溶质载体家族7成员11基因SLC7A11与肝癌临床特征相关性

目的 明确溶质载体家族7成员11基因（SLC7A11）在肝癌及癌旁组织中的表达水平,了解SLC7A11基因与肝癌患者临床特征的关系。方法 收集102例肝癌患者肝癌组织及其癌旁组织,通过半定量PCR 、Real-time PCR测定SLC7A11基因在组织中的表达水平,分析该基因与肝癌患者年龄、性别、肿瘤大小、HBV感染、淋巴结转移、生存期及组织学分级的关系。结果 随机挑选20对肝癌和癌旁组织进行半定量PCR,SLC7A11基因在85.0%（17/20）的肝癌组织较癌旁组织中mRNA的表达水平明显上调。Real-time PCR检测102例肝癌和癌旁组织中SLC7A11 mRNA表达水平,72.5%（74/102）肝癌组织中SLC7A11基因表达水平明显上调（P<0.01）。在64例肝癌患者中SLC7A11 mRNA高表达组的平均生存期为16个月,低表达组的平均生存期为22个月,SLC7A11 mRNA高表达组生存期较短（P<0.01）。SLC7A11基因表达水平与肿瘤大小成正相关,肿瘤大于3 cm的肝癌患者SLC7A11基因的表达水平明显上调（P<0.05）。SLC7A11基因表达水平与患者的年龄、性别、HBV感染、淋巴结转移与否及组织学分级无关（P>0.05）。结论 SLC7A11基因在肝癌组织中表达上调,影响着肿瘤的增生及患者的生存期,提示SLC7A11基因在肝细胞癌发生发展中起着重要的作用。     

SLC7A11表达与双硫死亡、铁死亡及肿瘤关系的研究进展

研究已发现数十种调节性细胞死亡方式,包括铜死亡、铁死亡以及新鉴定的双硫死亡(disulfidptosis)等。其中,双硫死亡是由细胞内过量胱氨酸积累引起的二硫化物应激导致的细胞死亡方式,通常在葡萄糖饥饿的条件下发生。溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)作为参与多种新型细胞死亡方式的特定分子在肿瘤生长或进程中发挥了关键作用。本文针对双硫死亡并围绕其关键分子SLC7A11在肿瘤中的研究进展作一综述。     

结肠癌中SLC11A1基因的表达及其临床意义

目的:探讨多个结肠癌数据集中SLC11A1的表达情况及其与结肠癌临床预后的关系,以及在结肠癌肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中的潜在作用。方法:利用肿瘤基因表达图谱(the cancer genome atlas,TCGA)及基因表达汇编(gene expression omnibus,GEO)汇总结肠癌相关数据,分析SLC11A1表达及其与结肠癌临床预后关系,同时使用ESTIMATE算法和单样本基因集富集分析(single-sample gene-set enrichment analysis,ssGSEA)算法,探索SLC11A1与TME中免疫细胞浸润之间的关联。结果:在TCGA、GEO数据集中,SLC11A1表达在肿瘤中增高(P<0.001),其高表达是结肠癌患者总体生存(overall survival,OS)的独立危险因素,且SLC11A1与肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAMs)和M2型巨噬细胞的浸润、聚集密切相关。进一步分析发现,其与CD8+T细胞抑制剂TGFB1和CXCL12及其受体的...     

