手足口病患儿176例病原检测及肠道病毒71型基因特征分析

目的研究手足口病(HFMD)病原构成,对引起HFMD的肠道病毒71型(EV71)进行基因特征分析。方法采集2013年6月至8月天津市儿童医院176例临床诊断HFMD患儿的咽拭子标本,应用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测标本中的肠道病毒。选取EV71阳性标本扩增基因的VP1区,测序并比对,构建进化树分析。结果 176例标本中肠道病毒总阳性率为68.8%,其中EV71为32.4%,柯萨奇病毒A组16型(CVA16)为4.0%,EV71和CVA16双阳性为1.7%,其他肠道病毒(EV)28.4%。EV71 VP1区与C4a基因型代表株核苷酸同源性为96.6%~98.9%,氨基酸同源性为98.8%~100%,亲缘进化分析显示本地区EV71与C4a基因型代表株处于同一分支。结论 EV71是2013年天津市儿童医院手足口病住院患儿主要病原,且属于C4a基因亚型。     

2010年昆明地区儿童手足口病的流行特征

目的：调查2010年昆明地区儿童手足口病（HFMD）的流行特征。方法：收集2010年1~12月昆明市儿童医院门诊及住院的HFMD患儿13286例的临床资料进行回顾性分析。这些患儿中包括死亡病例8例、重症病例715例和普通病例12563例。结果：人肠道病毒检出8200例,总阳性率为61.72%,其中人肠道病毒71型（EV71）占29.49%（2418/8200）,柯萨奇病毒A16型（CoxA16）占53.21%（4363/8200）,EV71和CoxA16混合感染占0.91%（75/8200）,肠道病毒其他型占16.39%（1344/8200）。四个季度间人肠道病毒总阳性率差异有统计学意义（P0.05）。结论：2010年昆明地区儿童HFMD以CoxA16感染为主,但感染EV71更易导致重症HFMD,且重症患儿集中在3岁以下儿童;病毒载量与患儿病情无关;全年发病高峰期在第二季度。     

2009至2010年昆明儿童手足口病病原及流行特点分析

目的 对2009至2010年昆明地区儿童手足口病(hand foot and mouth disease,HFMD)病原及流行病学特点进行回顾性总结分析.方法 选择昆明市儿童医院2009年1月至2010年12月门诊及住院诊治的13 286例HFMD患儿为研究对象,采集病程3d内的双份粪便标本于无菌采便杯内,应用荧光定量PCR进行人肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)和肠道病毒通用型(EV)检测,并对阳性病例的年龄分布特点、季节分布情况进行分析.结果 13 286例HFMD患儿中,病原检出阳性病例8 125例,EV71、CoxA16、其他型肠道病毒阳性分别为18.2％(2 418/13 286)、32.8％(4 363/13 286)、10.1％(1 344/13 286),肠道病毒总阳性率为61.1％;EV71和CoxA16混合感染75例,混合感染率为0.9％.～1岁、～3岁、～6岁、＞6岁年龄组病原检测阳性率分别为37.1％ (311/889)、64.7％(5 290/8 178)、62.9％(2 300/3 657)、36.6％(224/612),～3岁、～6岁组病原阳性率高于～1岁、＞6岁组.昆明地区两年中4～6月份均为HFMD发病高峰期,病原阳性检出率最高,其中5月份为发病最高月份,从7月份起病例数有减少趋势,但11月、12月又出现发病高峰趋势,四个季度间病原体阳性率比较差异有统计学意义(x2=1 000.446,P＜ 0.01).结论 2009至2010年昆明HFMD病原感染以CoxA16为主,其次为EV71;3～6岁患儿发病率最高;本地区HFMD四季均可发病,夏季为发病高峰期.     

肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型感染的手足口病患儿的相关特征对比研究

目的：比较由肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CA16）感染的手足口病（HFMD）患儿流行病学情况及临床特征的差异。方法：采集108名临床诊断HFMD患儿疱疹液和咽拭子标本,使用RT-PCR进行肠道病毒检测,对EV71和CA16感染患儿的临床资料进行回顾性分析并比较。结果：108名患儿的肠道病毒总阳性率为97.2%（105/108）,其中EV71、CA16、其他肠道病毒及EV71和CA16混合感染分别占51.9%（56/108）,36.1%（39/108）,1.9%（2/108）,7.4%（8/108）。EV71感染患儿和CA16感染患儿两组间年龄、性别差异无统计学意义。单因素分析显示,CA16感染患儿口腔疱疹、膝部皮疹、流涕的发生比率高于EV71感染患儿。进一步多因素分析显示,出现膝部皮疹的患儿CA16感染可能性大。结论：发现口腔无疱疹、膝部无皮疹、无流涕等症状的HFMD患儿时,应考虑EV71感染的可能。     

血清抗结核抗体检测在结核病诊断中的价值

目的评估血清抗结核脂阿拉伯甘露糖-B(LAM-B)和相对分子质量为38-IgG抗体对儿童结核病的诊断价值。方法采用斑点免疫金渗滤法定性检测235例患儿标本[包括血清207份、脑脊液(CSF)43份、胸水8份、腹水5份、胃液4份]中抗结核LAM-B 相对分子质量为38-IgG。结果血清抗LAM-B 相对分子质量为38-IgG阳性率:非结核病组假阳性率1.96%(2/102);结核组为26.67%(28/105),其中肺内结核组32.14%(18/56),肺外结核组20.41%(10/49),两组血清抗体阳性率差异无显著性(P>0.05);菌检阳性合并组抗体阳性率64.00%(16/25)明显高于菌检阴性组抗体阳性率34.29%(12/35),两组有显著性差异(χ2=5.173P<0.05)。结论血清抗LAM-B 相对分子质量为38-IgG检测对儿童结核病有辅助诊断价值。     

2016年哈尔滨市1~19岁健康人群水痘血清流行病学调查

目的 了解哈尔滨市1~19岁健康人群水痘IgG抗体水平，为完善水痘防控策略提供理论依据。方法 以随机抽样方法在全市范围内选取1 203名1~19岁健康调查对象，按年龄分为1岁~组（n=240）、4岁~组（n=396）、7岁~组（n=364）和14~19岁组（n=203）。采用酶联免疫吸附试验检测血清中水痘-带状疱疹病毒抗体（VZV-IgG）浓度，VZV-IgG浓度≥ 100 mIU/mL判定为阳性，表明调查对象具有抵抗水痘病毒感染的能力。结果 VZV-IgG的抗体阳性率为71.49%（860/1 203），抗体浓度为447±17 mIU/mL。随着年龄增加，VZV-IgG抗体浓度呈上升趋势（P < 0.05）；城市人群抗体阳性率高于农村（P < 0.05）；不同剂次水痘疫苗免疫史人群VZV-IgG的抗体阳性率比较差异有统计学意义（P < 0.05），其中以2剂次免疫史人群的抗体阳性率最高。不同病史人群VZV-IgG的抗体浓度比较差异有统计学意义（P < 0.05），其中以患过水痘人群的抗体浓度最高。结论 哈尔滨市1~19岁健康人群水痘抗体水平存在城乡及年龄差异，需加强薄弱地区和14岁以下人群含水痘成分疫苗的接种工作。     

