口服El Tor型O1群霍乱弧菌减毒活菌苗株——CVD110

作者用基因重组方法构建了一栋新的口服菌苗候选株——El Tor生物型小川血清型霍乱弧菌CVD110。 病原性霍乱弧菌株具有一个高度保守的4.5千对碱基（kb）核心区.该区含有ace、zot和ctxAB三个毒素基因。在许多El Tor生物型菌株中, 该区与2.7kb的重复顺序（RS1成分）相连接。 作者将含有ace、zot和ctxB的4.7kb片段亚克隆入载体pGP704,构建成质粒pCVA2再转化入大肠杆菌SM10λpir,并通过接合作用导入霍乱弧菌E7946。该质粒与霍乱弧菌核心区之间同源顺序的交换导致完整的质粒整合入宿主基因组。经培养可发生第2次重组,即RS1元件之间的交换,从而导致毒素基因的丧失。由此得到霍乱弧菌CVD109。质粒pCVD622.2B含有插入了汞抗性基因（mer）和ctxB的霍乱弧菌溶血素基因（hlyA）以及氨苄青霉素抗性基因（Ap）。将此质粒转化SM10λpir,接着转入CVD109。筛选整合了质粒的宿主菌（Ap）进行培养,再筛选氨苄青霉素敏感性克隆即可     

抗O139型霍乱弧菌口服活载体菌苗株的构建及鉴定

O139型霍乱弧菌与O1群ElTor生物型霍乱弧菌最主要的区别在于,两者编码O多糖(O-PS)的rfb基因座间缺乏同源性,而且O139型株具有荚膜多糖(CPS),作者将O139型霍乱弧菌的rfb基因引入O1群霍乱弧菌弱毒株CH19,构建了抗O139型霍乱弧菌的口服活载体菌苗株,并对其特性作了鉴定.用多克隆抗O139型霍乱弧菌MO45株全菌体抗血清从基因库中筛选编码O139型霍乱弧菌rfb区、称为pSSV1212和pSSV1215系列的粘粒克隆.免疫印迹分析表明pSSV1212-3及pSSV1215-8克隆既表达连接核心的短链O-PS(SOPS)又表达CPS.用pSSV1209N整合质粒将两型阳性克隆基因座引入霍乱弧菌弱毒株CVD103-HgR的rfb缺失突变株CH19,构建出O139型霍乱弧菌     

口服霍乱活菌苗CVD103-HgR株的志愿者保护性免疫力的开始与持续时间

作者对18～39岁的健康成人志愿者进行两项研究。第1项研究,22人口服1剂3～5×10~8菌落形成单位(cfu)CVD 103-HgR株霍乱活菌苗。2个月后,另7人口服1剂3～5×10~9cfu CVD 103-HgR菌苗,以15名未免疫者作为对照组。分别在口服菌苗后6和4个月以4×10~6 cfu稻叶型霍乱弧菌569B株攻击。第2项研究,11人口服1剂3～5×10~8     

口服霍乱活菌苗CVD103-HgR株对泰国健康成人安全性及免疫原性的初步评价

用DNA重组技术去除编码稻叶型霍乱弧菌569B株A亚单位的基因,使之变成CVD103减毒株,又经进一步诱导变为CVD103 HgR减毒株.将这两种减毒株制成口服活菌苗,免疫北美健康成人反应小,服1剂后对El Tor型,稻叶型或小叶型霍乱弧菌有较强防御作用.     

口服单剂霍乱活菌苗CVD103-HgR株的安全性、免疫原性和传播性

作者用基因重组技术从野型01群霍乱弧菌569B株获得CVD103-HgR株,研究其单剂口服时的安全性和有效性。 作者在印度尼西亚雅加达对303名24～59月龄儿童进行了对照试验.其中155名服用CVD103-HgR株菌苗,另外148名口服安慰剂（5×10~8个灭活大肠杆菌K12菌体）。所有受试者在随后的观察中不良反应都很轻微。菌苗组腹泻发生率为11.6％、呕吐10.3％、腹痛11.6％。而安慰剂组则分别为8.1％、6.7％和8.7％。两组胃肠道反应无显著差异。菌苗组发热发生率为18.1％,安慰剂组为9.4％。在随访的最初5天,两组发热无显著差别,分别分9％和8.1％。但是,最后4天,为9％和0.7％,免疫后6至9天对每名发热者的随访分析表明.菌苗组14人中有12人有明显间发感染（其中8人上呼吸道感染、2人咽炎、1人志贺菌病）。 菌苗组有75％血清杀弧菌抗体水平增高4倍以上[几何平均滴度（GMT）较免疫前升高10倍]。17％的儿童滴度倒数为≥2560。而对照组只有3％血清阳转CVD103-HgR株     

O1群霍乱弧菌毒力株和变异株对家兔肠粘膜的免疫力

粘膜免疫力介质[包括分泌性免疫球蛋白A(SIgA)抗体]是预防病原菌定居或侵入粘膜表面的第一道防卫线。本试验用不同的霍乱弧菌株免疫家兔,测定家兔抗霍乱毒素(CT)的粘膜IgA应答。对禁食家兔静脉注射甲腈咪胺并口服碳酸氢钠中和胃酸,细菌放在15ml酪蛋白氨基酸酵母浸液中,经胃管接种,30分钟后于腹腔内注射2ml鸦片酊,将CT置于5ml含有0.02%明胶的0.01M磷酸盐缓冲液中于十二指肠内注射。结果表明,经不同量霍乱毒菌接种后     

