微囊化猪胰岛肝动脉内移植治疗犬Ⅰ型糖尿病

目的　观察放射介入方法行微囊化猪胰岛细胞肝动脉肝内移植的可行性及有效性。方法　采用放射介入技术经股动脉穿刺将微囊猪胰岛经肝动脉植入糖尿病模型犬肝内 ,术后监测空腹血糖、C肽、胰岛素用量变化 ,行肝功能、肝脏组织病理学检查。结果　移植后糖尿病犬血清C肽水平升高 2～ 6倍 ,胰岛素用量逐步减少 ,3只犬停用胰岛素并维持空腹血糖正常 ;移植后肝转氨酶一过性升高 ,2周后降至正常。结论　经肝动脉肝内微囊猪胰岛素异种移植治疗移植Ⅰ型糖尿病犬安全、可行。     

胃黏膜下层作为自体胰岛移植部位的研究

目的 探讨胃黏膜下层作为自体胰岛移植部位的可行性及有效性.方法 全胰切除建立Beagle犬糖尿病模型(n=6);改良Ricordi法,分离切取自体胰腺的胰岛细胞.按4 500～7 000 IEQ/kg剂量,将自体胰岛细胞移植入犬胃黏膜下层(n=6);术后6、12、24、48 h检测血糖和C肽水平.48 h后,切取胰岛移植部位的胃组织,苏木素-伊红(HE)染色及Insulin染色观察胃黏膜下层胰岛移植物的存活情况.结果 全胰切除术后6h,Beagle犬血糖为(11.95±1.06) mmol/L;术后2和5d,静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)2 h后血糖分别为(25.73±6.60) mmol/L和(23.13±9.35) mmol/L,符合糖尿病诊断标准.自体胰岛移植术后6h,犬血糖降至(5.30±2.52) mmol/L,且48 h内血糖均维持在11.1 mmol/L以下.胰岛移植术后6、12、24、48 h,犬C肽水平与术前比较明显升高.HE和Insulin染色均在胃黏膜下层检测到了存活良好的自体胰岛.结论 胃黏膜下层可作为自体胰岛移植部位,为该部位在未来临床胰岛移植的应用奠定了基础.     

磁共振成像监测大鼠肝脏内经超顺磁铁氧化物标记的胰岛移植物

目的 探讨磁共振成像(MRI)监测胰岛移植物的可行性.方法 在体外利用超顺磁铁氧化物(SPIO)标记大鼠胰岛,然后移植至用链佐星诱导的糖尿病大鼠肝脏内,同系移植标记组供、受者均为Wistar大鼠,同种移植标记组供者为Lewis大鼠,受者为Wistar大鼠.并设同系移植对照组(供、受者均为Wistar大鼠)和同种移植对照组(供者为Lewis大鼠,受者为Wistar大鼠),胰岛移植物未经SPIO标记.术后定期利用MRI监测肝内胰岛移植物,监测受者的血糖,并抽取动物,对其肝脏进行病理检查.结果 只有SPIO标记的胰岛移植物能被MRI检测到.经MRI检测,同系移植标记组术后第1、2、3周胰岛移植物的相对数量分别为(89.6±2.2)%、(87.5±14.4)%和(74.5±19.5)%,同种移植标记组术后第1、2、3周的相对数量分别为(43.2±17.2)%,(36.5±13.0)%和(26.5±17.4)%,组间相同时间点两两比较,差异有统计学意义(P<0.05).同系移植标记组血糖始终维持在正常水平,肝脏中能检测到胰岛素免疫组化和普鲁士蓝染色双阳性细胞;而同种移植标记组移植1周后的血糖水平超过16.8 mmol/L,肝脏中无法找到形态完整的胰岛.结论 MRI监测结果与血糖监测和病理检查结果一致,但它可直观、无创、连续地监测胰岛移植物在体内分布和存活情况.     

