轻音乐对大鼠繁殖性能影响初探

目的研究轻音乐对大鼠繁殖性能的影响。方法将240只12周龄SPF级SD大鼠按交配原则分配后分为对照组和实验组。对照组笼具置于无音乐的隔离屏障间,实验组置于播放有轻音乐的隔离屏障问。实验过程中观测大鼠妊娠率、窝产仔数;乳鼠的初生重、离乳率、离乳体重。结果与对照组比较,实验组母鼠的妊娠率、乳鼠的初生重及离乳体重明显增高（P〈0.01或P〈0.05）,窝产仔数及乳鼠的离乳率差异无显著性。结论轻音乐能明显提高部分大鼠繁殖性能指标。     

清洁级Long Evans大鼠生产性能的研究

目的通过对清洁级Long Evans大鼠生长发育及繁殖性能的主要指标测定,为其大量生产和使用提供基础数据。方法在屏障设施(SPF级)内饲养40对清洁级Long Evans大鼠种鼠,采用一雌一雄间隔同居方式交配5胎,测定其生长发育及繁殖性能的主要指标;从第2胎中选择60只离乳仔鼠,雌雄各半,间隔5d称重,描记生长曲线。结果以第2胎的产仔数、初生窝质量、离乳窝质量和离乳鼠质量最高,第5胎最低;描记的生长曲线与Taconic公司公布的相似。结论Long Evans大鼠以连续繁殖4胎为宜,第2胎最适合留种。     

6种常用SPF级大小鼠繁殖性能测定与分析

目的测定、分析本中心保存的6种常用SPF级大小鼠(SD大鼠、C57BL/6小鼠、BALB/c小鼠、NIH小鼠、KM小鼠、ICR小鼠)的主要繁殖性状。方法近交系小鼠采用全同胞同居交配,封闭群大鼠和小鼠采用循环交配。测定这6种品系大小鼠第1~4胎所生仔鼠的平均产仔数、平均带仔数和平均离乳数,并计算离乳率。同时测定初配日龄、初产日龄、初产间隔和各胎胎间隔。结果近交系小鼠的平均产仔数均为6~7只,前3胎繁殖数据基本保持稳定,第4胎各项数据相比第3胎明显下降(P0.05)。BALB/c小鼠的离乳率在98%~99%,C57BL/6小鼠为96%~98%。封闭群实验动物的平均产仔数可达12~14只,第2~3胎平均产仔数均较第1胎明显升高(P0.05),但第4胎又比第3胎显著下降(P0.05)。NIH、KM和ICR小鼠的离乳率都维持在98%~99%;SD大鼠的离乳率则略低(95%~97%)。小鼠的初配日龄在70 d~80 d之间,大鼠在109 d;封闭群小鼠的初产日龄和初产间隔低于近交系小鼠,大鼠的初产日龄和初产间隔分别为136.3 d和27.7 d;近交系小鼠的胎间隔在34 d~40 d之间,封闭群小鼠在25.5 d~28.7 d之间,大鼠在32.8 d~33.8 d之间。结论本中心保存的6种常用大小鼠繁殖性能较高,获得的繁殖性能参数为华南地区实验大小鼠商业化生产和啮齿类实验动物资源库的建立提供依据和基础数据。     

子午沙鼠的室内繁殖特征

目的了解和掌握子午沙鼠在实验室内繁殖特征。方法根据1996~2002年实验室饲养的子午沙鼠记录数据,推导雌雄体的性成熟期和雌体妊娠期,统计分析不同胎次和月份每窝产仔数、离乳数、成活率和性比结果。结果雌雄体的性成熟期分别为(109.3±21.0)d和(106.3±21.7)d,妊娠期为(21.3±1.4)d;1~7胎各胎次之间出生数和离乳数差异不显著(P0.05),而第4胎和第6胎的成活率低于平均胎仔数,但差异无显著性(P0.05);1~7胎之间雌雄百分比差异没有显著性(P0.05),各胎次平均雌雄比例为1.4∶1.0。在12个月份中,9月-11月停止繁殖,其它各月份之间每窝出生数之间差异不显著(P0.05),每窝离乳数和成活率在部分月份之间差异有显著性(P0.05)。结论与野生子午沙鼠繁殖数据比较,实验室驯化对子午沙鼠繁殖有影响,主要为季节繁殖提前到12月,繁殖窝数增加1~2窝。本结果为该鼠种实验动物化研究提供参考。     

