金标试纸法与ELISA法检测无偿献血者HBsAg结果比较

我国正常人群乙肝表面抗原(HBsAg)携带者一般为10%～15%,在流动无偿献血现场采血时如何快速筛查出HBsAg阳性者,对节省血液资源十分重要,我站实施无偿献血流动采集1年多来的经验是应用金标试纸现场检测,筛除HBsAg阳性者,并与ELISA法检测结果进行比较并分析金标试纸法现场快速筛查HBsAg的可靠性。     

加酶时间对ELISA定性测定HBsAg的影响

目的探讨加酶时间对酶联免疫吸附试验(ELISA)一步法定性测定HBsAg的影响程度,及加酶前后反应的差异。方法1加酶时间分别设为加样后0,5,10,15,20min,温育时间为30min,检测阴性血清和HBsAg为0.2,0.5,1,2,50,1000ng/ml的定值质控血清,观察这些条件下标本测定S/CO比值的差异;2同时作"一步法"与"二步法"对照检测,比较两种测定方法S/CO比值的差异。结果1随着加样后加酶时间的延长,弱阳性标本结果越明显;2弱阳性标本检测结果"一步法"S/CO比值明显低于"二步法"。结论1加酶时间对ELISA一步法定性测定HBsAg弱阳性标本结果有较大影响;2弱阳性标本的检测"二步法"优于"一步法"。     

献血者HBsAg ELISA检测屏蔽界限值研究

目的建立酶联免疫吸附法(ELISA)对献血者进行乙肝表面抗原(HBsAg)检测的高特异性S/CO屏蔽界限值。方法对783份HBsAg ELISA反应性标本和588份非反应标本,采用HBsAg化学发光法和中和实验确认检测。根据确认检测结果和ELISA检测S/CO值建立受试者工作特征曲线(ROC曲线),确定95%和99%特异度对应的S/CO界限值。另选择124份HBsAg ELISA反应性标本对设定的屏蔽界限值进行验证,同时以乙肝五项化学发光发检测结果作为补充,判断屏蔽界限值的实用性。比较不同实验室采用相同试剂设定的99%特异度对应的HBsAg ELISA检测S/CO界限值。结果该实验室采用的2种ELISA试剂95%特异度对应的S/CO界限值分别为0.24和0.65,99%特异度对应的S/CO界限值分别为3.89和3.62,将99%特异度对应的S/CO界限值设定为该实验室献血者屏蔽界限值。验证实验证实,大于或等于试剂1和试剂2屏蔽界限值的标本均为HBV感染标本。与该实验室采用相同HBsAg ELISA检测试剂的3家实验室,试剂1的99%特异度对应S/CO界限值分别为3.77、3.60、13.42,试剂2分别为27.73、31.75、1.17。结论该研究建立的献血者HBsAg ELISA检测屏蔽界限值可在该实验室有效甄别出真阳性献血者,有助于减少进入归队流程的献血者数量。即使采用相同的ELISA检测试剂,不同实验室也不适用统一的献血者屏蔽界限值。     

ELISA检测HBsAg复检结果的分析

由于酶联免疫吸附试验(ELISA)测定过程中影响因素较多,为了提高乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的检测质量,我院已经对HBsAg初检临界状态的标本建立了复检制度,现就积累的实验结果作分析。     

ELISA检测HBsAg复检结果的分析

由于酶联免疫吸附试验(ELISA)测定过程中影响因素较多,为了提高乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的检测质量,我院已经对HBsAg初检临界状态的标本建立了复检制度,现就积累的实验结果作分析。一、材料和方法1 .材料　1 998年1月～2 0 0 2年1 2月间体检人员的血液标本共376 0 2例;∑96 0酶标仪;科华公司HBsAg酶免试剂盒。2 .方法　按照试剂盒说明书进行操作,用∑96 0酶标仪读数,我们将HBsAg初检临界状态的标本[吸光度(A)值0 .0 70～0 .2 0 0 ]置4°C冰箱保存,于次日进行HB sAg的复检,复检时做双孔(初检时溶血的标本,复检重新采血,均无溶血) ,…     

