肺炎支原体抗体和载量指数在儿童肺炎支原体肺炎诊断中的应用

目的 评估肺炎支原体载量指数（MPLI）与血清总抗体在MP 肺炎诊断中的价值。方法 选取115 例肺炎支原体肺炎患儿和400 例健康儿童为研究对象,荧光定量PCR 与被动凝集法检测MP 肺炎患儿不同病程阶段的MP-DNA 及总抗体水平,并计算MPLI。结果 肺炎支原体肺炎患儿的MPLI 临界值为6.12。MPLI和MP 总抗体滴度均随病程升高,MP-DNA 则随病程迅速下降;MP-DNA 载量较高组的总抗体滴度显著高于MP载量较低组（P P 结论 MPLI 提供了标准化的MP-DNA 定量值,对肺炎支原体感染的早期诊断有重要价值。     

三种方法对儿童肺炎支原体感染诊断的动态评价

目的评价荧光定量PCR(FQ-PCR)检测肺炎支原体(MP)-DNA(MP-DNA),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MP-IgM,以及MP快速培养三种方法对儿童MP感染诊断的临床价值。方法对经临床和实验室诊断MP感染的患儿同时进行三种方法检测。并分别在病程1、3个月时重复检测。结果 MP感染患儿共153例。入院时首次检测,FQ-PCR阳性率为96%,ELISA为71%,MP快速培养法为24%。其中MP快速培养法的检出率在≤3岁组明显高于>3岁组,差异有统计学意义(P<0.05)。随访至1个月时,MP-DNA检测结果仍有50%以上阳性,而MP-IgM则保持较高的阳性率,此时仍然有44例(29%)患儿存在咳嗽,其中28例(64%)MP-DNA和MP-IgM均为阳性。随访至3个月时有4例(3%)患儿仍存在咳嗽,2例(50%)MP-DNA和MP-IgM均为阳性。结论在三种诊断儿童MP感染的方法中,FQ-PCR检测MP-DNA最敏感,其次为ELISA检测MP-IgM抗体,MP快速培养敏感性最低。MP-IgM检测阳性率至3个月时仍然维持较高水平。     

荧光定量PCR及血清IgM检测对儿童肺炎支原体中枢神经系统感染诊断价值的研究

目的研究荧光定量PCR及特异性抗体MP-IgM检测在儿童肺炎支原体(MP)中枢神经系统感染早期诊断及疗效评估中的作用。方法利用荧光定量PCR检测非化脓性中枢神经系统感染儿童血及脑脊液中MP-DNA量,并与血及脑脊液中MP特异性抗体(MP-IgM)检测阳性结果比较。结果(1)在262例非化脑患儿不同的年龄组中,各组脑脊液MP-DNA的阳性率均明显高于脑脊液MP-IgM的阳性率(P<0.05)。在3岁以下患儿组中,血MP-DNA阳性率显著高于血MP-IgM的阳性率(P<0.05),而3岁以上各组中两种方法阳性率无显著差异(P>0.05)。(2)在重症MP中枢神经系统感染患儿其脑脊液及血MP-DNA的拷贝数均较轻症者明显升高(P<0.01)。(3)MP中枢神经系统感染患儿急性期脑脊液及血MP-DNA的拷贝数明显高于恢复期(P<0.01)。结论荧光定量PCR法可作为早期快速诊断儿童(尤其3岁以下患儿)MP中枢神经系统感染的方法,并且为评估病情轻重及疗效提供可靠依据。     

荧光PCR和定量ELISA在呼吸道肺炎支原体感染诊断中的应用

目的 探讨定量ELISA和荧光PCR方法在呼吸道肺炎支原体(MP)感染中的临床应用和意义.方法 选取于2006年1月-2008年12月因急性呼吸道感染住院治疗的患儿3 958例,进行多种病原联合检测.应用定量ELISA和荧光PCR检测血清特异性抗体和痰液特异性核苷酸序列,明确MP感染;同时检测151例患儿家属血清MP特异性抗体.结果 PCR检测阳性率为8.9%;单份血清ELISA检测阳性率为23.24%,双份血清的阳性率为37.18%;PCR与EUSA联合检测阳性率为31.07%.血清ELISA阳性率显著高于痰PCR-DNA阳性率,PCR和ELISA的一致性较差.MP感染阳性率随年龄的增长而增加.不同疾病MP感染阳性率也不同,毛细支气管炎最低(9.04%),大叶性肺炎患儿MP感染阳性率高达72.55%.MP感染与肺炎衣原体感染存在正相关,而与RSV感染存在负相关.患儿和家属之间存在交叉感染.结论 MP是儿童呼吸道感染的主要病原体之一.定量ELISA和荧光PCR均适合临床应用,联合应用有利于作出早期诊断、进行合理治疗.     

