反相高效液相色谱法测定雷贝拉唑的血药浓度

目的　建立测定雷贝拉唑血药浓度的高效液相色谱(HPLC)方法。方法　色谱条件 :luna C8色谱柱 ,流动相为 2 0mmol·L-1 磷酸盐缓冲液 (pH7 0 ) /乙腈 (70 / 30 ,V/V) ,流速1 2ml·min-1 ,测定波长 2 88nm ,以雷贝拉唑峰面积定量。结果　雷贝拉唑的标准曲线为 ^Y =1 2 4 95 0X - 80 6 0 5 (r =0 999) ,线性范围为 0 0 1～ 0 75mg·L-1 ,具有良好的线性关系 ;其 0 0 5、0 1、0 5mg·L-1 3个浓度的血清样本回收率分别为 75 2 3%± 3 0 2 %、84 2 3%± 3 33%、91 0 5 %± 7 5 1 % ;日内变异分别为 5 0 9%、9 2 0 %、6 75 % ;日间变异分别为8 2 5 %、3 5 1 %、4 1 9%。结论　该方法简便、快速且无干扰 ,满足测定要求 ,可用于雷贝拉唑的药代动力学研究     

蛋白酪氨酸激酶抑制剂对脑血管平滑肌细胞Ca~(2+)池操纵性Ca~(2+)内流的影响

目的　研究蛋白酪氨酸激酶和蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂对牛脑血管平滑肌细胞 (CSMC)Ca2 + 池操纵性Ca2 + 内流的影响。方法　采用培养的CSMC ,在生物荧光双波长影像分析系统用Fura 2 /Am荧光探针测定单个细胞内游离Ca2 + 浓度。结果　 (1)蛋白酪氨酸激酶抑制剂 (genistein ,2 5 ,5 ,10 μmol·L-1)能浓度依赖性降低内皮素 1(ET 1,10 -7mol·L-1)刺激引起的CSMCCa2 + 内流 ,抑制率分别为5 6%± 2 .9%、2 5 6%± 3 9%、48 9%± 3 7% ;蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂 (vanadate ,2 ,4,8μmol·L-1)能浓度依赖性升高CPA刺激引起的CSMCCa2 + 内流 ,增加比率分别为8 2 %± 3 9%、18 8%± 4 9%、46 6%± 6 9% ;(2 ) genistein(2 5 ,5 ,10 μmol·L-1)能浓度依赖性降低ATP(10 μmol·L-1)刺激引起的CSMCCa2 + 内流 ,抑制率分别为 6 7%±2 6%、2 4 6%± 6 5 %、5 1 3 %± 6 9% ;vanadate (2 ,4,8μmol·L-1)能浓度依赖性升高ATP刺激引起的CSMCCa2 +内流 ,增加比率分别为 4 8%± 2 0 %、2 8 5 %± 4 6%、49 6%± 3 3 % ;(3 ) genistein (2 5 ,5 ,10 μmol·L-1)能浓度依赖性降低环匹阿尼酸 (Cyclopiazonicacid ,CPA ,10 μmol·L-1)刺激引起的CSMCCa2 + 内流 ,抑制率分别为 6 5 %± 3 0 %、2 2 5 %± 5 2 %、     

偏振荧光光度法同时测定氨基酸注射液及动、植物浸出液中酪氨酸、色氨酸的研究

酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸具有荧光,本文使用互相垂直的偏振片有效地消除了苯丙氨酸的干扰和溶剂散射光的影响;附加滤光片,进一步提高了酪氨酸与色氨酸荧光测定的选择性。线性范围分别为0.02～12.0mg·L^-1(酪氨酸)与0.01～2.5mg·L^-1(色氨酸)。此法可直接用于氨基酸注射液和动、植物浸出液中游离酪氨酸、色氨酸的分析,结果满意。     

HPLC法同时测定人血清中犬尿氨酸和色氨酸的浓度

目的:建立同时测定人血清中的犬尿氨酸和色氨酸浓度的方法。方法:血清样品用24%高氯酸以10:1进行蛋白沉淀处理,取上清液进样分析。采用高效液相色谱-紫外/荧光检测器法分别检测犬尿氨酸和色氨酸浓度,色谱柱为Accurasil-C18,流动相为乙酸钠-乙腈溶液(24.8mmol.L-1乙酸钠,用乙酸调pH值至约4.0)=90:10,流速1.0mL.min-1,紫外检测波长为360nm,荧光检测激发波长为285nm、发射波长为365nm。结果:犬尿氨酸、色氨酸血药浓度分别在0.16～20.89(r=0.9999)、0.24～61.58μmol.L-1(r=0.9996)范围线性关系良好;高、中、低3种浓度的方法回收率分别为91.33%～101.82%、91.49%～104.37%;日内及日间RSD均<6%。结论:本方法稳定、可行,可为临床疾病的诊断和药物治疗提供实验室依据。     

