帕金森病的秀丽隐杆线虫模型研究进展

帕金森病是第二大神经退行性疾病,病因及发病机制复杂,可能与年老、环境因素及遗传因素等有关,目前尚不能治愈。秀丽隐杆线虫因其独特的优势,逐渐成为研究帕金森疾病的重要模式生物。作者对近几年帕金森病的秀丽隐杆线虫转基因模型和化学因素诱导模型进行综述。     

秀丽隐杆线虫作为电离辐射模型的研究进展

随着放射治疗在肿瘤治疗中的地位日益显著,如何减轻放疗的副作用也逐渐成为研究的热点。秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）因其独特的优势成为一个良好的研究电离辐射的模型。近年来,国内外利用线虫模型对电离辐射特性的研究日益增多。本文简要综述了电离辐射对线虫的影响以及相关机制。     

秀丽隐杆线虫对益生菌鉴定研究进展

人和动物肠道中具有非常复杂而平衡的微生物群,这些微生物通常可以起到如下作用:(1)营养[1];(2)防御[2];(3)免疫调节[3];(4)促进生长、抗衰老及抑制肿瘤[4].突然改变膳食、紧张或使用抗生素会扰乱这种微生物群平衡,使宿主易患病及降低对食物的利用效率.益生菌具有重建自然平衡和使宿主恢复正常健康和营养状况的能...     

秀丽隐杆线虫在神经科学研究中的应用

模式生物秀丽隐杆线虫(C. elegans)是多细胞无脊椎动物,其中神经细胞占体细胞的三分之一之多.虽然解剖结构十分简单.但神经递质、突触蛋白、离子通道等基本组成与人类具有高度的保守性.由于其全基因组遗传信息已知,基因操作便捷,秀丽隐杆线虫已经在高级神经功能活动、神经系统疾病等研究领域中发挥重要作用.本文就秀丽隐杆线虫在神经科学研究中的应用进行综述.     

基于实时定量PCR技术的秀丽隐杆线虫肠道食物菌鉴定方法

目的：建立基于实时定量PCR技术的秀丽隐杆线虫肠道食物菌鉴定方法。方法采用实时定量PCR （ real-time quantitative polymerase chain reaction ,qPCR）分别对1、20、50只线虫进行肠道食物菌检测,分析成虫期和衰老期线虫肠道食物菌的变化情况。结果 qPCR可检测到单只线虫肠道食物菌含量,可准确反映不同样本之间肠道食物菌含量的变化。结论基于qPCR技术的线虫肠道食物菌鉴定方法可对线虫肠道食物菌进行准确定量,具有成本低、灵敏度高、特异性好的优势。     

神经酰胺在辐射诱导的秀丽隐杆线虫生殖细胞旁效应中的机制研究

目的 利用秀丽隐杆线虫为研究对象,以单粒子束为辐射源,从活体水平探究神经酰胺在辐射旁效应中的作用。方法 以野生型N2和突变体L4期线虫的后食道球为辐射部位,分别给予2 000个质子的辐照剂量,检测和分析成虫的生殖腺凋亡细胞以及基因表达水平。结果 定点辐射N2的后食道球可显著诱导线虫旁区生殖腺细胞凋亡的增加（t=9.007,P<0.05）,但在神经酰胺合酶基因突变体中未表现出这一现象（P>0.05）。实时定量PCR结果显示,辐射诱导N2和神经酰胺合酶基因突变体lagr-1（gk327）;hyl-1（ok976）线虫中凋亡核心通路基因egl-1和ced-13表达量的上升,但两品系线虫间的差异无统计学意义（P>0.05）;辐射可诱导N2和DNA损伤检验点突变体hus-1（op241）中hyl-1和lagr-1表达量的上升,且两品系间的差异无统计学意义（P>0.05）。非受体络氨酸激酶abl-1突变可显著增加辐射诱导的旁区细胞凋亡（t=13.241,P<0.05）,而当神经酰胺合酶基因与abl-1同时突变时,凋亡增加的现象被抑制（t=13.462,P<0.05）。结论 神经酰胺参与线虫体内辐射引起的旁区凋亡过程,且可能与凋亡核心通路中的促凋亡蛋白egl-1和ced-13以及DNA损伤响应通路中的HUS-1协同发挥作用。抑凋亡基因abl-1与神经酰胺合酶在凋亡过程中表现出拮抗关系。     