口服霍乱活菌苗CVD103-HgR者用同源菌攻击后的二次特异性细胞抗体应答

在用活的或灭活的微生物抗原初次口服免疫后,特异性抗体分泌细胞(ASC)暂时循环于外周血中,这些细胞来源于粘膜淋巴组织。初次抗原刺激后,外周血免疫球蛋白A抗体分泌细胞的应答,被认为是对局部存在的抗原的粘膜免疫应答。 作者对36名志愿者用O1群霍乱弧菌弱毒活菌苗CVD103-HgR单剂口服免疫后,分3组分别在免疫后7、30和180天,用同源野生型稻叶型霍乱弧菌569B株攻击(试验组)。另对39名志愿者不接种菌苗,仅在同一时间用相同菌攻击(对照组),以评估他们对     

Peru-15——改良的O1群霍乱弧菌口服减毒活菌苗

霍乱菌苗Peru-15来源于稻叶型El Tor弧菌,经去除霍乱毒素基因片段后,将编码霍乱毒素B亚单位的基因插入recA基因座,筛选出不泳动的突变株即为Peru-15。 作者将年龄在18～40岁,以前无霍乱样病史或霍乱菌苗接种史的14名志愿者随机分成两组:11人给予单剂2×10~8菌落形成单位(cfu)Peru-15;3人给予安慰剂。每天对志愿者进行临床症状观察,收集所有的大便称重,依其性状分级并送培养,24小时内无大便者通过直肠拭子获取样本进行培养。服苗后6天给予四环素治疗以消除菌苗株排出。服苗后1个月,分别给予其中5名服苗者及新选的5名对照者5×10~6cfu的霍乱弧菌N16961野毒株攻击,同样进行症状记录及大便培养。大便总     

口服双价霍乱B亚单位-O1群/O139型全菌体菌苗后的肠道和全身免疫应答

口服双价霍乱B亚单位-O1群/O139型全菌体(B-O1/O139WC)菌苗是通过向近期获准生产的口服霍乱重组B亚单位-O1群全菌体(B-O1WC)菌苗中加入经福马林灭活的O139型霍乱弧菌制成的。作者就其安全性和免疫原性进行了研究。     

口服霍乱灭活菌苗能预防和减轻霍乱流行区内O1群霍乱弧菌感染

在孟加拉国Matlab现场试验区作者进行了口服霍乱灭活菌苗的现场观察。菌苗为     

用重组体技术制备的O1群霍乱弧菌缺失变异株免疫志愿者的研究

O1群霍乱弧菌A-B-候选菌苗株JBK70是EL Tor稻叶型亲代株N16961经诱变导致霍乱毒素A和B亚单位基因缺失的衍生株;A-B菌苗CVD101株是由小川型395株经诱变致A亚单位基因缺失而来;CVD102菌株是CVD101自然衍生的胸腺嘧啶依赖性营养缺陷型变异株;CVD104是JBK70经诱变使EL tor溶血素基因缺失的衍生株;CVD105是CVD101经诱变使溶血素基因缺失的衍生株。志愿者     

O1群稻叶型霍乱弧菌脂多糖-霍乱毒素结合菌苗在成人志愿者中的Ⅰ期评估[英]

作者在健康成人中评价肼处理的O1群稻叶型霍乱弧菌特异性脂多糖（DeALPS）分别和霍乱毒素变体CT-1和CT-2结合而构成的菌苗DeALPS-CT-1和DeALPS-CT-2的安全性和免疫原性。     

用交联的类毒素菌苗免疫大鼠对人和猪的产肠毒素性大肠杆菌株的防御作用

无论用大肠杆菌不耐热毒素(LT)或耐热毒素(ST)免疫动物,其抗毒素应答只限于同种毒素,因而对产肠毒素性大肠杆菌株(ETEC)的防御作用局限于所产生的毒素类型。为此,作者制备了ST-LT B亚单位交联类毒素菌苗,以便能防御所有ETEC菌株,并产生两种抗毒素应答。     

百日咳全细胞或无细胞菌苗初免后对菌苗及抗原依敕性1型和2型细胞因子的诱导

本文对百日咳全细胞菌苗DTP(DTwP)和百日咳无细胞菌苗DTP(DTaP)初免后细胞因子诱导情况进行了探讨。     

表达JEV prM和E基因的高度减毒痘苗病毒MVA株免疫小鼠后对致死性JEV感染的防御作用

作者将韩国分离的乙型脑炎病毒（JEV）野毒株K94P05的糖基化膜前体（PrM）和包膜(E）蛋白的基因插入到高度减毒的宿主范围限定的痘苗病毒MVA株基因组内,获得两个重组病毒vJH6和vJH9,分别由合成的痘病毒启动子Psyn和修饰的痘苗病毒H5启动子控制。JEV野毒株K94P05的核苷酸序列与JEV原型中山株有88％相同,但是K94P05株的E基因内没有痘菌病毒早期终止信号。应用转移载体将目的JEV基因转移至MVA基因组内的缺失位点组成重组病毒并用JEV抗体免疫染色进行检测,结果表明两个重组体都稳定地表达prM和E蛋白。但vJH9的滴度较vJH6高3～5倍。vJH6和vJH9感染的CEF细胞与抗JEV K94P05株E蛋白表位的单克隆抗体NBl的免疫荧光反应强度与K94P05野毒株相似,而非重组MVA感染的细胞则未显示这种染色结果。用JEV多克隆抗体的结果与单克隆抗体相似。