大鼠SLC7a8基因的克隆及真核表达载体的构建

目的：克隆大鼠左旋氨基酸转运体（SLC7a8）基因cDNA的读码框（CDS）,构建携带SLC7a8基因的重组真核表达载体,为进一步研究其在自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHR）中的功能作准备。方法：从非高血压大鼠（wistar-kyoto,WKY）肾脏组织提取总RNA,通过RT-PCR得到总cDNA,PCR法扩增,产物连接pGEM-T Easy载体测序分析正确后,再以PCR方法扩增,将其连接入真核表达质粒pcDNA3.1（＋）。以PCR、双酶切和测序鉴定正确后,将重组载体pcDNA3.1（＋）-SLC7a8用脂质体包裹转染大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）,RT-PCR法及Western blotting法分别检测转染后SLC7a8 mRNA及蛋白表达水平。结果：成功克隆了大鼠SLC7a8基因cDNA,重组真核表达载体pcDNA3.1（＋）-SLC7a8构建成功,且证实转染后肾小管上皮细胞的SLC7a8 mRNA及蛋白表达均明显高于空白对照组（P〈0.05）及空质粒组（P〈0.05）。结论：成功克隆了SLC7a8基因,并构建了真核表达载体pcDNA3.1（＋）-SLC7a8,能够在NRK-52E细胞中获得有效过表达,这为进一步探讨SLC7a8基因的生物学功能奠定了基础。     

SLC真核表达载体的构建及蛋白质表达的鉴定

目的：构建SLC真核表达载体，并实现其真核表达。方法：通过使用限制性内切酶酶切载体中的SLC片段，再与经过相同酶切的真核表达载体pcDNA3．1进行连接，电穿孔法转染Hela细胞后，培养上清经阴离子交换层析纯化后，进行SDS—PAGE及Westernblot鉴定。结果：表达出蛋白质经westernblot法鉴定为特异性蛋白质。结论：成功获得SLC真核表达载体。     

泛癌中SLC7A7表达的预后意义及其与免疫微环境的关系

SLC7A7是溶质转运蛋白超家族的重要成员之一,能够通过某些信号通路调控细胞周期、抑制肿瘤细胞迁移和侵袭,可能对肿瘤的预后具有重要意义.然而,SLC7A7在肿瘤进展和肿瘤免疫学中的潜在功能和机制仍不清楚.应用TIMER比较了多种癌症类型和正常组织中SLC7A7基因表达量的差异.使用cBioPortal分析SLC7A7拷...     

雷公藤甲素调控p53/SLC7A11轴诱导结肠癌细胞铁死亡

目的 探讨雷公藤甲素调控p53/SLC7A11轴诱导结肠癌细胞铁死亡的分子机制。方法 培养人结肠癌细胞系（HCT116）,采用CCK-8法检测细胞活力,EdU实验和平板克隆形成实验检测细胞增殖与克隆能力;铁死亡相关检测试剂盒测定Fe2+离子、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量,流式细胞术检测活性氧自由基（ROS）水平;JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位变化;Western Blot 检测p53、SLC7A11蛋白表达水平。结果 CCK-8实验显示雷公藤甲素呈浓度梯度依赖性抑制结肠癌细胞活力,其IC50为47.82nmol/L;EdU实验和平板克隆形成实验证实雷公藤甲素可显著抑制结肠癌细胞增殖与克隆能力（P<0.05）;在雷公藤甲素干预后,铁死亡相关指标检测发现,HCT116细胞 Fe2+离子、MDA及ROS水平显著升高,GSH含量降低（P<0.05）;并在荧光显微镜下观察到HCT116细胞线粒体膜电位下降（P<0.05）。进一步通过Western Blot实验,发现HCT116细胞p53蛋白表达增加,SLC7A11蛋白表达下调（P<0.05）。结论 雷公藤甲素可通过调控p53/SLC7A11轴诱导结肠癌细胞铁死亡,抑制结肠癌细胞增殖与克隆。     