高效液相色谱法测定苯溴马隆血药浓度及生物等效性研究

目的建立人血浆中苯溴马隆的高效液相色谱测定法,并观察苯溴马隆在健康人体内的药代动力学;同时对苯溴马隆国产胶囊和进口片进行生物等效性研究.方法色谱柱为Lichrospher C185mm(250×4.6 mm);流动相为乙腈-水-三乙胺(70300.05),用冰乙酸调pH 5.68;紫外检测波长280nm,以华法令为内标,血样经乙醚-正己烷(21)提取剂提取.用3P87药代动力学程序计算有关药代动力学参数.结果该方法简单灵敏,线性范围为0.050～7.50mg·L-1,线性关系良好,r=-0.9993,最小检测浓度0.02mg·L-1;日内、日间误差均小于13.0%,回收率大于90%.20名健康志愿者随机交叉口服单剂量100mg国产苯溴马隆胶囊和进口苯溴马隆片后的主要动力学参数分别为AUC0-2418.02±9.31mg·h·L-1和17.59±7.72mg·h·L-1,tmax分别为2.98±0.62 h和3.15±0.59 h,Cmax分别为3.19±0.91mg·L-1和2.94±1.04mg.L-1.上述药代动力学参数经方差分析和双单侧t检验统计分析,均无显著性差异.结论以进口片为标准参比制剂,国产胶囊的相对生物利用度为102.1%±13.8%.结果表明两种制剂生物等效.     

克拉维酸/阿莫西林分散片与普通片的人体相对生物利用度研究

目的　利用反相液相色谱法比较克拉维酸 /阿莫西林分散片与克拉维酸 /阿莫西林普通片安奇的人体生物利用度。方法　 18名男性健康志愿受试者采用两周期随机交叉试验 ,分别口服克拉维酸 /阿莫西林分散片与克拉维酸 /阿莫西林普通片安奇 (克拉维酸 12 5mg ,阿莫西林 5 0 0mg)。用HPLC法同时测定血浆中克拉维酸和阿莫西林的浓度 ,计算克拉维酸和阿莫西林的药代动力学参数 ,计算分散片的相对生物利用度。结果　分散片和普通片克拉维酸的Tmax为(0 89± 0 2 5 )h和 (1 0 1± 0 30 )h ;Cmax为 (1 92± 0 6 4 )mg·L-1和 (1 4 9± 0 6 5 )mg·L-1;AUC0→∞ 为 (4 347±1 5 4 2 )mg·h·L-1和 (3 395± 1 4 6 8)mg·h·L-1,相对生物利用度 15 1 0 9%± 86 0 0 %。阿莫西林Tmax 为 (1 15±0 4 1)h和 (1 34± 0 4 0 )h ;Cmax(5 81± 1 4 0 )mg·L-1和(4 6 0± 1 37)mg·L-1;AUC0→∞ 为 (13 4 72± 3 114 )mg·h·L-1和 (11 937± 2 735 )mg·h·L-1,相对生物利用度118 4 1%± 31 5 6 %。两者间除阿莫西林Tmax的差异无统计学意义外 ,克拉维酸 /阿莫西林分散片的克拉维酸Tmax小于克拉维酸 /阿莫西林普通片安奇的克拉维酸Tmax(P <0 0 5 ) ,克拉维酸 /阿莫西林分散片的克拉维酸Cmax、AUC0→∞ 和阿莫西林Cm     

