金莲花总黄酮对人甲状腺乳头癌 K1细胞三叶因子3表达变化的影响

目的：探讨金莲花总黄酮对人甲状腺乳头癌K1细胞增殖抑制作用及三叶因子3（TFF3）表达变化。方法不同浓度金莲花总黄酮作用于体外培养K1细胞24、48、72 h,MTT检测细胞生长抑制率,Western blotting 和Real-time PCR检测不同浓度总黄酮对K1细胞TFF3蛋白及mRNA表达的影响。结果 MTT实验结果表明,同一时间总黄酮对K1细胞生长增殖抑制率随着药物浓度的增高而升高（ P ＜0?．05）,同一浓度总黄酮对K1细胞抑制率随时间延长而升高（ P ＜0．05）。 Western blot及QPCR结果显示随着金莲花总黄酮浓度的升高K1细胞TFF3蛋白及mRNA水平下降（ P ＜0．05）。结论金莲花总黄酮对人甲状腺乳头癌细胞具有抑制作用,并能抑制TFF3的表达。     

TFF3和SDF-1在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义*

目的分析三叶因子3(TFF3)、基质细胞诱导因子-1(SDF-1)在甲状腺乳头状癌（PTC）和癌旁组织中的表达及意义,为临床诊断PTC及评估患者预后提供依据。方法采用免疫组织化学染色,检测并比较PTC组织芯片中癌与癌旁组织TFF3、SDF-1蛋白的表达,并分析二者的表达与临床病理特征的关系。结果（1）PTC中TFF3阳性率和表达水平明显高于癌旁组织,在有淋巴结转移患者明显高于无淋巴结转移患者,临床Ⅲ~Ⅳ期PTC患者高于Ⅰ~Ⅱ期患者（P<0.05）。（2）PTC中SDF-1的阳性率及表达水平明显高于癌旁组织,有淋巴结转移患者明显高于无淋巴结转移患者,临床Ⅲ~Ⅳ期患者高于Ⅰ~Ⅱ患者;45岁以上患者明显高于≤45岁者（P<0.05）。（3）PTC中TFF3与SDF-1蛋白表达水平呈正相关(rs=0.266,P<0.05)。结论 TFF3和SDF-1在PTC中的高表达与癌的发生发展有关,对判断PTC的恶性程度和病情进展有重要价值。     

葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的凋亡作用

目的研究葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的影响。方法将低、中、高剂量(分别为16、32和64μl/ml)的葡萄汁加入体外培养的人前列腺癌PC-3细胞,检测葡萄汁对PC-3细胞的毒性作用,用单细胞凝胶电泳测其对DNA损伤作用,流式细胞术测细胞凋亡,免疫组化法测凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达。结果3种剂量的葡萄汁能抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖;DNA迁移长度与彗星细胞拖尾率逐渐增高,拖尾细胞率最高为71%;能诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡,细胞凋亡率分别是14.5%3、2.1%和40.5%,促凋亡基因Bax表达率分别是36.8%、50.4%和64.8%;抑凋亡基因Bcl-2表达率依次为39.1%、25.0%和12.4%。结论葡萄汁可抑制人前列腺癌PC-3细胞增长,诱导其细胞凋亡,能上调促凋亡基因Bax的表达,下调抑凋亡基因Bcl-2的表达。     

LYRM1基因过表达对P19细胞凋亡的影响

目的 观察LYRM1基因过表达对P19细胞凋亡的影响.方法 将人LYRM1基因的真核表达载体(pcDNATM 3.1/myc-HisB-LYRM1)和空载体pcDNATM 3.1/myc-HisB,分别转染P19细胞,通过G418筛选2周,建立稳定过表达人LLYPM1基因的P19细胞系.用Western blot技术验证稳定表达细胞株.将稳定转染pcDNATM3.1/myc-HisB-LYRM1载体质粒和空载质粒的P19细胞以无血清培养基37℃孵育24 h以诱导细胞凋亡,收获细胞用流式细胞术检测细胞凋亡.结果 建立了稳定转染LYRM1的P19细胞系,成功地表达了目的 基因.流式细胞术检测结果发现过表达LYRM1基因的P19细胞凋亡率显著降低.结论 LYRM1基因具有抑制P19细胞凋亡的作用.     