SLC11A1基因多态性在新发和复发肺结核患者中的分布

目的探讨SLC11A1基因多态性在中国汉族人群新发和复发肺结核患者中的分布。方法在中国汉族人群中,选择新发肺结核患者、复发肺结核患者和健康对照者各30例,应用SNaPshot SNP分型技术检测以上人群SLC11A1基因多态性位点INT4、D543N和3′UTR的基因型,采用Logistic回归分析和2χ检验进行统计学处理。结果病例组3′UTR位点TGTG /del基因型频率显著高于对照组(P=0.038),病例组与对照组INT4和D543N位点各基因型频率无显著性差异,病例组D543N和3′UTR位点联合分析显示GG/ del及GA/ del基因型频率均显著高于对照组(P=0.048和P=0.034)。新发肺结核患者与复发肺结核患者3′UTR和D543N/3′UTR基因型频率无显著性差异。结论SLC11A1基因3′UTR位点多态性和D543N/3′UTR单倍体型可能是中国汉族人群肺结核发病的易感因素,但与肺结核复发的关系有待进一步研究。     

人趋化因子SLC原核表达载体的构建与表达

目的构建趋化因子SLC(secondary lymphoid-tissue chemokine)的硫氧还蛋白融合表达载体并表达融合蛋白.方法从人扁桃体中提取总RNA,再进行RT-PCR,扩增SLC成熟蛋白基因,并在5'和3'分别添加Nco Ⅰ和EcoRⅠ酶切位点,通过这两个酶切位点重组于pET32a( )载体上,转化E.coli DH5α,筛选阳性克隆,酶切鉴定,DNA测序检测插入序列的正确性,经突变删除因Nco Ⅰ位点引入而在肠激酶位点和目的基因间多余的3个氨基酸,DNA再测序检测突变结果,SDS-PAGE分析其表达,并通过金属离子亲和层析、除盐、弱阳离子交换层析,得到纯化的融合蛋白,Western blot验证纯化的融合蛋白.结果成功构建了SLC天然蛋白的硫氧还蛋白融合表达载体,表达并纯化出融合蛋白,Western blot证明该融合蛋白能与羊抗人SLC一抗结合.结论构建的天然SLC硫氧还蛋白融合表达载体以可溶性蛋白的方式稳定表达SLC硫氧还蛋白,并对融合蛋白进行了初步纯化.     

人胃蛋白酶原A基因原核表达载体构建及鉴定

目的构建人胃蛋白酶原A(Pepsinogen A)原核表达载体,用于下一步人胃蛋白酶的表达。方法以Pepsinogen A CDNA为模板,利用PCR技术扩增Pepsinogen A基因,与pMD18-T载体相连构建载体pMD18-T/Pepsinogen A,提取质粒进行EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切并测序鉴定,插入原核表达载体pET30a的相应位点,构建原核表达载体pET30a-Pepsinogen A,经菌落PCR、EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切分析鉴定重组质粒。结果 PCR扩增出约1 000bp的Pepsinogen A基因片段,经酶切和测序验证Pepsinogen A基因正确;克隆至表达载体后,菌落PCR及双酶切证明pET30a-Pepsinogen A原核表达载体构建成功。结论成功构建了pET30a-Pepsinogen A原核表达载体,为进一步分析研究人胃蛋白酶提供了实验基础。     

人eIF4A3真核表达载体构建及稳定表达细胞株筛选

目的 构建人eIF4A3重组质粒载体,筛选高表达人eIF4A3的稳定细胞株。方法RT-PCR克隆eIF4A3基因,将获得的基因片段分别连接到含有HA和c-myc标签的质粒载体上,转染HeLa细胞,经G418筛选获稳定表达细胞株,在体外翻译体系中进行体外翻译,通过免疫印迹鉴定eIF4A3的表达。结果成功构建人eIF4A3...     

