胃癌多药耐药机制的研究进展

化疗是胃癌综合治疗的重要手段之一,而肿瘤多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的存在常导致化疗失败,已成为直接影响患者预后的重要因素.深入探讨胃癌MDR的机制并寻找有效的逆转策略是当前胃癌研究中的热点,也是临床胃癌治疗中亟待解决的问题.     

多药耐药相关蛋白及P-糖蛋白在胃癌组织中表达的意义

目的 :分析多药耐药相关蛋白 (multidrug resistance associated protein,MRP)、P-糖蛋白 (P- gp)在胃癌组织中表达 ,研究其与胃癌生物学行为及预后的关系。方法 :采用免疫组化法检测 5 3例胃癌组织 MRP、P- gp表达的情况 ,分析其与相关临床资料的关系。结果 :MRP、P- gp表达与临床分期、浸润深度、组织学类型无关。MRP表达与淋巴结转移显著相关 (P <0 .0 1)。 MRP、P- gp表达与 5年生存率无关。结论 :MRP在胃癌组织中的单一表达能一定程度上反映胃癌的生物学行为。 MRP、P- gp均不能较好的反映胃癌的预后     

Pokemon基因表达与胃癌耐药性的关系

目的 探讨okemon基因表达与胃癌细胞药敏性及耐药基因的关系.方法 取60例胃癌组织和癌旁组织石蜡标本,采用免疫组化技术检测组织中pokemon蛋白及耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药蛋白(LRP)、生存素(survivin)的表达,并分析pokemon蛋白与其他4种蛋白的关系.采用磺酰罗丹明B(SRB)蛋白染色法检测5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)、奥沙利铂(L-OHP)对胃癌细胞株SGC7901、胃癌耐药细胞株SGC7901/ADR、胃上皮细胞株GES-1的抑制作用;qPCR及蛋白质印迹法检测上述3种细胞株中pokemon和耐药基因的表达.合成针对pokemon的siRNA并转染SGC7901/ADR细胞,检测转染前后SGC7901/ADR细胞的化疗药敏性及耐药基因的变化.结果 胃癌组织中pokemon、P-gp、MRP1、LRP、survivin蛋白的阳性表达率均高于癌旁组织(P＜0.05);pokemon蛋白表达与P-gp、survivin蛋白表达间存在正相关关系(r=0.385 2,P=0.002;r=0.342 4,P=0.007).Pokemon、P-gp、MRP1、survivin蛋白在SGC7901/ADR细胞株中的表达高于细胞株SGC7901及GES-1;SGC7901/ADR细胞株的耐药性最强,SGC7901次之,GES-1最弱(P＜0.01).Pokemon-siRNA转染SGC7901/ADR细胞后细胞中pokemon mRNA的表达明显受到抑制;转染后化疗药物对细胞的抑制能力增强,P-gp、survivin表达减弱(P＜0.05).结论 Pokemon与P-gp、survivin通过相互调控而促进胃癌耐药性的形成.Pokemon可能成为胃癌靶向治疗的候选基因.     

复发及难治急性髓细胞白血病病人多药耐药基因检测及意义

目的研究复发及难治急性髓细胞白血病（AML）病人多药耐药基因（mdr1）的表达及其与临床疗效的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测65例AML病人（其中初诊组38例,完全缓解组14例,复发难治组13例）、27例非白血病病人和健康人（包括健康人15例、缺铁性贫血病人10例、特发性血小板减少性紫癜病人2例）mdr1基因的表达水平,并分析其临床意义。结果AML病人mdr1基因表达阳性率高于对照组,复发难治组mdr1基因表达阳性率高于初诊组和完全缓解组,临床耐药组mdr1基因表达阳性率显著高于非临床耐药组,CR率非临床耐药组显著高于临床耐药组,差异均有显著性（χ^2=8.334～49.630,P〈0.01）。结论mdr1基因阳性表达与AML病人临床耐药密切相关,是影响预后的重要因素,可作为检测临床耐药和判断预后的指标之一。     

