庚醇后处理对兔缺血再灌注心肌缝隙连接蛋白43表达的影响

目的通过观察家兔心肌线粒体缝隙连接蛋白43(Cx43)基因及蛋白的表达,探讨庚醇后处理对缺血再灌注心肌保护作用的机制。方法将50只新西兰大白兔随机分为5组,每组10只:对照组,缺血再灌注组,庚醇后处理组,5-羟葵酸干预组,庚醇后处理加5-羟葵酸干预组(联合处理组)。所有兔于心肌缺血再灌注4h后处死,取心肌组织,检测Cx43mRNA表达水平,提取心肌细胞线粒体蛋白并采用Western blot检测其含量。结果与对照组比较,缺血再灌注组、庚醇后处理组、5-羟葵酸干预组、联合处理组Cx43mRNA和Cx43蛋白表达明显减少(P<0.05);与庚醇后处理组比较,缺血再灌注组、5-羟葵酸干预组和联合处理组Cx43mRNA和Cx43蛋白表达明显减少(P<0.05);与联合处理组比较,缺血再灌注组和5-羟葵酸干预组Cx43mRNA和Cx43蛋白表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论庚醇后处理对心肌缺血再灌注损伤引起的Cx43表达降低有抑制作用,并且可能与线粒体敏感性钾离子通道的参与有关。     

庚醇预处理对兔缺血再灌注心肌线粒体结构、功能及线粒体Cx43的影响

目的观察庚醇预处理对心肌缺血再灌注时线粒体的结构、功能和缝隙连接蛋白43(Cx43)影响,以探讨庚醇预处理心肌保护的可能机制。方法兔64只,建心肌缺血再灌注模型,随机分4组(每组16只):假手术组(sham组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血预处理组(IP组)、庚醇预处理(HT组)。测定心肌梗死面积,电镜观测线粒体超微结构改变,检测线粒体膜电位、ca浓度、丙二醛(MD A)和超氧化物歧化酶(SOD)的改变。Western blotting检测线粒体Cx43蛋白变化。结果 IP组和HT组心肌梗死面积分别为18.97%±2.80%、19.97%±3.80%,均明显低于IR组35.67%±5.80%,P<0.01。电镜检测发现,与sham组比较,其它组线粒体损伤明显(P<0.01);与IR组比较,HT组和IP组线粒体损伤明显减轻(P<0.05)、线粒体跨膜电位明显升高、线粒体ca浓度明显下降(P<0.01);与IR组比较,IP组SOD活性明显升高、MD A含量显著下降(P<0.01)。与sham组比较,IR组线粒体Cx43蛋白显著下降(P<0.05);与IR组比较,HT组和IP组心肌线粒体Cx43明显升高(P<0.05)。结论庚醇预处理可保护缺血再灌注心肌,其机制可能与提高线粒体跨膜电位、减轻线粒体钙超载和提高线粒体Cx43表达有关。     

缺血后处理减轻心肌再灌注损伤的新方案

<正>长期以来,心肌梗死在老年人群中的发病率极高,其治疗关键在于及早恢复供血,而这又会引起缺血再灌注损伤,对此学者们尝试了许多解决办法,但均未取得令人满意的效果。1986年,Murry等首次提出心肌在经受多次短暂的缺     

缝隙连接蛋白43在缺血预处理心肌保护机制中的作用

缺血预处理是迄今发现的最强大的心肌内源性保护措施,很多研究对其机制作了深入、广泛的探讨,但目前为止,对缺血预处理心肌保护的确切机制还不能够被完全解释。近年来有研究发现缝隙连接蛋白43在缺血预处理心肌保护机制中也起着重要的调控作用,本文将从缝隙连接蛋白43的结构、分布、功能,以及心肌缺血与缺血预处理对缝隙连接蛋白43表达及功能的影响作一综述。     