SLC7 A11蛋白在小儿肾母细胞瘤中的表达及临床意义

目的 探讨溶质载体家族7成员11(SLC7A11)蛋白在小儿肾母细胞瘤(WT)中的表达情况及其临床意义。方法 选取103例WT患儿作为研究对象。取手术切除的癌组织及癌旁组织,采用免疫组织化学法检测组织中SLC7A11蛋白的表达情况。随访5年并记录WT患儿存活情况。比较癌组织与癌旁组织中SLC7A11蛋白的表达情况,以及不同临床病理特征WT患儿癌组织中SLC7A11蛋白的表达情况。分析癌组织中不同SLC7A11蛋白表达情况的WT患儿的预后差异,以及WT患儿预后的危险因素。结果 WT患儿癌组织中的SLC7A11蛋白阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。肿瘤直径≥5 cm、肿瘤分期为Ⅲ/Ⅳ期的WT患儿癌组织中SLC7A11蛋白阳性表达率均分别高于肿瘤直径<5 cm、肿瘤分期为Ⅰ/Ⅱ期的WT患儿(均P<0.05)。癌组织中SLC7A11蛋白阳性表达的WT患儿5年生存率低于阴性表达的WT患儿(分别为45.95%、72.41%,P<0.05)。单因素COX回归分析显示,肿瘤直径、肿瘤分期、癌组织中SLC7A11蛋白表达情况均是影响WT患儿预后的因素(均P<0.05)...     

S100A11慢病毒表达载体的构建及其在肝癌细胞中的表达

目的 构建S100A11基因慢病毒表达载体,建立Huh-7 S100A11稳定细胞株,并鉴定其表达. 方法 RT-PCR扩增S100A11基因片段,与pWPT载体经Mlu Ⅰ和Not Ⅰ同时酶切后连接,构建慢病毒表达载体pWPT-S100A11;将表达载体pWPT-GFP和pWPT-S100A11与慢病毒包装质粒pMD2.G和psPAX2共同感染293T细胞,获得携带GFP和S100A11基因的慢病毒,将两种慢病毒分别感染Huh-7细胞,获得Huh-7 S100A11和Huh-7GFP稳定细胞株;利用Real-Time PCR和Western Blotting实验方法检测感染后S100A11的过表达情况. 结果 成功构建慢病毒表达载体pWPT-S100A11;慢病毒感染Huh-7细胞株后,阳性对照Huh-7GFP经荧光镜检测传染率达95％;感染Huh-7细胞后S100A11的mRNA和蛋白表达量均增加. 结论 成功构建慢病毒表达载体pWPT-S100A11,并建立了Huh-7S100A11稳定细胞株,为进一步研究S100A11基因在肝癌中的生物学功能和机制奠定了基础.     

SLC11A1、SGPP2基因多态性与山东汉族风湿关节炎的关联性

目的 探讨SLC11 A1和SGPP2基因的单核苷酸多态性(SNPs)与山东汉族人群类风湿关节炎(RA)的关联.方法 采用Real-time PCR法对山东汉族134例RA患者(RA组)和242例健康者(对照组)SLC11A1基因的rs1059823、rs2695343位点和SGPP2的rs13382934、rs2009150位点及进行检测,采用SPSS13.0软件对其分析,数据分析采用x2检验和Fisher确切概率法.结果 RA组SLC11 A1基因的rs1059823、rs2695343位点及SGPP2的rs13382934、rs2009150位点与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SLC11A1和SGPP2基因与山东汉族人群RA的易感性无关.     

SLC7 A2作为肝细胞癌新的生物标志物研究

目的:探讨SLC7A2基因作为肝细胞癌(HCC)患者潜在新的生物标志物前景.方法:利用肿瘤基因组图谱(TCGA)数据挖掘SLC7A2在HCC患者中的表达水平.采用Kaplan-Meier法、Cox回归分析法和列线图评价SLC7A2在HCC中的预后价值.结果:与正常肝组织相比,HCC组织SLC7A2表达显著降低(P<0.05).SLC7A2低表达与血清中高AFP水平、血管浸润、残余肿瘤、复发和死亡显著相关(P<0.05).Kaplan-Meier分析表明,SLC7A2的低表达与肝细胞癌的整体生存率(OS)显著相关(P=0.006),与无病生存期(DFI)无显著相关(P=0.09).多因素分析进一步证实SLC7A2低表达是肝细胞癌患者OS的独立指标(P<0.05).HCC中SLC7A2的表达下调基于DNA拷贝缺失和SLC7A2甲基化减少.结论:SLC7A2可作为HCC患者预后新的生物标志物和候选治疗靶点.     