朊蛋白在耐阿霉素胃癌细胞系SGC7901/ADR中的过表达及其意义

目的 探讨朊蛋白(PrP)在耐阿霉素胃癌细胞系SGC7901/ADR中过表达及其与胃癌多药耐药性的相关性。方法(1)利用Northern印迹和Western印迹分别从RNA 水平和蛋白质水平检测朊蛋白在胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR及其亲本细胞SGC7901中的表达;(2)借助DNA重组技术构建朊蛋白基因的正反义真核表达载体;(3)通过电穿孔方法将正反义真核表达载体分别转入SGC7901和SGC7901/ADR细胞;(4)以流式细胞仪检测瞬时转染细胞中的阿霉素蓄积和潴留。结果(1)Northern印迹和Western印迹结果提示朊蛋白在SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中的表达显著高于其在SGC7901中的表达;(2)将正反义真核表达载体转入SGC7901(命名为PS)和SGC7901/ADR(命名为PA)中,PCDNA3.1空载体转入SGC7901(命名为BS)和SGC7901/ADR(命名为BA);转染48h后检测转染细胞的平均阿霉素荧光强度,阿霉素蓄积BS为8.9±0.7,PS为6.6±0.3,BA为5.5±0.7,PA7.5±0.6,阿霉素潴留BS为8.0±0.7,PS为5.9±0.5,BA5.1±0.7,PA为7.1±0.5,PS与BS相比两组均为P<0.01,BA与BA相比均为P<0.01表达,并对胃癌细胞,具有统计学意义。结论 朊蛋白在胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR和SGC7901/VCR中高表达并对胃癌细胞的药物蓄积有影响。     

胃癌病人外周血及肿瘤组织中多药耐药基因表达的相关性

目的 探讨多药耐药基因（MDR1）在胃癌病人外周血中的表达，并观察与肿瘤组织中多药耐药基因（MDR1）表达的相关性。方法 荧光定量RT-PCR法检测胃癌病人外周血及肿瘤组织中MDR1表达水平。结果 病理证实的初治胃癌病人31例，外周血中MDR1阳性率38．7％，肿瘤组织中MDR1阳性率77．4％．肿瘤组织中MDR1阳性者中50％外周血MDR1阳性，而肿瘤组织中MDR1阴性者中外周血MDR1无阳性表达，二者有相关性（P〈0．05）。结论 外周血中MDR1表达与肿瘤组织中MDR1表达具有一致性，前者可作为后者的补充。     

P—糖蛋白及多药耐药相关蛋白在胃癌中的表达与意义

目的：了解Ｐ－糖蛋白（Ｐｇｐ）及多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）在胃癌中的表达与意义，方法；采用免疫组化ＳＡＢＣ法。结果：在４３例胃癌中，Ｐｇｐ及ＭＲＰ阳性者分别为１３例（３０．２％）２２例（５１．２％）在４３相应癌旁组织中分别为８例（１８．６％），１７例（３９．５％）而在３０例胃炎组织中则分别为５例（１６．７％），９例（３０．０％）Ｐｇｐ与ＭＲＰ表达均阳性者，癌组织４例（９．３％）癌旁组织１例（２．３     

结肠癌中多药耐药相关蛋白和肺耐药蛋白的表达

目的:探讨结肠癌中多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)的表达及意义。方法:采用免疫组化法检测51例结肠癌和32例癌旁相对正常结肠中MRP和LRP的表达情况。结果:51例结肠癌中MRP的阳性率为41.18％(21/51),32例癌旁相对正常结肠中MRP的阳性率为18.75％(6/32),两组比较差异有显著性(P<0.05)。LRP的表达与结肠腺癌的分化程度相关,高分化腺癌的阳性率为90.00％(9/10),中分化腺癌的阳性率为79.66％(23/29),高于低分化腺癌20.00％(1/5)的阳性率,差异有显著性(P<0.05)。结肠癌中MRP与LRP的表达存在相关性(P<0.05)。结论:结肠癌中MRP和LRP均为高表达,两者均可能是结肠癌原发性多药耐药的重要机制,且两者可能有协同作用。临床上检测这2种蛋白的表达,有助于对化疗药物的选择。     