庚醇预处理对兔缺血再灌注心肌凋亡和线粒体结构与功能的影响

目的探讨庚醇预处理对兔心肌缺血再灌注心肌凋亡和线粒体结构与功能的影响及可能机制。方法大白兔80只,随机分为假手术组、心肌缺血再灌注组(IR组)、缺血预处理组(IP组)、庚醇预处理组(HT组)以及庚醇预处理加5-HD干预组(5-HD组)。采用TUNEL法检测各组缺血心肌细胞凋亡,用透射电镜观察心肌细胞的超微结构改变,同时检测线粒体膜电位、Ca~(2+)、MDA、超氧化物歧化酶(SOD)浓度。结果假手术组心肌线粒体结构正常。与IR组和5-HD组比较,HT组和IP组心肌凋亡指数明显减少,心肌线粒体形态结构改变明显减轻(P0.05);线粒体膜电位明显升高、Ca~(2+)浓度明显下降(P0.05,P0.01)。与IR组比较,IP组SOD浓度明显升高、MDA浓度明显下降(P0.05)。结论庚醇可改善心肌凋亡以及保护心肌线粒体结构,其机制可能与线粒体ATP敏感性钾通道有关。     

线粒体连接蛋白43参与缺血后处理对兔急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨线粒体连接蛋白43(connexin43,Cx43)和线粒体ATP敏感性钾通道(mitoK_(ATP)~+)在缺血后处理保护兔心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 新西兰大白兔64只,建立心肌缺血再灌注模型,给予冠状动脉左前降支30 min缺血,240 min再灌注.随机分为4组,每组16只:假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组和5-羟葵酸加缺血后处理组.测定血浆磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB),肌钙蛋白I(cTnI)含量以及心肌梗死面积,采用电子显微镜观测心肌线粒体结构变化,Western blot检测线粒体Cx43蛋白表达.结果 缺血后处理组心肌梗死面积为(19.1±3.9)%,明显低于缺血再灌注组(35.7±5.8)%,P＜0.01.再灌注4 h末血浆CK-MB与cTnI活性,缺血后处理组明显低于缺血再灌注组和5-羟葵酸加缺血后处理组(P＜0.01).与假手术组比较,其他各组线粒体均损伤明显(P均＜0.01);缺血后处理组线粒体损伤程度轻于缺血再灌注组(P＜0.01);缺血后处理组线粒体损伤程度明显轻于5-羟葵酸加缺血后处理组(P＜0.01).缺血再灌注组和5-羟葵酸加缺血后处理组线粒体Cx43蛋白表达均显著低于假手术组(P均＜0.05);缺血后处理组心肌线粒体Cx43蛋白表达明显高于缺血再灌注组(P＜0.05);缺血后处理组心肌线粒体Cx43蛋白表达明显高于5-羟葵酸加缺血后处理组(P＜0.05).结论 线粒体Cx43可能参与了缺血后处理的心肌保护作用,其机制可能与mitoK_(ATP)~+有关.     

缺血后处理对大鼠缺血再灌注心肌缝隙连接蛋白43的影响

目的观察缺血后处理对缺血再灌注心肌缝隙连接蛋白43（Cx43）的影响，进一步探讨其减少再灌注心律失常的可能机制。方法将雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血预处理组、缺血后处理组，每组8只。建立在体心肌缺血再灌注模型，观察心律失常的发生情况，应用免疫组织化学SP法检测cx43在各组缺血再灌注心肌中的表达，应用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法半定量检测各组：Cx43的mRNA的表达水平。结果与假手术组比较，缺血再灌注组心律失常评分显著增高，心室肌Cx43含量显著降低、分布紊乱，Cx43的mRNA水平显著降低（P〈0．01），与缺血再灌注组比较，缺血后处理组的心律失常评分显著降低，心室肌Cx43含量增高、分布规律，Cx43的mRNA水平显著增高（P〈0．01）。结论缺血后处理能通过抑制Cx43蛋白降解和再分布、上调其mRNA水平起到保护Cx43蛋白的作用，进而减少再灌注心律失常的发生。     

庚醇预处理的心脏保护作用对细胞膜缝隙连接蛋白43的影响

目的探讨庚醇预处理对家兔心肌缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法将50只新西兰大白兔随机分为5组:假手术组、缺血再灌注组(IR组)、缺血预处理组(IP组)、庚醇预处理组(HP组)、庚醇预处理加5-羟葵酸(5-HD)预处理组(HP+5-HD组),每组10只。所有新西兰大白兔再灌注4h后处死。分别于术前、缺血时、再灌注2、4h检测血浆肌酸激酶同工酶和心肌肌钙蛋白活性;采用免疫荧光标记检测Cx43。结果与IR组比较,IP组及HP组心肌坏死区/左心室范围明显降低(P<0.01)。与假手术组比较,IR组、HP+5-HD组Cx43mRNA表达明显降低(P<0.01);与HP+5-HD组比较,IP组、HP组Cx43mRNA表达明显升高(P<0.01);与IR组比较,IP组、HP组、HP+5-HD组Cx43mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论庚醇预处理可以通过衰减由心肌缺血再灌注诱导的细胞膜Cx43表达下降,对损伤心肌起到保护作用。     