ELOVL2和SLC11A1基因多态性与新疆地区人群结核病易感性的相关性

目的研究超长链脂肪酸延伸酶2基因(ELOVL2)和溶质载体蛋白家族11A成员1基因(SLC11A1)单核苷酸多态性(SNP)与新疆维吾尔族人群结核病(TB)易感性的相关性。 方法选择维吾尔族TB患者178例为TB组,142例健康人为对照组。采用高通量测序检测各组ELOVL2基因rs1570069、rs2236212、rs3798719位点和SLC11A1基因rs17235409、rs17235416位点的多态性,分析不同遗传模型下基因多态性与TB易感性的相关性。 结果两组间各位点基因型、等位基因分布的差异ELOVL2无显著性(P＞0.05),而SLC11A1有显著性(P＜0.05)。隐性遗传模型下,rs17235409的GA+AA基因型、rs17235416的AT+TT基因型是TB的危险因素;超显性遗传模型下,rs17235409的GG+AA基因型、rs17235416的AA+TT基因型是TB的保护因素(P＜0.05)。 结论ELOVL2基因多态性与新疆维吾尔族人群TB易感性可能不相关;SLC11A1基因多态性与新疆维吾尔族人群TB易感性可能相关。     

喉癌来源的MAGE-A3基因真核表达载体及其稳定表达模型的构建和鉴定

目的：克隆人黑色素瘤相关抗原MAGE—A3基因,构建真核表达载体,检测、鉴定其在细胞中的表达。方法：MAGE-A3基因进行PCR扩增,凝胶回收PCR产物片段并连接至pMDl8一T载体。测序后将MAGE—A3基因片段亚克隆至真核表达载体,构建成plRES2-EGFP／MAGE—A3重组质粒。经脂质体转染至293T细胞株后,荧光定量PCR、Western-blotting法鉴定MAGE—A3基因的表达。结果：MAGE-A3基因正确克隆在plRES2-EGFP／MAGE-A3,测序结果与GenBank公布的MAGE—A3序列一致。转染293T细胞后能检测到MAGE-A3基因和蛋白的表达。结论：成功构建plRES2-EGFP／MAGE—A3真核表达质粒,并能在293T细胞中有效表达MAGE—A3蛋白,奠定了其作为DNA疫苗应用的基础。     

结肠癌组织中THBS2、SLC11A1基因表达及与TANs浸润的关系

目的 分析结肠癌组织中血小板反应蛋白2(THBS2)、溶质载体家族11成员1(SLC11A1)表达及与肿瘤相关性中性粒细胞（TANs）浸润的关系。方法 选取2020年1月—2022年4月在泉州市第一医院进行手术切除的120例结肠癌患者的肿瘤组织及癌旁组织,用免疫组化法检测结肠癌组织及癌旁组织中THBS2、SLC11A1表达,收集患者临床病理特征,分析THBS2、SLC11A1表达与结肠癌患者临床病理特征的关系,分析THBS2、SLC11A1与TANs浸润密度的相关性。结果 THBS2在结肠癌组织中主要表达于细胞质,SLC11A1在结肠癌组织中主要表达于细胞膜中,染色均呈现棕黄色;相较于癌旁正常组织,结肠癌组织中THBS2表达明显降低,SLC11A1表达明显升高。结肠癌组织THBS2表达与分化程度、淋巴结转移、TNM分期、血管浸润具有明显相关性（P<0.05）;结肠癌组织SLC11A1表达与淋巴结转移、肿瘤浸润深度、病理分型、TNM分期、血管浸润具有明显相关性（P<0.05）。结肠癌组织中THBS2表达与TANs浸润密度呈负相关（r=-0.444,P<0.05）,SLC...