结核分枝杆菌多抗原蛋白芯片对儿童结核病的诊断价值

目的 探讨结核分枝杆菌(MTB)多抗原蛋白芯片对儿童结核病的诊断价值。方法 选取2005年4月至2006年4月在首都医科大学附属北京儿童医院诊断为结核病的住院患儿作为结核病组。选取同期住院，患感染性疾病，同时除外结核病的患儿作为非结核病组；选取体检纯化蛋白衍生物（PPD）试验阳性，既往无结核病史，无明显结核中毒症状，胸部影像学及腹部B超检查未见结核病灶的儿童作为结核感染组；选取同期行健康体检，卡疤试验阳性，无基础疾病，无结核接触史的儿童为健康对照组。各组留取血清标本。计算结核病组PPD试验阳性率及细菌学检查阳性率。应用MTB多抗原蛋白芯片同时检测标本中脂阿拉伯甘露糖（LAM）、相对分子质量16 000和38 000蛋白IgG抗体，通过蛋白芯片阅读仪判断结果，其中任意1种或1种以上抗体检测阳性，即判为蛋白芯片检测阳性。分别计算各组抗体检测阳性率，并计算该方法检测儿童结核病的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值等指标。应用Logistic回归及χ2检验分析蛋白芯片检测阳性率与患儿年龄、病程、抗结核治疗时间、激素使用以及结核病类型的关系。结果 研究期间共纳入结核病组79例，非结核病组33例，结核感染组15例，健康对照组30例。蛋白芯片检测结核病组的阳性率为34.2%（27/79），低于PPD试验阳性率（84.8%，67/79），高于细菌学检查阳性率（12.7%，10/79）。在非结核病组阳性率为6.1%（2/33），结核感染组和健康对照组阳性率为0。蛋白芯片检测结核病组的灵敏度为34.2%，特异度为97.4%。阳性预测值93.1%，阴性预测值58.5%。Logistic回归发现蛋白芯片检测阳性率仅与病程相关，且随病程延长而阳性率升高。病程<1个月，蛋白芯片检测阳性率为18.8%（6/32），病程在～3个月，蛋白芯片检测阳性率为21.6%（8/37），病程>3个月，蛋白芯片检测阳性率为100%（13/13）。目前的统计结果尚未发现蛋白芯片检测阳性率与患儿年龄、抗结核治疗时间、激素使用情况有显著相关关系。结核病分型不同所造成的蛋白芯片检测阳性率的差异主要是由于其病程分布不同所致。结论 多抗原蛋白芯片对儿童结核病的诊断有一定价值，可作为一种诊断补充手段。但该方法灵敏度较低，不适用于早期诊断。     

苏州地区柯萨奇病毒A16手足口病流行病学、临床特征及OAS1基因多态性研究

目的了解2010—2014年苏州地区柯萨奇病毒A16(CA16)感染手足口病(HFMD)的流行特点、临床特征,以及寡腺苷酸合成酶1(OAS1)基因多态性与CA16感染HFMD的关系。方法收集2010—2014年确诊CA16感染HFMD患儿临床资料,分析其流行病学特点;选取其中167例患儿与同期166例EV71感染HFMD患儿进行临床特征比较;应用Taq Man探针技术检测167例CA16感染、166例EV71感染HFMD患儿及163例健康儿童的OAS1 rs10774671位点,分析该基因位点多态性与CA16感染HFMD的相关性。结果共收治HFMD患儿9 016例,CA16核酸检测阳性762例,检出率8.45%;CA16感染HFMD夏季最多,5岁儿童占94.62%。CA16感染与EV71感染患儿比较,发热时间短,口腔疱疹、溃疡及手足臀皮疹明显,神经系统受累较少;血乳酸脱氢酶、C反应蛋白增高,IgM、IgG升高病例较少,淋巴细胞亚群中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD19+的细胞比例改变明显,差异有统计学意义(P0.05)。CA16感染HFMD患儿OAS1rs10774671基因位点上GG基因型频率明显高于健康对照组(P=0.038);CA16感染HFMD患儿OAS1 rs10774671位点基因型分布与EV71感染患儿比较差异无统计学意义(P0.05);普通组与重型组CA16感染HFMD患儿OAS1 rs10774671位点基因型分布差异无统计学意义(P=0.475)。结论苏州地区CA16感染HFMD疫情的发生与年龄、季节有关;CA16感染HFMD患儿有不同的临床和实验室特征;OAS1 rs10774671位点GG基因型儿童更易感染CA16。     

