ShRNA靶向干扰BHRF1基因抑制鼻咽癌细胞增殖的实验研究

目的观察BHRF1 shRNA质粒载体转染对人鼻咽癌CNE2细胞中的BHRF1基因沉默及细胞增殖和凋亡的影响,以及肿瘤细胞对放射敏感性的变化。方法利用RNAi技术将负载BHRF1 shRNA的质粒载体转染至人鼻咽癌CNE2细胞,一组为BHRF1 shRNA质粒载体转染过的CNE2细胞（观察组）,未进行转染的CNE2细胞确定为对照组,经RT-PCR扩增人鼻咽癌组织中BHRF1 cDNA片段,RT-PCR和Western blot检测BHRF1基因的蛋白水平的表达。并且利用顺铂进行实验,观察使用顺铂后,BHRF1 shRNA转染后的肿瘤细胞是否对放射敏感性有变化。结果 BHRF1 shRNA转染鼻咽癌CNE2细胞后,细胞内BHRF1 mRNA表达量（2.02±0.53）,对照转染前明显下调,明显下调,与对照组的（29.82±0.64）比较,差异有显著性意义（P〈0.01）;DDP和8G放疗作用24 h以后,被转染的细胞的中的蛋白表达大大降低（P〈0.05）,癌细胞凋亡率上升,明显比对照组癌细胞的凋亡率高（P〈0.05）。结论利用RNA干扰技术对人鼻咽癌治疗具有潜在应用价值,BHRF1 shRNA质粒载体不仅仅能调控细胞基因的表达,而且还能够提高癌细胞对顺铂的敏感性。     

缺氧条件下电离辐射对鼻咽癌细胞HIF-1α及P53表达的影响

目的探讨缺氧条件下电离辐射对鼻咽癌细胞株CNE-1中缺氧诱导因子HIF—1α及P53表达的影响。方法将CNE-1鼻咽癌细胞分为空白对照组、单纯照射组和缺氧照射组。单纯照射组：按照照射率4Gy／min,共8Gy的剂量利用x射线照射细胞;缺氧照射组：氯化钴处理细胞模拟缺氧条件,缺氧一定时间后,按照与单纯照射组相同的剂量照射细胞。MTT法分析细胞存活分数,免疫荧光技术分析两组鼻咽癌细胞中的HIF-1α蛋白表达及分布情况,流式细胞仪定量检测HIF-1α和P53的蛋白表达。结果（1）MTT检测结果：细胞存活分数排列顺序为：对照组〉缺氧加照射组〉单纯照射组（P〈0．01）;（2）HIF-1α蛋白表达情况：免疫荧光显示鼻咽癌细胞HIF-1α蛋白的表达,在缺氧加照射组主要定位于细胞浆中,而另二组未见显示,流式细胞仪示缺氧加照射组HIF—1α明显高于单纯照射组（P〈0．01）,单纯照射组与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）;（3）P53蛋白表达变化情况：缺氧加照射组〉单纯照射组〉对照组（P〈0．05）。结论鼻咽癌细胞缺氧条件下HIF-1α可能通过P53发挥重要的保护作用,从而降低实体瘤中内部癌细胞对辐射的敏感性。     

RNA干扰iNOS基因对颊鳞癌细胞凋亡影响的实验研究

目的研究RNA干扰iNOS基因的表达对肿瘤细胞凋亡的影响。方法采用RNA干扰技术,通过脂质体介导,将含有iNOS特异性发夹状小RNA（short hairpin RNA,shRNA）的pGenesil-1质粒转染入颊鳞癌Bca885细胞株。观察pGenesil-1质粒载体转染率、免疫组化检测细胞中iNOS的蛋白表达的改变情况、流式细胞仪检测Bca885细胞的凋亡率。采用SPSS12．0统计软件统计分析。结果在脂质体介导下,将含iNOS特异性shRNA的质粒转染入颊鳞癌细胞后。实验组Bca885细胞中iNOS蛋白表达低于两对照组,具有统计学意义（P〈0．01）;三组细胞的凋亡率分别为12．05±0．18、3．31±0．12和2．46±0．09．实验组高于两对照组,具有统计学上意义（P〈0．01）。结论RNA干扰可以降低iNOS基因的表达,达到基因沉默的效果;沉默iNOS基因可提高Bca885细胞的凋亡．从而降低Bca885细胞的细胞增殖活性。     