肝星状细胞对同种异体胰岛移植物的保护作用

目的 研究小鼠肝星状细胞对同种异体胰岛移植物的保护作用.方法 将糖尿病小鼠随机分为三组,分别为糖尿病组、单纯胰岛移植组及与肝星状细胞共同移植组.单纯移植组于肾被膜下移植入同种异体胰岛300个;共同移植组移植入肝星状细胞(3×105个)与同种异体胰岛(300个)混合物.分别于移植术后监测受体小鼠血糖值及正常血糖维持时间;血糖正常一周后移植组及糖尿病组小鼠分别采血检测血清中TGF-β,TNF-α,IL-1β,IFN-γ的含量,同时取出移植物进行免疫组织化学检测.结果 术后共同移植组受体正常血糖维持时间为(23.75±8.96)d,单纯胰岛移植组受体正常血糖维持时间为(11.9±6.92)d,差异有统计学意义(P<0.05);三组受体血清中TNF-α、IL-1β、IFN-γ含量差异无统计学意义(P>0.05),共同移植组受体血清中TGF-β含量为(2292.31±5.87)pg/ml,单纯移植组为(1246.55±38.91)pg/ml,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);病理学结果显示共同移植组胰岛素表达量大,并且在移植物周围有生物包膜形成.结论 在同种异体移植模型中,肝星状细胞可能通过高分泌TGF-β、局部形成包囊等方式保护胰岛移植物并延长其存活时间.     

同种异体肝细胞移植促进大鼠肝纤维化逆转

目的 探讨肝细胞移植对大鼠肝纤维化的改善作用及其机制.方法 经腹腔注射四氯化碳制备的肝纤维化Wistar大鼠接受正常Wistar大鼠肝细胞移植(实验组),另以不接受肝细胞移植的肝纤维化大鼠(肝纤维化组)和接受肝细胞移植的正常Wistar大鼠(移植对照组)为对照.肝细胞移植于注射四氯化碳后21 d进行.分别于移植前及移植后第1、2、7和14天采集抗凝血(肝纤维化组同步采集),测定血浆总转化生长因子β1(TGF-β1)、活性TGF-β1、纤溶酶及α2-巨球蛋白(α2M)水平,并取其肝脏,进行肝脏的纤维成像和定量分析,检测肝脏星形细胞活性.结果 肝细胞移植后的第14天,实验组肝脏内成胶原纤维面积百分比为(3.69±0.44)%,低于肝纤维化组的(8.25±0.69)%(P＜0.01);实验组肝内α-SMA阳性信号面积百分比为(0.43±0.03)%,明显低于肝纤维化组同期的(2.79±0.40)%(P＜0.01).移植前实验组大鼠血浆中总TGF-β1和活性TGF-β1水平分别为(4543.2±307.2)μg/ml和(2380.7±150.8)μg/ml,移植后1 d,二者均显著下降,分别为(2109.9±425.2)μg/ml(P＜0.01)和(1758.9±429.2)μg/ml(P＜0.05).实验组肝细胞移植前血浆纤溶酶水平为(5.16±0.42)μg/ml,移植后下降至(2.96±0.11)μg/ml(P＜0.01).实验组肝细胞移植前血浆α2M水平为(152.4±27.6)mg/ml,移植后升高至(343.0±48.8)mg/ml,为移植前的2倍,而移植对照组的α2M水平移植后升高30余倍.结论 肝细胞移植能有效改善大鼠肝纤维化,其机制可能与肝内活性星形细胞减少及TGF-β1水平降低有关.     

肝胰岛细胞联合移植的临床应用(附1例报告)

目的 评估肝胰岛细胞联合移植治疗终末期肝病和糖尿病的可行性和疗效. 方法 对1例原有2型糖尿病史的原发性肝癌、肝炎肝硬化患者,施行肝移植的同时进行胰岛细胞经门静脉肝内移植,观察移植肝功能的变化,移植前后C肽、糖化血红蛋白的变化. 结果 患者胰岛素的注射量术前40~60 U/d,术后第45天降至20-30U/d,术后7月完全脱离胰岛素,血糖保持在正常范围. 结论 对肝脏功能衰竭的糖尿病患者施行肝胰岛细胞联合移植是可行而有效的.     