肺炎支原体RNA检测在儿童肺炎支原体肺炎疗效监测中的应用价值

目的 探讨应用肺炎支原体RNA检测（RNA实时荧光恒温扩增技术,MP-SAT）作为儿童肺炎支原体肺炎（MPP）治疗效果监测指标的可行性和应用价值。方法 纳入北京市平谷区妇幼保健院住院的社区获得性肺炎患儿,其中符合MPP诊断标准者为MPP组,余为非MPP组。①以血清肺炎支原体（MP）抗体（MP-Ab）检测为诊断MP感染的参照试验,考察MP-SAT诊断MP感染的敏感度和特异度。②对MP-SAT和血清MP-Ab均阳性MPP病例行动态观察,比较MP-SAT和血清MP-Ab在大环内酯类药物标准治疗不同时间的阳性率, MP-SAT转阴时间和临床痊愈时间。③比较不同MP-SAT转阴时间MPP病例发热时间、入院24 h内血常规（WBC、N、L）,超敏C反应蛋白(hs-CRP)和血清乳酸脱氢酶（LDH）及胸部X线指标的差异。结果 MPP组73例,非MPP组150 例。MP-SAT诊断MP感染的敏感度和特异度分别为83.6%（61/73）、97.3%（146/150）。MPP组MP-SAT和血清MP-Ab均阳性61例,随治疗时间的延长,MP-SAT阳性率显著降低（P<0.05）,而血清MP-Ab的阳性率呈增高趋势（P<0.05）。61例临床痊愈时间平均为(3.0±0.9)周,MP-SAT转阴时间为（3.3±0.8）周,差异无统计学意义（P＞0.05）。 MP-SAT转阴时间越长的病例表现为发热持续时间越长,入院24 h内中性粒细胞百分比、CRP、LDH水平越高,X线胸片大片实变比例越高,淋巴细胞百分比越低 (P<0. 05)。结论 MP-SAT可作为评价MPP 转归以及判断大环内酯类药物疗效的指标。     

儿童支气管哮喘与肺炎支原体感染的关系

目的探讨儿童支气管哮喘与肺炎支原体（MP）感染的关系。方法采用MP被动冷凝集法检测哮喘急性发作期103例及对照组非感染性疾病患儿30例血清肺炎支原体抗体（MP-Ab）。MP-Ab阳性患儿随机分为阿奇霉素治疗组和常规治疗组,比较其疗效。结果哮喘组MP-Ab阳性46例,阳性率44.66%;对照组阳性2例,阳性率6.67%,二组比较差异显著（P〈0.05）;MP-Ab阳性阿奇霉素治疗组30例,有效率86.7%;常规治疗组16例,有效率43.8%,二组比较差异显著（P〈0.05）。结论MP感染与儿童哮喘关系密切,对哮喘发作期患儿要考虑MP感染可能,应常规行MP-Ab检查。大环内酯类抗生素疗效确切。     

呼吸道吸出物MP-DNA检测对儿童肺炎支原体肺炎诊断的临床意义

目的 探讨鼻咽抽吸物(NPA)和肺泡灌洗液(BALF)中肺炎支原体(MP)-DNA 检测对儿童MP 肺炎(MPP)诊断的意义。方法 收集164 例MPP 患儿入院24 h 内的NPA 及BALF,荧光定量PCR 法检测MP-DNA;同时在入院24 h 内及治疗7~10 d 病情好转时采集所有患儿静脉血,ELISA 法检测血清特异性MPIgM。结果 164例患儿NPA的MP-DNA阳性检出率为51.8%,低于双份血清MP-IgM阳性检出率(63.4%)(P=0.044),两者检出一致性中等(Kappa=0.618,PP>0.05),两者检出一致性好(Kappa=0.793,PPKappa=0.529,PPPP结论 BALF 中MP-DNA 检出敏感性高,对临床早期诊断MPP具有重要意义;而NPA MP-DNA 检测可能会引起漏诊。     