单剂量与多剂量口服罗红霉素缓释片与普通片的犬体药物动力学研究

目的　研究健康家犬单剂量与多剂量口服罗红霉素(Rox)缓释片的药物动力学。方法　采用健康家犬 6只随机交叉单剂量与多剂量口服Rox缓释片与普通片 ,微生物法测定血药浓度 ,应用 3p97程序计算主要药动学参数 ,对AUC0～∞ 、AUC0～T或AUC0～τ的对数值进行方差分析、双单侧t检验等统计学处理 ,以 80 %～ 12 5 %为等效标准 ,评价缓释制剂与普通制剂的生物等效性。结果　单剂量时Rox缓释片的Tmax、Cmax、AUC0～T、AUC0～∞ 和MRT分别为(2 2 5± 0 99)h、(4 2 6± 1 70 )mg·L-1、(2 8 73± 10 4 6 )mg·h·L-1、(34 6 4± 9 5 7)mg·h·L-1和 (15 84± 1 6 3)h ,普通片的上述参数分别为 (1 33± 0 2 6 )h、(6 32± 2 79)mg·L-1、(2 8 6 8± 8 16 )mg·h·L-1、(34 4 9± 5 6 3)mg·h·L-1和 (12 95± 1 5 6 )h。多剂量达稳态时Rox缓释片的Tmax、Cmax、Cmin、AUC0～τ、AUC0～∞ 、Cav、DF和FI分别为(2 5 0± 0 4 5 )h、(4 38± 1 2 5 )mg·L-1、(0 4 9± 0 0 6 )mg·L-1、(2 4 91± 2 38)mg·h·L-1、(39 71± 6 4 8)mg·h·L-1、(1 0 4± 0 10 )mg·L-1、370 4 2 %± 98 4 1%和 15 7 36 %±11 86 % ,普通片的上述参数分别为 (1 4 2±0 38 )h、(6 13± 1 2 6 )mg·L-1、(0 4 3± 0     

氨糖美辛肠溶片在健康志愿者的生物等效性研究

目的:研究po氨糖美辛肠溶片在20名健康志愿者体内的相对生物利用度和生物等效性。方法:20名健康男性志愿者按双周期、随机交叉口服单剂量含吲哚美辛75 mg的试验和对照氨糖美辛肠溶片两种制剂,用HPLC法测定血清中吲哚美辛的浓度,并用3P97对试验数据进行统计处理。结果:单剂量口服试验及对照氨糖美辛肠溶片的C_(max)分别为4.685±1.168mg·L~(-1)和4.888±1.414 mg·L~(-1);t_(max)分别为2.9±1.2 h和3.4±0.9 h;AUC_(0-24)分别为20.468±3.461 mg·h·L~(-1)和20.415±4.777 mg·h·L~(-1);AUC_(0-∞)分别为22.908±3.884 mg·h·L~(-1)和23.151±5.509 mg·h·L~(-1);试验氨糖美辛肠溶片的相对生物利用度为(102.24±2.98)％。结论:两种氨糖美辛肠溶片具有生物等效性。     

高效液相色谱法测定儿童万古霉素血药浓度

目的:建立高效液相色谱法测定儿童万古霉素血药浓度,并为临床评估疗效、调整给药剂量提供方法学基础.方法:建立万古霉素标准曲线,血浆样品通过10%硫酸锌沉淀,采用Insertil ODS-3色谱分析柱,以甲醇、磷酸二氢钾缓冲液、乙腈(pH=3.2010:86:4)(v/v/v)为流动相,流速1mL·min-1,检测波长为196nm,柱温为28℃,进样量为20μL.结果:万古霉素血浆样品质量浓度在1.5625mg·L-1至100mg·L-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9996,n=7).低、中、高3个质量浓度溶液的方法回收率分别为98.52%±3.88、97.52%±1.74和100.00%±4.86,RSD分别为3.94%、1.79%和4.86%.结论:本方法灵敏、快速、简便、可靠,可用于儿童万古霉素的血药浓度监测及临床药学研究.     

葡甘聚糖对大鼠口服荧光素钠吸收的影响

目的 :研究葡甘聚糖对大鼠口服荧光素钠药动学的影响。方法 :利用荧光素钠作为示踪药物 ,HPLC反相柱色谱分离原药 ,荧光高效液相法定量分析血清荧光素钠含量。结果 :大鼠灌胃荧光素钠溶液T12 α为 (5 .0± 0 .9)min ,T12 β为 (43± 9)min ,Tmax为 (7.5± 0 )min ,Cmax为 (192± 7)mg·L- 1,AUC为 (83± 17) μg·h- 1·L- 1。以 0 .4 %或 0 .8%的葡甘聚糖为制剂时T12 α分别为 (2 0± 6 )min和 (38± 13)min ,T12 β为 (6± 3)h和 (2 5± 12 )h ,Tmax为(19± 9)min和 (40± 16 )min ,Cmax为 (92 .3± 2 .0 )mg·L- 1和 (5 2± 3)mg·L- 1,AUC为 (6 14± 10 5 ) μg·h- 1·L- 1和 (30 1± 2 2 ) μg·h- 1·L- 1。结论 :葡甘聚糖能明显改变口服药物的药动学参数 ,如降低血药峰值浓度 ,提高AUC。     