人肾透明细胞癌中细胞凋亡相关因子Caspase-3和Caspase-9的表达

目的研究人肾透明细胞癌组织中细胞凋亡相关重要因子Caspase-3、Caspase-9表达的变化与肾癌的关系。方法标本离体后分成肾透明细胞癌组、癌旁组织组、正常肾组织组,均用10%的甲醛溶液固定48h,常规石蜡包埋、切片5μm,应用免疫组织化学方法进行观察研究。结果 Caspase-3与Caspase-9均在正常肾组织中可见少量弱阳性反应,癌旁组织阳性表达增加,肾癌组织表达明显减少,两两比较结果显示,3组之间差异均有统计学意义（P〈0.01）。肾癌4个期之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。Caspase-3与Caspase-9蛋白表达呈正相关（r=0.988,P〈0.05）。结论癌组织中Caspase-3和Caspase-9表达下降,说明细胞凋亡减少,癌组织细胞增殖旺盛,是肿瘤形成的重要机制。     

甲状旁腺素对人甲状腺髓样癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨甲状旁腺素对人甲状腺髓样癌细胞体外增殖抑制及凋亡作用。方法体外培养甲状腺髓样癌细胞株,经甲状旁腺素和甲状旁腺素受体单抗干预处理后,倒置相差显微镜下观察细胞生长状况,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果倒置相差显微镜下细胞变化明显,各浓度的甲状旁腺素和甲状旁腺素受体单抗均分别能有效地抑制甲状腺髓样癌细胞增殖、诱导细胞凋亡,凋亡作用呈时间和浓度依赖。当甲状旁腺素浓度为2.0μmol/L、甲状旁腺素受体单抗浓度为1.0μmol/L时,对细胞凋亡作用显著(P0.05),凋亡率分别为13.24%及20.78%。结论甲状旁腺素对人甲状腺髓样癌细胞增殖有抑制作用并能诱导其凋亡。     

杨黄总黄酮对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的:研究杨黄总黄酮对人肝癌Hep G2细胞凋亡的影响。方法:制备杨黄总黄酮并进行定性、定量分析。以5-氟尿嘧啶(50μg/ml)与不同质量浓度杨黄总黄酮(10、20、40、80、100μg/ml)作用于Hep G2细胞24 h后,采用MTT法测定细胞活力以计算抑制率与半数抑制浓度(IC50)。以不同质量浓度杨黄总黄酮(40、80、100μg/ml)作用于Hep G2细胞72 h后,采用流式细胞仪测定细胞凋亡情况与细胞周期分布情况。结果:杨黄总黄酮含量为464.5 mg/g。10、20、40、80、100μg/ml杨黄总黄酮对细胞的抑制率分别为(6.46±1.74)%、(8.19±1.08)%、(23.19±2.77)%、(42.09±1.46)%和(58.18±1.89)%,抑制率与其质量浓度呈正相关,IC50为93.9μg/ml。40、80、100μg/ml杨黄总黄酮作用于细胞72 h后细胞凋亡率增加,并与质量浓度呈正相关。随着杨黄总黄酮质量浓度增加,S+G2期细胞比例增加。结论:杨黄总黄酮可诱导Hep G2细胞凋亡,其机制可能与将细胞阻滞于S+G2期有关。     

黄芪总黄酮对K562细胞凋亡及细胞周期的影响

<正>白血病是严重危害人类健康的恶性肿瘤,儿童尤其多见。黄芪总黄酮(total flavonoids of Astragalus,TFA)是从蒙古黄芪中分离的抗氧化、清除自由基的主要活性成分[1,2],     