CLIA和ELISA检测血清HBsAg及HBsAb的结果比较

目的比较化学发光免疫分析(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg及HBsAb的结果。方法采用CLIA法和ELISA法测定定值血清中的HBsAg和HBsAb,并对两种结果进行比较和分析。结果测定HBsAg时,ELISA法的批内CV:1IU/ml为9.6%,2IU/ml为7.3%,批间CV:1IU/ml为17.8%,2IU/ml为15.1%,灵敏度为0.25IU/ml,CLIA法的批内CV:1IU/ml为2.33%,2IU/ml为1.07%,批间CV:1IU/ml为6.57%,2IU/ml为3.78%,灵敏度为0.063IU/ml。HBsAb测定时,ELISA法的批内CV:10mIU/ml为11.8%,20mIU/ml为8.7%,批间CV:10mIU/ml为18.6%,20mIU/ml为15.9%,灵敏度为10mIU/ml,CLIA法的批内CV:10mIU/ml为4.79%,20mIU/ml为3.52%,批间CV:10mIU/ml为7.58%,20mIU/ml为6.13%,灵敏度为2.5mIU/ml。结论 ELISA法敏感度相对低,精密度差;CLIA法灵敏度高,精密度好,且自动化程度高,检测更快速,更适合于临床。     

ELISA法检测HBsAg(CMIA)低值血清样本的结果分析

目的 通过对HBsAg低值血清样本的检测,评价ELISA方法的检测性能。方法 收集化学发光法(CMIA)检测结果为0.05～9.99IU/ml的HBsAg低值血清样本305份,采用ELISA方法进行复孔检测。结果 HBsAg低值样本占HBsAg阳性样本的18.12%,主要分布于中老年人群。ELISA方法的总检出率为87.87%,其中0.05～0.11,0.12～0.20,0.21～0.50,0.51～1.00,1.01～5.00 IU/ml和5.01～9.99 IU/ml水平的检出率分别为36.00%,61.11%,78.38%,84.62%,99.11%和100.00%,各水平检出率之间差异有明显统计学意义(χ²=99.84,P=0.000)。ELISA方法检测HBsAg低值样本的S/CO结果与CMIA方法检测结果存在较高的相关性(r=0.874,P=0.000)。结论 ELISA方法检测HbsAg低值血清存在漏检的情况,临床实验室应根据实验目的合理选择实验方法。     

血清标本的质量对ELISA法检测HBsAg结果的影响

ELISA法检测HBsAg是目前常用的方法之一。但实验操作中各个环节对实验结果影响较大。我们通过对大批量标本进行HBsAg的筛查，发现血清标本的质量对检测结果的影响较大，特别是对弱阳性结果的影响更为明显。本文通过对弱阳性结果标本的重新测试，探讨标本质量对ELISA结果的影响。     

ECLIA和ELISA检测血清HBsAg的结果比较

目的 比较电化学发光免疫分析(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg结果。方法 采用ECLIA一步法和ELISA一步法、二步法测定定值血清中的HBsAg；用ELISA一步法和二步法检测经ECLIA筛选的190例HBsAg模式如下的临床标木：①HBsAg光放射强度(COI)在1～20，20例；②HBsAg COI在21～4000，160例；③HBsAg COI大于4000，6例；④HBsAg阴性(其COI值小于1)，HBeAg和HBcAb阳性4例。结果 ELISA一步法灵敏度为1ng／ml，二步法灵敏度为0．2g／ml，ECLIA灵敏度为0．05ng／ml。存190例临床标本中，ELISA一步法阳性检出率为84．2％，二步法阳性检出率为92．6％，ECLIA阳性检出率为97．4％。结论 ELISA一步法受钩状效应(hook effect)影响明显，敏感度低，HBsAg漏检明显：ELISA二步法能较好地避免钩状效应，敏感度较高，HBsAg漏检率较低，但费时：而ECLIA灵敏度高，受HOOK效应影响较小，HBsAg漏检率低，且自动化程度高，检测时间短。     

ELISA法检测HBsAg影响结果的重要因素的分析

目的确定温育温度、时间和条件对定性酶联免疫吸附试验（ELISA）测定结果的影响，为临床检验提供最佳方案。方法温育温度分别设为37℃组和室温组。37℃组温育时间分别为45分钟、60分钟、75分钟、90分钟和120分钟。其中室温组温育中又分别采用振荡和静置两种条件，温育时间分别为45分钟、1小时、2小时和4小时。检测阴性血清和0．2、0．5、1、2、5ng／ml HBsAg系列定值血清，观察这些条件下标本测定S／CO比值的差异。结果在同一温育温度下，所有被检血清的S／CO比值均随着测定温育时间的延长而增大，浓度越低表现越为明显，以0．2ng／ml的样本，温育2小时的S／CO比值与温育1小时相比，均有明显的增加，0．2ng／ml的样本由按CUT-OFF值判断为阴性而转为阳性。对照组阴性血清的S／CO比值在温育各时间则变化不大。室温组在振动状态下反应较之静止状态下的反应，S／CO比值均有明显增加。结论温育条件对ELISA测定结果有很大影响，尤其是弱阳性标本，由于温育条件不当会造成假阴性，增加传染机率。     