缝隙连接在大鼠缺血预适应心肌保护中的作用

目的探讨心肌缝隙连接在缺血预适应中的调控机制以及在预适应信号传导通路中的地位和作用。方法Sprague—Dawley大鼠进行30min的冠状动脉缺血和4h再灌注,根据是否使用缺血预适应、二氮嗪、18β-甘草次酸和5-羟基奎酸分为7组,即对照组（单纯缺血再灌注）、缺血预适应组、缺血预适应和5-羟基奎酸合用组、二氮嗪组、二氮嗪和5-羟基奎酸合用组、甘草次酸组、甘草次酸和5-羟基奎酸合用组。测量各组的血流动力学指标、心肌梗死面积以及缝隙连接蛋白43的磷酸化和内化。结果与对照组相比,缺血预适应、二氮嗪、18β-甘草次酸能降低心肌梗死面积（P〈0．001）,5-羟基奎酸可以阻断缺血预适应和二氮嗪的心肌保护作用（P〉0．05）,但是对缝隙连接失耦联剂甘草次酸没有影响（P〈0．001）。缺血预适应和线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂二氮嗪能促进缝隙连接蛋白43磷酸化,抑制去磷酸化和内化（P〈0．001,P〈0．001）,线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道阻断剂5-羟基奎酸能阻断该作用（P〉0．05,P〉0．0051）。结论缺血预适应通过开放线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道来调节缝隙连接蛋白43的磷酸化和内化,进而调控缝隙连接的化学转运,减少心肌梗死面积。     

心脏缝隙连接蛋白43与缺血后处理

缺血性心血管疾病的血运重建问题一直是心血管领域研究的热点。急性心肌梗死后,早期溶栓再灌注或早期经皮冠脉介入治疗是现今医院普遍采取的首要治疗方案,但此类治疗引发的致命性的心肌缺血再灌注损伤（ischemia repeffusion,I／R）,使急性心梗治疗后的死亡率仍旧很高,因此医学界一直在寻找保护、挽救缺血心肌的有效途径。     

缺血后适应对急性心肌梗死患者临床及预后的影响

目的探讨急性心肌梗死(AMI)患者施行缺血后适应能否有效地降低缺血再灌注损伤,从而对心脏产生保护作用。方法选取AMI患者42例,随机分为对照组22例和缺血后适应组20例。监测2组患者PCI术前、术后2h、1、2、3d内肌酸激酶同工酶(CK-MB)值,并测定CK-MB峰值及各时间点下CK-MB平均值曲线下面积;监测PCI术前及术后2h血清C反应蛋白(CRP)、丙二醛和超氧化物歧化酶(SOD)水平;比较2组患者PCI术前及术后24h内心电图ST段回落情况。结果缺血后适应组CK-MB峰值明显低于对照组[(570.61±41.27)U/L vs(661.80±58.55)U/L,P<0.01];CK-MB平均值曲线下面积明显低于对照组[(5821.19±2912.07)%vs(9843.12±3578.02)%,P<0.01];缺血后适应组术后2hCRP下降幅度明显低于对照组(P<0.05);缺血后适应组术后丙二醛下降较对照组明显(P<0.05);缺血后适应组术后SOD升高较对照组明显(P<0.01);缺血后适应组ST段回落情况较对照组高(60.0%vs 45.5%,P<0.05),对照组中有2例患者因发生恶性心律失常死亡。结论AMI患者施行缺血后适应处理能够降低CK-MB的释放,降低氧自由基含量,减轻炎性反应,使冠状动脉恢复血流情况占有明显优势,能够明显降低再灌注损伤,发挥心脏保护作用。     