新乡市小儿肺炎支原体、肺炎衣原体感染情况

目的分析新乡市儿童肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CPn)感染情况。方法选取符合肺炎诊断标准的308例患儿,应用胶体金法行血MP-IgG、CPn-IgG、MP-IgM及CPn-IgM抗体检测,并对所有病例的临床资料进行统计学分析。结果 308例肺炎患儿中检出MP、CPn阳性病例80例(其中混合感染9例);婴儿组与儿童组、幼儿组与儿童组感染率比较差异均有统计学意义(χ2=13.40,P<0.05;χ2=8.71,P<0.05)。MP感染70例,感染率为22.73%,各年龄组间MP感染率比较差异无统计学意义(χ2=1.67,P>0.05);CPn感染19例,阳性率为6.16%,各年龄组间CPn感染率比较差异无统计学意义(χ2=0.12,P>0.05)。结论 MP、CPn是新乡市小儿肺炎感染的重要病原体,存在混合感染的现象,应重视MP、CPn的实验室依据,早期合理诊治。     

肺炎支原体抗体联合超敏C反应蛋白检测在小儿肺炎支原体肺炎感染诊断中的临床价值

目的：探讨肺炎支原体抗体( MP-Ab)联合超敏C反应蛋白( hs-CRP)检测在小儿支原体肺炎感染诊断中的意义。方法采用免疫比浊法、被动明胶颗粒凝集法分别测定51例支原体肺炎(观察组)与52名健康儿童(对照组) hs-CRP和 MP-Ab 水平。结果观察组hs-CRP、MP-Ab阳性率明显高于对照组[(52.94％vs 5.77％)、(60.78％vs 1.96％)]，差异有统计学意义(P<0.05)；支原体肺炎患儿hs-CRP、MP-Ab阳性率随着年龄的增加明显增加( P<0.05)。结论 CRP、MP-Ab可作为诊断肺炎支原体肺炎的重要辅助指标。     

实时荧光核酸恒温扩增检测技术在肺炎支原体肺炎早期诊断中的价值及影响因素分析

目的 评估实时荧光核酸恒温扩增检测技术（SAT）在儿童肺炎支原体肺炎（MPP）早期诊断中的应用价值及影响因素分析。方法 选取2016年12月至2017年12月住院治疗的社区获得性肺炎患儿526例,采用颗粒凝集法检测MP血清学抗体（MP-Ab）,并以此结果为参照,评价SAT用于诊断MPP的价值。结果 以血清MP-Ab检测结果确诊MPP患儿165例,MP-SAT诊断MPP的敏感度为90.9%（150/165）、特异度为97.9%（368/376）,准确性高（约登指数为0.89）,两者的一致性好（Kappa=0.90）。MP-SAT在短病程患儿中的诊断敏感度明显高于长病程患儿（P=0.031）;MP-SAT诊断敏感度明显高于单次血清MP-Ab（P=0.018）,两者的一致性差（Kappa=0.039）;MP-SAT与双份血清MP-Ab一致性好（Kappa=0.91）。多因素logistic回归分析结果显示：病程（≥ 7 d）、院外应用大环内酯类药物治疗是影响MP-SAT检出结果的主要因素（P < 0.05）。结论 MP-SAT在MPP的早期诊断中应用价值高,可以有效弥补急性期单份血清MP-Ab检测的不足,辅助临床进行早期诊断;尽可能在病程早期（< 7 d）和大环内酯类药物应用前进行MP-SAT检测。     

维生素 A 水平与儿童肺炎支原体感染的关系

目的探讨维生素A(VA)水平与肺炎支原体(MP)感染的相关性。方法随机选取2015年3月—2015年12月因呼吸道急性感染性疾病住院的0~12岁儿童为研究对象。采用高效液相色谱法(HPLC)检测血清VA水平,聚合酶链反应(PCR)检测鼻咽拭子MP-DNA,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清MP-Ig M。分析和比较亚临床VA缺乏(SVAD)、可疑亚临床维生素A缺乏(SSVAD)和VA正常患儿间MP感染情况。结果 600例患儿中SVAD 83例(13.83%),SSVAD193例(32.17%),1岁、1~3岁、6岁以及~6岁组间SVAD及SSVAD发生率的差异有统计学意义(P均0.001),其中1岁婴儿SVAD及SSVAD发生率最高,分别为26.36%和49.10%。600例患儿中MP阳性病例201例(33.5%),其中SVAD 57例(28.35%),SSVAD 70例(34.83%);MP阳性患儿的SVAD发生率高于阴性患儿,差异有统计学意义(P0.001)。201例MP阳性患儿不同年龄组间SVAD、SSVAD以及VA正常儿童分布的差异有统计学意义(P=0.003),1岁婴儿SVAD发生率(48.39%)较高。结论 SSVAD、SVAD以1岁婴儿最多,SVAD与儿童MP感染可能相关。     