耐药相关基因在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 :探讨耐药相关基因P糖蛋白 (P gp)、拓扑异构酶Ⅱ (TOPOⅡ )、谷胱甘肽 S 转移酶 (GST π)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法 :应用免疫组化检测 90例术前未使用过化疗、放疗及免疫治疗的胃癌组织中的P gp、TOPOⅡ和GST π的表达。结果 :P gp、TOPOⅡ、GST π在胃癌组织中的表达分别为 82 .2 %(74/ 90 )、78.9% (71/ 90 )、87.8% (79/ 90 ) ;P gp和GST π的表达与胃癌的分化程度 ,浸润深度和淋巴结转移差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。TOPOⅡ表达与胃癌的组织学类型差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,与胃癌的浸润深度和淋巴结转移差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。各耐药相关基因之间的共同表达无明显的相关性 (P >0 .0 5 )。结论 :P gp和GST π的阳性表达可否作为胃癌病人的预后判断指标尚不能明确 ,TOPOⅡ阳性表达的高低可以作为胃癌预后的一个指标。各耐药相关基因的检测有利于指导化疗用药。     

胃癌组织核转录因子κB p65蛋白表达与肿瘤多药耐药性的关系

目的 分析胃癌组织中核转录因子κB（NF-κB）p65蛋白表达与肿瘤多药耐药性（MDR）的关系,并探讨其意义。方法 选取2013年1-12月在河北医科大学第四医院外三科手术切除并经病理证实的68例胃癌患者的肿瘤组织及癌旁组织。采用免疫组化（SP）法检测胃癌组织及癌旁组织NF-κB p65、P-gp、Bcl-2、Bax蛋白表达;采用体外药物敏感实验（MTT法）检测胃癌组织细胞对氟尿嘧啶（5-FU）、长春新碱（VCR）、紫杉醇（PTX）、奥沙利铂（L-OHP）、表阿霉素（eADM）的体外化疗药物敏感性。结果 胃癌组织NF-κB p65、P-gp、Bcl-2蛋白强表达率均高于癌旁组织,Bax蛋白强表达率低于癌旁组织,差异均有统计学意义（P＜0.05）。Spearman相关分析结果显示,胃癌组织NF-κB p65与P-gp蛋白表达呈正相关（rs=0.321,P=0.008）,NF-κB p65与Bax蛋白表达呈负相关（rs=-0.333,P=0.006）,NF-κB p65与Bcl-2蛋白表达无直线相关关系（rs=0.231,P=0.058）。在胃癌组织中,5-FU、PTX对NF-κB p65强表达者肿瘤细胞抑制率低于弱表达者,差异有统计学意义（P＜0.05）;5-FU、PTX、L-OHP对P-gp强表达者肿瘤细胞抑制率低于弱表达者,差异有统计学意义（P＜0.05）;5-FU、PTX、eADM对Bcl-2强表达者肿瘤细胞抑制率低于弱表达者,差异有统计学意义（P＜0.05）;5-FU、L-OHP、eADM对Bax强表达者肿瘤细胞抑制率高于弱表达者,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 胃癌组织中NF-κB p65表达增高,其可能通过调控P-gp、Bax蛋白表达而参与胃癌MDR。     

多药耐药相关蛋白检测及其临床治疗意义

目的 肿瘤多药耐药相关蛋白检测对肿瘤临床治疗的意义.方法 5种多药耐药相关蛋白抗体,免疫组化S-P法.结果 28例恶性肿瘤的检测结果没有同一性,差异性P＜0.01,具有2种以上耐药例数为25例,89.3%.结论 病理科开展对恶性肿瘤进行多药耐药相关蛋白的检测,对临床开展肿瘤的个体化治疗有非常重要的意义.     