反相高效液相色谱法测定小鼠血浆中醋酸洗必泰浓度

目的 :建立小鼠血浆中醋酸洗必泰浓度的反相高效液相色谱测定法。方法 :以十二烷基磺酸钠为反离子 ,安定为内标 ,采用离子对萃取法对血样进行提取 ;μ-BondapakC18 柱 (3 9mm×300mm ,10μm)为分析柱 ,0 02mol/L磷酸二氢钾缓冲液 (pH=3)∶甲醇(44:56 ,V/V)为流动相 ,检测波长为257nm。结果 :醋酸洗必泰在0 5～10μg/ml血药浓度范围内 ,浓度与峰面积比值间线性关系良好 ,r=0 9997 ;3种血浆浓度 (1、4、8μg/ml)平均回收率为104 67 % ,日内、日间精密度分别为1 5 %、0 37 %、0 26 %及2 45 %、0 46 %、1 27 % ;血浆中药物的最低检测浓度为0 4μg/ml。结论 :该方法灵敏、准确 ,适用于临床药代动力学的研究。     

HPLC法测定人血浆中丁咯地尔的质量浓度

目的建立测定人血浆中丁咯地尔质量浓度的HPLC法,并应用该法研究盐酸丁咯地尔片在健康人体内的药动学。方法色谱柱为Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-50mmol.L-1磷酸二氢铵缓冲液-三乙胺(体积比25∶75∶0.05),检测波长为275 nm,内标为乌拉地尔。结果丁咯地尔质量浓度线性范围为20μg.L-1～6.000 mg.L-1,回归方程为Y=0.260 5ρ-0.904×10-3,r=0.999 5,提取回收率大于87%,日内和日间RSD均小于7%。18例健康志愿者分别经口给予盐酸丁咯地尔的受试制剂和参比制剂300 mg后,血浆中丁咯地尔的tmax分别为(1.56±1.26)和(1.19±0.84)h,ρmax分别为(2.458±0.887)和(2.595±0.725)mg.L-1,t1/2分别为(4.88±1.25)和(4.96±1.42)h,AUC0-24分别为(16.275±5.931)和(16.040±5.831)mg.h.L-1,AUC0-∞分别为(17.110±6.521)和(17.008±6.782)mg.h.L-1。结论此法简便、快速,适用于盐酸丁咯地尔药动学研究以及临床上血浆药物浓度监测。     

反相高效液相色谱法检测兔血浆胞磷胆碱浓度

目的:建立兔血浆胞磷胆碱浓度检测的高效液相色谱方法。方法:血浆经高氯酸沉淀,以Venusil MP-C₁₈为色谱柱;流动相为0.1%三氟乙酸,流速为0.8 ml·min^-1;检测波长282 nm。结果:胞磷胆碱浓度在0.25～40.00 mg·L^-1范围内线性关系良好（r=0.999 8）;低中高三个浓度(0.50,10.00,30.00 mg·L^-1)的相对回收率分别为（100.87±3.38）%、（99.53±2.30）%和（100.47±1.47）%;日内RSD分别为3.37%、2.73%和1.76%,日间RSD分别为3.86%、3.34%和1.81%。结论:本方法简便、快速、准确可靠,适用于兔血浆胞磷胆碱浓度的测定及其药物动力学研究。     

反相高效液相色谱法测定马西替坦有关物质

目的 建立马西替坦有关物质的反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定方法.方法 采用Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-水-甲酸(50:50:0.1)为流动相A,以乙腈-水-甲酸(85:15:0.1)为流动相B,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为260 nm.结果 在选定色谱条件下,马西替坦与各杂质之间分离良好,杂质A、杂质B、杂质C、杂质D浓度分别在0.042~10.445 mg·L-1(r=1.000 0)、0.024~9.880 mg·L-1(r=1.000 0)、0.060~9.380 mg·L-1(r=0.999 5)、0.051~9.736 mg·L-1(r=1.000 0)范围内与峰面积呈良好的线性关系,上述杂质的平均回收率分别为99.91%、98.15%、98.51%、98.59%,RSD分别为1.61%、2.45%、3.89%、2.87%(n=9).结论 该方法专属性好,可用于测定马西替坦中的有关物质.     

