糖尿病大鼠视网膜组织中缺氧诱导因子-1α、内皮素-1的表达研究

目的检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）与内皮素-1（ET-1）在糖尿病视网膜组织中的表达变化,探讨其在糖尿病视网膜病变（DR）发生、发展中的作用。方法将SD大鼠随机分为对照组（CON）和糖尿病（DM）组。其中糖尿病组采用STZ一次性尾静脉注射建立糖尿病模型,制模成功后分别于2、4、8、12周处死大鼠,取眼球组织,应用免疫组化和放免法检测各组大鼠视网膜组织中HIF-1α、ET-1的表达变化。结果免疫组织化学染色显示正常对照组大鼠视网膜不表达HIF-1α,DM组2周时有少量表达,4周时阳性细胞数量增多,8周达到高峰,12周时表达已降低,各组之间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。经放免法测定,对照组大鼠视网膜组织中仅有少量ET-1,而DM组大鼠随病程延长,视网膜组织中的ET-1含量呈进行性增加。各组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HIF-1α与其下游基因ET-1在DM病程中的表达变化提示二者可能与视网膜组织的损伤有关,并在DR的发生、发展中发挥重要作用。     

高原缺氧条件对大鼠肠黏膜组织及缺氧诱导因子-1α、诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨高原缺氧条件对大鼠肠黏膜组织形态以及缺氧诱导因子(HIF)-1α和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法将40只雄性Wistar大鼠均分为平原对照组及高原24h、48h、72h组,每组10只。平原对照组在常温环境下饲养1个月后处死,高原组在平原饲养1个月后于24h内急运至高原,建立高原缺氧模型,分别于到达高原后24、48、72h处死。分别在光镜和电镜下观察大鼠空肠上段的微观组织学变化,用图像测量软件测量绒毛高度、隐窝深度、黏膜厚度及绒毛表面积。免疫组化染色检测HIF-1α及iNOS在肠黏膜中的表达。结果高原24h组肠绒毛高度、隐窝深度、黏膜厚度及绒毛表面积分别为313.10±10.84、123.10±2.64、432.60±7.37μm和0.09±0.01mm2,与平原对照组(分别为322.00±12.68、127.70±7.24、447.50±21.93μm和0.10±0.01mm2)相比差异无统计学意义(P>0.05),高原48h组上述指标分别为279.00±9.80、101.10±7.11、376.40±19.05μm和0.06±0.01mm2高原72h组上述指标分别为235.80±19...     

缺氧诱导因子-1α对肺动脉平滑肌细胞端粒酶反转录酶的转录调节作用

目的 研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对缺氧状态下大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)中端粒酶反转录酶(TERT)表达的调控作用.方法 培养大鼠PASMC,采用RT-PCR分别检测HIF-1α激动剂(CoCl2、DFX)、HIF-1α抑制剂(FAS)、代谢抑制剂(CBZ-LLL)、反义寡核苷酸等作用后及缺氧条件下HIF-1α、TERT mRNA的表达,Western blotting检测HIF-1α蛋白的表达.结果 缺氧4h条件下HIF-1α、TERT mRNA的表达量(分别为0.59±0.07、0.60±0.06)明显高于对照组(分别为0.11±0.02、0.10±0.01,P＜0.05).与对照组相比,加入DFX后,HIF-1α、TERT mRNA表达量(分别为0.52±0.06、0.45±0.04)明显升高(P＜0.05);加入CoCl2后,HIF-1α、TERT mRNA表达量(分别为0.99±0.08、0.72±0.07)也明显升高(P＜0.05).加入FAS后,HIF-1α、TERT的mRNA表达量(分别为0.09±0.01、0.13±0.01)较缺氧组(分别为0.65±0.06、0.52±0.04)明显降低(P＜0.05).加入CBZ-LLL后,HIF-1α mRNA表达量(0.09±0.01)与对照组(0.06±0.01)比较无明显差异(P＞0.05),但TERT mRNA表达量(0.82±0.07)较对照组(0.08±0.01)明显升高(P＜0.05).加入CoCl2和CBZ-LLL后,HIF-1α蛋白表达量(分别为12.0±1.1、9.0±0.8)较对照组(1.0±0.1)明显升高(P＜0.05).缺氧条件下,加入反义寡核苷酸后TERT mRNA表达量(0.20±0.01)较缺氧组(0.75±0.06)明显降低(P＜0.05),但加入错配寡核苷酸的TERT mRNA表达量(0.70±0.06)与缺氧组相比无明显差异(P＞0.05);常氧条件下,同时加入反义寡核苷酸、CoCl2后PASMC的TERT mRNA表达量(0.45±0.04)较CoCl2组(0.95±0.08)明显降低(P＜0.05).结论 HIF-1α对缺氧状态下大鼠PASMC中TERT的表达具有调控作用.     

