尼可地尔对体外培养乳鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响

目的:为了研究尼可地尔(nicorandil,Nic)抗心律失常的作用机制.方法:体外培养乳鼠心肌细胞并观察Nic对培养心肌细胞自发性搏动频率及动作电位的影响.结果:Nic能使体外培养乳鼠心肌细胞自发性搏动频率下降.Nic 60 μmol L~(-1)对CaCl_21 mmol L~(-1)及异丙肾上腺素2 μmol L~(-1)增加的细胞搏动率有抑制作用.Nic 32和160 μmol L~(-1)能使动作电位幅度(APA)及最大上升速率(V_(max))明显下降,使动作电位时程(APD_(50),APD_(90))缩短,搏动周期(SCL)显著延长.结论:Nic的抗心律失常机制与其对心肌细胞的直接作用有关.     

胺碘酮对离体心肌的负性肌力作用

对离体左,右心房肌,胺碘酮(Ami)1～100μmol·L~(-1)均有负性肌力作用,30μmol·L~1明显抑制心肌静息后收缩,正阶梯和成对刺激效应,1～10μmol·L~1使苯福林,异丙肾上腺素,组胺和CaCl_2正性肌力作用的量效曲线呈非竞争性拮抗作用,心肌动作电位和收缩力同步记录发现,Ami 30μmol·L~1减弱心肌收缩,延长APD,但对平台期和V_(max)无影响.故Ami的负性肌力作用可能是抑制心肌细胞外Ca~(2+)内流和细胞内Ca~(2+)释放所致,并非选择性阻滞心肌α,β和H_2受体以及电压依赖性钙通道引起 .     

呋喃二氢吡啶Ⅰ对豚鼠心肌收缩力及动作电位的影响

呋喃二氢吡啶I(FDP I)呈浓度依赖性地抑制豚鼠心肌收缩力,IC_(50)为1.62μmol·L~1,并能抑制心肌静息后增强效应.成对刺激及正阶梯现象的收缩幅度,离体心乳头状肌细胞跨膜电位实验表明:FDPI 1.0、4.0μmol·L~1能缩短动作电位之APD_(30)·APD_(50),APD_(90),硝苯碇(Nif)0.1.1.0,4.0μmol·L~1亦能缩短APD,但两药在所试浓度范围内,对APA和V_(max)均无明显影响。     

1—（2，6—二甲基苯氧基）—2—（3，4—二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐抑制豚鼠心室肌细胞内向整流和延迟整流钾电流

目的:研究1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)对心室肌细胞动作电位(AP)、内向整流钾通道电流(I_(K1))及延迟整流钾通道电流(I_K)的影响。方法:全细胞膜片箝技术。结果:DDPH 10,100μmol·L~(-1)使豚鼠心室肌细胞AP时程APD_(50)明显缩短;但DDPH(>1μmol·L~(-1))延长APD_(90)。DDPH浓度依赖性地抑制I_K尾电流(I_(K·tail)),EC_(50)为13.3(11.6.6-16.7)μmol·L~(-1)。DDPH(>1.0μmol·L~(-1))明显抑制I_(Kl);同时,DDPH使I_(Kl)翻转电位向正电位方向移动。结论:DDPH对豚鼠心室肌细胞I_(Kl)和I_K具有明显的抑制作用。     

人参皂苷Rg2对心肌细胞搏动幅度和存活率的影响

目的:研究人参皂苷Rg_2对心肌细胞搏动幅度和存活率的影响。方法:采用体外培养心肌细胞法,制备心肌细胞缺氧缺糖模型。结果:人参皂苷Rg_2在10和40μmol·L~(-1)浓度时对正常培养心肌细胞搏动幅度和存活率无影响,而对缺氧缺糖心肌细胞均有增加搏动幅度和存活率的作用,但其增加搏动幅度作用不及毒毛花苷G(Str),而其存活率在相同浓度下(10μmo·L~(-1))略高于Str。结论:人参皂苷Rg_2明显增加缺氧缺糖心肌细胞搏动幅度和存活率。     

