胃癌端粒酶表达及预后的研究

目的:研究胃癌组织和癌旁组织端粒酶活性表达的意义及其与预后的关系。方法:应用RT-PCR技术检测80例胃癌和癌旁组织(距癌组织约5厘米,病理切片无癌组织残留)及20例经內镜及病理证实为浅表性胃炎的胃组织的端罜富钚?结果:在80例胃癌组织中端粒酶活性表达为82.5%(66例),癌旁组织端粒酶活性表达为12.5%(10例)。20例浅表性胃炎组织中未发现端粒酶阳性表达。癌组织端粒酶活性与胃癌TNM分期,病理分化程度、淋巴结转移及预后有显著相关性。癌旁组织端粒酶活性与肿瘤术后复发有。.结论:端粒酶活性与胃癌的发生,发展密切相关,检测端粒酶活性可为胃癌术后早期复发提供参考依据。     

食管鳞状细胞癌Raf激酶抑制蛋白基因甲基化及mRNA表达

目的研究食管鳞状细胞癌(ESCC)中Raf激酶抑制蛋白(RKIP)基因启动子甲基化及mRNA表达情况。探讨其与食管鳞状细胞癌发生的关系及可能机制。方法采用改进的甲基化特异性PCR(MSP)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测ESCC组织及相应癌旁正常组织中RKIP基因的DNA甲基化和mRNA表达情况。结果 ESCC组织中RKIP基因启动子的甲基化发生率(75%)显著高于癌旁正常组织(27%)(P<0.01);77例ESCC组织中RKIP基因mRNA阳性表达率(36%)显著低于相应癌旁正常组织的RKIP基因mRNA阳性表达率(77%)(P<0.01);食管鳞状细胞癌组织中RKIP基因甲基化者mRNA阳性表达率为(26%)与非甲基化者mRNA阳性表达率(68%)比较明显相关(P<0.01);RKIP基因甲基化与肿瘤的淋巴转移和分化程度相关(P<0.01)。结论食管鳞状细胞癌RKIP基因启动子区甲基化导致的该基因的mRAN表达缺失可能是ESCC发生的机制之一,RKIP基因的高甲基化率可作为食管鳞状细胞癌恶性程度评估和判断预后的指标。     

食管鳞状细胞癌RKIP基因甲基化状态的检测及临床意义

目的研究食管鳞状细胞癌(ESCC)中RKIP基因启动子甲基化及其蛋白表达情况。方法采用改进的甲基化特异性PCR(MSP)和免疫组织化学SP法检测ESCC组织及相应癌旁正常组织中RKIP基因的DNA甲基化和蛋白表达情况。结果 77例ESCC组织中RKIP基因启动子的甲基化发生率(75%)显著高于癌旁正常组织(27%)(2=35.582,P<0.01);有淋巴结转移的ESCC组织中甲基化率(87%)高于无淋巴结转移的ESCC组织(59%)(2=7.494,P<0.01);低分化ESCC组织中甲基化发生率(94%)高于高、中分化ES-CC组织(50%,25%)(P均<0.01)。77例ESCC组织中RKIP蛋白的表达率(36%)与相应癌旁正常组织的RKIP蛋白表达率(77%)比较有显著性差异(2=25.39,P<0.001);有淋巴结转移的ESCC组织中蛋白表达率(24%)低于无淋巴结转移的ESCC组织(53%)(2=6.648,P=0.01)。结论 RKIP基因启动子区甲基化导致的基因沉默可能是ESCC的发生机制之一,可作为反映ESCC生物学行为的检测指标。     