TRAIL联合顺铂对胃癌多药耐药基因GST-π的影响

目的探讨肿癌坏死因子相关凋亡配体(TRAIL)与顺铂联合应用对胃癌耐药细胞株SGC-7901/VCR多药耐药(MDR)基因谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)的影响。方法采用MTT法检测不同浓度顺铂的抗癌活性并计算其亚毒性剂量IC10。流式细胞术检测TRAIL(200μg/L)及顺铂(亚毒性剂量)单用及联合应用后的细胞凋亡率。分别采用RT-PCR和ELISA法检测加药前后耐药基因GST-πmRNA及蛋白的表达情况。结果对照组、顺铂组、TRAIL组以及TRAIL顺铂联合用药组作用48 h后胃癌细胞凋亡率分别为2.69%、8.26%、9.71%和31.13%,与对照及单药组比较,联合用药组细胞凋亡明显升高(P<0.05)。RT-PCR和ELISA法结果显示,与单药组比较,联合用药组协同作用明显,多药耐药(MDR)基因GST-πmRNA和蛋白表达下降(P<0.05)。结论 TRAIL和顺铂联合应用能协同诱杀胃癌细胞,其机制可能是通过下调GST-π基因和蛋白表达,逆转或部分逆转MDR。     

胃癌组织铂类药物体外化疗药敏性与多种耐药相关因子表达的关系

目的 探讨铂类药物对胃癌组织的药物抑制率与多种耐药相关因子表达的关系及意义。方法 对68例胃癌新鲜肿瘤组织进行肿瘤细胞原代培养,以顺铂（CDDP）、奥沙利铂（L-OHP）行化疗药敏性实验,并对肿瘤组织行P-gp、GST-π、P53、Survivin和Bcl-2、Bax免疫组化染色。结果 L-OHP对肿瘤细胞的抑制率高于CDDP（t=2.76,P<0.05）。CDDP对胃癌细胞的药物抑制率与GST-π呈负相关（P<0.05）;L-OHP药物抑制率与P-gp、GST-π、Survivin表达呈负相关（均P<0.05）。结论 胃癌的CDDP和L-OHP化疗药敏性存在差异,影响两者药敏性的主要耐药因子也不相同。     

P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白在胃癌的表达与化疗敏感性的相关性研究

目的：探讨胃癌组织中P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gP）、多药耐药相关蛋白（muhidrug resistance-associated protein,MRP）的表达及对胃癌原代细胞培养体外化疗药物敏感性的影响。方法：应用免疫组化法检测P-gP及MRP在48例胃癌及癌旁组织的表达,同时通过胃癌原代细胞培养MTT药敏试验,检测胃癌对7种临床常用化疗药物的敏感性及耐药性,进一步分析药敏试验结果与P-gp、MRP表达的相关性。结果：在48例胃癌中,P-gP及MRP阳性率分别为41．7％、29．2％,共同表达率为25．0％。癌旁组织与癌组织的P-gP、MRP阳性表达率无显著差异。在顺铂（DDP）、丝裂霉素（MMC）、阿霉素（ADM）、鬼臼乙叉甙（VP-16）、5-氟尿嘧啶（5-FU）、羟基喜树碱（HCVF）、甲氨蝶呤（MTX）中,ADM、VP-16、HCVF耐药组P-gP、MRP阳性表达及共表达率较敏感组显著升高。结论：胃癌组织P-gp、MRP表达可导致胃癌原发性耐药。P-gP、MRP介导的MDR是ADM、VP-16、HCPT耐药的重要因素．     

胃癌及胃炎组织中多药耐药基因产物（P糖蛋白）表达的研究

目的：研究胃癌及胃炎组织中多药耐药基因产物Ｐ糖蛋白的表达。方法：采用免疫组化方法检测Ｐ－ｇｐ的分布。结果：各组胃癌及胃炎组织中均有Ｐ－ｇｐ表达，其中慢性胃炎 状及头癌、与代分化及未分化癌比较，Ｐ〈０．０１，差异有显著性意义。印戒细胞癌与低分化及未分化癌比较，Ｐ〈０．０１，差异有显著性意义，结论：癌组织Ｐ－ｇｐ表达较慢性胃炎强，但癌组织中Ｐ－ｇｐ表达不均衡。     