p53及p21^wafl蛋白表达与人舌癌细胞多药耐药性的关系

目的 探讨p53及p21^wafl蛋白表达与人舌癌细胞系Tca8113多药耐药性（MDR）的关系。方法 采用脂质体介导的转染技术，将野生型p53（wt-p53）基因导入人舌癌耐药细胞系Tca8113／BLM；分子信标（Molecular Beacon）法检测人舌癌细胞系Tca8113及其耐药细胞系Tca8113／BLM中p53基因的mRNA水平；Western blot检测亲本、耐药细胞和转染细胞中p53、p21^wafl、P-gp和MRP蛋白的表达变化；MTT法检测不同细胞的药物敏感性，流式细胞仪检测细胞周期的改变，激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡。结果 在人舌癌耐药细胞系Tca8113／BLM中p53基因的表达明显下调，并且未检测到p21^wafl蛋白的表达；转染了wt—p53的耐药细胞Tca8113／BLM／p53中p53和p21^wafl蛋白表达均显著上调，而P-gP和MRP的蛋白表达则明显下调，其对药物BLM的敏感性增加10．1倍（P〈0．01）；转染细胞的周期也发生改变，G2期细胞增加，G1和S期细胞减少，转染细胞明显出现凋亡。结论 人舌癌耐药细胞系Tca8113／BLM多药耐药性的产生，可能通过p53和p21^wafl的表达下调使得多药耐药性相关蛋白P—gp和MRP表达上调来实现。     

八氯二丙醚生产工人p53蛋白及氧化损伤检测

目的检测八氯二丙醚生产工人氧化损伤及血清p53蛋白表达情况。方法选择暴露于八氯二丙醚工人21名为研究对象，另选21名非暴露者为对照，进行血清p53蛋白及丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）的测定。结果暴露于八氯二丙醚工人血清p53蛋白水平略高于对照组，但工龄〉8年组血清p53蛋白的水平显著高于工龄〈8年组。差异有统计学意义（P〈0．01）；SOD、GSH—Px酶活性略低于对照组，MDA水平则显示升高（P〈0．01）。结论长期暴露接触于八氯二丙醚作业工人可有p53基因异常的危险性，以及对氧化性应激的易感性。     

Let-7b和miR-199a对B16F10细胞增殖生长的影响

目的研究let-7b和miR．199a对黑色素瘤增殖生长的影响。方法设计靶向let-7b和miR．199a基因的过表达质粒和inhibitor干扰片段,将同一株系B16FIO细胞分为七组：空白组、let-7b质粒组、miR-199a质粒组、空质粒组、let-7binhibitor组、miR-199ainhibitor组、inhibitor对照组,运用基因转染技术将对应组别的外源基因导人B16F10细胞中,从RNA水平、蛋白水平和细胞水平三方面检测let-7b和miR-199a基因对B16F10细胞的影响。结果let-7b质粒组和miR-199a质粒组B16FIO细胞中对应基因的表达为3．8776±0．1372和2．8660±O．2821,明显高于空白组（P〈0．05）;let-7binhibitor组和miR-199ainhibitor组B16F10细胞中对应基因的表达为0．2057±0．0263和0．2656±0．0253,明显低于空白组（P〈0．05）;B16F10细胞中cyclinDl的表达let-7b质粒组（2．023±0．315）和let-7binhibitor组（1．857±0．377）明显高于空白组（0．997±0．041）（P〈0．05）,而B16F10细胞中Met的表达中miR．199a质粒组（5．19±0．309）和miR-199ainhibitor组（4．87±0．044）明显高于空白组（2．2±0．198）（P〈0．05）;let-7b质粒组和miR-199a质粒组B16FIO细胞的生长趋势较空白组缓慢,尤其到转染后第3天,此生长趋势下降至最低值（P〈0．05）,此后又缓慢趋近正常;此外,let-7b质粒组和miR-199a质粒组B16FlO细胞凋亡率分别为（11．8-4-1．19）％和（11．3±1．59）％,明显高于空白组（5．77±1．74）％（P〈0．05）。结论let-7b和miR-199a可负调控黑色素瘤细胞的增殖生长。     