白花蛇舌草总黄酮体外对人肝癌细胞HepG-2的作用

目的:观察白花蛇舌草总黄酮体外对HepG-2肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法:以HepG-2细胞为实验细胞株,观察白花蛇舌草中的总黄酮对HepG-2肿瘤细胞形态的影响;用流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果:白花蛇舌草总黄酮对HepG-2肿瘤细胞形态有影响,抑制其生长并诱导HepG-2肿瘤细胞的调亡。结论:白花蛇舌草中的总黄酮通过诱导凋亡对人肝癌细胞HepG-2有抑制增殖作用。     

枸杞多糖对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响

目的研究枸杞多糖(LBP)对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响。方法体外培养的人前列腺癌PC-3细胞经枸(LBP)处理后,采用MTT法测定细胞的增殖情况,流式细胞仪分析LBP对PC-3细胞周期和凋亡的影响,TUNEL法观察PC-3细胞凋亡的变化,用免疫组化法检测其Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果LBP可明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的生长,并能诱导PC-3细胞凋亡,凋亡率分别为8.5%、17.5%、29.5%、37.5%和41.5%,与对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01);同时PC-3细胞Bcl-2/Bax蛋白比值显著下降,呈明显的剂量-效应关系。结论LBP对人前列腺癌PC-3细胞DNA具有损伤作用,能诱导PC-3细胞的凋亡,调节其相关基因的表达。     

CK19、Galectin-3和HBME-1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的探讨细胞角蛋白19(CK19)、Galectin-3和HBME-1在甲状腺乳头状癌(PTC)和乳头状增生性甲状腺疾病鉴别诊断中的作用。方法应用免疫组织化学方法检测了44例PTC、27例结节性甲状腺肿伴乳头状增生(NGWPH)和40例甲状腺腺瘤伴乳头状增生(FAWPH)中单克隆抗体CK19、Galectin-3和HBME-1的表达。结果 CK19、Galectin-3和HBME-1在PTC中的阳性表达率分别为100%、97.7%和95.5%,均明显高于NGWPH中的11.1%、7.4%和3.7%,或FAWPH中的12.5%、2.5%和10.0%(P<0.01)。同一病例有两种以上阳性表达在PTC为97.7%,明显高于NGWPH和FAWPH的11.1%和7.5%(P<0.01)。结论 CK19、Galectin-3和HBME-1的检测,尤其是联合检测,对甲状腺良、恶性病变的诊断及鉴别诊断具有较高的临床使用价值。     

甲状腺乳头状癌中MRP-1基因的表达及其临床意义

目的 探讨甲状腺乳头状癌中IMRP-1基因mRNA和蛋白的表达及其临床意义.方法 采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学(Envision TM)法,检测36例甲状腺乳头状癌组织标本中MRP-1基因mRNA和蛋白的表达,并结合临床资料进行分析.结果 MRP-1的免疫组化和RT-PCR的检测结果相符(P＜0.01).甲状腺乳头状癌巾MRP-1 mRAN表达水平为1.41±0.47,蛋白阳性率为36.1%(13/36),两者均低于正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿及滤泡性腺瘤(P＜0.05);MRPI基因mRNA和蛋白表达与甲状腺乳头状癌侵袭转移有关(P＜0.05).结论 MRP-1基因与甲状腺乳头状癌的发生、发展、侵袭转移及预后有关.     

肿瘤特异性凋亡基因对人淋巴瘤细胞U937的凋亡诱导作用

为观察肿瘤特异性凋亡基因（apoptin gene）对人淋巴瘤细胞U937的调亡诱导作用，用含有apoptin基因的真核表达载体短时转染体外培养的人淋巴瘤细胞U937；采用台盼蓝染色法、RT-PCR及DNA凝胶电泳等方法研究其在不同时间条件下对人淋巴瘤细胞U937诱导凋亡的作用。结果表明，apoptin基因短时转染的人淋巴瘤细胞U937可出现明显的细胞凋亡；而且凋亡细胞的数量与apoptin的转染时间有关。结论：apoptin基因具有诱导人淋巴瘤细胞U937凋亡的作用。     