乙胺噻嗪对培养乳鼠心肌细胞电生理特性的影响

目的　探讨乙胺噻嗪抗心律失常作用是否与抑制慢反应心肌细胞有关。方法　在体外培养大白鼠乳鼠心室肌细胞 ,采用显微镜直接观察和细胞内动作电位记录方法 ,研究乙胺噻嗪对这种慢反应心肌细胞的自律性、传导性和动作电位时程等电生理参数的影响。结果　 0 1～ 5 0 μmol·L-1剂量依赖性抑制细胞自发性搏动频率 ,最大抑制率为 5 2 % ,半效抑制浓度为 0 17μmol·L-1;乙胺噻嗪作用心肌细胞后15～ 30min ,对搏动频率的抑制作用开始达稳态 ;2 5 μmol·L-1乙胺噻嗪负性频率作用达稳态时 ,部分对抗了 2mmol·L-1氯化钙和 1μmol·L-1异丙肾上腺素的正性频率作用 ,完全对抗了 0 2mg·L-1乌头碱的正性频率作用 ;0 3、0 9、2 5μmol·L-1乙胺噻嗪剂量依赖性抑制细胞动作电位参数APA、OS、Vmax、SP4和MDP ,剂量依赖性延长动作电位周期长度SCL ,0 9、2 5 μmol·L-1略延长APD90 。结论　乙胺噻嗪对慢反应心肌细胞的自律性和传导有明显抑制作用、略延长动作电位时程 ,乙胺噻嗪对慢反应心肌细胞自律性的抑制可能与抑制Ca2 + 和Na+ ,特别是Na+ 的作用有关     

美蓝对电刺激毁脑脊髓大鼠交感神经诱发的后肢缩血管反应的影响

用含10/μmol·L~(-1)的美蓝及同浓度的血红蛋白营养液恒速灌流,使高频(16Hz)电刺激毁脑脊髓大鼠交感神经诱发的后肢血管灌流压升高作用明显增强,但对低频电刺激作用无明显影响.1μmol·L~(-1)乙酰胆碱显著抑制各频率电刺激引起的灌流压增高,提示血管内皮可能通过释放血管内皮舒张国子来缓解过度刺激肾上腺素能神经引起的缩血管反应。     

次乌头碱对乳大鼠原代培养心肌细胞的毒性作用

目的探讨次乌头碱(HA)对心肌细胞的毒性作用。方法制备乳大鼠原代心肌细胞,用锥虫蓝染色法检测心肌细胞存活率,用小鼠抗大鼠α横纹肌肌动蛋白和兔抗大鼠纤连蛋白多克隆抗体免疫化学染色法鉴定心肌细胞。制备的原代细胞培养3～4d,分别加入HA0,3,6,30,60和120μmol·L-1培养5,15,30和60min,记录每组细胞搏动频率;以HA体外引起心肌细胞搏动消失的浓度及作用时间为依据,将心肌细胞分为培养基对照,二甲亚砜(DMSO)对照,HA30,60和120μmol·L-1组,分别连续培养5,15,30和60min,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,倒置显微镜下观察细胞形态的变化。结果与HA0μmol·L-1组比较,HA30μmol·L-1与心肌细胞作用5,15,30和60min时细胞搏动频率增加,由40±26,42±27,38±19和(20±10)min-1分别增加到114±27,98±32,100±32和(49±13)min-1(n=12,P<0.01);HA120μmol·L-1立即导致心肌细胞停搏。不同浓度的HA随着作用时间的延长,导致LDH漏出率不同程度的增加,其中HA30,60和120μmol·L-1作用60min时细胞LDH漏出率分别为(29±8)%,(42±10)%和(57±9)%与同一时间点DMSO组比较有明显差异(P<0.01)。倒置显微镜观察发现,随着HA浓度的增加和作用时间的延长,心肌细胞有死亡现象。结论 HA对心肌细胞有毒性作用,主要表现为细胞搏动频率加快,细胞膜稳定性破坏;HA120μmol·L-1与心肌细胞作用超过120min会引起少量心肌细胞死亡。     

血管紧张素Ⅱ及牛磺酸对体外培养乳鼠肥大心肌细胞心律失常发生的作用

在培养72h的乳鼠心肌细胞,血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AgnⅡ)1,10,100和1000nmol·L^-1时,可浓度依赖性地增加细胞搏动频率;而牛磺酸5,10和20mmol·L^-1不影响心肌细胞搏动频率,但能浓度依赖性地拮抗AngⅡ100nmol·L^-1加快心肌细胞搏动频率的作用。AngⅡ100nmol·L^-1连续作用7d引起的培养乳鼠肥大心肌细胞搏动频率加快,动作电位APA升高,APD₅₀和APD90延长,SCL缩短;哇巴因50nmol·L^-1诱发的心肌细胞搏动节律失常发生率高于常规培养组。牛磺酸20mmol·L^-1可抑制AngⅡ引起的上述改变,并降低哇巴因诱发的心律失常发生率。     