神经生长因子诱导肝星状细胞凋亡及其相关机制的研究

目的观察神经生长因子（nerve growthfactor,NGF）对大鼠肝星状细胞（hepatic stellatecell,HSC）凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC—T6,将HSC—T6与100ng／mlNGF孵育24h后,流式细胞术检测细胞凋亡;细胞免疫化学法检测HSC中凋亡相关基因P^53、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的情况;免疫荧光法检测NGF、神经生长因子低亲和力受体p75NTR表达的情况。结果NGF作用HSC后凋亡率较对照组明显增高[（22．364±9．51）％VS（5．88±1．36）％,P〈0．05]。凋亡相关蛋白P^53、Caspase-3的阳性细胞百分率与对照组比较明显增高[（78．41±4．00）％、（39．26±1．57）％VS（34．96±3．84）％、（9．27±1．01）％,P〈0．05],而Bcl-2表达实验组阳性细胞百分率较对照组降低[（18．12±1．38）％vs（91．53±2．98）％,P〈0．05]。NGF作用HSC后NGF表达增多（6．53±1．40vs1．77±0．17,P〈0．05）,而p75NTR表达无明显变化（3．52±0．36VS4．24±0．38,P〉0．05）。结论NGF可能通过使凋亡相关基因p、Caspase-3表达上调、Bcl-2表达下调,而诱导HSC凋亡。NGF作用HSC后可作为始动因子和效应因子增加NGF的表达,而对p75NTR表达无影响。     

NALP1基因与骨肉瘤细胞的相关研究

目的:探讨NALP1基因在骨肉瘤细胞株MG-63、U-2OS中的表达,以及高表达NALP1基因对于骨肉瘤细胞体外凋亡的影响.方法:使用RT-PCR、Western-blot法检测骨肉瘤细胞株MG-63、U-2OS中的mRNA及蛋白表达水平并与人成骨细胞株hFOB1.19比较.将NALP1基因转染质粒PcDNA3.1,将重组质粒转染骨肉瘤细胞,分成高表达基因组、空质粒组及对照组,加入抗肿瘤药物顺铂及甲氨蝶呤促使肿瘤细胞凋亡,使用流式细胞仪测定各组肿瘤细胞凋亡率.结果:通过统计分析,骨肉瘤细胞株MG-63、U-2OS中的mRNA及蛋白表达水平均低于人成骨细胞株hFOB1.19 (P＜0.05),NALP1高表达组的肿瘤细胞凋亡率明显高于空白质粒组及对照组.结论:上调骨肉瘤细胞株MG-63、U-2OS中的NALPl的表达量可以促进肿瘤细胞凋亡.     