缺氧诱导因子1α在异丙肾上腺素诱导的大鼠心房纤维化中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在盐酸异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心房纤维化中的表达及其可能机制.方法 健康雄性Wistar大鼠30只,随机均分为空白对照组、ISO组、ISO+西罗莫司(Rapa)干预组(Rapa组).于实验15d时处死大鼠取心肌组织,放射免疫法检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量,HE和Masson染色法观察纤维化程度即胶原容积分数(CVF),免疫组织化学法、Western blotting检测HIF-1α、转化生长因子β1(TGF-β1)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在大鼠心房纤维化组织中的表达,并分析HIF-1α、TGF-β1、MMP-9蛋白表达量与心房纤维化指标CVF的相关性,以及HIF-1α、TGF-β1、MMP-9蛋白表达量之间的相关性.结果 ISO组、Rapa组AngⅡ含量较空白对照组明显升高(P＜0.01).空白对照组CVF为15.482％±0.837％,无心房纤维化,而Rapa组、ISO组CVF分别为16.730％±1.052％、86.704％±1.928％,Rapa组较ISO组的心房纤维化程度明显减弱(P＜0.01).免疫组化及Western blotting检测显示,与空白对照组相比,ISO组HIF-1α、TGF-β1和MMP-9蛋白表达量均明显增加(P＜0.01),与ISO组比较,Rapa组中HIF-1α、TGF-β1和MMP-9蛋白表达量明显降低(P＜0.01). HIF-1α、TGF-β1和MMP-9蛋白表达量均与心房纤维化程度(以CVF为评价指标)呈正相关(r=0.987,r=0.988,r=0.917,P＜0.01); HIF-1α与TGF-β1、MMP-9蛋白表达量呈正相关(r=0.976,r=0.901,P＜0.01),MMP-9与TGF-β1蛋白表达量亦呈正相关(r=0.912,P＜0.01).结论 在异丙肾上腺素诱导的大鼠心房纤维化过程中,AngⅡ、HIF-1α、TGF-β1、MMP-9发挥着重要作用.     

缺氧环境下的肝星状细胞中缺氧诱导因子1α与缺氧诱导因子2α对CD248表达水平影响

目的探究缺氧状态下的肝星状细胞(HSC)中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、缺氧诱导因子2α(HIF-2α)对内皮唾液酸蛋白(endosialin/CD248/TEM1)表达水平的影响。方法首先,通过对布-加综合征(BCS)患者肝组织样本进行HIF-1α、HIF-2α和CD248免疫组化染色,并通过计算HIF-1α、HIF-2α和CD248的免疫组化累积光密度(IOD)值来分析CD248与HIF-1α、HIF-2α之间表达的相关性。其次,将成功包装的HIF-1α、HIF-2α过表达慢病毒和空载慢病毒分别感染体外培养的LX-2人肝星状细胞(HSC-LX2),并使用CoCl2进行低氧诱导处理。使用β-actin作为内参基因,通过定量聚合酶链反应技术观察缺氧环境下过表达慢病毒和空载慢病毒感染的HSC-LX2细胞中CD248基因表达水平,并对数据进行统计学分析。结果通过对BCS患者肝组织样本HIF-1α、HIF-2α和CD248的IOD值进行检测,显示CD248与HIF-1α(Pearson相关系数:r=0.285,P=0.010)和HIF-2α(Pearson相关系数:r=0.382,P<0.001)的表达水平呈现显著的正相关。定量聚合酶链反应技术检测显示,与空载慢病毒感染的HSC-LX2细胞比较,HIF-1α与HIF-2α过表达慢病毒感染的HSC-LX2细胞中CD248的表达丰度均明显升高(P均<0.05)。结论在缺氧状态下的HSC中,HIF-1α、HIF-2α均可能参与调控CD248基因表达增加。     

缺氧诱导因子HIF—1α与恶性肿瘤

IBF-1α是与恶性肿瘤生长进程密切相关的转录调节因子，瘤细胞氧状态及基因变异共同调控HIF-1α表达水平及其活性。HIF—1α高表达在人体恶性肿瘤中广泛存在。HIF-1α高表达对肿瘤组织放化疗敏感性有显著影响，体外实验表明针对HIF-1α的靶向药物和基因治疗能够通过主动下调HIF-1α表达水平，抑制肿瘤细胞生长。因此研究HIF—1α对肿瘤生长、侵袭、转移、预后和诊治等方面都有重要意义。     