SX1近交系小鼠生长繁育主要指标的测定

目的测定SX1近交系小鼠的生长繁育指标，为建立该品系小鼠的生物学特性资料提供实验数据。方法从采用全同胞兄妹交配方式繁殖获得的F20、F21代仔鼠中选择30对小鼠，连续繁殖5胎，分别测定窝产仔数、24h窝重、仔鼠均重、离乳仔数、离乳均重、胎间隔等几项指标；以第2胎小鼠作为生长发育观察对象，测定1-10周间每周的体重变化，计算每周体重增长情况。结果SX1小鼠1-5胎平均窝产仔数5.42±0.76只；平均窝重10.36±1.45g；仔鼠均重1.93±0.07g；离乳仔数5.21±0.95只；离乳窝重61.41±9.67g；离乳均重11.98±0.50g；离乳成活率96.09%；平均胎间隔33.63±0.68。1-10周平均每周增重雄鼠3.08±2.40g，雌鼠2.76±2.01g。3-5周时为生长发育旺盛期，平均每周增重雄鼠5.95±1.41g，雌鼠5.18±0.96g。结论SX1近交系小鼠具有稳定的繁殖性能，幼鼠离乳成活率高，各项主要指标基本符合近交系小鼠的特征。     

玉米秸作为大鼠垫料对其生长发育及繁殖性能的影响

目的　对比观察不同原料制成的垫料对SD大鼠繁殖性能及其仔鼠生长发育的影响 ,探讨以玉米秸为原料制作实验动物新型垫料的可行性。方法　测定使用玉米秸、卫生纸、刨花三种垫料时SD大鼠的繁殖性能指标及仔鼠体重变化 ,并进行比较分析。结果　出生仔数、初生窝重、初生重三个指标三组间比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;离乳率三组间差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,玉米秸组与卫生纸组差异有极显著性 (P <0 .0 1) ,玉米秸组最高 ,为99.79% ;三组之间胎次间隔差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,玉米秸组为 31.4 1d ;仔鼠生长发育指标 ,三组之间比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　玉米秸作为垫料时 ,SD大鼠能保持较高的繁殖性能 ,可以作为大鼠垫料使用。     

雌雄不同比例频密繁殖对KM小鼠繁殖性能的影响

KM小鼠按1♂:1♂和1♂:2♂方式频密繁殖4胎,观察小鼠繁殖性能的变化。试验结果显示:1♂:1♂组和1♂:2♂组无论是在胎间隔、产仔数、仔均重、离乳仔数、离乳仔数均重、离乳率,还是每只雌鼠月繁殖小鼠数,2组均无显著性差异;每只椎鼠及每只饲养盒月生产小鼠数,1♂:2♂组(16.83±2.94)远远超过1♂,1♂组(9.18±2.     

不同氨气浓度饲养环境对大小鼠繁育生长性能的影响研究

目的研究不同氨气浓度对大小鼠繁育性能的影响。方法将性成熟的KM小鼠与SD大鼠各30对,分别饲养在氨气平均浓度为3~10 ppm(低浓度)、10~15 ppm(中浓度)、17~25 ppm(高浓度)的独立通风笼盒(Individually Ventilated Cages,IVC)内按雌雄1∶1进行交配,观察大小鼠的受孕率、产仔量、初生重、离乳率、胎次间隔与仔鼠生长情况。结果各氨气浓度组的大小鼠都能成功受孕。与中低浓度氨气组相比,高氨气浓度组KM小鼠的平均产仔量(F=3.39,P0.05)、初生重(F=5.40,P0.05)、离乳率(F=24.47,P0.05)、胎次间隔(F=19.32,P0.05)、体重增长(F=5.17,P0.05)、料重比(F=1.99,P0.05)差异均有统计学意义;高氨气浓度组SD大鼠的平均产仔量(F=5.32,P0.05)、初生重(F=6.86,P0.05)、离乳率(F=24.47,P0.05)、胎次间隔(F=19.32,P0.05)、体重增长(F=28.36,P0.05)、料重比(F=29.28,P0.05)差异均有统计学意义。结论氨气的浓度影响大小鼠的产仔量、初生重、离乳率、胎次间隔及仔鼠的生长。     