PTEN在胆囊癌中的表达及其与微血管密度和临床病理特征的关系

目的探讨抑癌基因PTEN蛋白在胆囊癌及癌旁正常组织中的表达,及其与微血管密度(MVD)和临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法对29例胆囊腺癌、8例胆囊鳞癌及其相应癌旁组织中PTEN蛋白进行检测,计算微血管密度,分析PTEN在不同组织中的表达与MVD和胆囊癌组织类型、分化程度等的关系。结果胆囊癌组织中PTEN蛋白阳性表达率低于癌旁正常胆囊黏膜组织(P<0.01),MVD高于癌旁正常组织(t=-7.941,P<0.01);胆囊癌组织中PTEN蛋白阳性表达与患者性别、年龄、组织类型及有无淋巴结转移无明显相关性,但与组织分化程度明显相关。高分化胆囊癌组MVD显著低于低分化组(t=3.275,P<0.01),淋巴结转移组MVD值显著高于无淋巴结转移组(t=-2.931,P<0.01)。结论 PTEN蛋白在胆囊癌组织中阳性表达率较低,PTEN基因突变或缺失可能促进肿瘤血管形成,与肿瘤的生长、分化等相关。该基因在胆囊癌发生发展中可能起重要作用,并为临床治疗和预后判断提供一定的依据。     

端粒酶活性测定在鉴别甲状腺良恶性病变中的意义

目的研究端粒酶在甲状腺良恶性病变中活性状态,探讨端粒酶检测在甲状腺病变定性诊断中的价值。方法采用TRAP-PCR-ELISA对110份甲状腺组织进行端粒酶活性分析。结果24例甲状腺癌中23例表达端粒酶活性,阳性率96%,20例癌旁组织仅1例阳性,阳性率为5%;21例甲状腺腺瘤亦仅1例阳性,阳性率5%;结节性甲状腺肿1例阳性,阳性率4%;正常甲状腺组织未检测出端粒酶活性。甲状腺癌组织端粒酶活性阳性率较其他几种组织皆有非常显著性差异(P均<0.01)。结论端粒酶是甲状腺癌的定性标志物,在甲状腺病变的鉴别诊断中具有重要价值。     

白附子混悬液对荷瘤小鼠p16、bcl-2的表达及端粒酶活性的相关性研究

[目的]探讨白附子混悬液(SGTR)对荷瘤小鼠端粒酶活性的调节及对p16、bcl-2的相关表达的研究。[方法]采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测小鼠血清中端粒酶浓度;用免疫组织化学方法测定H22肿瘤组织中p16和bcl-2蛋白的表达情况来推断SGTR对肿瘤细胞凋亡机制的作用。[结果]SGTR可上调p16蛋白表达水平,差异有统计学意义(P<0.01);下调bcl-2蛋白的表达水平(P<0.01),抑制H22荷瘤小鼠体内端粒酶活性(P<0.01)。[结论]SGTR通过抑制端粒酶活性、下调凋亡基因bcl-2的表达及上调抑癌基因p16的表达从而促进肿瘤细胞凋亡来达到抗肿瘤的作用。     

抑癌基因PTEN在宫颈癌中的表达及意义

目的探讨一种新的抑癌基因PTEN在人宫颈癌中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法,检测48例宫颈癌及癌旁正常组织石蜡切片中PTEN蛋白表达情况。经计算机图像分析,计算阳性细胞数,比较PTEN蛋白表达与临床病理特征的关系。结果PTEN蛋白表达于细胞浆。48例宫颈癌中PTEN蛋白阳性表达率40%(19/48),而癌旁正常组织阳性表达率96%(46/48),两者有显著性差异(P<0.05)。在淋巴结转移组织中PTEN蛋白阳性表达率(24%)明显低于未转移组织(52%,P<0.01),另外,PTEN蛋白表达与临床分期呈负相关趋势,而与病理分级、浆膜浸润无相关性(P均>0.05)。结论PTEN异常表达可能与部分宫颈癌发生、发展及预后有关。     