缺氧诱导因子1α、多药耐药相关蛋白1在脊索瘤中的表达及其临床意义

目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白、多药耐药相关蛋白1(MRP1)在脊索瘤中的表达水平及其与脊索瘤病理特征和放化疗抵抗之间的关系。方法收集2000年1月-2008年12月接受手术治疗的50例脊索瘤患者的肿瘤组织石蜡标本,另取15例骨软骨瘤标本作为对照。50例脊索瘤患者中男35例,女15例;年龄17～77岁,平均53.3岁;原发病例26例,复发病例24例;病理类型包括普通型48例,去分化型1例,外周型1例。采用免疫组化Envision法检测HIF-1α、MRP1蛋白表达情况,分析其与放化疗抵抗的关系,并探讨HIF-1α、MRP1表达与脊索瘤临床病理特征的关系。结果50例脊索瘤组织HIF-1α、MRP1的阳性表达率分别为80%和74%,均明显高于骨软骨瘤组织(分别为20%和27%,P<0.01)。相关性分析显示,脊索瘤组织中HIF-1α与MRP1的表达呈正相关关系(r=0.80,P<0.01)。脊索瘤组织中HIF-1α、MRP1的表达水平与患者性别、年龄、发病次数及肿瘤大小、部位、分化程度、分期、淋巴结转移均无明显关系。结论脊索瘤组织中HIF-1α和MRP1表达明显增高,且两者表达水平呈正相关,其过度表...     

缺氧诱导因子HIF-lα与恶性肿瘤

HIF-lα是与恶性肿瘤生长进程密切相关的转录调节因子,瘤细胞氧状态及基因变异共同调控HIF-lα表达水平及其活性.HIF-lα高表达在人体恶性肿瘤中广泛存在.HIF-lα高表达对肿瘤组织放化疗敏感性有显著影响,体外实验表明针对HIF-lα的靶向药物和基因治疗能够通过主动下调HIF-lα表达水平,抑制肿瘤细胞生长.因此研究HIF-lα对肿瘤生长、侵袭、转移、预后和诊治等方面都有重要意义.     

缺氧诱导因子-1α基因多态性和乳腺癌易感性关系的Meta分析

目的 运用Meta分析方法评价缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)基因多态性与乳腺癌发生的关系。方法 检索PubMed、Cochrane Library、中国期刊全文数据库、万方数据库等数据库中所有关于HIF-1α基因多态性与乳腺癌易感关系的相关文献,合并各研究的OR值进行Meta分析。结果 HIF-1α C1772T基因多态性与乳腺癌发生的研究共纳入9篇文献,乳腺癌患者2 787例,对照组2 686例,G1790A基因多态性与乳腺癌风险的研究共纳入4篇文献,其中乳腺癌患者796例,对照组651例。Meta分析结果表明,C1772T以及G1790A基因型均与乳腺癌发病风险无明显相关。排除了对照组基因分布不符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律后,对C1772T基因多态性与乳腺癌关系进行敏感性分析,结果表明显性模型（TT vs CT+CC）以及（TT vs CC）与乳腺癌发生有密切关系[OR=2.61,95%CI(1.32~5.15),P=0.006;OR=2.62,95%CI(1.33~5.16),P=0.005];对G1790A基因多态性研究进行敏感分析,未发现对总体分析结果有明显影响。结论 HIF-1α C1772T基因隐性模型个体发生乳腺癌风险可能增加,但HIF-1α基因多态性与乳腺癌发病风险之间的关系尚不明确。     

针刺干预对脑缺血大鼠脑组织低氧诱导因子-1α蛋白和mRNA表达的影响

 目的 观察针刺干预对脑缺血大鼠脑组织缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)蛋白及mRNA表达的影响,探讨针刺对缺血性脑血管疾病的防治机制。方法 建立局灶性脑缺血大鼠模型,随机分为正常组、假手术组、模型组、针刺组(各8只大鼠),应用蛋白印迹及实时荧光定量检测针刺对局灶性脑缺血大鼠脑组织HIF-1α蛋白及mRNA表达的变化。结果 正常组和假手术组大鼠比较HIF-1α蛋白及mRNA表达无明显变化,模型组大鼠HIF-1α蛋白及mRNA表达上调,差异无统计学意义;针刺组大鼠HIF-1α蛋白及mRNA表达高于模型组(0.567±0.058 vs 0.315±0.118; 1.593±0.102 vs 1.193±0.259),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 脑缺血后大鼠脑组织HIF-1α蛋白及mRNA表达增强,针刺可以上调其表达从而发挥脑保护作用。     