裸鼹鼠的人工饲养繁育初步研究

目的 探索裸鼹鼠的人工饲养和繁育方法.方法 在科学的饲养管理和适宜的饲养环境下,采用全同胞兄妹交配的方法,观察统计裸鼹鼠的妊娠率、胎间隔、窝产仔数、离乳数和成活率.结果 通过7对裸鼹鼠的繁育观察,表明裸鼹鼠能适应人工环境.雌雄鼠初次交配年龄为8～12月龄,第1胎妊娠率为71.43％;5只母鼠第1胎平均产仔数9.20±3.90只/窝,离乳数7.60±5.03只/窝,成活率为75.10％±42.49％;第2胎胎间隔89.00±19.53 d、产仔数9.60±5.68只/窝、离乳数6.20±4.09只/窝,成活率为74.33％±34.19％;第3胎胎间隔99.60±17.17 d、产仔数12.40±4.77只/窝、离乳数10.00±3.08只/窝,成活率为82.91％±16.70％.结论 裸鼹鼠在人工环境适应后,繁殖性能大大提高,可以培育出实验动物化的裸鼹鼠.     

两种群东方田鼠生长发育及繁殖性能观测

目的测定和比较东方田鼠洞庭湖种群(DTH)(长江亚种)和青铜峡种群(QTX)(指名亚种)的繁殖及生长特性。方法东方田鼠雌雄1:1长期同居法饲养繁殖,观察两种群东方田鼠的窝产仔数、胎间隔、初生体质量、离乳体质量等繁殖指标。两种群田鼠雌雄各选30只,测定不同时间点的体质量,并用VonBertalanffy模型方程拟合其生长曲线。结果 DTH窝产仔数(4.70±1.15)只,胎间隔(30.78±10.21)d,出生体质量(4.09±0.13)g,离乳体质量(27.31±1.10)g;QTX窝产仔数(3.58±1.00)只,胎间隔(35.60±12.48)d,初生体质量(4.37±0.09)g,离乳体质量(28.22±0.46)g。从生长曲线可见,两种群东方田鼠的体质量性二型分化分别出现在14 d和28 d,雄性田鼠的体质量显著高于雌鼠。拟合结果显示,两种群田鼠雌性体质量生长曲线体质量拐点出现时间比雄性鼠早。结论 DTH田鼠繁殖能力较QTX高,两个种群田鼠雌雄鼠的体质量均有明显的性二型分化特征,雌体较雄体早熟。     

人bcl-xl转基因小鼠外源基因的复制及传代的稳定性观察

显微注射法建立转bcl-xl基因小鼠，将PCR及Southern-blot检测阳性的小鼠与正常鼠酱并传代，然后检测子代中外源基因的遗传 情况。结果发现：10号小鼠传代过程中PCR阳性率保持稳定，符合孟德尔遗传规律，外源基因能够稳定遗传 。6号小鼠PCR阳性率呈轻微下降趋势，但能够保持相对稳定遗传 。13号和5号小鼠PCR阳性率均呈现明显的下降趋势。该二小鼠存在外源基因遗传丢失现象。结果提示：获得了能够稳定遗传 的转基因鼠系。     

TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型的建立

目的 建立TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型.方法 构建pEGFP-TNNT3(R69H)转基因构件,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒pEGFP-TNNT3(R69H)注射入BDF1小鼠受精卵中,胚胎移植至同期发情的假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠.用PCR和Southern blot方法检测子代鼠尾基因组DNA,通过RT-PCR及Western blot的方法检测TNNT3基因表达.结果 8只假孕小鼠共移植注射后的胚胎82枚,出生40只子代鼠,经PCR和Southern方法检测得到5只转基因阳性小鼠.对其子代小鼠进行RT-PCR、Western blot检测结果显示,TNNT3在转基因小鼠心脏和骨骼肌中表达量明显增多.结论 通过显微注射法使外源基因pEGFP-TNNT3(R69H)在小鼠基因组中整合,成功建立了TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型.     