定量PCR检测热性惊厥患儿外周血单个核细胞ICAM-1／LFA-1 mRNA表达水平

目的探讨细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及其配体淋巴细胞功能相关抗原-1（LFA-1）对热性惊厥（FS）患儿的神经免疫调节作用。方法40例FS患几分为单纯性FS（SFS）组20例和复杂性FS（CFS）组20例;对照组19例。分别采用实时荧光定量PCR、RT-PCR方法检测外周血单个核细胞（PBMC）ICAM-1／LFA-1 mRNA的表达水平。结果SFS组患儿ICAM—1 mRNA水平为（0．63±0．39）基因copy数,明显高于对照组（0．46±0．20）和CFS组患儿（0．41±0．20）基因copy数（P〈0．05）;CFS组ICAM—1 mRNA水平与对照组儿童比较有下调趋势,但差异无统计学意义（P〉0．05）。SFS组LFA—1 mRNA表达水平为（0．73±0．11）灰度值比。明显高于对照组（0．60±0．15）和CFS组（0．54±0．17）灰度值比（P〈0．05）;CFS组患儿LFA-1 mRNA水平与对照组儿童比较亦有下调趋势,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PBMC ICAM-1／LFA-1基因表达水平在SFS和CFS是不同的,ICAM-1／IFA-1 mRNA表达增高所介导的炎性免疫病理损害在SFS患儿发病机制中有一定的作用,而CFS患儿ICAM-1／LFA-1 mRNA表达反而下调可能有一定的神经保护作用。     

外源性p21（waf1）基因转染对人胃癌细胞系BGC-823增殖的影响

目的：探讨外源性p21waf1基因转染对人胃癌细胞系BGC-823细胞增殖的影响。方法：用脂质体介导的方法将pIRES-p21waf1真核表达载体转染人胃癌细胞系BGC-823,分为pIRES-p21waf1转染组、pIRES-neo空载体组及未转染组三个组别。应用实时荧光定量RT-PCR、Westernblot免疫印迹分别在基因和蛋白两个水平检测各组p21的表达情况,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定细胞增殖能力,流式细胞仪分析细胞DNA周期变化,所有数据进行统计学分析。结果：p21waf1转染组p21waf1mRNA和p21蛋白高表达（P〈0.01）;p21waf1转染组BGC-823细胞生长速度明显低于空载体组和未转染组（P〈0.01）;流式细胞仪观察到p21waf1转染组细胞的G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组（P〈0.01）,S期比例显著低于空载体组和未转染组（P〈0.01）,并出现凋亡峰。结论：p21waf1基因转染可以抑制人胃癌细胞系BGC-823细胞增殖并能诱导其发生细胞凋亡,可能为胃癌的基因治疗提供一条新的途径。     

P38MAPK、Nox1及ROSmRNA在早发型重度子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨Nox1、P38MAPK及ROS mRNA表达与早发型重度子痫前期发病的关系,揭示早发型重度子痫前期发病基础,为临床治疗提供理论依据。方法选择早发型重度子痫前期患者32例、晚发型重度子痫前期患者30例为研究组,35例正常分娩者为对照组。胎盘娩出后立即于脐带附着处母体面,避开钙化出血梗塞区(肉眼观)剪取大小为1 cm×1 cm×1 cm的组织两块,一份用无菌生理盐水(含0.1%DEPC水)漂洗,去除血液,置于经DEPC水处理并消毒的冻存管中,于-80℃冰箱保存待行RT-PCR检测;另一份取材后即以4%多聚甲醛固定,常规脱水,浸蜡,包埋,4um切片(每例5张),载玻片经清洁处理,APES包被,进行HE染色及脂肪特染观察胎盘组织的脂肪浸润情况和形态学改变;采用RT-PCR及免疫组化方法检测胎盘组织中Nox1、P38MAPK、ROSmPNA表达水平。结果各组胎盘组织的合体滋养细胞、血管内皮细胞、蜕膜细胞中均可以检测到Nox1、P38MAPKmRNA及ROS表达。早发型重度子痫前期组Nox1mRNA表达显著高于晚发型重度子痫前期组及对照组(0.712±0.012,0.215±0.013,0.113±0.01,p<0.01);早发型重度子痫前期组ROSmRNA水平显著高于晚发型重度前期组及对照组(142.43±11.81,96.12±8.93,102.21±9.75,p<0.01);早发型重度子痫前期组P38MAPKmRNA表达水平显著高于晚发型重度前期组及对照组(0.109±0.057,0.074±0.074,0.042±0.013,p<0.01)。各组胎盘组织中Nox1表达与ROS水平呈正相关(r=0.81,p<0.05);各组胎盘组织中Nox1表达与P38MAPKmRNA呈正关(r=0.63,p<0.01)。结论早发型重度子痫前期组胎盘中Nox1mRNA高表达与其发病及发展密切相关。P38MAPK介导的P38MAPK-Nox1-ROS脂质代谢途径可能在早发型重度子痫前期发生发展中起重要作用。     