药物对自身免疫性甲状腺疾病与细胞凋亡的影响

目前越来越多的研究发现甲状腺细胞凋亡与自身免疫性甲状腺疾病(AITD)有很大的关系,研究较多的甲状腺细胞内的凋亡路径主要有3条:Fas/FasL系统、Bcl-2/Bax系统、TRAIL/TRAIL-R系统,且受多种因素调节。探讨细胞凋亡与AITD的关系,有助于进一步阐明AITD的发病机制,并为相关的干预措施提供新的思路。     

紫杉醇对绒癌JEG-3细胞增殖与凋亡的影响

目的该文围绕紫杉醇对人绒毛膜癌细胞JEG-3的增殖与凋亡的影响进行研究。方法通过MTT法检测细胞增殖及流式细胞术检测不同浓度紫杉醇作用下细胞的凋亡及其对细胞周期的影响。结果随紫杉醇浓度的增加或时间的延长,JEG-3细胞增殖抑制率及凋亡率均增大,各组间比较有统计学意义（P〈0.05）。结论该次实验的结果显示紫杉醇在抑制绒癌细胞JEG-3增殖及促凋亡方面均有显著的作用。     

PPARγ激动剂15d-PGJ_2对甲状腺刺激抗体作用下人甲状腺细胞存活和凋亡的影响

目的探讨PPARγ激动剂15d-PGJ2对甲状腺刺激抗体(TSAb)作用下人甲状腺细胞存活和凋亡的影响。方法应用原代培养人甲状腺细胞为研究对象,用TSAb刺激细胞24 h,不同浓度15d-PGJ2(0～40μmol/L)干预0～48 h后,MTT法测定细胞存活率;干预24 h后观察细胞凋亡形态、流式细胞技术测定细胞凋亡率。结果 15d-PGJ2呈浓度和时间依赖性抑制TSAb作用下甲状腺细胞的存活(P<0.05);5～40μmol/L15d-PGJ2对TSAb作用下甲状腺细胞有促进凋亡作用(P<0.05),并呈剂量依赖关系;10μmol/L PPARγ拮抗剂GW9662能拮抗20μmol/L15d-PGJ2对TSAb作用下甲状腺细胞的凋亡作用(P<0.05)。结论 15d-PGJ2能够引起TSAb作用下甲状腺细胞凋亡,这一效应可能主要通过PPARγ途径起作用。     

鱼腥草总黄酮调控PI3K/Akt信号通路诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的实验研究

目的：探讨鱼腥草总黄酮调控磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路对人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的诱导作用。方法：取对数期MCF-7细胞,随机分为4组（5个复孔）,低、中、高剂量组分别用3,6,9 g·L^-1鱼腥草总黄酮处理,对照组用磷酸盐缓冲液（PBS）处理。干预48 h后进行细胞形态学观察;对比干预12,24,48 h时的细胞凋亡率;对比干预48 h时PI3K、Akt、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA和PI3K、Akt、磷酸化Akt（pAkt）、Bcl-2、Bax蛋白相对表达量。结果：Hoechst 33258染色结果显示,干预后3剂量组部分细胞体积缩小、染色质浓缩,出现凋亡小体,且中剂量组凋亡现象最为明显;细胞凋亡率、Bax mRNA和蛋白相对表达量组间比较,中剂量组最高、高剂量组其次、低剂量组其稍低、对照组最低,且每2组间比较差异均有显著性（P<0.05）;细胞凋亡率组内比较,对照组随时间的延长变化不显著（P>0.05）,3剂量组均随时间的延长显著增加（P<0.05）;PI3K、Bcl-2 mRNA和PI3K、pAkt、Bcl-2蛋白相对表达量组间比较,中剂量组最低、高剂量组其次、低剂量组稍高、对照组最高,且每2组间比较差异均有显著性（P<0.05）;Akt mRNA和蛋白相对表达量组间比较差异均不显著（P>0.05）。结论：鱼腥草总黄酮可促进人乳腺癌细胞株MCF-7的凋亡,其中浓度为6 g·L^-1时促凋亡作用最强,推测是通过下调PI3K、Bcl-2 mRNA和PI3K、pAkt、Bcl-2蛋白表达,上调Bax mRNA和蛋白的表达,与PI3K/Akt信号通路有关。     

