裸鼠人胃腺癌SGC-7901原位移植模型的构建及其生物学特性

目的：建立裸鼠人胃癌原位移植模型。方法：以反复接种传代于裸鼠皮下的SGC-7901人胃癌细胞株建立的移植瘤组织块为材料，将其原位移植于裸鼠胃壁，观察移植肿瘤的生长情况、移植成功率和自发转移的发生率。结果：原位移植成功率及局部浸润率为8／8，局部淋巴结转移率为8／8，肺转移发生率为5／8，肝转移发生率为7／8，腹膜转移发生率为7／8。结论：裸鼠人胃癌原位移植模型的生物学行为与人胃癌自然生长和转移过程相似，可作为肿瘤转移机制及其抗转移治疗实验研究的理想模型。     

人胃癌组织块裸鼠原位移植/转移模型的建立

 目的　用肿瘤组织块原位移植 ,建立人胃癌裸小鼠原位移植 /转移模型。方法　以人胃低分化腺癌细胞系接种于裸小鼠皮下 ,形成稳定传代的皮下移植瘤 ,再取该肿瘤组织块原位移植于裸鼠胃壁 ,观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率。结果　原位移植成功率 (成瘤率 )为 1 0 0 %、局部淋巴结转移率 1 0 0 %、远处淋巴结转移率 90 %、肝转移发生率为 75%。荷瘤鼠的中位生存期为 1 4周 ,晚期出现消瘦和全身衰竭。结论　该裸小鼠原位移植 /转移模型的生物学行为与人胃癌自然生长和转移过程相似 ,可作为一种有价值的工具用于胃癌转移机理和抗转移实验治疗的研究。     

采用OB胶粘贴法建立人胃癌裸鼠原位种植转移模型

背景与目的建立理想的动物肿瘤移植模型是进行肿瘤防治研究的重要前提,目前公认的胃癌造模的方法为采用完整组织块的“皮下移植法”、“胃囊法”,但传统的造模方法目前尚存在操作复杂、成活率低等缺点,本研究拟采用“OB胶粘贴法”更简便地建立人胃癌裸鼠原位移植模型。方法以反复接种传代于裸鼠皮下的SGC鄄7901人胃癌细胞株建立的移植瘤组织块为材料,将其用生物吻合“OB胶”原位粘贴于裸鼠胃壁,并与传统“胃囊法”、“皮下移植法”比较观察移植肿瘤的生长情况、移植成功率和自发转移的发生率。结果“OB胶粘贴法”组原位移植成功率为100%,局部淋巴结转移率为100%,肺转移发生率为62.5%,肝转移发生率为87.5%,腹膜转移发生率为87.5%,较之胃囊法(分别为100%、100%、50.0%、50.0%和33.3%),除腹膜转移率升高外,远处脏器转移差异无显著性,但成活率高。皮下移植组未发生局部浸润及远处转移。结论“OB胶粘贴法"能更简便地建立人胃癌高转移模型,重现临床转移过程。     

胃癌细胞和组织块原位移植模型的建立及评价

[目的]采用两种方法建立胃癌裸鼠原位移植模型，并对两种模型进行评价。[方法]将胃癌肿瘤细胞悬液、胃癌裸鼠皮下瘤块采用OB胶粘贴法种植于裸鼠胃壁，形成原位移植瘤，观察和比较两种方法所建立的模型肿瘤移植成功率和自发转移的发生率。常规HE染色，观察胃癌原位移植瘤、胃癌淋巴结转移和肝转移的病理切片。免疫组化法检测胃癌原位移植瘤的MVD和VEGF的表达。[结果]细胞悬液种植的原位胃癌成瘤率为60％，淋巴结转移率和肝转移发生率仅为55．6％和33．3％；皮下组织块移植OB胶粘贴法的原位成瘤率100％，淋巴结转移率和肝转移发生率为93.3％和80％。皮下瘤块的原位移植瘤中MVD值和VEGF的表达高于细胞悬液法鼠移植瘤中MVD和VEGF的表达。[结论]两种原位移植和转移模型均具有人胃癌自然生长过程的特点，以胃癌裸鼠皮下组织块OB胶粘贴法为优，且肿瘤血管新生的能力较强。     