高效液相色谱法测定人血清中拉莫三嗪浓度

目的评价高效液相色谱测定人血清中拉莫三嗪浓度的方法。方法用Hypersil C18色谱柱,柱温为30℃,流动相为1%三(羟甲基)氨基甲烷-乙腈(70∶30),流速为0.8 mL.min-1,测定波长为230 nm。结果拉莫三嗪血清样品线性范围为0.39～50.00 mg.L-1,1.56,6.25,25.00 mg.L-13个浓度质控样品日内、日间精密度(RSD)均<5%,方法学回收率分别为(103.8±3.6)%,(100.0±2.2)%,(99.1±4.2)%。结论本方法回收率高、准确度好、操作简便,适用于临床上对拉莫三嗪血药浓度的常规监测。     

RP－HPLC法同时测定人血浆中劳拉西泮与帕罗西汀浓度

目的：建立同时测定人血浆中劳拉西泮、帕罗西汀浓度的反相高效液相色谱法。方法以 Agilent TC－C18反相柱（150mm ×4．6mm,5μm）为色谱柱,流动相为20mmol? L －1醋酸铵－甲醇－乙腈（20∶35∶45 V／V／V）;流速：1．0mL? min －1;检测柱温：30℃;检测波长：220nm。提取剂为乙酸乙酯与二氯甲烷（77∶23 V／V）。结果劳拉西泮在5．0～240．0μg? L－1、帕罗西汀在10．0～480．0μg? L－1浓度范围内,峰面积与其浓度呈良好线性关系;劳拉西泮、帕罗西汀的低、中、高3种浓度相对平均回收率大于97％;提取回收率大于70％。日内、日间RSD均低于15％（ n＝5）。分析方法的检测限2．50μg? L －1;劳拉西泮线性方程：Y ＝8．63X ＋1．27,r＝0．9985（n ＝7）;帕罗西汀线性方程：Y ＝11．76X ＋1．12,r ＝0．9983（ n＝7）。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床劳拉西泮与帕罗西汀血药浓度监测和药动学研究。     

互为内标法测定奈替米星和链霉素的血药浓度

目的：建立人血清中硫酸奈替米星和硫酸链霉素的浓度的HPLC测定方法。方法：采用色谱柱KromnsilC18柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液（10：90,pH2．5,含10mmol／L庚烷基硫酸钠）,流速0．8mL／min,柱温40℃,检测波长205nm。奈替米星和链霉素互为内标。结果：本法奈替米星和链霉素的线性范围分别为：2mg·L-1～20mg·L-1（r=0．9995,n=6）及1mg·L-1～60mg·L-1（r=0．9992,n=6）。回收率分别为100．9％及99．8％,奈替米星的日内日间RSD分别为3．95％、5．10％;链霉素的日内日间RSD分别为4．22％、5．09％。结论：本法灵敏度较高,结果准确可靠,操作简便,适合临床常规血药浓度监测。     

液相色谱串联质谱法测定人血清中硝苯地平的浓度

目的建立液相色谱串联质谱法测定人血清中硝苯地平浓度。方法血清样品用甲醇沉淀蛋白,内标为尼群地平,色谱柱为Kromasil C18(4.6mm×150mm,5μm),柱温为30℃,流动相为甲醇-水(90:10,V/V),流速为0.5ml·min-1。质谱采用ESI离子源负离子检测,定量分析的离子对为:m/z345.1/122.0(硝苯地平),m/z359.2/122.0(内标尼群地平)。结果硝苯地平在0.5μg·L-1～50μg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9987),批内批间RSD均小于15%,提取回收率为64.06%～77.10%。结论该方法快速,灵敏,准确,可用于硝苯地平的临床药动学研究。     

HPLC法测定天麻头风灵胶囊中原儿茶酸紫丁香苷和绿原酸的含量

目的 建立同时测定天麻头风灵胶囊中原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸含量的方法。方法 采用HPLC法。色谱柱为Diamonsil C18 柱(200 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为甲醇-乙腈-0.05 %磷酸溶液(体积比20:5:174),流速为1.0 mL·min-1,柱温为 35 ℃,检测波长为 281 nm。 结果 原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸质量浓度分别在2.40~24.0 mg·L-1、5.20 ~ 52.0 mg·L-1、26.6 ~ 266 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系,r分别为0.999 6、0.999 7、0.999 5,平均回收率分别为101.0 % (RSD=0.86 % , n= 9)、100.3 % (RSD=1.9 % , n= 9) 、 101.5 % (RSD=1.4 % , n=9)。结论 HPLC法可用于天麻头风灵胶囊的质量控制。