重症手足口病临床分析

目的总结重症手足口病（HFMD）的临床特征，探讨早期干预措施。方法采用回顾性分析方法，对752例HFMD患儿的相关临床资料进行分析。结果（1）752例患儿中，男512例，女240例，男女之比为2．13：1。发病年龄主要在5岁以下，其中l～3岁最多，占72．07％。（2）大部分患儿热程持续≥3d，出现嗜睡、激惹、惊跳等神经系统表现。（3）粪肠道病毒71型检测阳性609例（80．98％），29例（3．86％）粪柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）阳性，42例（5．59％）为其他肠道病毒阳性，72例（9．57％）未检测出肠道病毒。结论重症及危重症HFMD病例主要是EV71感染，年龄分布主要集中在1—5岁，尤其是1～2岁。对于HFMD患儿应严密监测生命体征，早期发现危重病例，早期干预，以降低病死率，改善患儿预后。     

3022例儿童乙型肝炎表面抗体检测结果分析

目的：观察儿童乙型肝炎表面抗体（HBsAb）阳性率情况。方法对2009~2011年3022例在门诊行健康体检的儿童采用酶联免疫法进行乙肝血清学检测,分析HBsAb阳性率。结果HBsAb阳性率随年龄增高而降低（P0.05),但1岁~组男孩HBsAb阳性率低于女孩(P<0.01),而3~＜4岁组男孩HBsAb阳性率高于女孩(P<0.01)。男孩组中HBsAb阳性率随年龄增高而降低,2岁~组男孩HBsAb阳性率低于1岁~组（P<0.01）;女孩组中HBsAb阳性率亦随年龄增高而降低,且各年龄组之间两两比较差异均有统计学意义（均P<0.01）。结论HBsAb阳性率随儿童年龄增高而降低,且低龄儿童是感染乙型肝炎的高危人群,需要加强乙肝血清学监测。     

肠道病毒71型手足口病121例临床分析

摘要：目的　 分析肠道病毒71型（EV71）感染所致手足口病的临床特征。方法　回顾性分析2010 - 05 - 01—2010 - 08 - 31日温州医学院附属育英儿童医院121例EV71感染所致手足口病的住院患儿病例资料。比较重型组和危重型组的临床表现及辅助检查资料。 结果（1）危重型组较重型组患儿高热明显（P = 0.002）、皮疹不典型（P = 0.000）;（2）120例（99.17%）EV71阳性患儿累及神经系统,主要表现有萎靡（84.30%）、频繁呕吐（65.30%）、肢体抖动（60.33%）和睡眠障碍（53.72%）、查体发现膝反射异常（52.07%）;（3）危重型组呕吐、神志不清、肌张力异常、心率异常、血压异常、毛细血管充盈时间（CRT） > 3 s、呼吸急促或呼吸困难、胸片提示有肺部渗出性病变的发生率显著高于重型组（P < 0.01）;（4）51例（42.15%）患儿外周血白细胞总数（WBC） > 12 ×109/L或者 < 4×109/L;52例（42.98%）患儿血糖 > 6 mmol/L,22例（18.18%）肌钙蛋白-I（cTnI）升高,危重型组的这3项指标与重型组比较差异均有统计学意义（P = 0.000）。 结论 EV71感染所致手足口病多累及神经系统,高热、皮疹不典型、频繁呕吐、神志改变、肌张力异常、心率异常、血压异常、毛细血管充盈时间（CRT） > 3 s、呼吸急促或呼吸困难及肺部渗出性病变是手足口病重型患儿进展为危重型的高危因素。     

