Caveolin-1基因转染对人胃腺癌细胞生长的影响

目的 探讨外源性Caveolin-1基因在人胃腺癌细胞中的表达作用.方法 将pcl-neo-caveolin-1人全长质粒转染入MGC803细胞中,用G418筛选得到细胞克隆并扩大培养,获得稳定表达caveolin-1的细胞系,通过Western-blot、细胞计数及流式细胞术等方法检测基因表达、细胞增殖分化等情况.结果 与对照组和pcl-neo空质粒转染组相比,转染caveolin-1基因后的MGC803细胞的caveolin-1的表达明显增高,而P-ERK1/2的表达却明显下降;细胞的群体倍增时间明显延长:由46.67或47.32小时延长至65.46小时,差异有显著性(P＜0.01); 细胞周期分布发生明显变化:G0/G1期细胞比例由35.02%增加到51.98%,S期比例由56.97%下降至39.80%,G2、M期无明显变化.结论 Caveolin-1通过抑制MGC803细胞的增殖而导致其发生G0/G1期阻滞,可为肿瘤基因治疗提供实验依据.     

小檗碱对胃癌AGS细胞增殖和凋亡影响的初步研究

目的初步探讨小檗碱对胃癌细胞系AGS细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT的方法检测不同浓度小檗碱作用48h后对AGS细胞的抑制率,并计算半抑制浓度（50％inhibitingcon—centration,IC50）值;采用流式细胞技术检测不同浓度小檗碱作用48h后胃癌细胞系AGS凋亡的发生率和细胞周期的变化。结果小檗碱对胃癌细胞AGS生长的抑制作用呈现出剂量依赖性,48hIC。。为39．15umol／L。IC50浓度小檗碱干预48h后,AGS凋亡率发生率明显增加,与对照组比较差异有统计学意义（23．18％±3．47％vs10．05％±2．96％,P〈0．05）;IC50浓度的小檗碱作用后,AGS胃癌细胞GO／G1期细胞比例较对照组明显升高,两组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）,而S期细胞及G2／M期比例减少,但无明显统计学意义。结论小檗碱对胃癌细胞系AGS细胞具有浓度依赖性的抑制作用,抑制作用与阻滞细胞周期于G0／G1期有关,其作用机制可能与抑制DNA合成和诱导凋亡有关。     

绒毛膜促性腺激素对人胃腺癌细胞增殖的影响

目的 探讨人绒毛膜促性腺激素(hCG)对人胃腺癌SGC-7901细胞增殖生长的影响。方法用MTT法检测细胞生长率及存活率。结果 hCG在10^11～10^-8mol／L范围内,对胃腺癌细胞的生长具有促进作用,但无明显的时间依较关系。结论 hCG对胃腺癌细胞的生长具有一定的促进作用,提示hCG在胃腺癌的发生与发展中起了一定的作用。     

阿司匹林对人子宫内膜腺癌Ishikawa细胞生长和凋亡的影响

 目的研究阿司匹林对体外培养的人子宫内膜腺癌Ishikawa细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法检测不同浓度及作用时间下阿司匹林对子宫内膜腺癌Ishikawa细胞增殖的影响;通过流式细胞仪检测不同浓度阿司匹林对细胞周期和凋亡率的影响;应用透射电镜观察阿司匹林作用后细胞的形态学变化。结果阿司匹林对人子宫内膜腺癌Ishikawa细胞的增殖具有明显的抑制作用,呈时间与剂量依赖性(P<0.05);阿司匹林使细胞阻滞在G1期,细胞凋亡率增加,与药物作用浓度相关(P<0.05);阿司匹林作用后细胞体积缩小,染色质浓缩致密,可见凋亡小体形成。结论阿司匹林能够显著抑制人子宫内膜腺癌Ishikawa细胞的增殖,并诱导其发生凋亡。     

沙棘油抑制人胃癌细胞增殖及其机制的研究

目的:探究沙棘油对人胃癌细胞增殖的影响.方法:使用CCK-8实验筛选出沙棘油助溶剂DMSO(二甲基亚砜)的安全使用剂量,使用助溶剂DMSO溶解沙棘油后干预人胃癌BGC-823细胞,通过CCK-8实验检测细胞增殖变化水平.使用Western blot实验检测沙棘油干预人胃癌BGC-823细胞后,细胞凋亡基因P53、BCL-2、BAX蛋白表达水平.结果:细胞增殖试验显示,≤0.1％助溶剂DMSO细胞培养液对胃癌BGC-823细胞活性无影响,使用DMSO溶解沙棘油干预胃癌细胞,当沙棘油浓度为2、5、10、20μg·mL-1均能够较好的抑制BGC-823细胞的增殖(P<0.05).Western blot结果显示,当沙棘油浓度为5、10、20μg·mL-1时,P53蛋白表达量均较对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05);当沙棘油浓度为2、5、10、20μg·mL-1时,BCL-2蛋白表达量均较对照组明显降低(P<0.05),BAX蛋白表达量均较对照组增加(P<0.05).结论:沙棘油可通过P53信号通路抑制人胃癌细胞增殖达到抗肿瘤作用.     