以秀丽隐杆线虫为模型的电离辐射损伤研究进展

秀丽隐杆线虫（简称线虫）作为一种经典模式生物,已被广泛应用于辐射损伤研究领域。电离辐射在线虫体内造成的损伤与脊椎动物相似,主要体现在DNA损伤、活性氧水平上升、衰老加速和生殖系统受损等。以线虫作为电离辐射动物模型的研究已经在辐射损伤领域中取得很多突破。电离辐射引起的线虫衰老受多种因素影响,包括错误的蛋白表达、脂质代谢的改变等。电离辐射可诱导线虫生殖细胞凋亡、细胞周期阻滞和DNA损伤。以线虫作为电离辐射动物模型的研究对高等生物的辐射效应研究有重要意义。笔者简要综述了以线虫为模型的辐射损伤研究进展。     

秀丽隐杆线虫识别辐射损伤小鼠尿液的研究

目的 研究秀丽隐杆线虫（简称线虫）对照射后小鼠尿液的趋向性及与照射剂量和时间的关系。 方法 按照区组随机法将168只C57/BL6小鼠分为对照组和照射组,对照组为未照射的小鼠;照射组为使用137Cs γ射线进行全身照射后的小鼠,剂量率为0.84 Gy/min。（1）照射后不同时间点的爬行实验：将小鼠分为7.5 Gy照射组和对照组,每组12只,于照射后0、2、4、8、12、24、48、72 h收集尿液;（2）不同剂量照射后的爬行实验：将小鼠分为2、4、6 Gy照射组和对照组,每组12只,于照射后24 h收集尿液。（3）时间与剂量之间的正交实验：将小鼠分为2、4、6 Gy照射组和对照组,每组12只,于照射后4、8、24 h收集尿液。（4）风扇实验和加热实验：将小鼠分为7.5 Gy照射组和对照组,每组12只,于照射后24 h收集尿液,分别将尿液用风扇吹风和加热后进行爬行实验。线虫培养至L3幼虫期,将其分别和每组小鼠的尿液滴至培养皿的不同区域,于体视显微镜下观察并计算每个区域中线虫的百分数。2组间的比较采用独立样本t检验和配对t检验。 结果 （1）照射后不同时间点的爬行实验：7.5 Gy照射后8 h时线虫开始出现聚集,与对照组相比,照射组在照射后8、12、24、48、72 h时线虫的百分数差异均有统计学意义（t=4.073~67.518,均P<0.01）。（2）不同剂量照射后的爬行实验：与对照组相比,2、4、6 Gy照射组区域线虫的百分数均增加[（29.33±5.79）%对（69.58±7.00）%、（11.58±3.60）%对（84.42±5.55）%、（9.08±2.19）%对（88.58±3.45）%],且差异均有统计学意义（t=11.955、30.320、51.463,均P<0.001）。（3）时间与剂量之间的正交实验：在照射后8、24 h,2、4、6 Gy照射组小鼠尿液的线虫百分数与对照组相比,差异均有统计学意义（t=17.628~133.349,均P<0.001）。（4）风扇实验和加热实验：风扇实验结果显示,照射组和对照组的线虫百分数均增多,但二者的差异无统计学意义（t=1.250,P>0.05）;加热实验结果显示,小鼠尿液加热前后整体重量的差异有统计学意义[（1.060±0.028） g对（1.051±0.026） g,t=11.814,P<0.001],照射组和对照组的线虫百分数均增多,但二者的差异无统计学意义（t=0.585,P>0.05）。 结论 线虫对照射后小鼠尿液中挥发性代谢物具有趋向性,且可辨别低剂量照射。     

秀丽隐杆线虫双突变株系hif-1（ia04）;glb-13（tm2825）的制备与鉴定

目的以秀丽隐杆线虫为模式生物研究珠蛋白（globin）13（glb-13）的生理作用,以回交2次的glb-13（tm2825）突变株系和hif-1（ia04）构建线虫双突变株系hif-1（ia04）;glb-13（tm2825）。方法 glb-13（tm2825）与野生型N2株系交配获得glb-13（tm2825）的雄虫,再与N2的雌雄同体线虫进行交配,回交2次后,通过单只线虫基因组PCR法鉴定出交配后的纯合体。使用hif-1（ia04）和野生型线虫N2进行交配得到hif-1（ia04）的雄虫,然后再与glb-13（tm2825）雌雄同体线虫交配,通过单只线虫基因组PCR法鉴定出交配后的纯合体。结果获得hif-1（ia04）;glb-13（tm2825）双突变株系。结论通过线虫交配回交可以使突变株系线虫保持稳定性状,而突变株系之间的交配可以制备出双突变株系,为深入开展glb-13的功能研究奠定了物质基础。     