端粒酶在萎缩性胃炎大鼠胃黏膜组织中的表达及胃乐益对其影响

目的观察胃乐益对萎缩性胃炎大鼠胃黏膜组织中端粒酶活性的抑制作用。方法将80只大鼠随机分为4组,即正常对照组、模型组、胃乐益治疗组(胃乐益组)、生理盐水对照组(生理盐水组),观察各组胃黏膜组织病理学改变,并应用端粒重复扩增法测定各组胃黏膜组织中端粒酶的活性。结果正常对照组胃粘膜未呈现端粒酶活性,模型组、胃乐益组、生理盐水组端粒酶阳性率分别为60%、25%、55%,胃乐益组与模型组、生理盐水组比较差异均有显著性(P＜0．01)。结论胃乐益对端粒酶的激活有一定的抑制作用,胃乐益治疗慢性萎缩性胃炎作用机制之一可能与其一定程度抑制端粒酶活性有关。     

急性髓系白血病中医证型与ID4基因启动子区甲基化相关性研究

目的研究急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者骨髓细胞中ID4基因启动子区甲基化状态与中医证型的关系,探讨ID4基因甲基化与AML发生、发展的关系。方法选取35例2010年2-12月山东中医药大学附属医院血液科住院或门诊AML患者作为试验组,另选取10名山东中医药大学附属医院健康体检中心体检健康者作为对照组,采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific polymerasechain reaction,MS-PCR)检测两组ID4基因启动子区甲基化状态并进行组间及中医证型间比较,分析中医证型与基因启动子区甲基化相关性。结果 AML患者ID4基因启动子区甲基化为27例(77.1%),与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。各证型患者ID4基因启动子区甲基化阳性率由低到高依次为气阴两虚证<瘀血痰结证<毒热炽盛证,差异均有统计学意义(P<0.05)。ID4基因启动子区甲基化阳性患者外周血白细胞数、骨髓原始细胞比例高于阴性患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论毒热炽盛证、瘀血痰结证患者更易出现ID4基因甲基化,ID4基因启动子区甲基化阳性表达从分子水平验证了AML初期中医邪实内存的本质,也一定程度上反映了AML恶性程度。     

角化棘皮瘤和高分化鳞状细胞癌p53和Bcl-2表达的比较研究

目的研究p53、Bcl-2蛋白在角化棘皮瘤和高分化鳞状细胞癌中的表达及意义。方法采用EnVision免疫组化二步法对12例角化棘皮瘤、8例高分化鳞状细胞癌,进行p53、Bcl-2的表达检测。结果p53蛋白在角化棘皮瘤和高分化鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为50.0%和62.5%,两者比较无显著性差异(P>0.05);Bcl-2蛋白在角化棘皮瘤和高分化鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为66.7%和87.5%,两者比较无显著性差异(P>0.05)。结论p53和Bcl-2蛋白均参与了角化棘皮瘤和高分化鳞状细胞癌的发病过程,但不宜单独作为角化棘皮瘤和高分化鳞状细胞癌的鉴别诊断标志。     

胃癌中NF-кB与COX-2表达的研究

目的探讨NF-кB、COX-2的表达与胃癌的关系及临床意义。方法采用免疫组织化学方法(S-P法)对胃癌组织、正常胃黏膜中NF-кB p65及COX-2蛋白表达进行检测。结果 NF-кB p65蛋白和COX-2蛋白在胃癌组织中的阳性表达率分别为67%和60%,正常胃黏膜中的阳性表达率分别为21%和18%,2者比较均有显著性差异(P均<0.01)。在低分化组的阳性表达率分别为79%和72%,高/中分化组的阳性表达率分别为53%和47%,2者比较均有显著性差异(P均<0.05);在浸润深度为T3+T4组的阳性表达率分别为73%和66%,T1+T2组的阳性表达率分别为22%和22%,2者比较均有显著性差异(P<0.01);在临床Ⅲ～Ⅳ期组的阳性表达率分别为78%和74%,Ⅰ～Ⅱ期组的阳性表达率分别为48%和37%,2者比较均有显著性差异(P均<0.01)。不同性别、年龄、肿瘤部位及大体分型胃癌组织中NF-кB p65和COX-2蛋白的表达无显著性差异(P均>0.05)。胃癌组织中NF-кB p65和COX-2蛋白的表达呈明显正相关(rs=0.539,P<0.01)。结论胃癌组织中的NF-кB和COX-2表达增高,提示其与胃癌的发生、发展、侵袭、淋巴转移密切相关。     