膜联蛋白A7过表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨膜联蛋白A7(A N X A7)过表达对人胃癌M G C-803细胞增殖和凋亡的影响.方法 将人胃癌MGC-803细胞分为ANXA7过表达组、阴性对照组,脂质体转染法将pcDNA3.1-ANXA7重组质粒以及空质粒分别转染ANXA7过表达组和阴性对照组.采用Western blot鉴定ANXA7过表达;转染4...     

三氧化二砷对人胃癌细胞增殖的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）抑制人胃癌细胞株MKN-28生长及诱导其凋亡的生物学效应。方法采用光镜观察、溴化二甲噻唑二苯四氮唑（MTT）还原法、流式细胞仪（FCM）检测法、琼脂糖DNA凝胶电泳法检测As2O3在不同作用时间、不同给药浓度时对MKN-28细胞生长的影响。结果MKN-28细胞经As2O3作用后，细胞增殖受到明显抑制，而且呈浓度-作用时间依赖关系。流式细胞仪检测结果显示DNA直方图上出现典型的亚二倍体凋亡峰，细胞周期分析发现药物作用后MKN-28细胞的生长周期受到明显阻滞。琼脂糖DNA凝胶电泳检测到细胞发生凋亡时由于DNA的规律性降解而形成的梯状条带。结论As2O3既能有效地抑制人胃癌细胞株MKN-28的生长，又能诱导该细胞凋亡，而且呈浓度依赖性和作用时间依赖性。     

五肽胃泌素及丙谷胺对人结肠癌细胞增殖的影响

目的：探讨五肽胃泌素（ｐｅｎｔａｇａｓｔｒｉｎＰＧ）及丙谷胺（ｐｒｏｇｌｕｍｉｄｅＰＧＬ）对体外培养的人结肠癌细胞株ＨＴ２９增殖的影响。方法：用ＭＴＴ法测定细胞生长曲线,用流式细胞仪分析细胞周期变化。结果：ＰＧ能明显刺激ＨＴ２９细胞增殖,２．５×１０－６ｍｏｌ／ＬＰＧ使细胞倍增时间缩短５小时,提高细胞增殖指数（Ｐ＜０．０１）。ＰＧＬ能抑制ＰＧ的促增殖作用,单独使用能抑制ＨＴ２９细胞增殖,４ｍＭＰＧＬ能使ＨＴ２９细胞倍增时间延长１１小时,并降低增殖指数（Ｐ＜０．０１）。结论：胃泌素可能在结肠癌的生长中具有调节作用,胃泌素受体拮抗剂可能在结肠癌的治疗中具有重要作用。     

清金得生片对人肺腺癌细胞(LAC)抑制与凋亡的诱导作用

【目的】观察清金得生片对人肺腺癌细胞(LAC)的抑制与凋亡的影响。【方法】以8 g/kg剂量的清金得生片,0.2 g/kg剂量的替加氟(FT-207)灌胃SD大鼠制备体积分数为10%、20%、30%的中药含药血清和体积分数为20%的FT-207含药血清,并设空白血清对照;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)染色法观察清金得生片对LAC的抑制作用;采用硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)双染色法,以流式细胞仪检测清金得生片对LAC细胞早期凋亡的影响;采用透射电镜观察中药对LAC超微结构的影响。【结果】不同剂量中药含药血清对LAC增殖的抑制作用与药物浓度及作用时间呈一定依赖关系,其中体积分数为30%的中药含药血清作用72 h时的抑瘤率达32%;各剂量组中药含药血清均具有一定诱导LAC细胞凋亡的作用;中药含药血清高、中剂量组透射电镜下可见明显凋亡特征,低剂量组凋亡特征不明显。【结论】清金得生片的抗肿瘤机制可能与其能抑制LAC增殖、诱导细胞凋亡作用有关。     

复方苦参注射液对人胃癌BGC-823细胞株增殖抑制作用研究

目的 探讨复方苦参注射液对人胃癌BGC-823细胞株增殖的抑制作用.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测复方苦参注射液对人胃癌BGC-823细胞48 h增殖抑制作用,并求出其48 h半数抑制浓度(IC50);用流式细胞仪分析技术及琼脂糖凝胶电泳检测复方苦参注射液对人胃癌BGC-823细胞凋亡的影响.结果 复方苦参注射液能明显抑制人胃癌BGC-823细胞增殖并呈浓度依赖性,IC50为9/250原液稀释倍数;人胃癌BGC-823细胞经复方苦参注射液(终浓度为1/25.0原液稀释倍数)作用24 h、48 h及72 h后,流式细胞仪分析结果显示,其早期凋亡细胞率分别为(9.58±0.88)%、(20.41±0.77)%及 (60.30±3.19)%,明显高于空白对照组的(4.17±0.11)%,差异均有统计学意义(P＜0.05),并发现明显的细胞凋亡峰(Sub-G1);人胃癌BGC-823细胞经复方苦参注射液(终浓度为1/25.0原液稀释倍数)作用48 h和72 h后,可见明显的梯状条带形成.结论 复方苦参注射液可抑制人胃癌BGC-823细胞增殖,并诱导其凋亡.     