PI3K／AKT抑制剂联合放射对CNE-1细胞Ku70、Ku80表达的影响

目的：分析体外研究磷脂酰肌醇3-激酶,丝氨酸苏氨酸激酶（P13K／AKT）信号转导通路抑制剂（LY294002）联合放射对鼻咽癌细胞CNE-1KuT0、Ku80mRNA表达的影响,探讨P13K／AKT抑制剂影响放射敏感性的机制。方法：体外培养人鼻咽癌细胞CNE-1,取指数生长期细胞分为四个实验组：对照组（A）、单纯放射组（B）、单纯药物组（C）、加药联合放射组（D）;RT-PCR检测各组Ku70、Ku80mRNA的表达水平。结果：RT-PCR结果显示,放射后Ku70mRNA的表达增高,而抑制剂LY294002单纯作用CNE-1细胞后Ku70mRNA的表达水平无改变,但联合放疗后,可以降低放射后的Ku70mRNA的表达水平（P〈0．05）;本实验中Ku80mRNA的表达水平在各实验组中未观察到明显改变。结论：LY294002联合放疗可抑制Ku70表达,通过减少CNE-1细胞DNA损伤后的再修复影响放射敏感性。     

Caveolin-1与内皮型一氧化氮合成酶在门静脉高压症性血管病变中的表达

目的检测肝硬化门静脉高压症病人的脾血管中小凹蛋白caveolin-1、内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的mRNA及蛋白表达水平的变化,探讨caveolin-1的表达对eNOS的影响。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测27例肝硬化门静脉高压症病人脾静脉组织和20例脾外伤病人正常脾静脉血管中caveolin-1和eNOS的mRNA;Western Blot检测caveolin-1和eNOS的蛋白表达水平变化。结果肝硬化门静脉高压症组脾静脉Caveolin-1 mRNA与对照组脾静脉组织表达分别为(0.73±0.18)、(0.38±0.12),两组比较差异有显著性(p<0.05);肝硬化门静脉高压症组脾静脉eNOS mRNA为(0.23±0.11),显著低于对照组内脾静脉组织eNOS mRNA的表达(0.47±0.15)(p<0.05)。Western Blot检测caveolin-1在肝硬化门静脉高压症组脾静脉中较正常脾静脉中表达明显增强;eNOS在肝硬化门静脉高压症组脾静脉中呈低水平表达,较正常脾静脉中表达明显减少。结论肝硬化门静脉高压症组脾静脉中caveolin-1的过量表达及eNOS表达降低,导致NO合成减少,脾静脉血管阻力持续增加,及caveolin-1致静脉血管病理改变作用,共同作用致脾静脉出现对门静脉高压失代偿改变。     