低分子肝素对人胃癌裸鼠原位移植模型肿瘤生长、转移及趋化因子受体4表达的影响

目的:探讨低分子肝素(low molecular weight heparin ,LMWH)对人胃癌裸鼠原位移植模型中肿瘤生长、转移及趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)表达的影响.方法:应用原位移植方法建立人胃癌裸鼠原位移植模型,模型建立后7 d时将裸鼠随机分为对照组(0.9%氯化钠溶液)、化疗组(5-氟尿嘧啶)和LMWH组(低分子肝素钙),分别每周给药2次,共5周.第6周牺牲动物,观察裸鼠胃癌原位模型的肿瘤生长及转移情况.应用RT-PCR和免疫组织化学法检测胃癌组织中CXCR4 mRNA和蛋白的表达水平.结果:化疗组和LMWH组的肿瘤体积比对照组明显缩小,差异有统计学意义(P＜0.05);LMWH组胃癌原位模型的肿瘤转移率(20%)低于对照组(70%),差异有统计学意义(P＜0.05),而与化疗组(11%)之间无明显差异(P＞0.05);LMWH组CXCR4 mRNA和蛋白的表达均较对照组和化疗组下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:LMWH具有抑制人胃癌裸鼠原位移植模型中肿瘤生长和转移的作用,可能与肿瘤组织中CXCR4表达下降有关.     

BNX小鼠人胃癌原位移植模型的建立及其生物学特性的观察

目的应用T、B、NK细胞联合免疫缺陷的BNX小鼠建立人胃癌原位移植高转移模型.方法将MKN-45细胞株接种至BNX小鼠皮下,成瘤后将肿瘤组织剪成小块通过手术移植至BNX小鼠的胃壁,观察肿瘤生长与转移情况,8周后对动物进行解剖.结果胃壁原位移植瘤浸润破坏胃壁各层组织结构,并直接扩散至周围脏器.肿瘤的移植成功率为100%(23/23),表现出很高的侵袭和转移特性:原位肿瘤平均体积2837.07±1044.04 mm3,局部和远处淋巴结转移率达83%(19/23),肝转移率为83%(19/23),肺转移率为65%(15/23),膈转移率为39%(9/23),发生腹腔种植与腹水的动物为35%(8/23),此外,还有个别脾转移.结论通过T、B、NK细胞联合免疫缺陷的BNX小鼠建立人胃癌原位移植模型可以更好地模拟人胃癌侵袭与转移本身的自然过程,对人胃癌防治及其转移机理的研究提供一个更为理想的模型.     

人胃癌裸鼠模型的建立及应用

构建人胃癌裸鼠移植瘤模型是目前研究人类胃癌生物学行为和抗肿瘤实验性治疗的主要方法之一。1969年Rygaard[1]等首次成功将人类结肠癌移植于裸鼠,开辟了利用动物研究人类肿瘤的广阔前景。20世纪九十年代以后国内外学者相继建立了人类肿瘤裸鼠原位移植(orthotopic transplantation)模型。这种模型可以发生类似肿瘤临床特点的生长及转移过程,在肿瘤生物学特性、肿瘤化疗、放射生物学、肿瘤热生物学及中医中药等方面应用广泛。1人胃癌裸鼠模型的建立胃癌是我国发病率和死亡率均占第一位的恶性肿瘤,利用人胃癌裸鼠模型对于深入研究人胃恶性肿…     

