两种培养基对结核分枝杆菌分离鉴定的比较

与世界总体水平相比 ,目前我国的结核病发病率仍然较高。为了选择检测效果好、成本低的培养基对结核分枝杆菌进行分离与鉴定 ,我们采用匡铁吉[1] 琼脂培养基与Ｌ ｗｅｎｓｔｅｉｎ[2 ] 培养基对痰标本中的结核分枝杆菌进行分离、鉴定 ,结果显示匡铁吉琼脂培养基临床效果较优。1　材料和方法1 1　痰标本与前处理　从我院住院肺结核患者中留取 12 7份痰标本 ,每份大约 10ｍｌ,收集在一个10 0ｍｌ的干净厂口玻璃瓶内。按痰标本量的 2 5倍体积加入 2 %氢氧化钠 (ＮａＯＨ)溶液 ,用玻璃棒反复搅拌 ,以使浓痰液化均匀 ;作用 2 0ｍｉｎ后即可用于…     

应用多重PCR方法快速鉴定结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌

目的 探讨应用多重PCR技术快速鉴定结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌的可靠性.方法 根据结核分枝杆菌种的MTP40基因序列(396bp),分枝杆菌属的32kD基因序列(506bp),结核分枝杆菌复合体群的IS6110序列(984bp),采用3对特异性引物(PT1,T2;MT1,T2;IS5,S6)在同一反应体系和条件下对92株结核杆菌临床分离株和5株非结核分枝杆菌临床分离株进行扩增,并与标准菌株进行比较.结果 92株结核分枝杆菌临床分离株中,0株扩增出与结核分枝杆菌H37RV标准株相同的396bp、506bp、984bp 3条DNA片段,敏感性达97.8%,特异性为100%;5株非结核分枝杆菌临床分离株均扩增出506bp DNA片段,敏感性达100%,特异性为100%.结论 应用多重PCR方法,对结核分枝杆菌及非结核分枝杆菌进行鉴定,结果快速、准确、可靠,为临床结核病与非结核分枝杆菌病的快速诊断提供了有效的手段,具有很好的临床应用价值.     

快速微波铜染色法在Wilson病肝穿病理诊断中的应用

Wilson病（Wilson disease）是一种铜代谢障碍性的常染色体隐性遗传性疾病,其临床表现多样,且缺乏早期或特异性的实验室诊断指标,因此,肝穿刺活检病理检查意义较大,而肝组织铜染色对于其病理诊断和鉴别诊断具有重要作用。目前,国内外应用于组织铜染色的成熟方法有几种,其中红氨酸铜染色法最为常用,但其常规染色方法需恒温过夜,染色时间较长,在一定程度上影响临检病理诊断报告周期。为此,我们对其进行了微波处理改良,将时间缩短为15min左右,并用于58例Wilson病穿刺肝组织回顾性铜染色,取得了等同于或好于常规染色法之结果,现介绍如下。     

三种结核分枝杆菌耐药基因检测的临床应用和评价

采用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（PCR－SSCP）检测结核分枝杆菌耐药基因（rPOB、katG和rPSL），评估它的临床应用价值。通过Bactec-960快速培养、PCR－SSCP和药物敏感试验了解123例肺结核病人结核分枝杆菌耐药情况，分析了临床治疗效果。近1／3的初治肺结核病人至少耐一种抗结核药物，RFP、INH和SM敏感株SM敏感株rPOB、katG和rPSL基因突变率分别为6．2％、10．8％和25．4％，耐药株基因突变率分别为60．2％、48．0％和61．5％，耐药基因突变率随着耐药浓度增高而增高。药敏试验联合耐药基因检测指导治疗效果满意。耐药基因检测指导治疗是一种新探索，与药敏试验联合应用可互相弥补，有可能成为临床指导用药的较好方法。     

结核分枝杆菌潜伏感染现状及防控对策

结核潜伏感染(LTBI)是结核病发病的蓄水池,也是持续不断的新发患者的来源。5%～10%的LTBI者一生中会发展为活动性结核病,在LTBI高危人群中发病风险更高。LTBI是结核病疫情难以控制的主要原因之一。2018年,第一次联合国大会结核病高级别会议呼吁重点关注LTBI的管理,控制和减少LTBI者由于重新激活而导致结核病的发病。本文就LTBI的疾病负担、流行现状、发病风险、患者管理及防治策略等进行系统论述,为制定我国LTBI的防治策略提供参考。     