血标本制备对全自动酶标检测HBsAg结果的影响

目的　探讨血液标本制备对全自动酶标检测HBsAg结果的影响 方法酶联免疫试剂检测结果血液标本不同处理后自动与手工测定HBsAg、抗 HCV、抗 HIV(1 +2 )比较 ,发现经全自动检测后出现的假阳性机率与其它组相比大大提高 ,但手工检测初检与复检结果一致无假结果出现结论造成HBsAg假阳性的原因①洗板头不干净 ,②气泡问题     

HBsAb阳性对酶标法HBsAg检测的影响

目的探讨乙型肝炎表面抗原(HBsAg)假阴性的产生及预防方法。方法应用全自动加样仪(ML-AT plus-Sampler),使加样针在不同的清洗次数下,同时加样12份含不同浓度HBsAb标本和12份含不同浓度HBsAg不同OD值标本,分别应用ELISA二步法检测HBsAg,观察其吸光度的变化。结果 12份含HBsAg标本在清洗次数逐渐减少的情况下,OD值都有不同程度的下降。HBsAb强阳性标本对OD值影响很大,在只清洗3次的情况下,HBsAg弱阳性标本开始出现假阴性;在不洗涤也不擦拭的情况下,4份HBsAg弱阳性出现假阴性。结论高浓度的乙型肝炎表面抗体会引起HBsAg检测结果假阴性;使用一次性加样枪头,可避免假阴性。     

两种酶联免疫吸附法检测乙肝表面抗原的结果比较

目的 比较乙肝表面抗原-酶联免疫吸附试验一步法(简称一步法)和乙肝表面抗原-酶联免疫吸附试验二步法(简称二步法)检测乙肝表面抗原(HBsAg)的结果,研究钩状效应对一步法检测HBsAg结果的影响,评价二步法检测HBsAg的应用价值.方法 分别用一步法和二步法检测1200份无偿献血者初检标本,并用一步法(稀释法)检测怀疑存在钩状效应的标本6份.结果 一步法检测出29份HBsAg阳性,二步法检测出35份HBsAg阳性,6份一步法检测结果阴性怀疑存在钩状效应的标本进行1∶5、1∶10、1∶30、1∶60倍稀释后,再采用一步法进行检测,分别有6份、6份、4份、3份结果转为阳性.结论 采用二步法或一步法同时对标本进行一定倍数稀释后检测,可以克服钩状效应,提高检测的敏感度.     

不同保存处理对尿标本AD7C-NTP检测结果的影响研究

目的探讨不同保存条件和保存时间对尿液标本阿尔茨海默病(AD)相关神经丝蛋白(AD7C-NTP)检测结果的影响。方法于2015年10月至2016年1月,选取AD确诊患者50例,留取尿液标本,按不同保存条件分为室温保存组、4℃保存组、-20℃保存组,分别于不同时间检测AD7C-NTP水平;同时在4℃保存组和-20℃保存组分别加入防腐剂,在不同时间检测AD7C-NTP水平。结果室温保存组和4℃保存组标本保存3d内,检测结果与初始检测值比较差异无统计学意义(P0.05);7d后,4℃保存组检测结果与初始检测值比较差异无统计学意义(P0.05);-20℃保存组保存1d后,检测结果与初始检测值比较差异有统计学意义(P0.05)。加入防腐剂后,4℃保存组检测结果稳定性不及未加防腐剂组,-20℃保存组检测结果过稳定性增加,但检测偏差仍超过可接受范围。结论 4℃不加防腐剂是用于检测AD7C-NTP水平的尿标本最理想保存条件。     

标本溶血对生化检验结果的影响

目的：探讨标本溶血对生化检验结果的影响。方法：用日立7020全自动生化分析仪检测20份正常人血液标本溶血前和溶血后的谷丙转转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ－谷氨酰转肽酶（γ－GT），总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、尿素氮（BUN）、肌肝（CRE）、尿酸（UA）、葡萄糖（Glu）、胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、载脂蛋白－A（APo-A）、载脂蛋白－B（APo-B)、高密度胆蛋白（DHL－C）、钙（Ca)、乳酸脱氢酶（LDH）的值，并进行了比较和统计分析。结果：ATL、AST、ALP、γ－GT、TBIL、DBIL、CRE、GLu,Apo-B、LDH的值在溶血前后有非常显著性差别（P＜0．001），APo-A的值在溶血前后有显著性差别（P＜0．05），其中，ALT、AS、TBIL、DBIL、LDH的值溶血后比溶血测得的值高，ALP、γ－GT、CRE、GLu、APo-A,APo-B的值溶血后比溶血前测得的值低，而TP、ALB、BUN、DHL－C、CHO、TG、Ca、UA的值在溶血前后则无显著性差别（P＞0．05）。结论：溶血对较多的生化检验项目有明显的干扰影响，其机制有多种原因，应尽量避免或减少标本的溶血，使检验结果更准确可靠。     