No loss of cardioprotection by postconditioning in connexin 43-deficient mice

In situ hearts and isolated cardiomyocytes from heterozygous connexin 43-deficient (Cx43+/-) mice cannot be protected by ischemic preconditioning or diazoxide. We have now addressed the role of connexin 43 in ischemic postconditioning (PC). Wild type (WT) and Cx43+/- mice were subjected to 30 min coronary occlusion and 120 min reperfusion, with and without a PC protocol of three cycles of 10 s coronary occlusion/10 s reperfusion. Infarct size (TTC staining) was reduced by PC from 54+/-5 to 37+/-3% of area at risk in WT. Likewise, infarct size was reduced by PC from 53+/-4 to 34+/-3% of area at risk in Cx43+/-. We conclude that connexin 43 is no prerequisite for PC's protection. To this end, the signal transduction of ischemic preconditioning and postconditioning differs.     

缺血后处理和三磷酸腺苷后处理对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的观察缺血后处理(IPO)、ATP和腺苷受体激动剂CGS-21680后处理对心肌缺血再灌注损伤的影响。方法健康新西兰大白兔48只,随机分为对照组、IPO组、ATP组、CGS-21680组,每组12只。测定肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛水平及超氧化物歧化酶(SOD)活力;计算各组兔心肌梗死面积;HE染色观察心肌组织病理形态变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;实时荧光定量RT-PCR检测心肌组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)mR NA和Bcl-2 mRNA的表达。结果与对照组比较,IPO组、ATP组和CGS21680组血清丙二醛、CK-MB水平及心肌梗死面积明显降低,SOD活力明显升高。IPO组、ATP组和CGS-21680组心肌细胞凋亡指数较对照组明显降低,心肌组织损伤明显减轻。IPO组、ATP组和CGS-21680组较对照组caspase-3 mRNA表达明显下调,Bcl-2 mRNA表达明显上调。结论 IPO与ATP后处理可通过激活腺苷A2a受体,减轻心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与上调Bcl-2和下调caspase-3的表达,抑制氧自由基氧化应激损伤,减少细胞凋亡有关。     

芬太尼后处理联合缺血后适应对兔心肌缺血再灌注损伤心肌坏死标志物的影响

目的 观察芬太尼后处理联合缺血后适应对兔心肌缺血再灌注损伤心肌坏死标志物及心肌梗死面积的变化,探讨其对心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法 32只日本大耳白兔,采用结扎左冠状动脉前降支30 min、复灌120 min建立心肌缺血再灌注损伤模型.按“随机数字表法”随机分为4组,每组8只：假手术组,动脉下仅穿线不结扎;缺血再灌注组,直接恢复再灌注;缺血后适应组,缺血后适应后恢复再灌注;芬太尼后处理＋缺血后适应组,缺血28 min给予芬太尼5μg· kg-1后处理,30 min予以缺血后适应.测定各组心肌坏死标志物（心肌肌钙蛋白Ⅰ浓度与肌酸激酶同工酶蛋白活力浓度）、计算心肌梗死面积及观察室性心律失常发生率.结果 芬太尼后处理＋缺血后适应组较缺血后适应组、缺血再灌注组外周血心肌肌钙蛋白Ⅰ浓度、肌酸激酶同工酶酶蛋白活力浓度降低,心肌梗死面积减小,差异均有统计学意义（P＜0.05）.缺血后适应组较缺血再灌注组外周血心肌肌钙蛋白Ⅰ浓度、肌酸激酶同工酶酶蛋白活力浓度降低,心肌梗死面积减小,差异均有统计学意义（P＜0.05）.芬太尼后处理＋缺血后适应组、缺血后适应组较缺血再灌注组室性心律失常发生率降低[0 vs.50％（4/4）,P＜0.05;12.5％（1/7）vs.50％（4/4）,P＜0.05],差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 芬太尼后处理联合心肌缺血后适应显著降低兔心肌缺血再灌注心肌肌钙蛋白Ⅰ浓度、肌酸激酶同工酶酶蛋白活力浓度,减少心肌梗死面积,降低室性心律失常发生率,可减轻心肌缺血再灌注损伤.     