人源胞红蛋白转基因秀丽线虫的制备与鉴定

目的：为了以秀丽线虫为模式生物研究人源胞红蛋白（human cytoglobin,hCGB）的生理功能,构建hCGB的秀丽线虫表达载体,并通过显微注射的方法制备转基因线虫。方法：将通过RT-PCR获得的hCGB的cDNA序列亚克隆到pFX-unc-119表达载体中,通过显微注射的方法获取染色体外转基因线虫,采用紫外线（UV）照射的方法,筛选获得整合到染色体中的株系,并采取Western印迹和免疫组织化学法鉴定外源基因的表达。结果与结论：成功地构建了hCGB基因的表达载体并获得了3个hCGB的转基因线虫株系,同时获得了3个作为功能对照研究的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转基因线虫株系,为深入开展胞红蛋白的功能研究奠定了基础。     

肝再生增强因子研究进展

肝再生增强因子是一种新的肽类肝细胞辅助丝裂原，能促进肝再生。其同源基因广泛存在于各种生物体中。本文从肝再生增强因子的基因克隆与分子结构、组织分布与分泌方式、受体分布与信号转导和生物活性等方面进行综述，以加深对肝再生机制的了解。     

Coupling of oxidative stress responses to tricarboxylic acid cycle and prostaglandin E2 alterations in Caenorhabditis elegans under extremely low-frequency electromagnetic field

Purpose: With all-pervasive presence of extremely low-frequency electromagnetic field (ELF-EMF) in modern life, ELF-EMF has been regarded as an essential factor which may induce changes in many organisms. The objective of the present study was to investigate the physiological responses of Caenorhabditis elegans (C. elegans) to 50?Hz, 3?mT ELF-EMF exposure.

Materials and methods: Worms were exposed to ELF-EMF from the egg stage until reaching the fourth larva (L4) stage. After exposure, expressions of the tricarboxylic acid (TCA) cycle enzymes were examined by qRT-PCR and western blot analysis. Two lipid metabolites were detected by GC-MS. Reactive oxygen species (ROS) level was detected by dichlorofluorescein staining and worm antioxidant system was investigated by enzymatic activity analysis, including detection of the superoxide dismutase and catalase (CAT) activity and the total antioxidant capacity (T-AOC).

Results: The TCA cycle enzyme, fumarase was found with decreased expression under ELF-EMF exposure. And arachidonic acid (ArA) and prostaglandin E₂(PGE₂) showed elevated concentrations, with increased expression of prostaglandin E₂ synthase (PGES-2) in ELF-EMF exposed worms. Significant elevation of ROS level was identified accompanied with the significant depression of T-AOC in response to ELF-EMF.

Conclusions: Our results suggested that exposure to 50?Hz, 3?mT ELF-EMF in C. elegans can elicit disruptions of the TCA cycle metabolism and PGE₂ formation, coupling ELF-EMF-induced oxidative stress responses. Our study probably will attract increasing attentions to the controllable application of ELF-EMF associated with health and disease.     

外泌体对脊髓损伤修复作用的研究进展

脊髓损伤是常见的脊柱骨折合并伤,可导致患者运动及感觉功能障碍甚至瘫痪.外泌体作为纳米级的细胞微粒参与多种疾病的发生与发展,已受到广泛关注.脊髓损伤时来源于脊髓组织细胞的外泌体对损伤进程与组织修复产生影响;另外,外泌体可作为脊髓损伤的一种新兴治疗方案也被广为研究.笔者就脊髓组织中各类细胞外泌体在脊髓损伤中的作用机制以及多...     

血管生成过程中促血管生成因子及其在内皮细胞中信号转导途径的研究进展

新血管生成在个体发育、创伤愈合及肿瘤生长等过程中具有十分重要的意义。多种促血管生成因子作用于血管内皮细胞,通过不同的信号转导途径调节细胞的迁移、增殖、凋亡、分化、分泌及管腔状结构的形成。本文回顾了多肽类生长因子、脂类介质,如鞘氨醇－1－磷酸酯（sphingosinel-phosphate,SPP)、溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid,LPA)以及一氧化氮分子等在血管内皮细胞中的信号转导途径及其在血管生成过程中的主要作用,并简述了电离辐射对血管生成影响的研究进展。     

根管冲洗剂拮抗性的研究进展

根管治疗是各型牙髓病和根尖周病最为有效的治疗方法.单纯的机械装备无法彻底清理根管,还可能影响根管的严密充填,只有与化学冲洗剂同时作用才能达到较强的清洁效果.根管冲洗液必须具备溶解组织、清除病原微生物、润滑根管壁、去除玷污层等作用,迄今为止没有任何一种溶液能同时发挥这些效能,因此需要联合使用.这样不仅能够达到良好的清洁和消毒效果,还可降低冲洗剂的使用浓度,减少副作用.但也有研究表明各种化学冲洗剂之间存在拮抗作用.本文针对几种常见的冲洗剂联合使用的拮抗作用进行综述.