缺氧诱导因子1α活性调节机制及其应用进展

缺氧诱导因子1α作为维持内环境氧平衡的核心调控因子,调控一系列缺氧相关基因的表达,在传递缺氧信号的过程中发挥重要作用。通过其转录激活参与对低氧反应基因的调控,从而使机体对低氧刺激作出复杂的病理生理反应。在缺氧诱导因子1α的转录活性调节机制中,羟基化调节和磷酸化调节起主导作用。     

缺氧诱导因子1α、微血管密度在前列腺癌中的表达

目的检测前列腺癌组织中缺氧诱导因子-1浕(HIF-1浕)和微血管密度(MVD)的表达,探讨HIF-1浕和MVD在前列腺肿瘤发生、发展中的作用。方法采用免疫组织化学两步法测定30例前列腺癌和15例良性前列腺增生(BPH)组织标本中HIF-1α的表达和MVD计数,对HIF-1浕的表达和MVD值之间的相关性进行分析。结果 HIF-1α在前列腺癌中的表达显著高于BPH(P<0.05),与肿瘤病理分级、临床分期和远处转移密切相关。前列腺癌组织中MVD计数也显著高于BPH组织,两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。前列腺癌组织中HIF-1α的表达和MVD计数之间呈正相关(r=0.835,P<0.05)。结论 HIF-1α与前列腺癌的新生血管形成密切相关,提示HIF-1α可能在促进前列腺癌的发生、发展中起重要作用。     

低氧训练对大鼠骨骼肌缺氧诱导因子-1α蛋白和血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的:探讨低氧训练对大鼠骨骼肌缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的影响.方法:选用健康雄性SD大鼠72只,随机分为9组.采用递增负荷跑台训练及低氧、超低氧两种不同程度的递增低氧刺激,在运动中和运动后给予低氧处理.应用免疫组织化学、原位杂交、计算机显微图像分析等方法,检测HIF-1α、VEGF mRNA在骨骼肌组织中的定位及含量.采用相关分析方法,分析低氧训练骨骼肌HIF-1α蛋白表达对骨骼肌VEGF转录的促进作用.结果与结论:低氧和运动训练可增加骨骼肌组织HIF-1α蛋白和VEGF mRNA含量,低氧训练骨骼肌组织HIF-1α蛋白表达的增加对VEGF基因转录具有促进作用.     

缺氧诱导因子-1α在兔VX2肝癌模型TACE术后的表达及其临床意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在兔VX2肝癌模型TACE术后的表达及其与肿瘤血管生成的相关性.方法 24只荷VX2瘤兔随机分为3组,每组8只.对照组:经肝动脉注入生理盐水2ml;TAE组:单纯碘油(UFLP)0.5～0.8 ml栓塞,TACE组:碘油抗癌药混悬液(UFLP THP)栓塞,UFLP 0.5～O.8 ml,THP 2 mg.于术后2周应用免疫组化法分别检测肿瘤组织中HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)的表达,用CD34单克隆抗体标记肿瘤血管内皮细胞,计数肿瘤组织中的微血管密度(MVD).结果 TAE组和TACE组HIF-1α、VEGF表达与MVD值均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),HIF-1α与VEGF的表达及MVD的变化呈正相关(rs=0.537,P＜0.01;rs=0.423,P＜0.05).结论 TACE能明显上调HIF-1α的表达,HIF-1α通过调控其下级基因VEGF的表达而促进肿瘤血管的生成,影响肝癌的预后.     

同源性磷酸酶-张力蛋白、缺氧诱导因子-1α在肾细胞癌组织中表达及与临床病理特征关系研究

目的探讨同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在肾细胞癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法选取2015年3月至2016年12月西安医学院附属宝鸡医院收治的94例肾细胞癌患者为研究对象。分别采集94例患者的肾细胞癌组织标本(肾细胞癌组)及癌旁组织标本(癌旁组)。利用免疫组化法检测各组组织中PTEN及HIF-1α的水平,并分析其与肾细胞癌临床病理特征之间的关系。结果肾细胞癌组PTEN高表达阳性率低于癌旁组,HIF-1α高表达阳性率高于癌旁组,组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。PTEN与HIF-1α的高表达率在不同肾细胞癌的病理类型中比较,差异无统计学意义(P>0.05);在不同Robson分期、Fuhrman分级、有无淋巴结转移、有无远处转移的肾细胞癌组织中比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。经Spearman秩相关分析,肾细胞癌组织中PTEN和HIF-1α的表达水平呈显著负相关(r=-0.716,P<0.05)。结论 PTEN、HIF-1α在肾细胞癌组织中异常表达,二者联合检测有助于早期诊断肾细胞癌及评估患者的病情进展。     