结核分枝杆菌耐药基因快速检测研究进展

耐药结核是重大的公共卫生问题并且成为控制结核病的一大障碍［1］。2015年10月28日,WHO 2015年全球结核病报告［2］中指出,2014年全球新发的结核病病例约960万,其中新发耐多药结核（multidrug-resisi-tant tuberculosis MDR-TB）病例48万,新发的MDR-TB中不到13万病例得到检测和报告,而开始接受MDR-TB治疗的病例约为11万。中国每年耐多药结核病患者达到近10万人,其中初治患者耐多药结核为5.7%,复治患者高达25.6%［3］。在很多地区,因为传统的结核药敏实验受生物安全、培养时间长等因素影响,不能常规进行耐药结核检测,甚至最基本的结核菌培养都不能开展,这表明大多数的耐多药结核病例仍然不能确诊,导致临床上的治疗无针对性。目前,具有生物安全要求级别低、检测时间短、敏感性较高等特点的耐药结核分子生物学诊断方法日益受到重视,现就结核分枝杆菌的基因快速检测研究进展综述如下。     

检测耐利福平结核分枝杆菌寡核苷酸芯片的研制及应用

目的：探讨用寡核苷酸芯片检测结核分枝杆菌耐利福平株的rpoB基因突变的可行性。方法：制备了检测耐利福平结核分枝杆菌寡核苷酸芯片，并且通过优化引物比例和杂交温度以获得最佳结果。应用该寡核苷酸芯片检测6例结核分枝杆菌的rpoB基因突变，并与测序结果比较。结果：不同引物比例PCR产物经热变性后杂交，杂交结果无明显差异。杂交温度可以影响杂交结果的特异性和杂交信号的强度。引物比例1：1，杂交温度50℃为最佳条件。6例标本的芯片检测结果显示其中有1例野生型标本，5例突变标本：516位GAC→AAC，GTC，TAC，GAG，531位TCG→TTG。其结果与测序结果完全相符。结论：寡核苷酸芯片可以推广应用到临床作为耐药结核病快速诊断的一种有效方法。     

FAFLP技术及其在细菌学研究中的应用

荧光素标记的选择性扩增片段长度多态性(fluorescent amplified fragment length polymorphism，FAFLP)分析是一种用荧光素标记引物扩增已知酶切位点和接头DNA片段的指纹图技术，具有快速、简便、价廉、分辨率高、重复性好和污染少的特点。该方法已被成功地应用于植物学、动物学、法医学、微生物学等领域，是目前微生物流行病学调查、鉴定、分型和遗传分析中较为理想的分子生物学方法。本文主要介绍了FAFLP技术的原理、方法及其在微生物学中的应用。     

实时荧光定量PCR检测痰中结核分枝杆菌临床评价

目的评价实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测临床痰标本中结核分枝杆菌诊断肺结核的意义。方法收集我院2011年9月-2013年8月期间收治的126例确诊为肺结核的患者和80例非结核性呼吸道疾病患者的痰液标本,分别采用漂浮集菌涂片镜检、BACT／ALERT3D快速培养法和FQ-PCR法检测痰中结核杆菌,分析检出结果。结果126例确诊为肺结核患者的痰标本中对结核分枝菌杆的检验以FQ-PCR检出率最高达到53．2％,高于快速培养法的46．8％（P〈0．05）和痰漂浮集菌涂片镜检法的32．5％（P〈0．01）。FQ-PCR与痰培养法总体一致性为95．1％,K=0．88。对痰涂片阳性标本,两者敏感性差异无统计学意义（P〉0．05）;对痰涂片阴性标本,FQ-PCR敏感性明显高于快速培养法（P〈0．01）。结论FQ-PCR具有快速、敏感、特异、可定量和自动化的优点,值得应用于痰中结核杆菌的检测及肺结核的诊断。     

脓肿型分枝杆菌肺部感染胸片和CT表现

目的：探讨脓肿型分支杆菌病的胸部X线和CT影像学表现。方法：回顾性分析18例经临床确诊为脓肿型分枝杆菌感染患者的X线、CT表现。结果：胸片异常征象：斑点状、细网状阴影16例（89%,16/18）,空洞8例（44%,8/18）,肺叶体积缩小8例（44%,8/18）,实变4例（22%,4/18）,支气管扩张8例（44%,8/18）。CT异常征象：支气管扩张12例（66.7%,12/18）,其中表现为柱状支气管扩张9例（50%,9/18）,囊状支气管扩张5例（27.8%,5/18）,静脉曲张型支气管扩张3例（16.7%,3/18）;直径小于10mm结节17例（94.4%,17/18）,树丫征15例（83.3%,15/18）;直径大于10mm结节13例（72.2%,13/18）,肺叶实变6例（33.3%,6/18）,段或亚段实变9例（50%,9/18）,空洞9例（50%,9/18）,肺体积缩小7例（38.9%,7/18）。结论：脓肿型分枝杆菌感染的胸片和CT表现主要为小结节样斑片状、细网状影、支气管扩张和空洞形成。     