牛磺酸镁配合物对乌头碱诱发心律失常大鼠心肌细胞钙通道的影响

目的研究牛磺酸镁配合物(TMCC)对乌头碱诱发心律失常大鼠心肌细胞L型钙电流(I_(Ca,L))的影响。方法酶解法分离大鼠单个心室肌细胞,乌头碱诱导大鼠心律失常模型,胺碘酮作为阳性对照,100、200和400μmol·L~(-1)TMCC作用于心肌细胞。应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞I_(Ca,L)的变化。结果 400μmol·L~(-1)TMCC显著增加大鼠正常心肌细胞I_(Ca,L),胺碘酮则使之减小。1μmol·L~(-1)乌头碱使I_(Ca,L)电流密度由(4.3±1.6)pA·pF~(-1)增加到(6.4±1.9)pA·pF~(-1)(p<0.01),400μmol·L~(-1)TMCC能显著降低乌头碱诱导的I_(Ca,L)增加。胺碘酮则能使之恢复为(3.7±1.4)pA·pF~(-1)。结论 400μmol·L~(-1)TMCC能增加正常细胞的I_(Ca,L),对钙内流有促进作用,并可减少乌头碱诱导的心律失常大鼠心肌细胞异常增加的电流。     

前胡丙素对培养乳鼠心肌细胞自发性收缩及动作电位的影响

用倒置显微镜闭路电视系统及细胞内标准微电极法,记录培养心肌细胞的自发性收缩及动作电位,结果发现:应用Pra-C5min后,心肌细胞收缩频率及细胞边缘运动的速度同时下降。Pra-C10,30和100μmol·L^-1剂量依赖性的方式抑制心肌细胞的收缩速度,分别抑制24%,43%和50%。pra-C(10和30μmol·L^-1)显示了抑制心肌细胞收缩频率的作用,分别抑制13%和19%。Nif3μmol.L^-1分别缩短APD₅₀和APD₉₀14%及17%,但同样浓度的verapatmil则抑制APA27%,缩短APD₅₀8%,分别延长APD90及SCL10%和43%。Pra-C10,30和100μmol·L^-1缩短APD₅₀7%,14%和18%。Pra-C100μmol·L^-1有抑制APA及延长SCL的作用。结果提示,Pra-C对心肌细胞收缩及动作电位的作用可能与其阻滞Ca²⁺通道有关。     

前胡丙素对培养心肌细胞~（45）Ca~（2＋）摄入及细胞内游离钙的影响

利用培养的乳鼠心肌细胞测定细胞４５Ｃａ２＋的摄入及细胞内游离钙的浓度。结果表明，前胡丙素（Ｐｒａ－Ｃ）１０－１００μｍｏｌ·Ｌ－１依浓度抑制４５Ｃａ２＿的摄入，并抑制由３０μｍｏｌ·Ｌ－１ＫＣｌ所引起的４５Ｃｓ２＋摄入的增加，同时Ｐｒａ－Ｃ１００μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素所诱发的４５Ｃａ２＿摄入的增加也有抑制作用。Ｐｒａ－Ｃ１０μｍｏｌ·Ｌ－１和维拉帕米１０μｍｏｌ·Ｌ－１能抑制细胞外高钾（３０，５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）引起的［Ｃａ２＋］ｉ的升高，同时Ｐｒａ－Ｃ３０ｍｏｌ·Ｌ－１和维拉帕米１０μｍｏｌ·Ｌ－１对去甲肾上腺素１０μｍｏｌ·Ｌ－１在无钙及含ＣａＣｌ２１．３ｍｍｏｌ·Ｌ－１的溶液中所引起的［Ｃａ２＋］，的增加也有抑制作用。提示前胡丙素对心肌细胞的作用与其阻滞钙通道有关。     