四君子汤对D-半乳糖衰老模型小鼠心、肝、脑组织MDA含量及端粒酶活性的影响

目的 研究四君子汤(SJ)对D-半乳糖(D-gal)衰老模型小鼠心、肝、脑组织丙二醛(MDA)含量及端粒酶活性的影响。方法 60只小鼠分为5组,除正常对照组外其余4组采用10％的D-gal0．01g／g注射于小鼠颈背部皮下,每日1次,连续6周,建立小鼠衰老模型;于造模同时,3个给药组(低、中、高剂量)分别按6g／(b·d)、12g／(kg·d)、24g／(kg·d)的药量(容积为0．2m1／10g体重)喂饲四君子汤,连续用药6周;正常对照组和模型对照组喂饲同体积的蒸馏水。TBA比色法检测小鼠心、肝、脑组织MDA含量;PCR-ELISA法检测小鼠心、肝、脑组织端粒酶活性。结果 与正常对照组相比,模型对照组小鼠心、肝、脑组织MDA含量明显增加(P<0．01),心、肝脏组织端粒酶活性明显降低(P<0．01),脑组织端粒酶活性无明显变化(P>0．05);与模型对照组比较,3个给药组小鼠心、肝、脑MDA含量明显减少(P<0．01),低、中剂量给药组小鼠心脏组织端粒酶活性有升高的趋势,但差异不显著(P>0．05),高剂量给药组小鼠心脏组织端粒酶活性明显升高(P<0．05);3个给药组小鼠肝组织端粒酶活性均无明显变化(P>0．05);低、中剂量给药组小鼠脑组织端粒酶活性无明显变化(P>0．05),高剂量给药组小鼠脑组织端粒酶活性明显升高(P<0．01)。结论 四君子汤能拮抗自由基损伤,减少D-gal衰老模型小鼠心、肝、脑组织MDA含量,并能提高其心、脑组织端粒酶活性,但对肝组织端粒酶活性无影响。     

食管鳞状细胞癌组织Raf激酶抑制蛋白和NF-κBp65表达及临床意义

目的探讨食管鳞状细胞癌组织中Raf激酶抑制蛋白(RKIP)和核因子κBp65(NF-κBp65)的表达,及其与食管鳞状细胞癌各临床病理因素之间的关系。方法用免疫组织化学法检测77例食管鳞状细胞癌和77例癌旁组织的RKIP和NF-κBp65表达,并分析其与食管鳞状细胞癌临床病理学特征关系。结果食管鳞状细胞癌组织中RKIP的表达低于正常癌旁组织,而NF-κBp65的表达则高于癌旁组织,二者比较有显著性差异(P<0.01);RKIP在食管鳞状细胞癌组织中的表达与有无淋巴结转移有关(P<0.05)。NF-κBp65在食管鳞状细胞癌组织中的表达与临床分期、有无淋巴结转移及肿瘤分化程度有关(P<0.05或0.01)。食管鳞状细胞癌组织中RKIP与NF-κBp65的表达呈负相关(P<0.05)。结论RKIP表达减少或缺失与食管鳞状细胞癌的发生、发展密切相关,RKIP表达减少或缺失可能通过上调NF-κBp65的表达促进食管鳞状细胞癌的侵袭和转移。     