强力霉素对人胃癌细胞体外增殖的影响

目的研究强力霉素对人胃癌细胞SGC-7901增殖的影响及其机制。方法用MTT法和免疫组织化学法分别检测SGC-7901细胞的增殖及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)蛋白表达水平。结果强力霉素作用于SGC-7901的抑制效应呈浓度和时间依赖性,SGC-7901经强力霉素处理后MMP-2的表达,不同浓度间有显著性差异(P<0．01)。结论强力霉素对胃癌细胞SGC-7901有抑制增殖的作用,其机制可能与下调MMP-2蛋白表达有关。     

膜联蛋白A7低表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨膜联蛋白A7(ANXA7)低表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响。方法 将人胃癌MGC-803细胞分为ANXA7低表达组(si-ANXA7)和阴性对照组(si-con),分别将靶向ANXA7的si-RNA和阴性对照RNA转染为ANXA7低表达组和阴性对照组。Western blot法检测ANXA7的表达;MTT法检测各组细胞的增殖能力;PI检测各组细胞的凋亡率;Western blot检测各组细胞增殖和凋亡相关蛋白PCNA和Cleaved casepase-3的表达。结果 与阴性对照组相比,ANXA7低表达组MGC-803细胞增殖能力显著降低,增殖相关蛋白PCNA表达显著下降(P<0.05);细胞凋亡增强,相关蛋白Cleaved casepase-3的表达显著升高(P<0.05)。结论 ANXA7低表达可抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖并促进其凋亡。     

谷氨酰胺酶反义基因对胃癌细胞恶性增殖的逆转作用

目的利用反义核酸技术封闭胃癌细胞的谷氨酰胺酶（glutaminase,GA）基因,观察反义GAcDNA对胃癌细胞恶性增殖能力的影响。方法构建含有GAcDNA片段的反义真核表达载体pcDNA3．0／GA,经脂质体介导转入胃癌细胞SGC-7901（命名为SGC-7901^GA）,并对胃癌细胞生长曲线、细胞核增殖抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）表达、软琼脂克隆形成试验进行观察。结果与对照组比较,8GC-7901^GA在各时相点的细胞生长数目显著性降低（P〈0．05）,PCNA表达较对照组显著下降,在软琼脂上克隆形成数减少。提示SGC-7901^GA生长速度减慢,增殖活性明显减弱。结论通过特异性抑制GA基因的表达,反义GAcDNA对胃癌细胞恶性增殖能力有显著抑制作用。     

马鞭草醇提液对绒毛膜癌JAR细胞增殖的影响

目的　探讨马鞭草醇提液 (ae Vo)对绒毛膜癌 JAR细胞株的影响。方法　 JAR细胞株与人肝癌 SMMC- 772 1细胞株及人胚肺 2倍体成纤维细胞株 (2 BS)体外培养比较 ,应用溴化甲噻唑基四唑 (MTT)法、荧光法测得细胞相对生长曲线及增殖抑制率。结果　 ae Vo对 JAR细胞有明显抑制作用 ,于加药后 4 8h,增殖抑制率为 (71.9± 4 .0 ) %及 (69.6± 2 .0 ) % ,MTT法及荧光法所测结果无明显差异 (P>0 .0 5 )。 ae Vo对 SMMC- 772 1细胞及 2 BS细胞无明显影响。结论　 ae Vo具有抗绒癌作用 ,且作用具有特异性 ,有关机制需进一步研究     

失神经骨骼肌提取液对雪旺细胞体外增殖的作用

目的：观察去神经支配骨骼肌粗提液在体外培养条件下对雪旺细胞（Schwann cells,SCs)增殖的作用,了解外周神经损伤后SCs大量增殖的机理。方法：将新生大鼠SCs培养标本分为加正常骨骼肌提取液组,加失神经支配骨骼肌提取液组和正常对照组,每组10个标本。通过活细胞计数和S－100免疫细胞化学染色证实,观察两种肌肉提取液对SCs增倍时间的影响。结果：对照组SCs增倍时间为8天,正常骨骼肌提取液组为7天,而去神经支配骨骼肌提取液组为5．5天。结论：周围神经损伤后SCs可能受失神经支配骨骼肌产生的某些物质的刺激而增殖加快。     