犬自体骨髓干细胞在缺血肢体中新生血管形成中的作用

目的:探讨犬自体骨髓干细胞在缺血组织的新生血管形成中的作用.方法:抽取犬骨髓,经免疫磁珠系统分离出CD 34细胞,体外扩增并向血管内皮细胞诱导分化;建立犬双下肢缺血动物模型,将诱导分化细胞移植入一侧缺血肢体中作为实验组,另一侧缺血肢体植入等体积的生理盐水作为自体对照组.移植后6周,检测缺血肢体中新生血管的形成.结果:细胞移植后6周,动脉造影显示实验组缺血肢体侧枝循环增加,明显多于对照组.微血管密度检测实验组为(14±2.3)个/高倍镜视野,明显高于对照组(6±2.1)个/高倍镜视野(P<0.05).激光共聚焦显微镜证实缺血肢体中移植的自体骨髓干细胞参与了新生血管形成.结论:自体骨髓干细胞移植可以促进缺血肢体组织中的新生血管形成.     

子鼠胰腺干细胞与胰岛联合移植治疗糖尿病

目的 探讨利用子鼠胰腺干细胞与胰岛联合移植保护移植胰岛,提高糖尿病移植疗效的可行性.方法 分离纯化孕16 d SD大鼠子鼠:胰腺干细胞培养传代,行Nestin免疫组织化学及流式细胞术鉴定;分离纯化SD大鼠胰岛,分联合移植组(10只)、单独移植组(10只)及正常对照组(10只),分别将2×105个子鼠:胰腺干细胞与800个胰岛和单纯800个胰岛移植至糖尿病大鼠模型左肾包膜下,定期监测各组大鼠血糖情况及留取血浆ELISA测胰岛素含量,观察胰岛存活时间.结果 子鼠:胰腺干细胞培养传代3代后细胞涂片免疫组织化学示存在Nestin阳性细胞,流式细胞术测定nestin阳性细胞含量占74.1%.联合移植组大鼠均于术后第3天起血糖开始下降,血浆胰岛素水平逐渐升高,术后5 d内血糖可降至正常[(5.4±0.6)mmol/L],血浆胰岛素达到正常水平[(509.8±16.6)ng/L],胰岛存活时间(18.2±2.4)d;单独移植组大鼠血糖可于术后1周内降至正常[(6.1±0.9)mmol/L],胰岛存活时间(14.4±2.1)d;两组胰岛存活时间差别有统计学意义(P《0.05).结论 子鼠胰腺干细胞与胰岛联合移植可保护胰岛功能,延长胰岛体内存活时间,提高移植疗效.     

异体大鼠骨髓单个核细胞胰岛细胞移植治疗糖尿病

目的 观察异体骨髓单个核细胞和胰岛细胞通过肝脏和静脉途径移植后对糖尿病大鼠的治疗作用.方法 密度梯度离心法分离胰岛细胞,淋巴细胞分离液分离骨髓单个核细胞,28只糖尿病大鼠模型随机分为A、B、C、D组,A组在肝脏被膜下多点注射1000个胰岛细胞,B组在体外将1000个胰岛细胞和1×107个骨髓单个核细胞混合后在肝脏被膜下多点注射,C组通过尾静脉注射1000个胰岛细胞,D组在体外将1000个胰岛细胞和1×107个骨髓单个核细胞混合后通过尾静脉注射,移植后于不同时间点尾静脉测定随机血糖,比较不同细胞组合和移植途径之间对糖尿病的治疗作用.结果 A、B组血糖于术后3 d内开始下降,A组血糖可降至正常水平(7.98±2.28)mmol/L,血糖维持正常水平(3.71±0.95)d,B组降至(7.72±1. 75)mmol/L可维持(4.86±1.06)d,静脉移植组血糖于术后4 d内降至正常(7.35±1.40)mmol/L,可维持(7.85±1.46)d,D组静脉注射胰岛于4 d起效(7.00±0.83)mmol/L,血糖可降至正常水平可维持(14.10±1.21)d,各组间血糖随时间变化的趋势及维持正常水平的时间具有统计学意义(P＜0.05).结论 骨髓单个核细胞和胰岛混合细胞通过尾静脉移植对大鼠血糖维持正常时间最长,血糖控制水平最理想.     