陕西省26例危重型手足口病的病原学特点及临床分析

目的 分析2010年陕西省危重型手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)患儿病原学及临床特点.方法 回顾性分析2010年3月至9月我院收治的26例危重型HFMD患儿的临床资料.采用反转录实时定量PCR方法检测其中20例危重患儿的咽拭子肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)及柯萨奇病毒A组16型的核酸,选择6个不同地区EV71阳性标本进行VP1全长基因扩增、测序,与国内其他地区毒株进行比较.结果 20例受检患儿中,EV71感染18例,2例为阴性.发病地区:渭南20例(76.9％),成阳地区4例,西安市区2例.6株EV71 VP1基因全长序列与安徽阜阳、我国香港、广州、深圳、山东、北京比较,同源性达96％～100％.危重型HFMD多发生于3岁以下患儿,男性多于女性,所有患儿伴持续高热、精神差、易惊、嗜睡、肢体抖动,外周血白细胞、C反应蛋白及血糖均明显升高,肾损伤少见.临床痊愈出院18例,其中遗留有肢体活动障碍2例,死亡8例.结论 陕西危重型HFMD以渭南地区高发,且以EV71感染为主,与我国其他地区EV71有高度同源性.危重型手足口病病情凶险,早期识别、早期干预可缓解病情,是降低病死率的关键.     

2008年广州地区手足口病的病原学研究

目的 了解广州地区2008年5～6月份手口足病的病原.方法 设计肠道病毒71型、柯萨奇病毒A16型和肠道病毒属通用实时荧光RT-PCR引物和TaqMan探针,运用TaqMan实时荧光RT-PCR技术,对2008年5至6月,到广州市儿童医院就诊的疑似手足口病患儿咽拭子标本1023例(份),同时分别进行肠道病毒属、肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型检测.对肠道病毒属荧光RT-PCR检测阳性.而肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型荧光RT-PCR检测阴性的标本进行5'非编码区(Untranslated Region UTR)的扩增和序列测定.结果 在1023份临床标本中,肠道病毒属阳性434例,检出率为42.42%.其中,肠道病毒71型276例,柯萨奇病毒A16型126例,肠道病毒84型4份,埃可病毒11型3例,埃可病毒9型2例,柯萨奇病毒B3型3例,柯萨奇病毒A10型4例,柯萨奇病毒A6型3例,柯萨奇病毒A12或A5型6例,另有7例难以区分型别,没有混合感染.结论 2008年5～6月广州地区手足口病的主要病原是肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型,并有肠道病毒84型、柯萨奇病毒A10型、柯萨奇病毒A12型、柯萨奇病毒A6型、柯萨奇病毒B3型、埃可病毒11型、埃可病毒9型等小部分其他型别肠道病毒感染.     

手足口病病原体流行特征分析及临床意义

目的 比较2008和2009年,手足口病流行期间(5至9月),我院手足口病病原体流行特征,分析重症与普通手足口病患儿相关因素差异,为手足口病特别是重症患儿的预警与诊治提供参考.方法 收集2008和2009年,流行期间我院就诊的手足口病患儿154例为研究对象,其中重症28例,并收集同期疱疹性咽炎患儿80例作对照;用荧光定量RT-PCR法进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)定量分型.结果 154例手足口病患儿肠道病毒总阳性率为81.82%(126/154),其中EV71占57.14%(72/126),80例疱疹性咽炎肠道病毒总阳性率为68.75%(55/80),EV71为0例;手足口病2008年以EV71流行为主,2009年以EV71和CA16流行为主,两年患儿肠道病毒株流行特点差异有统计学意义(X2=23.50,P=0.000)(P＜0.01).重症与普通手足口病患儿肠道病毒株流行分布特征差异有统计学意义(X2=29.85,P=0.000)(P＜0.01),手足口病重症病例EV71阳性率92.86%(26/28),明显高于普通病例36.51%(46/126)(X2=29.22,P=0.000)(P＜0.01);EV71阳性手足口病患儿中重症组与轻症组在性别(x2=0.135,P=0.714)和病毒载量(t=0.141,P=0.889)差异没有统计学意义,而年龄差异有统计学意义(t=2.926,P=0.009),重症组患儿年龄小于2岁占88.89%(8/9),普通组患儿平均年龄为3.19岁..结论 手足口病在不同时期的肠道病毒感染往往呈现不同的流行特点,手足口病重症患儿与普通患儿可能在性别和病毒载量上没有差异,年龄小于3岁的EV71阳性手足口病患儿已成为重症病例的危险因子.     