结核分枝杆菌脂多糖抗原的提取及血清学诊断价值研究

 目的 建立结核分枝杆菌脂多糖的提取方法,评价其在结核病血清学诊断巾的价值,寻找更有效的结核病诊断试剂.方法 将火活的结核分枝杆菌经超声破碎,热酚法去除蛋白,乙醇沉淀去除DNA、RNA,透析得到结核分枝杆菌多糖.将其作为抗原,通过酶联免疫吸附试验( ELISA)方法 检测470例血清中抗结核抗体.结果 结核分枝杆菌脂多糖用于血清标本检测,敏感性为49.5％;特异性为93.5％,其巾健康对照组阳性率为5.2％,非结核对照组阳性率为10.3％.结论 结核分枝杆菌脂多糖抗原可作为结核病血清学诊断的组合抗原之一,提高阳性标本检出的阳性率和特异性.     

CT检查在回盲部结核中的临床应用价值

回盲部结核影像检查方法主要依靠钡餐或钡灌肠,而其他检查手段如B型超声、CT尽管有一定限度[1],但在临床上也有一定的应用价值。本文通过回顾性分析我院自2000年9月~2007年7月间经临床确诊的34例回盲部结核的CT资料,以评价CT检查在回盲部结核中的临床应用价值。1资料与方法本组     

前哨淋巴结检测术在宫颈癌诊疗中的研究进展

宫颈癌在女性生殖器官肿瘤中发病率最高,淋巴结转移是其最主要的转移方式,前哨淋巴结是在原发肿瘤淋巴引流区域内,淋巴结发生转移必经的首站淋巴结,前哨淋巴检测术具有操作简单、检出率高、阴性预测值高等特点,其方法、病理学检查、影像因素对指导早期宫颈癌的根治性切除术,减少手术创伤、淋巴结微转移和制定合理的放疗计划等的研究具有重要意义.     

MR扩散加权成像在脑实质结核中的应用价值

目的：探讨MR扩散加权成像（DWI）在脑实质结核中的应用价值。方法：搜集脑实质结核病例48例,回顾性分析其DWI表现特点,并测量脑实质结核表观扩散系数（ADC）值。结果：脑实质结核的DWI表现复杂,病灶中心约1/2表现为等信号,余表现为高、低或混杂信号。测得在T1增强扫描上呈均匀强化、环形强化伴实性中心及环形强化伴液性中心的病灶中心平均ADC值分别为（0.92±0.14）×10-3mm2/s、（0.99±0.17）×10-3mm2/s和（2.00±0.55）×10-3mm2/s,环形强化病灶的壁平均ADC值为（1.05±0.19）×10-3mm2/s,病灶周围水肿平均ADC值为（1.18±0.24）×10-3mm2/s,均大于正常脑实质ADC值[（0.83±0.09）×10-3mm2/s],差异均具统计学意义（P〈0.05）。结论：脑实质结核病灶扩散不受限,DWI检查及ADC值的测量对脑实质结核的诊断及鉴别诊断具有一定的价值。     