fat-1转基因小鼠的构建与鉴定

目的构建和鉴定携带有外源fat-1基因的转基因小鼠。方法将fat-1基因的cDNA与动物表达载体pEF—neo连接,构建pEF-fat-1重组质粒,酶切、测序鉴定正确后,以显微注射法把线性化重组质粒注射到小鼠受精卵的雄原核中,并将受精卵移植到受体鼠的输卵管中产出转基因小鼠,通过PCR、Southern blot杂交等方法确立阳性整合有目的基因的G0代小鼠。结果成功构建了pEF-fat-1重组质粒,将其显微注射到小鼠受精卵中,得到G0代小鼠,PCR、Southern blot杂交确立了4只整合有fat-1基因的首建鼠。结论fat-1基因可整合到小鼠体内,得到的转基因小鼠为研究fat-1基因的生物学功能提供了动物模型。     

纯合子NEOr转基因小鼠品系的建立及鉴定

目的　建立清洁级Neor 转基因小鼠纯合子品系。方法　通过胚胎移植生物净化方法获得 1 0只清洁级NeorF1 小鼠 ,按孟德尔遗传法则交配 ,用PCR、Southernblot杂交和交配实验检测相结合的方法筛选纯合子。结果　选育出 4只纯合子 ,并建系。该纯合转基因小鼠与野生型小鼠交配制备的胎儿成纤维细胞具有G4 1 8抗性 ,可作为ES细胞基因打靶培养中的饲养层细胞。结论　通过微生物学和遗传学上对Neor 转基因小鼠进行质量控制 ,使Neor 转基因小鼠达到了清洁级 ,并建立纯合子品系。     

实时荧光定量PCR法检测转基因小鼠拷贝数

目的利用实时荧光定量PCR法鉴定转基因小鼠外源基因插入拷贝数。方法以TG-CARK转基因首见鼠为研究对象,选取小鼠的高度保守基因Fabpi为内参,利用绝对定量的实时荧光PCR法鉴定转基因小鼠拷贝数,并与传统的Southern blot方法的定量结果进行比较。结果实时定量PCR鉴定的转基因拷贝数与Southernblot法完全一致,三只TG-CARK首见小鼠的拷贝数分别为1,7,45。结论实时定量PCR技术具有高准确性、高稳定性、高通量和低成本的优点,是比传统杂交技术更好的鉴定小鼠转基因拷贝数的方法。     

Transgenic mice with overexpression of human scavenger receptor A on endothelial cells

Objectives To establish a new transgenic mouse model for determining the function and role of human scavenger receptor A (SR- A) in atherosclerosis in vivo. Methods Human scavenger receptor minigene- driven mouse tie- 1 promoter was constructed and confirmed by endonuclease digestion and sequence analysis. Transgenic mice were generated via the microinjection method. PCR and Southern blot were used t o screen the positive transgenic mice. RT- PCR and immunohistochemical analysis were used to detect the level and location of human SR- AⅠ expression in transgenic mice. The activity of human SR- AⅠ was determined by morphologi c observation of aortic endothelial cells of transgenic mice under transmission electron microscopy. Results The electrophoresis assay showed the expected 4 fragments of 0. 9 kb, 1. 1 kb, 1. 2 kb and 4. 2 kb in the SmaⅠ digest and 2 fragments of 0. 8 kb and 6 . 7 kb in BglⅡ digest of plasmids pTie- 1/hSR- A. The fragment sequence of tie - 1 p romoter and human SR- A cDNA in plasmids pTie- 1/hSR- A was correct and no A TG b efore the translation initiation sites of human SR- A was found by sequence ana lysis. 561 injected and surviving embryos with the purified human SR- A minigen e were implanted into the oviducts of 19 ICR pseudopregnant mice. Among the 54 surviving pups from 13 foster mothers, 7 were identified by PCR and Sou thern blot analysis. The results of RT- PCR and immunohistochemical analysis sh owed human SR- A was specifically expressed on vascular endothelial cells of the aorta and renal artery, as well as hepatic sinusoidal endothelial cells in tran sgenic mice. Transmmion electron microscope (TEM) of aorta of transgenic mice s howed that a large number of vesicles, multivesicle bodies and swollen mitochond ria filled the plasma of endothelial cells. Conclusions A transgenic mouse model with overexpression of human SR- A in endothelial cells was successfully established. The transgene was integrated and transmitted int o the chromosome of transgenic mice. Tie- 1 promoter controlled the transgene t o express in endothelial cells in mice. Pinocytic activity of aortic endothelia l cells in transgenic mice was higher than that of C57BL/6J mice. Our studies w ill provide a new transgenic model for investigation of atherosclerosis and func tions of human SR- A.     