人类胃癌裸鼠淋巴结转移模型的建立

 目的　研究胃癌淋巴结转移动物模型的建立方法。方法　人类胃癌低分化细胞系SGC-7901体外培养、传代并扩增后，收集细胞行皮下种植成瘤，鼠间传代至第6代，以皮下肿瘤组织块原位种植于裸鼠胃壁建立动物模型。种植后第9周处死裸鼠，观察原位种植瘤生长、淋巴结转移及其他脏器转移情况，测定荷瘤裸鼠血清癌胚抗原（CEA）值。结果　原位移植瘤种植成功率100 ％，胃周淋巴结转移率93.3 ％，移植瘤可发生局部浸润及远处脏器转移，荷瘤裸鼠CEA值明显高于正常裸鼠（P＜0.01）。结论　应用SGC-7901细胞系可成功建立胃癌的淋巴结转移动物模型。     

人类胃癌裸鼠原位移植模型的建立

 目的：探讨建立人胃癌裸鼠原位移植转移模型简便易行的方法，比较三种方法的成瘤率。方法：用人胃癌细胞SGC7901悬液接种于裸鼠皮下，形成稳定传代的皮下移植瘤，连续传八代。15只裸鼠随机分为三组，以第八代裸鼠皮下移植瘤组织为移植材料，分别用困扎法、医用OB胶法以及两种联合的方法把皮下肿瘤组织移植裸鼠胃浆膜下形成原位移植肿瘤。结果：6～7周后，处死全部裸鼠，捆扎组、医用OB胶组和联合组成瘤率分别为4／5、3／5和5／5，捆扎联合医用OB组成瘤率最高。结论：应用缝线困扎联合OB胶建立人胃癌裸鼠原位移植模型是一种简便易行的方法，值得推广和应用。     

SCID鼠人胃癌原位移植模型的构建及其生物学特性初探

将传代于裸鼠皮下的人胃癌ＳＧＣ－７９０１完整组织原位移植于ＳＣＩＤ鼠，探讨移植后自主生长的肿瘤生物学特性及其侵袭转移与形态学特征。移植成功率为１００％。移植瘤保持了人胃癌选择素表达的生物学特性并显示人胃癌侵袭转移的体内表现。表明移植部位的微环境对移植瘤的生物学行为有一定的影响。原位移植后自主生长的肿瘤较皮下移植模型更客观地模拟了患者体内的侵袭转移过程。可适用于人类胃癌的实验治疗研究和为进一步探讨粘     

MIA PaCa-Ⅱ胰腺癌细胞系神经转移动物模型建立的实验研究

目的建立MIA PaCa-Ⅱ人胰腺癌细胞系裸鼠胰腺原位移植瘤模型并观察神经侵袭情况。方法将MIA PaCa-Ⅱ细胞行裸鼠背部皮下接种,建立高转移特性胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,然后将高转移性移植瘤组织接种于裸鼠胰腺被膜下,分别于4周、6周和8周处死裸鼠行移植瘤组织解剖和病理学检查,测量移植瘤大小和重量,并用HE和银染方法观察神经侵袭情况。结果MIA PaCa-Ⅱ细胞裸鼠皮下接种成瘤率为100.0%（10/10）,皮下移植瘤呈局限性生长,无脏器和神经转移。原位移植4周、6周和8周后,胰腺癌原位移植瘤成瘤率均为100.0%（10/10）,神经转移率分别为50.0%（5/10）、80.0%（8/10）和60.0%（6/10）,并可见多个脏器转移,以肝脏、肝门淋巴结、胃窦转移和腹膜播散多见。结论人胰腺癌细胞系MIA PaCa-Ⅱ裸鼠胰腺原位移植瘤模型为一较理想的＂拟人＂神经浸润转移模型,可用于胰腺癌体内嗜神经性机制的研究。     

