细胞凋亡和神经发生的作用及其机制 ,iNOS选择性抑制剂对缺血性脑损伤的影响作了综述。     

雌激素对去卵巢大鼠空间学习记忆能力及海马一氧化氮合酶表达的影响

目的观察雌二醇(E2)对去卵巢(OVX)大鼠学习记忆能力及海马一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响,探讨E2改善OVX大鼠认知功能的可能机制。方法 30只SD雌性大鼠随机分为假手术组(SHAM组),OVX组和去卵巢雌二醇组(OVX+E2组)。E2治疗8 w后通过八臂迷宫实验观察E2对雌激素剥夺大鼠学习记忆的影响;学习记忆能力测试结束后用免疫组织化学结合图像半定量方法分析海马nNOS的表达。结果与假手术组比较,OVX组完成八臂迷宫时间显著延长(P<0. 01),工作记忆错误次数(WME)显著增多(P <0. 01)、参考记忆错误次数(RME)及总记忆错误次数(TE)显著增多(均P <0. 01),海马nNOS的数量(P<0. 05)及面积(P<0. 05)均显著下降; 8 w E2治疗可显著改善OVX大鼠的学习记忆能力,与OVX大鼠比较,海马nNOS的表达显著增强(P<0. 01)。结论卵巢摘除会导致大鼠空间学习记忆能力下降,长期E2治疗可改善OVX大鼠学习记忆能力,可能与E2增强OVX大鼠海马nNOS的表达有关。     

大鼠局灶性脑缺血时脑微血管及组织中一氧化氮合酶的变化

目的探讨大鼠局灶性脑缺血时脑微血管、脑组织中一氧化氮合酶(NOS)的活性变化及其与脑损伤的关系。方法将Wistar雄性大鼠73只随机分为假手术组19只;缺血组54只,据缺血时间1、2、3、4h再分Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅰ3、Ⅰ4组。用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型,用放射性同位素法测定脑微血管及脑组织中NOS的活性。结果局灶性脑缺血时不同部位、时间,NOS活性的变化不同。脑微血管中NOS活性在缺血4h(Ⅰ4)组为(0.104±0.035)pmol/mg蛋白,假手术组为(0.042±0.021)pmol/mg蛋白,两组比较差异有显著意义(P<0.001)。纹状体、海马的NOS活性在Ⅰ4组分别为(0.037±0.007)pmol/mg蛋白、(0.050±0.010)pmol/mg蛋白,假手术组为(0.079±0.018)pmol/mg蛋白、(0.059±0.008)pmol/mg蛋白,两组比较差异有显著意义(P<0.001,P<0.05)。结论脑微血管中NOS活性变化在局灶性脑缺血损伤中起重要作用,脑组织中NOS活性变化也参与了其病理生理过程。     

高碘对大鼠海马一氧化氮合酶蛋白表达的影响

目的：探讨高碘对大鼠学习记忆功能的影响和海马一氧化氮合酶（NOS）活性变化的关系。方法：采用Y－迷宫试验和免疫组化ABC方法对高碘大鼠海马内神经型一氧化氮合酶（nNOS)的变化进行研究。结果：高碘大鼠学习能力比对照组明显降低（P＜0．05）,高碘大鼠海马nmNOS阳性神经细胞数目较对照组明显减少（P＜0．05）,结论：高碘对大鼠学习记忆能力的影响与其海马nNOS阳性神经细胞数目减少有关。     

快速眼动睡眠剥夺及恢复睡眠对大鼠海马和皮质神经元型一氧化氮合酶mRNA表达的影响

目的研究快速眼动(REM)睡眠剥夺和睡眠恢复对大鼠海马及皮质区神经元型一氧化氮合酶(nNOS)转录水平表达的影响。方法将大鼠分为两组,分别为REM睡眠剥夺组(SD组)和对照组(空白对照组:CC组和环境对照组:TC组)采用改良多平台睡眠剥夺法建立大鼠REM睡眠剥夺模型,获取海马及皮质组织,采用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),测定REM睡眠剥夺13、、5及7天、恢复睡眠6、12、24及48 h大鼠皮质、海马nNOS mRNA的表达。结果CC组和TC组海马及皮质nNOS mRNA表达无显著性差异。REM睡眠剥夺1天和3天组nNOS mRNA表达增多,睡眠剥夺5天组nNOS mRNA表达明显升高,睡眠剥夺7天组nNOS mRNA达到峰值(0.691±0.008,P<0.01),睡眠恢复后6 h、12 h和24 h组nNOS mRNA表达仍高于TC组。结论大鼠REM睡眠剥夺增加皮质、海马nNOS mRNA的表达。     