肝内移植微囊对肝纤维化的影响:经门静脉及肝动脉途径对比

目的通过比较经门静脉及肝动脉两种途径肝内移植海藻酸钠微囊对肝纤维化影响的差别,探求安全、简便的肝内胰岛移植途径。方法实验犬30只随机分为V、A两组,每组15只,分别作为经门静脉移植组及经肝动脉移植组,V、A两组分别随机分为三个小组,每小组5只,分别移植海藻酸钠微囊8000个/kg、16000个/kg、32000个/kg,观察移植前、后血清肝纤维化标志物透明质酸(HA)的变化,并对肝脏进行病理组织学检查。结果血清纤维化指标:V组:血清HA值在移植后逐渐升高,移植前、后有明显差别(P<0.01);且各移植量组间存在显著性差异(P<0.01)。A组:血清HA值在移植后轻度升高,但移植前后无显著差异(P>0.05),且各移植量组间的差异无统计学意义(P>0.05)。相同移植量Vn及An组间血清HA值的比较差异有显著性(P<0.01)。肝脏病理组织学检查:移植术后12周时,V3组肝脏组织学检查发现汇管区少量胶原纤维沉积,肝细胞浊肿,间质见炎性细胞浸润;而A组肝脏组织学检查未见明显异常。结论经肝动脉移植微囊对肝脏损伤小,有望成为一种相对简单、安全的肝内胰岛移植途径。     

Effects of intrahepatic canine islet autotransplantation on the portal vein pressure and liver function

Currently, the most common method used for human islet transplantation is intrahepatic implantation via the portal vein, which may affect portal vein pressure and liver function. The aim of this study was to investigate the effects of intrahepatic canine islet autotransplantation on portal vein pressure and liver function. After total pancreatectomy was performed in 30 mongrel dogs, islets were isolated and transplanted back into the portal vein of the same dog. In our series, 12 dogs achieved normoglycemia (fasting glucose <200 mg/dL) without exogenous insulin after transplantation. The portal vein pressure increased from 4.6 +/- 1.5 to 7.7 +/- 2.9 cm H(2)O after islet infusion (P < .05). Alanine transferase amino transferase (ALT) levels gradually increased after pancreatectomy with the peak at 4 weeks after islet infusion. But the changes of portal vein pressure and ALT were not significantly different between successful and failed islet transplantation. In summary, elevation of portal vein pressure and liver enzymes were noted after intrahepatic canine islet autotransplantation. However, they did not influence the transplant outcome.     

Reversal of Diabetes in Mice by Intrahepatic Injection of Bone-derived GFP-murine Mesenchymal Stem Cells Infected with the Recombinant Retrovirus-carrying Human Insulin Gene

Background The objective of this study was to assess the effect of intrahepatic injection of bone-derived green fluorescent protein (GFP)-transgenic murine mesenchymal stem cells (GFP-mMSCs) containing the human insulin(ins) gene in streptozotocin-induced diabetic mice. Methods GFP-mMSCs were isolated from the bone marrow of GFP transgenic mice, expanded, and transfected with a recombinant retrovirus MSCV carrying the human insulin gene. C57BL/6J mice were made diabetic by an intraperitoneal administration of 160 mg/kg streptozotocin (STZ), followed by intrahepatic injection of transfected GFP-mMSCs. The variations in body weight and the blood glucose and serum insulin levels were determined after cell transplantation. GFP-mMSCs survival and human insulin expression in liver tissues were examined by fluorescent microscopy and immunohistochemistry. Results The body weight in diabetic mice that received GFP-mMSCs harboring the human insulin gene was increased by 6% within 6 weeks after treatment, and the average blood glucose levels in these animals were 10.40 ± 2.80 mmol/l (day 7) and 6.50 ± 0.89 mmol/l (day 42), respectively, while the average values of blood glucose in diabetic animals without treatment were 26.80 ± 2.49 mmol/l (day 7) and 25.40 ± 4.10 mmol/l (day 42), showing a significant difference (p < 0.05). Moreover, secretion of human insulin of GFP-mMSCs in serum and animal liver was detected by radioimmunoassay (RIA) and immunohistochemistry (IHC). Conclusions Experimental diabetes could be relieved effectively for up to 6 weeks by intrahepatic transplantation of murine mesenchymal stem cells expressing human insulin. This study implies a novel approach of gene therapy for type I diabetes.     