深圳237例手足口病肠道病毒血清型基因及临床特征

目的：了解该地区手足口病临床和流行病学特征，明确其肠道病毒血清型分布。方法：分别在肠道病毒基因组5’端非编码区，CAV16和EV71 VP1区设计通用引物和特异性引物，建立RT-nPCR检测方法，对手足口病病人进行肠道病毒基因检测，鉴别其血清型，根据血清型不同比较其临床特征。结果：237例手足口病均有口腔黏膜疹和手足皮疹，发热141例（59.5%），低热为主，6岁以下占94.5%，以春夏季节为多（67.9%）。肠道病毒通用引物RT-nPCR检测阳性133例（56.1%），其中EV71 38例，CAV16 64例，二者均阴性31例。12株肠道病毒PCR阳性产物基因克隆、测序，证实分别为EV71 5株、CAV16 5株、ECHO13 1株、CAV5 1株。结论：手足口病病原体以EV71和CAV16为主，另有CAV5，ECHO13，临床症状与肠道病毒血清型关系不大。     

2002年上海儿童手足口病病例中肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型的调查

目的对上海地区2002年4—6月儿童手足口病流行期间的手足口病患儿进行病原学调查。方法采集手足口病患儿的疱疹液、粪便、咽拭子进行病毒分离;分别用肠道病毒组合血清、肠道病毒71型（EV71）单价血清和柯萨奇病毒A组16型（CA16）单价血清对分离到的病毒进行中和试验定型;对不能定型的病毒株再分别用EV71和CA16的VP1基因的特异性引物进行RT-PCR鉴定。结果从72例患儿共采集102份标本,由其中67例患儿的91份标本分离到病毒;所有分离到的病毒株均不能用血清学方法进行定型;进一步经RT—PCR检测,58例为CA16,9例为EV71,二者之比为6．4：1;其中2例的EV71病毒株经中国疾病预防控制中心进行序列分析,认为属新的C4基因亚型;在EV71阳性病例中1例并发脑炎,出现抽搐、休克、昏迷、呼吸衰竭。结论从该组手足口病患儿检测到的主要病原是CA16和EV71;在上海地区首次报道与EV71感染相关的手足口病合并重症脑炎病例。     

重庆单中心手足口病分子流行病学特征分析

目的 了解2014年重庆地区手足口病的流行特点和分子生物学特征。方法 收集2014年重庆医科大学附属儿童医院门诊传染病报卡的手足口病病例和住院的手足口病病例,描述性分析其流行病学特征;对住院并采集了粪便标本的手足口病病例,以RT-PCR方法行肠道病毒DNA扩增和鉴定并测序分型,构建系统进化树行分子流行病学分析。结果 19 207例手足口病患儿进入流行病学特征分析,男:女为1.5:1,以散居及幼托为主（97.9%）,发病中位年龄2.1岁(1 d至17岁),5岁以下患儿占94.2%;呈现4～6月和9～12月2个流行高峰,分别占全年发病的36.9%和52.8%。364例住院且行病原学检测阳性的手足口病病例进入病原学和分子流行病学分析,其中239例为重症病例,EV71感染占64.4%;单纯EV71 195例(53.6%)、单纯CA16 18例(4.9%)、单纯CA6 23例(6.3%)、单纯CA10 6例(1.6%)、混合感染45例(12.4%)、其他肠道病毒77例(21.1%);EV71在1～6月检出率高,CA6在9～12月检出率高,EV71/CA6混合感染占9.3%。病毒序列分析显示2014年重庆地区分离到的EV71属于C4a亚型,CA16为B1b亚型,CA6与日本及西班牙等地的代表菌株同源性较高,CA10与中国其他地区流行株同源性较高。结论 2014年重庆地区手足口病流行呈双峰模式,发病人群以5岁以下散居及幼托儿童为主。手足口病流行的病毒株为EV71 C4a亚型和CA16 B1b亚型。