缺血后处理对急性心肌梗死患者细胞因子的影响

目的:探讨缺血后处理对急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者细胞因子的影响.方法:急性STEMI患者39例,随机分入对照组(17 例)和缺血后处理组(22 例).各例接受急诊冠状动脉介入治疗术(PCI),对照组梗死血管再通后3 min内不施加干预;缺血后处理组梗死血管再通后1 min内应用低气压充盈和回缩球囊,每一过程各30 s,反复3 次.PCI术前和术后4 h采血测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD),PCI术前和PCI术后12 h采血测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6).结果:PCI术前2组患者 MDA、SOD、TNF-α、IL-6差异无统计学意义,PCI 术后缺血后处理组较对照组MDA、TNF-α、IL-6 低[分别为(5.53±1.20):(6.70±1.24)μmol/L,(33.86±10.08):(41.09±11.36)ng/L,(72.07±11.09):(79.96±9.25)ng/L,P<0.05]而SOD高[(83.92±13.67):(74.31±14.68)U/L,P<0.05].结论:缺血后处理可以减少急性STEMI患者血清中MDA、TNF-α、IL-6 的生成,升高SOD.     

缺血后适应对老年急性心肌梗死患者的影响

目的观察缺血后适应(IPO)对急性心肌梗死(AMI)患者PCI后心肌灌注和临床事件的影响。方法选取12h内接受急诊PCI的老年AMI患者122例,分为对照组87例和IPO组35例。对照组梗死相关血管再通后,不施加干预;IPO组梗死相关血管再通后1 min内应用低气压充盈和回撤球囊,每一过程各30s,术后测定血肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛,观察ST段回落,冠状动脉血流速度、住院期间临床事件发生情况。结果 IPO组CK、CK-MB和丙二醛峰值明显低于对照组(P<0.05);IPO组冠状动脉血流速度明显快于对照组(P<0.05),术后ST段回落>50%者明显高于对照组(74.3%vs 54.0%,P<0.05),再灌注心律失常发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论 IPO可以缩小心肌梗死面积、减少自由基的生成,改善PCI后冠状动脉血流速度,改善心肌灌注,减少再灌注心律失常的发生。     

心肌缺血预适应对单支动脉闭塞性急性心肌梗死患者的影响

目的 :观察心肌缺血预适应 （IPC）对急性心肌梗死 （AMI）患者并发症及预后的影响。方法 :对照分析 40例无 IPC的 AMI患者 （A组 ）和 5 0例有 IPC的 AMI患者 （B组 ）的近期临床资料。结果 :B组梗死后泵功能障碍发生率及程度、磷酸肌酸激酶 （CPK）峰值、并发症均显著低于 A组 ,近期预后有改善。结论 :缺血预适应组 CPK的峰值降低 ,梗死后所致心肌坏死面积减小 ,从而使泵功能障碍的发生率降低、梗死后室性心律失常、 度以上房室传导阻滞及再灌注性心律失常发生率减少。这可能是 IPC使 AMI患者死亡率降低的主要原因。     

Effect of remote ischemic preconditioning on hepatic microcirculation and function in a rat model of hepatic ischemia reperfusion injury

Background:

Liver transplantation involves a period of ischemia and reperfusion to the graft which leads to primary non-function and dysfunction of the liver in 5–10% of cases. Remote ischemic preconditioning (RIPC) has been shown to reduce ischemia reperfusion injury (IRI) injury to the liver and increase hepatic blood flow. We hypothesized that RIPC may directly modulate hepatic microcirculation and have investigated this using intravital microscopy.

Methods:

A rat model of liver IRI was used with 45 min of partial hepatic ischemia (70%) followed by 3 h of reperfusion. Four groups of animals (Sham, IRI, RIPC+IRI, RIPC+Sham) were studied (n= 6, each group). Intravital microscopy was used to measure red blood cell (RBC) velocity, sinusoidal perfusion, sinusoidal flow and sinusoidal diameter. Neutrophil adhesion was assessed by rhodamine labeling of neutrophils and cell death using propidium iodide.

Results:

RIPC reduced the effects of IRI by significantly increasing red blood cell velocity, sinusoidal flow and sinusoidal perfusion along with decreased neutrophil adhesion and cell death.

Conclusions:

Using intravital microscopy, this study demonstrates that RIPC modulates hepatic microcirculation to reduce the effects of IRI. HO-1 may have a key role in the modulation of hepatic microcirculation and endothelial function.