9-氨基四氢吖啶对颈上神经节胆碱能传递的增强和抑制作用

用大鼠颈上神经节细胞内记录技术对9-氨基四氢吖啶(THA)的作用进行了观察,发现低浓度(0·l或1μmol·L~(-1))灌流可增强快兴奋性突触后电位(f-EPSP,n=26)及外源性A Ch电位(n=19),但高浓度(50 或100μmol·L~(-1))不仅抑制f-EPSP(n=17)和ACh电位(n=4),且抑制氨甲酰胆碱电位(n=5)。结果表明THA因抗胆碱酯酶而增强胆碱能传递,但高浓度能抑制其传递。     

索他洛尔对培养乳鼠心肌细胞自发性搏动及动作电位的影响

观察了索他洛尔对培养乳鼠心肌细胞的作用，索他洛尔３－３００μｍｏｌＬ－１引起心肌细胞簇搏动频率浓度依赖性减小，３和３０μｍｏｌＬ－１能部分对抗乌头碱的正性频率作用，３０μｍｏｌＬ－１也能部分对抗毒毛花苷Ｇ的正性频率作用，索他洛尔３和３０μｍｏｌＬ－１延长５０％和９０％动作电位时程和搏动周期长度．结果提示，索他洛尔的抗心律失常作用与抑制Ｋ＋外流有关，也可能抑制Ｎａ＋内流．     

胍丁胺对体外培养海马神经前体细胞增殖的影响及作用机制

目的前期证明胍丁胺(agmatine,Agm)作为一种新型神经递质具有抗抑郁作用,能够促进慢性应激小鼠海马神经元再生。本实验通过观察胍丁胺对体外培养海马神经前体细胞增殖的影响及作用机制,探讨其抗抑郁作用的细胞分子机制。方法培养扩增新生大鼠海马神经前体细胞,通过3H-TdR参入法和CCK-8试剂盒检测胍丁胺对其增殖的影响;培养体系内加入H89(PKA特异性抑制剂)或PD98059(MEK特异性抑制剂),观察这两种抑制剂对胍丁胺作用的影响。结果胍丁胺在0.1~10μmol·L-1浓度范围内,浓度依赖性地促进神经前体细胞的增殖,这种促增殖作用可以被H89(10μmol·L-1)和PD98059(10μmol·L-1)取消。结论胍丁胺可以促进体外培养的海马神经前体细胞增殖,此作用与cAMP-PKA-CREB通路和MEK-ERK-CREB通路相关。     

胱胺对离体兔动脉环的舒张作用

用兔离体主动脉环观察腕胺对苯福林缩血管作用的影响以及与一氧化氮代谢的关系１０—１００μｍｏｌ·Ｌ￣（－１）的胱胺在苯福林预收缩的兔主动脉环表现缓慢而完全的舒张作用，呈剂量和时间依赖性，与内皮细胞存在与否无关。１００μｍｏｌ·Ｌ（－１）脱胺预温育５ｈ，使主动脉环对苯福林的收缩敏感性明显降低，ＥＣ＿（５０）增加，最大收缩力下降。胱胺结构类似物半胱胺，半胱氨酸，Ｎ—乙酰半脱氨酸均未见抑制血管收缩力的作用。亚甲基蓝（１０μｍｏｌ·Ｌ￣（－１）），血红蛋白（１μｍｏｌ·Ｌ￣（－１））及Ｎ＿ω—硝基精氨酸（１００μｍｏｌ·Ｌ￣（－１））均可部分反转胱胺对血管收缩力的抑制，使标本的最大收缩力恢复（Ｐ＜０．０５），提高标本对苯福林的敏感性，结果表明，胱胺对血管平滑肌有直接舒张作用，其机理可能与血管平滑肌细胞的一氧化氮代谢途径有关。     

腺苷对细胞免疫功能的影响

腺苷１３，１３０ｍｇ·ｋｇ－１抑制小鼠的迟发型超敏反应，１０，１００，１０００μｍｏｌ·Ｌ－１抑制小鼠外周全血的淋巴细胞增殖反应，脾淋巴细胞增殖反应和小鼠脾细胞产生白细胞介素２。在人外周血淋巴细胞转化反应中１０００μｍｏｌ·Ｌ－１才可见明显的抑制作用；氨茶碱２２μｍｏｌ·Ｌ－１逆转１０００μｍｏｌ·Ｌ－１的作用，潘生丁１０μｍｏｌ·Ｌ－１部分逆转１０００μｍｏｌ·Ｌ－１的作用，提示腺苷可能通过腺苷受体而起作用。