高住低练对大鼠肝组织低氧诱导因子-1α蛋白表达的影响

目的:探讨不同持续时间低氧后运动训练(高住低练)对大鼠肝组织低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达的影响。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为6组,每组10只:安静对照组不训练,不进行低氧暴露;两低氧暴露组和两高住低练组每天分别进行8小时或12小时低氧暴露(氧浓度12.6%,相当于海拔4000m);同时,训练对照组和两高住低练组每天均以25m/min的速度进行跑台训练1h,每周5天,共4周。采用免疫组织化学的方法检测各组大鼠肝组织HIF-1α的蛋白表达,并采用计算机显微图像分析系统进行HIF-1α定位及阳性表达定量分析。结果:与安静对照组相比,不论是单纯低氧暴露组、单纯训练组或者高住低练组HIF-1α蛋白表达均显著增加(P<0.05);12小时低氧暴露组HIF-1α蛋白表达灰度值比8小时稍增高,无统计学意义(P>0.05),而阳性物质表达面积和PI显著增加(P<0.05);与训练对照组比较,8小时和12小时高住低练组HIF-1α蛋白表达增加,具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);8小时高住低练组HIF-1α蛋白表达比8小时低氧暴露组显著增加(P<0.05),12小时高住低练组HIF-1α蛋白表达比12小时低氧暴露组显著增加(P<0.05,P<0.01);与8小时高住低练组相比,12小时高住低练组HIF-1α蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论:(1)不论单纯低氧暴露、单纯训练或者高住低练均能促进肝组织HIF-1α蛋白表达增加;(2)高住低练过程中肝组织HIF-1α蛋白表达高于单纯低氧暴露或单纯训练方式,不同持续时间低氧后运动对大鼠肝组织HIF-1α蛋白表达的影响不同。     

常压模拟高住低练对大鼠心肌低氧诱导因子1α基因表达的影响

目的:探讨常压下不同低氧(14.5%、12.6%氧含量)模拟高住低练对低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA表达的影响,为运动与低氧适应提供理论依据.方法:采用RT-PCR技术检测大鼠心肌HIF-1α mRNA水平.结果:与低住安静组和低住低练组比较,模拟海拔3000m急性模拟高住低练组和模拟高住低练组HIF-1α mRNA表达均显著上调;模拟海拔4000m急性模拟高住低练组HIF-1α mRNA表达显著上调,模拟高住低练组则无显著性差异,而显著性低于急性模拟运动组.提示不同海拔低氧刺激与运动对HIF-1α mRNA表达的影响不同,3000m海拔比4000m更为适宜.     

上调缺氧诱导因子-1对大鼠球囊损伤后内膜增生的影晌

目的探讨上调缺氧诱导因子-1（HIF-1）对大鼠球囊损伤后内膜增生的影响。方法 30只雄性健康SD大鼠随机分为假手术组、模型组和干预组,模型组和干预组均采用1.5F球囊导管建立颈动脉球囊损伤模型。于术后第1 d开始,干预组给予含羞草素（L-Mim）100 mg/（kg.d）灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃。干预14 d后取损伤血管段,测定内膜增生情况,并用Western blotting法检测HIF-1的蛋白表达。结果术后14 d,模型组和干预组均发生明显内膜增生,内膜面积和内膜与中膜面积比均显著高于假手术组（P〈0.01）,而干预组上述指标均低于模型组（P〈0.01）。与模型组比较,干预组损伤血管中HIF-1的蛋白表达水平显著升高（P〈0.05）。结论采用L-Mim上调HIF-1可显著削弱球囊损伤导致的内膜增生。     

缺氧诱导因子1促进血管生成的调控机制

创伤、肿瘤、血管栓塞等因素常导致机体相应组织产生缺血缺氧，通过新生血管可以有效缓解缺氧组织对氧和能量的需求，从而维持内环境稳定。缺氧诱导因子-1(hypoxia—inducible factor-1，HIF-1)对缺氧状态下的血管生成起核心调控作用。笔者就HIF-1的结构、对病理性血管生成的调控机制及其治疗策略进行综述。