花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨花边莲提取液对人肺癌SPC-A-1细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用体外培养,细胞毒（MTT法）实验、荧光显微镜观察细胞形态变化、DNA琼脂糖凝胶电泳测定DNA ladder及流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化.结果 花边莲提取液能够抑制SPC-A-1细胞增殖,且呈剂量依赖性;观察到凋亡细胞典型的形态和生化特征,花边莲提取液作用48 h,SPC-A-1细胞均呈现凋亡细胞所特有的亚二倍体峰（sub-G1）,凋亡率随药物浓度增加而增高,并使细胞生长停滞在S期,从而阻滞细胞周期的进行.结论 花边莲提取液对SPC-A-1细胞具有增殖抑制作用,并可诱导SPC-A-1细胞凋亡,其机制可能与细胞周期的S期阻滞有关.     

大黄虫丸含药血清对人肺腺癌细胞A549增殖的影响

目的:观察大黄虫丸含药血清对人肺腺癌细胞A549增殖的影响。方法:12只SD大鼠随机分为大黄虫丸组(DHZCW组)、鸦胆子组、生理盐水组,按常规方法制备含药血清。然后以细胞培养液将含药血清稀释成不同的浓度(40%、20%、10%、5%),采用MTT法检测不同浓度含药血清对A549细胞增殖的影响。结果:与生理盐水组比较,20%、40%DHZCW组和20%、40%鸦胆子组OD值降低,差异有统计学意义(P<0.05);与鸦胆子组比较,40%DHZCW组OD值降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大黄虫丸含药血清与鸦胆子油口服乳液含药血清均具有体外抑制人肺腺癌A549细胞增殖的作用。     

昆明山海棠提取物对人脐静脉血管内皮细胞增殖的抑制作用

目的 探讨昆明山海棠提取物(THW-4)对人脐静脉血管内皮细胞增殖的抑制作用.方法 培养人脐静脉血管内皮细胞,加入不同计量的THW-4进行处理,细胞计数、MTT、细胞周期测定观察THW-4对HUVEC增殖的影响.结果 THW-4可以明显抑制HUVEC增殖,呈剂量依赖性,作用24 h的半有效抑制浓度(IC50)为1.09 ng/mL;THW-4(0.5～10 ng/mL)作用HUVEC 24 h后,THW-4主要阻滞HUVEC于G0/G1期.结论 THW-4能有效抑制体外培养的HUVEC增殖,进一步证明THW-4对球囊损伤血管内皮再生及修复无保护作用     

新藤黄酸体外抑制肺腺癌A549细胞增殖的作用

目的研究新藤黄酸（Gambogenic acid,GNA）抑制肺腺癌细胞株A549增殖的作用及其相关机制。方法不同浓度GNA分别作用A549细胞24、48和72 h,甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）比色法检测药物对A549细胞增殖的抑制率,吖啶橙/溴化乙啶（acridine orange/ethidium bromide,AO/EB）染色荧光显微镜检测细胞的凋亡;乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）法检测GNA对A549细胞损伤作用。结果 MTT法检测结果显示,GNA在0-8μmol/L浓度范围内、24-72 h时间范围内对A549的生长有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖关系;相差显微镜观察表明GNA作用A549细胞48 h后,细胞变圆,呈半贴壁状态;AO/EB染色荧光显微镜观察显示GNA作用48 h后,细胞出现典型的凋亡特征;LDH实验进一步证实GNA在0-4μmol/L浓度范围内对正常细胞未见明显毒性作用。与空白对照组比较,8μmol/L GNA显著降低LDH释放。结论 GNA具有体外抑制肺腺癌细胞株A549增殖的作用,在0-4μmol/L浓度范围内GNA可能是通过诱导细胞凋亡而发挥抑制A549细胞增殖的作用。     

马鞭草提取液对孕早期人滋养层细胞功能影响的研究

正常妊娠６～８周人绒毛滋养层细胞以Ｐｅｒｃｏｌ分离、纯化及体外培养为实验手段，观察马鞭草提取液对滋养层细胞功能的影响，进一步探讨了马鞭草抗早孕的细胞学作用机理。结果表明：２５ｇ／Ｌ、５０ｇ／Ｌ的马鞭草提取液能阻碍细胞生长，培养液中人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）含量明显减少。琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）组织化学及ＨＣＧ免疫组织化学染色，ＮＹＤ－１０００显微图像分析系统定量分析显示，细胞内ＳＤＨ的活性及ＨＣＧ分泌有明显抑制作用，其抑制率随加药剂量增加而增大。超微结构观察也显示细胞明显受损。一定浓度的马鞭草提取液能干扰细胞能量代谢，抑制ＨＣＧ的合成和分泌，为进一步分析马鞭草抗早孕的有效成分奠定基础