人原发性肝恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型的建立

目的建立人肝原发性恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型,为探讨肝恶性淋巴瘤发病机制和实验治疗提供工具。方法采用人肝原发性恶性淋巴瘤术中新鲜瘤组织块植入裸小鼠肝实质内,观察原位移植成瘤率和移植瘤的侵袭、转移,并进行形态学（光镜、电镜、免疫组织化学）、血清学、染色体核型和流式细胞分析。结果在裸小鼠体内建成了一株人肝原发性恶性淋巴瘤原位移植模型（HLBL-0102）。移植瘤的组织病理学为原发性肝恶性淋巴瘤（非霍奇金B细胞性）,免疫组织化学显示,CD19、CD20、CD45和CD79a阳性,CD3、CD7阴性,甲胎蛋白（AFP）阴性,乙型肝炎病毒表面抗原（HbsAg）阳性,乳酸脱氢酶（LDH）1267．5U／L。染色体众数范嗣55—59条;移植瘤细胞DNA指数值1．57～1．61,均为异倍体。HLBL-0102住裸鼠体内生长3年,已经传至37代,共移植裸鼠283只,其肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活牢均为100％。人原发性肝恶性淋巴瘤在裸鼠肝内自主侵袭性生长,瘤细胞侵入并破坏临近肝组织和门脉区内胆管及静脉,无其他组织、器官侵犯及远处淋巴结累及。结论HLBL-0102是首次建苞成功的人原发性肝恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型,完整地模拟了人原发性肝恶性淋巴瘤患者的自然临眯病理过程,为研究原发性肝恶件淋巴瘤生物学和实验治疗提供了理想的动物模型。     

金龙蛇方对人胃癌MKN-45裸小鼠原位移植瘤生长转移及多种粘附分子蛋白表达的影响

目的:通过观察金龙蛇方及拆方对裸鼠人胃癌模型中转移和多种相关粘附分子表达的影响,探讨其抗胃癌转移的机制。方法:50只动物随机分为消痰组、散结组、金龙蛇组、5Fu组和对照组,建立人胃癌MKN45裸鼠原位种植模型,造模后第3天开始给药,对照组给予生理盐水0.2mL/d,腹腔注射,5Fu组给予5Fu稀释液0.2mL/周,腹腔注射,中药组分别给予消痰方、散结方、金龙蛇方0.2mL/d灌胃。第6周实验结束,观察肿瘤生长及转移情况,肝脏称质量。瘤组织及转移脏器行免疫组化检测Ecad、CD44v6、GMP140、ICAM1等蛋白的表达。结果:金龙蛇方及拆方可以明显抑制裸鼠人胃癌MKN45原位种植瘤的生长,减少肝脏转移,不同程度下调肿瘤细胞CD44v6、GMP140蛋白的表达。结论:金龙蛇方可以下调多种异质性粘附分子蛋白的表达,可能是其抗胃癌转移的机制之一。     

New metastatic model of human small‐cell lung cancer by orthotopic transplantation in mice

Small‐cell lung cancer (SCLC) is an aggressive cancer with high metastatic ability and novel strategies against the metastasis are urgently needed to improve SCLC treatment. However, the mechanism of metastasis of SCLC remains largely to be elucidated. For further studies of SCLC metastasis, we developed a new orthotopic transplantation model in mice. We established a GFP‐labeled subline from the human SCLC cell line DMS273 and transplanted them orthotopically into the lung of nude mice with Matrigel. The GFP‐labeled cells showed significant metastatic activity and formed metastatic foci in distant tissues such as bone, kidney, and brain, as observed in SCLC patients. From a bone metastasis focus of the mouse, we isolated another subline, termed G3H, with enhanced metastatic potential and higher hepatocyte growth factor (HGF) expression than the parental line. Further studies indicated that the HGF/MET signaling pathway was involved in in vitro motility and invasion activities of the G3H cells and treatments with MET inhibitors decreased formation of distant metastases in our orthotopic model using G3H cells. These data indicated that our model mimics the clinical aspect of SCLC such as metastatic tropism and autocrine of HGF/MET signaling. Compared with other orthotopic SCLC models, our model has a superior ability to form distant metastases. Therefore, our model will provide a valuable tool for the study of SCLC metastasis.     