胃癌组织SNCG和MAP2表达及临床意义

目的 探讨γ突触核蛋白(SNCG)和微管相关蛋白2(MAP2)在胃癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化方法检测90例胃癌及40例非肿瘤胃黏膜组织中SNCG和MAP2的表达.结果 胃癌组织SNCG和MAP2的阳性表达均显著高于非肿瘤胃黏膜组织(uc=7.149、7.100,P＜0.01);胃癌组织SNCG阳性表...     

多药耐药相关蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的　探讨胃癌组织中多药耐药相关蛋白 (MRP)的表达与预后以及预测辅助化疗疗效的关系。方法　采用S -P免疫组化法检测 6 4例胃癌组织和 34例癌旁组织中MRP的表达水平。分析 4 5例术后化疗疗效与MRP表达的关系。结果　MRP在胃癌组织中表达阳性率 34.4 % ,与癌旁组织相比有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;胃癌组织中MRP阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤部位及大小、淋巴结转移及浸润深度、病理分化程度和临床分期无显著相关性 (P >0 .0 5 ) ,MRP表达阳性与 5年生存率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;在行术后辅助化疗的患者中 ,MRP表达阳性与生存率间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　MRP在胃癌组织中呈异常高表达 ,与癌旁组织有显著性差别。提示胃癌中存在MRP介导的原发性耐药。     

大肠癌组织中肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白的表达及临床病理意义

目的 :检测肺耐药蛋白 (LRP)和多药耐药相关蛋白 (MRP)在 6 0例大肠癌组织中的表达 ,探讨其与组织学类型、浸润深度、淋巴结转移的关系。方法 :应用免疫组化S -P法 ,检测 6 0例大肠癌组织 ,10例正常大肠粘膜中MRP和LRP的表达情况。结果 :MRP、LRP在 6 0例大肠癌组织中的阳性表达率分别为 6 8.3%和 70 % ,均高于正常大肠粘膜中阳性表达率 (P <0 .0 5 ) ,在各组织学类型之间的表达无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,不同浸润深度及是否有淋巴结转移间表达率无差异 (P >0 .0 5 )。结论 :MRP、LRP在大肠癌中均呈高表达 ,在大肠癌原发性多药耐药中起重要作用 ,这可能是大肠癌对化疗不敏感的原因之一。     

川芎嗪逆转人胃癌耐药细胞SGC7901/ADM多药耐药的实验研究

目的:观察中药钙通道阻滞剂川芎嗪(TMP)对胃癌耐药细胞系SGC7901/ADM多药耐药(MDR)的逆转.方法:采用四唑氮蓝(MTT)法以川芎嗪为逆转剂,观察化疗药物对SGC7901/ADM的杀伤作用.结果:采用非细胞毒剂量的300mg/L TMP,能提高5-Fu的细胞杀伤作用.结论:TMP是一种有效的逆转胃癌MDR的中药逆转剂.     

婴儿肝外胆道闭锁肝组织MRP2及FXR蛋白的表达及其意义

目的 探讨肝外胆道闭锁(EHBA)婴儿肝组织中多药耐药相关蛋白2(MRP2)、法尼醇受体(FXR)蛋白的表达及其与胆汁淤积的关系.方法 将临床和病理诊断为EHBA的20例患儿肝组织作为EHBA组,肝移植手术中成人供体的肝组织10例作为对照组,比较两组患者肝功能指标;采用免疫组织化学法检测肝组织中MRP2、FXR的表达情况,并进行病理图像分析.结果 EHBA组患儿血清总胆红素、直接胆红素、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶及γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)浓度明显高于对照组(P<0.05).对照组和EHBA组肝组织MRP2 蛋白吸光度(A)值分别为0.16±0.04和0.10±0.02,对照组和EHBA组