5-LO真核表达载体的构建及其在RAW264.7细胞中的表达的初步研究

目的构建5-LO真核表达载体并初步研究其在RAW264．7细胞中的表达,为建立5-LO高表达转基因小鼠模型提供表达载体。方法从人全血标本中提取细胞总RNA,以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法扩增5-LO基因,分别构建5-LO目的基因的克隆载体与表达载体,提取质粒,进行酶切、PCR和DNA测序鉴定,将重组融合表达载体pEGFP-5-LO稳定转染RAW264．7细胞,RT-PCR、western blot方法检测pEGFP-5-LO的表达情况。结果构建了重组克隆载体pUCm-5-LO和真核表达载体pEGFP-5-LO,经酶切、PCR及测序鉴定正确;转染细胞后,在荧光显微镜下观察到pEGFP-5-LO融合蛋白的表达,RT—PCR和Westemblot结果表明转染pEGFP．5-LO的RAW264．7细胞中有5-LO的表达。结论成功克隆了5-LO基因,构建的表达载体pEGFP-5-LO在RAW264．7细胞中表达5-LO蛋白,为进一步5-LO高表达转基因鼠模型的建立和临床应用奠定了基础。     

异种肝移植模型-转人CD59蛋白基因小鼠的建立

目的　通过显微注射法产生用于异种移植研究的表达人CD5 9蛋白的转基因小鼠模型。方法　实验中利用OMT作为目的基因hCD5 9cDNA的启动子 ,CMV作为报告基因GFP的启动子 ,构建重组质粒 pGOC。通过显微注射法 ,把CMV GFP OMT CD5 9基因片断注射入昆明白小鼠受精卵。结果　产生出 86只F0 代转基因小鼠。鼠尾基因组DNA经PCR法检测 ,12只阳性 ,进一步用Southernblot法检测 1只阳性。结论　通过显微注射法 ,外源基因hCD5 9cDNA在小鼠基因组中得到整合 ,产生出了阳性转人CD5 9蛋白基因小鼠 ,可用于进一步异种移植研究     

抗菌肽转基因小鼠模型的建立

目的:制备抗菌肽转基因小鼠模型.方法:显微注射pcDNA3.1-PCMG到FVB小鼠受精卵雄原核中,注射存活胚胎移植到假孕母鼠输卵管内发育产生子代小鼠.结果:在生出的119只小鼠中经PCR和Southern blot检测到7只阳性.结论:通过显微注射法使外源基因pcDNA3.1-PCMG在FVB小鼠基因组中得到整合,为抗菌肽抗菌谱的研究,抗病毒、抗肿瘤机制的研究提供有价值的抗病动物模型.     

严密型四环素调控系统调控的表达HCV-C基因双转基因小鼠模型的建立

目的 制备严密型四环素调控系统调控下表达丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-C)基因的双转基因小鼠,为进一步阐明核心蛋白Core与HCV感染所致的疾病以及与肝细胞癌发生的关系奠定基础.方法 严密型四环素调控部分(ApoE-rtTA-tTS)转基因阳性鼠和反应部分(TRE-HCV-C)转基因阳性鼠交配产生仔鼠,经PCR和Southcm blot分析筛选出阳性鼠.免疫组织化学检测HCV-C蛋白双转基因小鼠肝组织内表达情况及其肝脏的病理变化.结果 得到了2只携带有两种基因(tTS和HCV-C)的双转基因小鼠,成功制备了严密型四环素调控系统的HCV-C双转基因小鼠.结论 结果表明,所建立的严密型四环素调控系统在动物模型中是可行的和有效的,它消除了普通四环素调控系统存在的本底泄漏表达的缺点,是HCV-C基因功能研究及与肝细胞癌的关系的机制研究的一个有用工具.