结核分枝杆菌及多重耐药性的快速检测:MTB/RIF实验及检测诊断系统

我国是结核病及耐药结核高发地区,年新发结核病例130万,新发结核病例耐药率为5.7％.痰涂片抗酸染色和临床放射影像学是结核病尤其是肺结核的主要诊断手段.但痰涂片阳性率偏低,新发肺结核病例涂阳率仅28％,而且结核病的影像学表现缺乏特异性.缺乏简单、准确、快速的诊断手段一直是我国实现结核病防控目标的瓶颈.结核分枝杆菌/利福平耐药(MTB/RIF)检测诊断系统运用半槽式(hemi-nested)RT-PCR及荧光探针报告技术(beacon technology),特异性扩增并检测结核分枝杆菌特有并与利福平耐药密切相关的rpoB基因片段.以PCR循环阈值反映标本中的结核分枝杆菌载量,进行半定量分析.该系统以结核杆菌培养作为标准对照,对疑诊肺结核患者痰标本的诊断总体敏感性为73.1％～90.0％,特异性99.0％～99.5％;对利福平耐药基因(MDR-TB的分子生物学标记物)诊断的敏感性为97.2％、特异性为98.3％.上样后系统可在2h内自动完成诊断及结果打印程序.由于系统特异性扩增rpoB基因片段,因此与非结核分枝杆菌及呼吸系统常见病原体无交叉反应.除外痰标本,该系统还能用于多种体液(胸腔积液、尿、脑脊液以及支气管肺泡灌洗液等)和肺组织匀浆中结核分枝杆菌的检测.该系统的诊断敏感性较抗酸染色高l00倍,与结核分枝杆菌培养相近,但后者从加样至报告的平均时间为16d(平板培养基)或30d(液体培养基).与传统结核诊断实验室诊断技术相比,本系统还具有操作简便、不产生传染性生物气溶胶等优点.     

应用免疫金银染色法进行含胰岛素细胞的免疫组织化学定位

近几年来,一种敏感的免疫金银染色(immunogold—silver staining, IGSS)方法在免疫组织化学研究中得到了应用。我们用一种新的石蜡包埋方法将不同的组织包埋在一个蜡块中,在一张切片上可进行多种组织样品的免疫组化染色。用豚鼠抗胰岛素抗体和本实验室制备的胶体金标记羊抗豚鼠IgG进行IGSS,对大鼠胰腺组织中的含胰岛素细胞定位获得了较满意的结果。     

非结核分枝杆菌肺病的MSCT表现

【摘要】目的：探讨非结核分枝杆菌（NTM）肺病的多层螺旋CT表现。方法：回顾性分析经实验室检查确诊的60例NTM肺病的CT表现。结果：NTM肺病的主要CT表现分为三型：①支气管扩张合并细支气管炎型（35例,35/60,占58.3%）,支气管扩张均为柱状,同一肺叶均可见细支气管炎（即小结节和树芽征）。支气管扩张最常见于右肺中叶及左舌叶,均为24例（24/35）,小结节灶最常见于左肺下叶（33例,33/35）,树芽征最常见于右肺上叶（22例,22/35）。8例（8/35）患者合并空洞。②结核相似型（23例,23/60,占38.3%),主要CT表现为斑片状、片状、斑点状、结节状及索条状影,多种形态混合存在,伴空洞者16例（16/23）,空洞数共44个,多发空洞10例（10/16）,最常见于左肺上叶（10个）。伴支气管扩张者8例（8/23）,均为柱状支气管扩张。树芽征4例（4/23）。肺不张4例（4/23）,其内均可见柱状支气管扩张,胸膜增厚2例(2/23),单侧胸腔积液2例(2/23)。③混合型：1例右肺中叶大片状实变影,右肺下叶巨大肺大泡并感染;1例双肺多发大小不等小结节状影,边缘清楚,右肺上叶不张伴柱状支气管扩张及不规则空洞。结论：NTM肺病以柱状支气管扩张和细支气管炎表现为主要征象,其次类似于继发性肺结核表现,少数患者表现为其它征象,如大片状实变、多发结节灶。MSCT对该病的诊断具有重要价值。     

痰液和BALF的结核分枝杆菌培养对部队肺结核患者的诊断价值比较

目的 评估痰和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)的结核分枝杆菌快速培养对部队肺结核患者的诊断价值.方法 以来自部队的痰涂片检测阴性的疑似肺结核患者为研究对象,收集病员的痰液和BALF标本,采用BACTEC MGIT 960液体培养法(简称MGIT 960法)分别进行结...     

结核抗体检测在结核病诊断中的价值

结核抗体的检测，给结核病的诊断提供了血清学依据，为了探讨其诊断价值，我们将肺结核、肺外结核和健康人群，作进一步诊断研究，并探讨其诊断价值。1对象和方法1．1病例选择肺结核病组82例，男60例．女22例。年龄9～72岁。其中巨型4例，巨型58例，只型10例，V型IO例。肺外结核组24例，男19例，女5例。年龄4～32岁。其中淋巴结结核12例，结核性脑膜炎6例，骨和关节结核4例，结核性心包炎五例。担卵管结核1例。对照组30例，均为男性健康献血员．年自20～38岁。互．2方法采用ELISA法，检测标本为血清，其操作步骤及阴、阳性判定按试剂盒…