依达拉奉对脑缺血再灌注大鼠脑组织及血清NO、T—NOS水平的影响实验研究

目的探讨依达拉奉对局灶性脑缺血再灌注损伤的影响。方法采用线栓法制备SD大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，分为假手术组、脑缺血再灌注对照组和依达拉奉治疗组，分别于缺血1h后行再灌注，设再灌注后2、6、12、24h不同时间点，检测脑组织及血清NO、T—NOS浓度。结果对照组再灌注期间NO浓度先下降后升高，T—NOS变化与NO一致；治疗组脑组织及血清NO、T—NOS水平均明显下降，以再灌注6h最明显。结论依达拉奉可降低NO、T—NOS水平，对缺血再灌注脑组织确有保护作用。     

一氧化氮前体与供体在脑缺血中的作用及影像学评估

评估NO前体/供体在脑缺血中的作用及影像学评估受累脑区脑损害情况等系列变化。方法将72只SD大鼠随机分为4组:假手术组18只,模型组18只,硝酸甘油组(NG组)18只,左旋精氨酸组(L-ARG组)18只。各组根据处死大鼠时间不同,分为再灌注3、24 h时间点,并进行Longa评分、HE染色及弥散加权成像观察其疗效。结果再灌注3 h时,与模型组比较,NG组、L-ARG组大鼠Longa评分均明显降低,差异有统计学意义[(2.08±0.90)分vs(1.50±0.52)分vs(1.42±0.50)分,P<0.05]。与假手术组比较,再灌注24 h时,模型组大鼠细胞神经元大量脱失,但NG组、L-ARG组大鼠细胞神经元脱失不明显;再灌注3、24 h时,与模型组比较,NG组、L ARG组大鼠弥散加权成像高信号区明显减小,差异有统计学意义(P<0.01)。结论脑缺血早期给予NO前体/供体具有显著的缺血后脑保护作用。     

慢性脑缺血大鼠学习记忆损害与海马磁共振波谱分析

目的探讨慢性脑缺血对大鼠空间学习记忆功能及海马区神经细胞代谢物水平的影响及后两者的相关性。方法雄性10月龄SD大鼠30只,随机分为缺血组、假手术组和对照组,每组10只。行Morris水迷宫实验及质子磁共振波谱(~1H-MRS)扫描,计算左侧海马区N-乙酰天冬氨酸(NAA)/总肌酸(Cr)、胆碱复合物(Cho)/Cr的积分面积比值。结果缺血组大鼠定位航行的平均逃逸时间较假手术组和对照组明显延长,停留于平台所在区域的时间及穿越平台区域次数均较假手术组和对照组明显减少(P0.01)。缺血组大鼠左侧海马区Cho/Cr、NAA/Cr水平较假手术组和对照组明显降低(P0.05,P0.01)。各组大鼠左侧海马NAA/Cr、Cho/Cr水平与对应停留时间、穿越平台区域次数的变化趋势呈正相关。结论持续性低血流灌注可导致大鼠海马区神经元的功能代谢水平降低及学习记忆能力明显受损,海马区神经元的功能活性下降是认知障碍的重要机制之一。     

洛汀新对原发性高血压患者NOS活性及NO的影响

目的:探讨血管紧张素转换酶抑制剂洛汀新对原发性高血压（EH）患者的降压作用及其对NO和NOS水平的影响。方法:采用每日1次洛汀新10 mg治疗EH患者（21例）8周,观察治疗前、后血压和血小板（Pt）NO水平及NOS活性的变化。结果:EH患者Pt的NOS活性和NO水平显著低于正常对照组（14例）（P<0.01）。经洛汀新治疗后EH患者的血压显著降低（P<0.01）,Pt的NO产生量及NOS活性显著升高（P<0.01）。结论:洛汀新可降低血压、调节血小板NOS的活性和NO分泌量。     