瑞舒伐他汀对人单核-巨噬细胞组织因子表达的影响

目的探讨瑞舒伐他汀对氧化修饰低密度脂蛋白（OX-LDL）诱导的人单核-巨噬细胞组织因子（TF）表达影响及可能机制。方法据实验要求分空白对照组、OX-LDL组、多聚肌苷酸组、瑞舒伐他汀组。RT-PCR检测各组血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1（LOX-1）mRNA,TFmRNA表达,ELISA检测各组TF蛋白表达。结果OX-LDL组与空白对照组比较,LOX-1mRNA、TFmRNA表达增加[（3．25156±0．15772）VS（1±0）;（2．522451±0．138967）VS（1±0）],其差异均有统计学意义（P〈0．01）。多聚肌苷酸组、瑞舒伐他汀组与OX-LDL组比较,LOX-1mRNA、TFmRNA表达减少[（2．95139±0．157253）VS（3．25156±0．15772）、（2．877343±0．156558）VS（3．25156±0．15772）;（1．811956±0．169699）VS（2．522451±0．138967）、（1．687701．4-0．174647）vs（2．522451±0．138967）],其差异均有统计学意义（P〈0．05）。ox-LDL组与空白对照组比较,TF蛋白表达增加[（207．7233±1．154701）VS（184．8467±0．871799）],差异有统计学意义（P〈0．01）。多聚肌苷酸组、瑞舒伐他汀组与OX-LDL组比较,TF蛋白表达均减少[（197．8733±1．505003）vs（207．72334-1．154701）、（202．95674-2．722744）VS（207．7233±1．154701）],差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论LOX-1可能介导OX-LDL诱导的人单核-巨噬细胞TF表达增加。瑞舒伐他汀可通过下调单核-巨噬细胞LOX．1mRNA的表达下调TFmRNA表达,从而下调TF蛋白表达。     

氧化低密度脂蛋白促进内皮细胞MMP-9mRNA、LOX-1mRNA的表达及LOX-1在其中的作用研究

目的观察氧化低密度脂蛋白（OX．LDL）诱导人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶．9（MMP-9）mRNA、血凝素氧化型低密度脂蛋白受体1（LOX-1）mRNA的表达及LOX-1在表达中的作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,逆转录聚合酶链反应检测MMP-9mRNA和LOX-1mRNA的表达。并观察予以LOX-1的抑制剂多聚肌苷酸作用后,人脐静脉内皮细胞MMP-9mRNA表达的变化。结果与对照组比较（0．252±0．032,0．279±0．041）,OX—LDL作用后,人脐静脉内皮细胞MMP-9mRNA、LOX-1mRNA（25ng／组：0．486±0．012,0．586±0．02;50n舀／L组：0．668±0．011,0．739±0．014;100ng／组：0．817±0．030,0．872±0．003）表达明显增加,且诱导作用呈浓度-时间依赖性;与氧化低密度脂蛋白组（1．020±0．039）比较,多聚肌苷酸抑制后,MMP-9mRNA（0．872±0．046）表达明显下降。结论OX—LDL能促进内皮细胞MMP-9mRNA及LOX-1mRNA的表达,LOX-1参与了OX-LDL诱导内皮细胞MMP-9mRNA表达的过程。     

华蟾素对子宫内膜癌HHUA细胞芳香化酶表达的影响和意义

目的探讨华蟾素（cinobufagin）对体外培养子宫内膜癌HHUA细胞芳香化酶和雌二醇（estradiol,E2）表达的影响和意义。方法30例原代培养的正常子宫内膜组织和30例子宫内膜癌HHUA细胞分别取自2007年至2008年因功能性子宫出血（功血）而在本院诊刮和因子宫内膜癌在本院手术治疗患者。其组织学检查分别确诊为增生期内膜和子宫内膜癌HHUA细胞,体外（invitro）培养正常子宫内膜细胞（A组,n=30）和子宫内膜癌HHUA细胞。再将30例子宫内膜癌患者的子宫内膜癌HHUA细胞分成两部分,一部分纳入子宫内膜癌HHUA细胞组（B组,n=30）,一部分用华蟾索干预后,纳入子宫内膜癌HHUA细胞华蟾素干预组（C组,n=30）,应用RT—PCR检测芳香化酶表达,发光免疫法检测雌二醇表达,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果正常子宫内膜细胞（A组）不表达芳香化酶mRNA（aromatasemRNA）,不合成雌二醇,细胞凋亡率为（8．02±0．93）％;子宫内膜癌HHUA细胞（B组）表达芳香化酶mRNA,可合成雌二醇,细胞凋亡率为（1．08±0．21）％,低于正常子宫内膜细胞（P〈0．05）。华蟾素干预（C组）后,子宫内膜癌HHUA细胞芳香化酶mRNA的表达和雌二醇的合成均下降,细胞凋亡率为（27．14±4．12）％,高于B组（P〈0．05）。结论子宫内膜癌HHuA细胞可利用芳香化酶合成内源性雌二醇,华蟾素可抑制子宫内膜癌HHuA细胞芳香化酶mRNA的表达和雌二醇的合成,抑制癌细胞增殖。     