Moxibustion on telomerase activity in aging rat

目的：研究艾灸对衰老大鼠组织端粒酶活性及基因表达的影响。方法：以注射D．半乳糖溶液法制备亚急性衰老大鼠模型，采用艾灸“肾俞”穴进行治疗，并与模型组和正常组进行对照，分别以ELISA法和原位杂交观察各组大鼠肝脏组织端粒酶活性及其基因的表达的变化。结果：衰老大鼠端粒酶活性较正常组显著降低（P〈0．01），艾灸组与模型组比较明显升高（P〈0．05）。与正常组相比，衰老大鼠端粒酶基因阳性表达面积和阳性表达光密度均显著降低（P〈0．01），艾灸组阳性表达面积较模型组显著增高（P〈0．01）。结论：艾灸可通过调节衰老大鼠的端粒酶活性从而达到延缓衰老的目的。     

基于掌型经络检测仪探讨2型糖尿病体质与十二经络的相关性

目的:通过对比糖尿病患者的不同体质、不同经络的经络能量值,探讨糖尿病患者体质与经络能量的关系。方法:选取郑州市中医院糖尿病科诊治的2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者109例,统计比较不同体质患者的经络检测值的差别。结果:109例患者中,阴虚质46例(42.20%),平和质33例(30.28%),气虚质12例(11.01%),阳虚质10例(9.17%),痰湿质5例(4.59%),湿热质2例(1.83%),血瘀质1例(0.92%)。阴虚质患者左侧三焦经经络检测值明显高于平和质患者,差异有统计学意义(P<0.05),右侧胆经经络检测值明显低于平和质患者,差异有统计学意义(P<0.01);气虚质患者右侧心经经络检测值明显高于平和质患者,差异有统计学意义(P<0.05),右侧胆经经络检测值明显低于平和质患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:阴虚质和气虚质是糖尿病最常见的体质类型,阴虚质患者胆经和三焦经与平和质患者经络值水平差异较大,气虚质者心经和胆经与平和质者经络值水平差异较大。     

Cox-2和Ki-67在子宫内膜癌组织中的表达和意义

目的探讨环氧化酶-2(Cox-2)和Ki-67的表达与子宫内膜癌的关系。方法应用免疫组织化学Envision法检测37例增生期子宫内膜、16例非典型增生子宫内膜、58例子宫内膜癌中Cox-2和Ki-67的表达。结果Cox-2、Ki-67表达阳性率在子宫内膜癌组明显高于非典型增生子宫内膜组和增生期子宫内膜组(P<0.01)。在高中分化组,Cox-2、Ki-67表达率明显低于低分化组(P<0.05)。Cox-2表达与内膜癌的临床分型以及肌层浸润深度无关(P>0.05),Ki-67表达随临床分期以及分化程度的增加而增强(P<0.05)。结论Cox-2和Ki-67可作为判断子宫内膜癌的分化程度以及预后的较好指标。     

PTEN、p16和CyclinD1在胃癌及癌前病变中表达的研究

目的探讨PTEN、p16和CyclinD1表达与胃癌发生发展的关系。方法应用免疫组化S-P法检测正常胃黏膜、慢性萎缩性胃炎、胃黏膜不典型增生及胃癌组织中PTEN、p16和CyclinD1蛋白的表达情况。结果 PTEN表达从正常胃黏膜、慢性萎缩性胃炎、胃黏膜不典型增生至胃癌,阳性表达率逐渐降低,不典型增生组阳性表达率显著高于胃癌组(P<0.05);p16在慢性萎缩性胃炎组中阳性表达率显著高于不典型增生组(P<0.05);CyclinD1在不典型增生组中阳性表达率显著低于胃癌组(P<0.05)。在胃癌组织中PTEN表达和p16呈正相关(rs=0.585,P<0.01),和CyclinD1呈负相关(rs=-0.587,P<0.01),p16表达与CyclinD1呈负相关(rs=-0.522,P<0.01)。结论胃癌发生机制涉及PTEN、p16和Cy-clinD1等基因的异常,随着病变进展,PTEN、p16表达降低,CyclinD1表达升高,提示PTEN、p16和CyclinD1可能是胃癌早期分子事件。