胃旁路术对非肥胖型2型糖尿病大鼠糖代谢的影响

目的:观察胃旁路术对非肥胖型2型糖尿病大鼠(GK大鼠)糖代谢的影响.方法:GK大鼠20只,Wistar大鼠10只,随机分为GK手术组、GK假手术组和Wistar假手术组,每组10只;手术组行胃旁路术;测定术前1周及术后第1、2、4、8、12周各组体质量、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平和血清胰岛素(INS)含量.结果:术后12周,GK手术组大鼠体质量由术前的(255.10±21.09)g上升到(364.55±25.73)g,FPG和HbA1c分别由术前的(11.36±1.14)mmol/L和(8.91±0.36)%下降到(8.36±0.62)mmol/L和(6.35±0.46)%,而血清INS由术前(32.76±2.37)μIU/mL上升到(55.14±5.45)μIU/mL.结论:胃旁路术可以明显降低GK大鼠的空腹血糖,改善糖代谢障碍.     

胃旁路术对糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响及其机制研究

目的 研究胃旁路手术对非肥胖2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响及其机制.方法 将72只8周龄的GK大鼠随机分为手术组(O组,18只)、假手术组(S组,18只)、饮食控制组(F组,18只)和对照组(C组,18只),术前和术后1、2、4、8周检测比较空腹、餐后血糖、胰岛素和胰高血糖素样肽-1(GLP-1)水平.术后2、4、8周取血测餐后血糖后,分批随机处死大鼠,每批每组处死6只,大鼠处死后分离胰腺并取出待用.原位末端标记法检测胰岛β细胞凋亡;免疫组化方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达.结果 O组术后第4周空腹血糖由术前的(16.2 ±0.8)mmol/L下降到(9.2±0.6)mmol/L,术后第8周血糖为(9.7±0.7)mmoL/L;术后第4周餐后血糖由术前的(31.1±1.1)mmoi/L降至(13.1±0.7)mmol/L,术后第8周为(12.3 ±0.7)mmol/L;术后第4周空腹血清胰岛素水平由术前的(28.0±1.2)mU/L升至(62.8±1.9)mU/L,术后第8周为(61.7±1.4)mU/L,术后第4、8周餐后血清胰岛素水平分别为(77.4±1.1)mU/L、(77.1±1.0)mU/L;术后第2周空腹GLP-1由术前的(10.7±1.0)pmol/L升至(13.5±0.8)pmol/L,至术后第4、8周分别为(26.1±0.9)pmol/L、(25.3±1.2)pmol/L;O组各测量值术后各时相点与术前比较差异均有统计学意义(P＜0.05),与其他组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05).O组大鼠胰岛细胞凋亡率术后4周下降至(5.9 ±0.7)%,术后8周凋亡率为(6.3±1.1)%,差异有统计学意义(P＜0.05).O组Bcl-2蛋白表达术后2、4、8周表达量分别为31.3±1.5、35.7±1.0和35.8 ±0.8,明显高于同时间点的其他3组,差异有统计学意义(P＜0.05);Bax蛋白术后2、4、8周表达量分别为13.3±0.9、10.8 ±0.9和10.9±1.1,明显低于相同时间点的其他3组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 胃旁路手术可显著降低糖尿病大鼠血糖,促进GLP-1分泌,从而调节Bcl-2通路,显著抑制胰岛β细胞凋亡,保护胰岛B细胞.     