肝炎患者血清一氧化氮和一氧化氮合酶水平变化及其临床意义

目的 探讨血清一氧化氮水平、总一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶活力与病毒性肝炎的关系.方法 用生化方法 检测对照组、中度慢性乙型肝炎、肝硬化、慢性重症肝炎及乙戊肝重叠感染患者血清一氧化氮、总一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶水平.结果 中度慢性乙型肝炎、肝硬化及乙戊肝重叠感染患者血清一氧化氮水平、总一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶活力与对照组比较明显升高,慢性重症肝炎患者血清一氧化氮水平、总一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶活力与对照组比较明显降低(P＜0.05).结论 一氧化氮、总一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶在病毒性肝炎发病中具有重要作用,并在一定程度上与肝损害程度相关.     

丁基苯酞对慢性脑缺血大鼠脑保护机制的研究

目的观察丁基苯酞(NBP)对慢性脑缺血老龄大鼠海马学习记忆及p-CREB和脑源性神经细胞生长因子(BDNF)表达的影响。方法选取健康Wistar大鼠80只,随机分为4组:对照组(A组)、单纯缺血组(B组)、缺血低剂量治疗组(C组)、缺血高剂量治疗组(D组)。每组20只。采用双侧颈总动脉结扎法(2VO)。各组大鼠于2VO前、2VO后2、3个月行Morris水迷宫试验进行学习记忆能力的评价,采用免疫组织化学法观察2VO后3个月NBP对大鼠海马中p-CREB及BDNF表达的影响。结果与A组比较,2VO后2个月B、C、D组大鼠逃避潜伏时间明显延长,跨过平台次数明显减少;与B组比较,2VO后3个月C、D组差异有统计学意义(P<0.05),D组与C组比较,均有所改善,差异有统计学意义(P<0.05,表1)。与A组比较,B组海马p-CREB及BDNF表达明显减少。与B组比较,C组、D组p-CREB和BDNF表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NBP能改善缺血,增加p-CREB及BDNF的表达。     

APP17肽对脑缺血大鼠记忆能力及海马Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的研究APP17肽对脑缺血大鼠记忆能力及海马Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法采用双侧颈总动脉结扎方法制备前脑缺血致血管性痴呆大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、手术组和治疗组,每组24只,并观察APP17肽的保护作用,采用Morris水迷宫检测记忆能力,免疫组织化学检测海马Bcl-2和Bax蛋白表达。结果手术组与假手术组比较,记忆能力明显下降(P<0.01),Bcl-2和Bax免疫阳性细胞数增多(P<0.01),治疗组较手术组记忆功能改善明显(P<0.01)。Bcl-2免疫阳性细胞数明显增多(P<0.01),Bax免疫阳性细胞数明显减少(P<0.01)。结论APP17肽可能通过调节Bcl-2和Bax蛋白表达来抑制细胞凋亡,从而改善脑缺血大鼠的记忆能力。     

缺血再灌注不同时间点大鼠海马细胞内Ca~(2+)含量比较

目的研究脑缺血再灌注损伤中大鼠海马神经细胞内Ca~(2+)含量的变化,检测环磷腺苷葡胺(MAC)预处理对其的影响。方法将SD大鼠60只按实验分为正常组(5只)、假手术组(5只)、缺血再灌注组(再灌注组)和MAC预处理组(预处理组)。再灌注组和预处理组又分为再灌注后2、24、48、72 h和7天5个时间点,每个时间点5只大鼠,线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,流式细胞仪检测缺血侧海马神经细胞内Ca~(2+)的含量,观察MAC预处理对细胞内Ca~(2+)含量变化的影响。结果与假手术组比较,再灌注组2 h细胞内Ca~(2+)含量开始增高,24、48 h Ca~(2+)含量达到高峰(P0.01),72 h Ca~(2+)含量开始下降,7天Ca~(2+)含量进一步降低,但仍高于假手术组水平;与再灌注组比较,预处理组缺血再灌注2 h Ca~(2+)含量差异无统计学意义,24、48、72 h Ca~(2+)含量显著降低(P0.01)。结论细胞内Ca~(2+)含量增高为缺血再灌注损伤的病理机制之一,MAC预处理能有效抑制细胞内Ca~(2+)含量增高,在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中起到保护作用。