血液保养液对ELISA检测HBsAg结果的影响及改进措施

目的探讨CPD血液保养液对ELISA法检测HBsAg结果的影响。方法用CPD血液保养液和小牛血清分别将1ng／ml HBsAg阳性物稀释成不同浓度,每个浓度用ELISA方法进行一次平行对照实验（双孔检测取均值）,共检测20次,比较两者的检测结果。结果（1）两组不同的HBsAg阳性混合物的S／CO值均随着HBsAg阳性物的浓度降低而降低,但降低趋势不同;（2）在HBsAg阳性物浓度相同的情况下,两组不同的HBsAg阳性混合物的S／CO值的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论（1）ELISA检测系统对CPD血液保养液稀释的HBsAg阳性混合物的变化敏感;（2）CPD血液保养液对ELISA实验有明显影响。     

ELISA检测592例乙肝表面抗原复检结果的分析

目的总结分析592例ELISA手工检测乙肝表面抗原的复检结果特点,进一步提高ELISA手工检测的质量。方法以0．7≤S／CO〈10作为复检范围,从67070例ELISA手工检测HBsAg的结果中筛选出592例进行复检,两次结果一致则报告结果;如不一致则再次ELISA复检或采用MEIA进行复检,以两次一致的ELISA或MEIA结果报告。分析初检时造成假阳性或假阴性结果的原因。结果按照2007年上海市临床检验中心复检要求,以0．7≤S／CO〈2为复检范围,复检率为0．48％（325／67070）;本实验室扩大复检范围,以0．7≤S／CO〈10为复检范围,复检率为0．88％（592／67070）,初复检结果符合率为65．88％（390／592）,初检假阴性率为1．35％（8／592）,初检假阳性率为32．77％（194／592）。结论严格遵守操作规程,根据实验室实际情况扩大复检范围,确保实验结果准确性。     

ECLIA和ELISA检测血清HBsAg的结果比较

目的 比较电化学发光免疫分析(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg结果。方法 采用ECLIA一步法和KLISA一步法、二步法测定定值血清中的HBsAg:用ELISA一步法和二步法检测经ECLlA筛选的190例HBsAg模式如下的临床标本：①HBsAg光放射强度(COI)在1-20，20例；②HBsAg COI在21-4000、160例；③HBsAg COI大于4000、6例；④HBsAg阴性(其COI值小于1)，HBeAg和HBcAb阳性4例；结果 ELISA一步法灵敏度为1ng／ml．二步法灵敏度为0．2ng／ml、ECLIA灵敏度为0．05ng／m1；在190例临床标本中。ELISA一步法阳性检出率为84．2％，二步法阳性检出率为92．6％．ECLIA阳性检出率为97，4％：结论 ELISA一步法受钩状效应(hook effect)影响明显，敏感度低。HBsAg漏检明显：ELISA二步法能较好地避免钓状效应，敏感度较高，HBsAg漏检率较低，但费时：而ECLIA灵敏度高．受HOOK效应影响较小、HBsAg漏检率低，且自动化程度高，检测时间短。     

ELISA试验加样误差对试验结果的影响分析

目的评价不同程度加样误差对ELISA试验结果的影响。方法分别在标准加样量基础上递减1、2、3、4μL和递增1、2、3μL进行加样,比较加样差异对HBsAg、HCV和TPELISA检测结果的影响。结果随加样量的增加,S／CO值呈上升趋势,HBsAg和TP（除＋3组）与对照组的平均S／CO值比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;各组S／CO值虽存在差异,但差异无统计学意义（P〉0．05）。HCV的-2、-1、＋1组S／CO值虽存在差异,但差异无统计学意义（P〉0．05）;而-4、-3组和＋2、＋3组与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。各试验组平均阳性率差（与对照组相减的绝对值）随标准加样最的减少呈增大趋势,HBsAg、HCV、TP加样量不足和加样过量的试验组之间的平均阳性率差相比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论加样误差对ELISA试验S／CO值和阳性率造成不同程度的影响,其影响程度随标准加样量的减少呈增大趋势。