骨髓间充质干细胞移植对糖尿病大鼠的治疗作用

目的 观察同种大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对糖尿病的治疗作用及其可能机制.方法 分离、培养和扩增供者(3～4周龄的SD大鼠)的BMSC,将成年SD大鼠分为正常对照组(12只)和糖尿病组(44只,制作糖尿病模型);糖尿病组大鼠又分为不移植对照组(12只)和移植组(32只).将分离纯化的同种大鼠BMSC经移植组大鼠尾静脉植入体内,每只大鼠移植BMSC约3×10~6个.移植后动态观察各组的血糖和胰岛素水平;移植后28 d制备胰腺组织切片,通过激光共聚焦显微镜观察移植的BMSC对内源性胰岛细胞再生的影响.结果 正常对照组血糖在4.0 mmol/L左右波动;不移植对照组血糖显著升高,维持在23～27 mmol/L;移植组血糖明显降低,术后72 h平均血糖值为(11.7±2.4)mmol/L,并维持稳定至35 d[血糖值(15.4±6.3)mmol/L].移植组血清胰岛素水平较不移植对照组明显增高,术后12 d时分别为(0.90±0.14)μg/ml和(0.35±0.06)μg/ml(P<0.01),但仍明显低于正常对照组的(1.32±0.14)μg/ml,差异有统计学意义(P<0.05).正常对照组大鼠胰腺组织切片内胰岛素阳性细胞聚集,但增殖的细胞极少,约为(11±6)个/mm~2,内源性增生的胰岛素阳性细胞约(7±4)个/mm~2.不移植对照组大鼠胰腺组织中胰岛素阳性细胞较正常对照组少,但存在明显的增生.增殖细胞约(25±4)个/mm~2.其中内源性增生的胰岛素阳性细胞约(13±5)个/mm~2,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).移植组胰岛体积较不移植对照组增大,增殖细胞和内源性增生的胰岛素阳性细胞均明显增多,分别为(45±9)个/mm~2和(23±11)个/mm~2,与正常对照组、不移植对照组之间比较,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 糖尿病大鼠经同种BMSC移植后,可能通过促进内源性胰岛细胞新生发挥治疗作用,这可能为糖尿病的治疗提供一条新的途径.     

糖尿病足溃疡患者创面局部注射胰岛素对全身血糖及创面的影响

目的 观察糖尿病足溃疡患者创面局部注射胰岛素对全身血糖和创面肉芽组织形成的影响. 方法 选择2009年6月-2010年6月在笔者单位住院治疗的糖尿病足患者32例,按随机数字表法分为胰岛素组和对照组,每组16例.所有患者预先清创.(1)胰岛素组:将胰岛素计算剂量的1/2用生理盐水稀释成1 mL后,浸润注射于溃疡创面基底部,另1/2计算量按常规行腹部皮下注射,均为2次/d.(2)对照组:将胰岛素计算剂量的全量常规注射于腹部皮下,溃疡创面基底部浸润注射1 mL生理盐水,均为2次/d.2组患者均连续注射7d.于患者每次注射前及注射后0.5、1.0、2.0、4.0 h,分别检测其空腹血糖值.于首次注射前及注射3、5、7 d,评估创面肉芽组织生长程度;取创面组织标本观察CD34表达情况,据此计算创面微血管密度(MVD).对实验数据行t检验.结果 2组患者观察期内空腹血糖值维持在6.6～12.8(10.0±2.2)mmol/L,各时相点组间比较,差异均无统计学意义(t值为0.000～2.209,P值均大于0.05).注射第5天起,胰岛素组患者局部创面肉芽组织明显增多;第7天达生长高峰[(59.06±1.58％],与对照组[(23.61±1.57)％]比较,差异有统计学意义(t=17.420,P=0.0.000).CD34表达情况显示,胰岛素组注射3 d起有新生血管形成,但此时MVD与对照组接近(t=0.0247,P＞0.05);注射5、7d,胰岛素组创面组织MVD每200倍视野中分别为(8.34±0.48)、(11.22±0.97)个,明显多于对照组的(4.42±0.14)、(5.44±1.13)个,t值分别为16.568、27.664,P值均小于0.01. 结论 糖尿病足溃疡患者创面局部注射胰岛素对全身血糖有较明显影响,能加速肉芽组织生长,促进创面愈合.     

Beagle犬腹腔镜活体供肾-移植模型的建立

目的 探讨Beagle犬腹腔镜活体供肾-移植模型建立的安全性和可行性。方法 8条beagle犬随机分为两组,实验组行腹腔镜左肾供肾切取术,对照组行开放左肾供肾切取术,两组分别行组内同种异体肾移植术并置于左侧髂窝,同时切除白体右肾。统计两组取肾手术时间、术中失血量、热缺血时间、切口长度,肾移植手术时间、术中失血量、供肾动静脉吻合时间等手术指标及术后实验犬肌酐、尿素氮变化情况。结果 实验组腹腔镜供肾切取术均成功完成,无一例中转开腹,其中供肾切取手术时间(61.5±11.0)min,术中失血量(13.9±6.8) ml,供肾热缺血时间(81.4±9.3)s;对照组开放供肾切取术,无一例失败,其中供肾切取手术时间(66.1 ±13.5) min,术中失血量(32.7±4.8) ml,供肾热缺血时间(28.5±5.6)s;8例次同种异体肾移植术,全部成功,受体移植手术时间(87.3±13.9) min,术中失血量(13.5±5.2) ml,动脉吻合时间(19.8±6.7) min,静脉吻合时间(22.8±3.5) min,术后1个月观察期间内,无漏尿、出血、感染等并发症发生,术后第3天实验犬肌酐、尿素氮指标恢复正常。结论 Beagle犬腹腔镜活体供肾-移植模型的建立操作相对简便、容易掌握,成活率高,安全、可靠。     