人类卵巢癌原位移植自发转移裸小鼠模型的构建

 目的　用人类卵巢癌组织块原位移植构建与人类卵巢癌最相似的裸鼠原位移植自发转移模型。方法　将人类卵巢癌高转移细胞系8910PM在裸鼠皮下注射成瘤,然后将瘤组织运用显微外科的方法植入裸鼠卵巢包膜内,原位移植成功后继续在鼠间卵巢包膜内传代,并运用透射电镜进一步验证肿瘤形成和转移效果。结果　裸鼠皮下与卵巢部位成瘤率均为100 %（分别为2／2和16／16）,原位移植瘤转移率为50 %。卵巢包膜间传代,第2代、第4代分别出现卵巢癌的肝转移,其他部位尚未见转移灶。最早成瘤时间1周,最早转移出现时间2周。在连续传代过程中移植瘤仍保持原癌组织病理形态特点及人类肿瘤染色体的特点。结论　成功构建了人类卵巢癌原位移植自发转移裸鼠模型,为卵巢癌的转移机制及治疗研究提供了一个理想的动物模型。     

BRMS1基因对人胃癌细胞增殖和转移作用的体内研究

Objective

The aim of the study was to investigate inhibitory effects of breast-cancer metastasis suppressor 1 protein (BRMS1) on primary tumor growth and metastasis of human gastric cancer (GC) cells in nude mice.

Methods

We compared the expression of BRMS1 in the primary gastric tumor and metastatic gastric tumor by immunohistochemistry. Expression of BRMS1 also was detected in the GC cells by RT-PCR and Western blot. Three groups of cultured human GC cell line SGC-7901, were maintained: transfected cells with pcDNA3.1(-)B/myc-BRMS1; negative control cells with pcDNA3.1/myc-his(-)B; and blank control cells without any transfection. Histologically intact samples of the cells, maintained by passage in the subcutis of nude mice, were transplanted orthotopically into stomach walls of nude mice to establish a nude mouse model of human gastric carcinoma. Their primary tumor growth and metastasis were then observed.

Results

The expression of BRMS1 was markedly stronger in the primary gastric tumor compared with metastatic gastric tumor. We also detected BRMS1 gene and protein in the gastric cancer cell lines. Numbers of metastasis tumors significantly differed among mice infected with transfected cells, with negative controls and with blank controls (4.38 ± 0.60, 7.75 ± 0.59, and 7.63 ± 0.65, respectively; P < 0.05). However, there were no significant differences in the size of orthotopic tumors among mice infected with transfected, negative control and blank control cells [(12.02 ± 0.70), (12.71 ± 0.63) and (12.89 ± 0.71) mm, respectively; P > 0.05].

Conclusion

BRMS1 suppresses metastasis of GC cells, but does not inhibit growth of gastric tumors.     

Magnetic Resonance Evaluation of Transplanted Endometrial Carcinoma and Its Lymph Node Metastasis in Rabbits

Objective： To establish a rabbit model of transplanted endometrial carcinoma with lymph node metastasis and observe its magnetic resonance imaging （MRI） features. Methods： VX2 tumor grafts were orthotopically embedded in the endometrium of rabbits, and 3 weeks after the transplantation, thetumor and its metastasis to the retroperitoneal lymph nodes were examined by MRI, and the signal intensities and size of the lymph nodes were compared with those of normal rabbits. Results： The orthotopic transplantation of the tumor grafts resulted in tumor growth in all the 12 recipient rabbits. The tumors infiltrated the serosa of the uterus and metastasized to the retroperitoneal lymph nodes 3 w after transplantation. MRI demonstrated that the lymph nodes of the tumor-bearing rabbits were larger in size than those of normal control rabbits, but the signal intensity of the lymph nodes was not significantly different between them. Conclusion： This transplanted endometrial carcinoma model is characterized by high success rate and similar tumor metastasis behaviors with human endometrial carcinoma, therefore may serve as a good model for testing the efficacy of contrast agents for MR lymphography.