Bmi-1和p16基因在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的 检测Bmi-1和p16基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达,并探讨其临床意义.方法 采用实时荧光反转录定量聚合酶链反应方法检测61例膀胱移行细胞癌组织和12例正常膀胱组织中Bmi-1和p16基因的表达情况.结果 膀胱移行细胞癌组织中Bmi-1表达量显著高于正常膀胱组织（0.242±0.129比0.031±0.011）,而p16表达量显著低于正常膀胱组织（0.059±0.021比0.165±0.029）,差异均有统计学意义（P＜0.05）.Bmi-1和p16基因的表达量与病理分级、临床分期、肿瘤复发有相关性（P＜ 0.05或＜0.01）,而与年龄、性别无相关性（P＞0.05）.在膀胱移行细胞癌组织中p16基因的表达量与Bmi-1基因的表达量呈负相关（rs=-0.714,P＜0.05）.结论 Bmi-1基因的高表达和p16基因的低表达可能参与了膀胱移行细胞癌的发生和发展过程,Bmi-1可能通过某种机制下调p16的表达,从而促进膀胱移行细胞癌的发生和发展.     

氢醌对TK6细胞周期的影响及其相关的调控机制探讨

［目的］ 探讨氢醌（hydroquinone,HQ）对细胞周期的影响及其相关的调控机制。 ［方法］ 磷酸盐缓冲液（PBS）处理人类淋巴母细胞（TK6 细胞）为对照组,20.0 μmol/L HQ为处理组,48 h 后通过碘化丙啶（PI）标记的流式细胞术检测细胞周期分布情况,用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测PTEN（抑癌基因）、p53 基因mRNA表达的改变,流式细胞荧光标记法检测Rb 蛋白的表达。 ［结果］ 与对照组比较,处理组G1 期细胞比例明显增加,S 期细胞比例明显减少,差异均有统计学意义（P 〈 0.05）;HQ作用于TK6 细胞后上调了Rb 的表达,下调了p53 的表达,其差异均有统计学意义（P 〈 0.05）,而对PTEN的表达没有明显影响。 ［结论］ HQ可能通过上调Rb 的表达使细胞阻滞于G1 期。     

AKT基因被RNA干扰抑制后对卵巢癌SKOV3细胞增殖及凋亡的影响

目的通过RNA干扰技术阻断卵巢癌SKOV3细胞中AKT基因的表达,研究其对卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响。方法人卵巢癌SKOV3细胞体外培养,分为对照组、空白载体组与RNA干扰组三组,采用MTT法与流式细胞仪AnnexinV／PI法检测并评价AKT基因干扰后对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响。结果MTF结果显示RNA干扰组细胞增殖能力较对照组与空白载体组明显降低,差异具有统计学意义（P〈0．05）,空白载体组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;流式细胞仪AnnexinV／PI法检测结果显示,RNA干扰组细胞凋亡率高达到（79．52±2．31）％,较对照组与空白载体组明显升高,约是空白载体组与对照组的3倍,差别具有统计学意义（P〈0．05）。结论靶向AKT基因的小干扰RNA（siRNA）可有效地抑制卵巢癌细胞的增殖,促进细胞凋亡,是卵巢癌的治疗新方法。