三种不同部位移植胰岛细胞治疗糖尿病

目的 对比通过肝脏、静脉、胰腺三种途径移植胰岛细胞对糖尿病大鼠的治疗作用.方法 24只糖尿病大鼠模型随机分为A、B、C组,A组在肝脏被膜下多点移植1000个胰岛细胞,B组通过尾静脉移植1000个胰岛细胞,C组在胰腺被膜下移植1000个胰岛细胞,于不同时间点测定大鼠随机血糖,对比大鼠血糖变化趋势及维持正常的时间.结果 A组大鼠血精于术后3 d内开始下降,血糖可降至正常水平(7.98±2.28)mmol/L,血糖维持正常水平(3.71±0.95)d,B组移植后24 h 血糖降至正常水平(7.35±1.40)mmol/L,可维持(7.85±1.46)d,C组移植后24 h血糖降至正常水平(7.06±2.11)mmol/L,可维持(24.90±2.60)d,不同部位移植对大鼠血糖水平变化的影响不同,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在胰腺被膜下移植胰岛细胞血糖维持正常时间最长,是一个较理想的移植部位.

Abstract：

Objective To study the curative effectiveness of pancreatic islets transplantation through the liver, tail vein and pancreas. Methods Twenty-four diabetic rats were randomly divided into groups 1,2, 3. The rats in group Ⅰ were transplanted with 1000 pancreatic islets beneath the liver capsule,those in group 2 with 1000 pancreatic islets through tail vein, and those in group 3 with 1000 pancreatic islets beneath the pancreas capsule. Plasma glucose levels at different time points were determined and compared. Results In group 1, plasma glucose levels were reduced at the 3rd day post-transplantation,reached the normal level (7.98 ±2. 28) mmol/L and maintain (3.71 ±0. 95) days. Group 2 start to activate after 24 h. Plasma glucose level reach to (7.35 ± 1.40) mmol/L and maintain (7.85 ± 1.46) days.Group 3 start to activate after 24 h. Plasma glucose level reach to ( 7.06 ± 2. 11 ) mmol/L and maintain (24. 90 ± 2. 60 ) days. There is statistical significance in plasma glucose level and maintain normal time after transplantation pancreatic islet in different sites ( P ＜ 0. 05 ). Conclusion Transplantation pancreatic islets beneath the pancreas capsule maintain plasma glucose for the longest time. The pancreas is a ideal transplantation site.     

Canine islet autografts with and without administration of cyclosporine

Cyclosporine administration prolongs the survival of immediately vascularized allografts. However, its role in the prevention of rejection of dispersed pancreatic islet allografts is uncertain, and some studies have suggested that it may be harmful. We performed total pancreatectomies in 21 mongrel dogs, followed by intrasplenic autotransplantation of islet-enriched, dispersed pancreatic tissue prepared by means of ductal perfusion and collagenase digestion. Ten dogs received no other therapy (controls) and 11 received orally administered cyclosporine from the day before to 30 days after transplantation. Therapeutic blood levels of cyclosporine were documented by means of high-pressure liquid chromatography. There was no difference in engraftment in six of 10 controls, and eight of 11 cyclosporine-treated dogs remained normoglycemic for more than 30 days. Intravenous glucose tolerance test results (K values), fasting serum insulin levels, and insulin secretion in response to a glucose challenge were similar in the two groups. There were two late treatment failures in the control group and one in the cyclosporine-treated group. We were unable to detect an adverse effect of cyclosporine on the engraftment or function of canine islet autografts. We conclude that cyclosporine remains a promising drug for use in studies of islet transplantation in human beings.