支气管肺泡灌洗液荧光定量PCR对儿童肺炎支原体肺炎诊断研究

目的探讨荧光实时定量PCR(FQ-PCR)检测肺泡灌洗液(BALF)中MP-DNA基因在肺炎支原体肺炎(MPP)早期病原诊断中的价值。方法采用FQ-PCR检测61例患儿BALF中MP-DNA,并与目前常用血清MP抗体检测方法颗粒凝集法进行比较。结果 FQ-PCR检测MP-DNA敏感度94%,特异度100%;病程早期及难治性病例中FQ-PCR检测BALF中MP-DNA准确性优于单份血清MP抗体检测(P<0.01)。难治性病例中MP-DNA拷贝数显著高于普通MPP组(P<0.05),且与CRP呈正相关(r=0.845,P<0.01)。结论 FQ-PCR检测BALF中MP-DNA是早期MPP特别是难治性MPP病原诊断的可靠方法,优于血清MP抗体检测。MP-DNA的拷贝量可以作为评价难治性MPP的转归以及判断药物疗效的指标。     

肺炎支原体肺炎患儿肺炎支原体耐药性与DNA载量和基因型的关系研究

目的探讨肺炎支原体(MP)肺炎患儿MP耐药情况及其与DNA载量和基因型的关系。方法选取2012年1月至2016年12月诊断为MP肺炎的230例住院患儿为研究对象,采集所有患儿咽拭子标本,采用快速培养基培养药敏法测定9种常用抗菌药物对MP临床分离株的药物敏感性;荧光实时定量PCR检测患儿咽拭子MP-DNA载量;PCR测序检测MP 23S r RNA V区2063位基因型。结果 230例MP患儿中,86例2063位基因型为A(37.4%),134例为G(58.3%),8例为C(3.5%),2例为T(0.9%)。突变基因型(G+C+T)MP-DNA载量高于野生基因型(A)菌株(P0.05);红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、克林霉素耐药组MP-DNA载量高于非耐药组(P0.05)。MP对大环内酯类抗生素耐药率较高,60%以上产生大环内酯类耐药的病例均检测出A2063G突变,喹诺酮类药物少见MP耐药(低于2%)。结论 23S r RNA V区2063位点发生基因突变可能导致MP对大环内酯类药物耐药和DNA载量的变化,可作为MP治疗用药的选择依据。     

触珠蛋白、α1-酸性糖蛋白和C反应蛋白对细菌性及病毒性感染患儿的鉴别诊断价值

目的 通过检测细菌性和病毒性感染患儿血清中触珠蛋白(haptoglobin,HPT)、α1-酸性糖蛋白(αl acid glycoprotein,AAG)和C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平,探讨其对患儿细菌性和病毒性感染的鉴别诊断价值.方法 检测64例细菌性感染患儿、64例病毒性感染患儿急性期血清及31例正常对照组患儿血清中HPT、AAG、CRP水平.比较各炎症指标的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和约登指数,评价它们对细菌感染和病毒感染的早期诊断价值.结果 (1)以HPT≥2g/L,AAG≥2g/L,CRP ≥10 mg/L为阳性标准,3指标对诊断细菌性和病毒性感染的灵敏度分别为82.82%、42.19%、98.44%;(2)细菌感染组和病毒感染组比较HPT[(2.70±0.99)g/L vs(1.42±0.75)g/L]、AAG[(0.91±0.38)g/L vs(0.30±0.08)g/L]、CRP[(6.40±0.89)mg/L vs(1.308±0.80)mg/L]水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01);细菌感染组与正常对照组比较亦显著升高(P＜0.05,P＜0.01);而病毒感染组和正常对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 血清中HPT、AAG和CRP水平检测对患儿细菌性与病毒性感染的鉴别诊断有临床价值.所有检测指标中CRP的特异度、阳性预测值、阴性预测值、约登指数最高.