黄芪总黄酮对辐射肝癌细胞的促凋亡作用

目的从细胞和蛋白水平研究黄芪总黄酮（total flavonoids of astragalus,TFA）对辐射肝癌细胞的促凋亡作用。方法以对数生长期的HepG－2肝癌细胞为实验对象,克隆形成实验检测细胞的辐射敏感性;流式细胞技术分析细胞凋亡率;Westernblot技术分析凋亡相关蛋白Fas、Bcl－2、Bax的表达。结果细胞克隆形成实验结果显示,TFA给药照射组能够明显抑制HepG－2细胞增殖,作用强于单纯TFA给药组和单纯照射组。流式分析结果也提示,经6Gv1射线一次性照射6、24h和48h后,TFA预处理组肝癌细胞HepG－2的细胞凋亡率分别为（11．6±2．2）％、（17．3±1．5）％和（20．1±2．8）％,单纯照射组HepG－2的细胞凋亡率分别为（6．±2．3）％、（9.3±3．5）％和（15．8±2．1）％。Westernblot分析结果提示,在肝癌细胞HepG－2中,TFA预处理照射组促凋亡蛋白Fas和Bax的表达量显著高于单纯照射组和对照组;凋亡抑制蛋白Bcl－2的表达量正好与此相反,TFA预处理照射组Bcl－2的表达量明显低于单纯照射组和对照组。结论TFA对肝癌细胞不仅没有辐射保护作用,而且能够增强辐射对肝癌细胞的毒性作用。     

亮叶杨桐总黄酮抑制胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞信号转导抑制因子3和抵抗素的过表达

目的：探讨亮叶杨桐总黄酮对高糖高脂膳食诱导的胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞细胞信号转导抑制因子3（SOCS-3）和抵抗素过表达的抑制作用。方法：大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和亮叶杨桐总黄酮400、200、100 mg·kg^-1·d^-1组,首先以高糖高脂膳食饲喂8周建立胰岛素抵抗大鼠模型,随后灌胃给药并继续高糖高脂膳食饲喂4周。于第12周末检测大鼠空腹血糖、胰岛素与抵抗素水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IRI）的自然对数值,分别以实时荧光RT-PCR与流式细胞术检测脂肪细胞SOCS-3、抵抗素的表达。结果：与正常对照组比较,模型组脂肪细胞SOCS-3、抵抗素过表达,伴空腹血糖、胰岛素与抵抗素水平明显升高。与模型组比较,400,200 mg·kg^-1·d^-1亮叶杨桐总黄酮组的脂肪细胞SOCS-3、抵抗素表达水平显著下调,伴空腹血糖、胰岛素与抵抗素水平明显降低。结论：亮叶杨桐总黄酮可抑制胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞SOCS-3和抵抗素过表达,从而降低空腹血糖、胰岛素与抵抗素水平。     

骨化三醇体外诱导人肝癌细胞IGFBP-3的表达及细胞凋亡的实验研究

目的:探讨骨化三醇[2β-(3一hydro-)-calcitriol]对人肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:应用MTT比色法观察骨化三醇对HepG2的生长抑制作用,以荧光显微镜和流式细胞仪观察HepGz的凋亡,RT-PCR检测骨化三醇处理前后HepG2细胞中胰岛素样生长因子受体结合蛋白-3(IGFBP- 3)mRNA表达水平的变化。结果:骨化三醇显著抑制HepG2细胞的体外增殖,并诱导细胞凋亡。不同浓度的骨化三醇(10-8,10-7,10-6,10-5mol·L-1)作用HepG2 48 h细胞凋亡率分别达(27.3±s 2．3)％,(33±6)％,(35±5)％,(48±7)％,明显高于对照组(8±4)％(P<0．05)。RT-PCR结果显示骨化三醇处理HepG2 24 h后IGFBP-3 mRNA表达水平明显升高。结论:骨化三醇体外显著抑制HepG2增殖并促进其凋亡,其作用机制可能与通过激活细胞内IGFBP-3 mRNA的表达有关。