重组粉尘螨Ⅱ类变应原致敏小鼠肺部变应性炎症模型的建立

目的探讨以重组粉尘螨Ⅱ类变应原(rDerf2)建立小鼠肺部变应性炎症模型的方法。方法将30只6～8周龄雌性SPF级BALB/c小鼠,随机分为PBS组(阴性对照组)、卵清蛋白(OVA)组(阳性对照组)和rDerf2组(实验组)。实验组分别于第0、7、14天用rDerf2对小鼠腹腔进行注射致敏;再于第21天开始,连续7d进行雾化激发;对照组分别用PBS和OVA代替。最后一次雾化激发后24h内处死动物,观察肺组织病理变化、支气管肺泡灌洗液(BLAF)中的白细胞计数及分类,用ELISA测定BLAF和脾细胞培养上清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-17和IFN-γ的含量及血清中IgG1、IgE抗体水平变化。结果实验组和阳性对照组BALB/c小鼠肺组织呈现明显的炎症性病理改变;rDerf2组的BALF中白细胞总数〔(17.39±1.03)×106/L〕及嗜酸性粒细胞(EOS)〔(1.61±0.03)×106/L〕计数,均明显高于PBS组(P<0.01);BALF中IL-4〔(78.92±9.06)pg/ml〕、IL-17〔(201.63±31.26)pg/ml〕与PBS组比较呈明显的高水平表达(P<0.01);而IL-2〔(8.29±1.27)pg/ml〕和IFN-γ〔(51.04±15.85)pg/ml〕的含量则显著下降(P<0.01);上述指标在脾细胞培养上清中出现类似的变化。rDerf2组血清中IgE〔(37.63±6.57)IU/ml〕、IgG1〔(16.68±2.90)μg/ml〕的含量表现为Th2型反应增强趋势;但OVA组和rDerf2组间所有指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论用rDerf2腹腔注射致敏后再雾化激发的方式能够成功构建小鼠肺部变应性炎症模型。     

子宫内膜异位症患者外周血干扰素γ、白细胞介素4和白细胞介素6的变化及其临床意义

目的 探讨子宫内膜异位症(EM)患者外周血干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素6(IL-6)的变化及其临床意义.方法 用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测25例EM患者(EM组)及20例盆腔结构正常患者(对照组)外周血IFN-y、IL-4、IL-6水平.结果 EM组患者外周血IFN-γ[(109.64±26.79)ng/L]明显低于对照组[(155.17±30.36)ng/L](P＜0.05),IL-4[(33.52±8.69)ng/L]、IL-6[(44.12±3.57)ng/L]明显高于对照组[(22.52±6.54)、(15.12±2.63)ng/L](P＜0.05);IFN-γ/IL-4(3.27±1.45)、IFN-γ/IL-6(1.15±0.56)明显低于对照组(6.89±1.68、2.54±1.03)(P＜0.01或＜0.05).结论 EM患者有Th2细胞因子明显增多并占优势漂移的现象,Th1/Th2细胞因子失衡在EM的发病机制及疾病进展中可能具有重要的作用.

Abstract：

Objective To study the changes of interferon ( IFN )- γ ,interleukin(IL)-4 and IL-6 in endometriosis. Method The levels of peripheral blood IFN-γ ,IL-4 and IL-6 in 25 patients with endometriosis (EM group) and 20 normal adults (control group) were detected by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Results The level of peripheral blood IFN- γ in EM group [(109.64±26.79 ) ng/L] was lower than that in control group [(155.17±30.36) ng/L] (P ＜ 0.05 ), IL-4[(33.52 ± 8.69)ng/L]and IL-6 [(44.12 ± 3.57) ng/L] were higher than those in control group [(22.52 ± 6.54), ( 15.12 ±2.63 )ng/L](P＜0.05 ).The ratio of IFN-γ/II-4(3.27±1.45 ) and IFN- γ/IL-6 ( 1.15 ± 0.56 ) in EM group were significantly lower than those in control group (6.89 ±1.68,2.54 ±1.03)(P ＜0.01 or ＜0.05).Conclusions Th1 cells shift toward Th2 cells in patients with endometriosis. Th1/Th2 ratio may be correlated with the pathogenesis of endometriosis.     

前列腺素E1联合重组人红细胞生成素对尿毒症患者的肾性贫血疗效及对炎症因子的影响

目的 考察前列腺素E1联合重组人红细胞生成素对尿毒症患者的肾性贫血疗效及对炎症因子的影响.方法 收集2009年2月～2012年1月在某院治疗的尿毒症患者79例,随机分为2组:43例前列腺素E1联合重组人红细胞生成素组(试验组)和36例重组人红细胞生成素组(对照组),考察用药前后取血红蛋白(Hb)、血细胞比容(HCT)、血清铁蛋白(SF)、转铁蛋白饱和度(TSAT)和血浆C-反应蛋白(CRP)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α).结果 两个组别的性别、年龄、体重指教和病程相当,差异无统计学意义(P＞ 0.05).经治疗后两个组别Hb[(63.5±10.2) g/L vs.(92.4±15.2) g/L,P＜0.05; (65.9±12.7) g/Lvs.(100.7± 11.9) g/L,P＜0.05)]、HCT[(21.3±3.8)％vs.(26.8±3.6)％,P＜0.05; (20.9±4.1)％vs.(29.5±4.1)％,P＜0.05)]、SF [(126.5±75.3) ng/ml vs.(469.8±106.5) ng/ml,P＜0.05; (131.1±64.9) ng/ml vs.(538.7±164.3) ng/ml,P＜0.05)]和TSAT[(20.7±5.4)％vs.(29.6±5.4)％,P＜ 0.05; (20.9±7.0)％vs.(32.6±3.0)％,P＜0.05)]显著升高(P＜0.05);与对照组比,Hb [(92.4±15.2) g/L vs.(100.7±11.9)g/L,P＜0.05)]、HCT[(26.8±3.6)％vs.(29.5±4.1)％)]、SF[(469.8±106.5) ng/ml vs.(538.7±164.3) ng/ml,P＜0.05)]和TSAT [(29.6±5.4)％vs.(32.6±3.0)％,P＜0.05)]升高明显.与治疗前比,对照组治疗后CRP、IL-6和TNF-α略有降低,但差异无统计学意义(P＞0.05),试验组CRP[(5.6±1.5) mg/ml vs.(4.5±1.8) mg/ml]、IL-6[(7.2±1.6) pg/ml vs.(5.5±2.3) pg/ml]和TNF-α[(9.1±2.2)pg/ml vs.(7.1±5.1) pg/ml)]显著降低(P＜0.05).结论 前列腺素E1联合重组人红细胞生成素对尿毒症患者能更有效改善患者贫血和缺铁,降低尿毒症患者的微炎症状态.     

蒿芩清胆汤对流行性感冒病毒性肺炎湿热证小鼠机体的免疫调节作用

目的 在动物模型的基础上,探讨蒿芩清胆汤在小鼠机体免疫调节中的信号传导机制,为该药物治疗湿热证打下理论基础.方法 采用随机数字表法将40只由美国国立卫生研究院(National Institute of Health,NIH)培育而成的小鼠(1980年引进我国,简称NTH小鼠)分为正常组8只、流行性感冒(简称流感)病毒组(单纯病毒感染)8只、复合模型组(高脂饮食+湿热环境+病毒感染)8只、阳性药物组(模型组+病毒唑)8只、蒿芩清胆汤组(模型组+蒿芩清胆汤)8只.计算各组小鼠肺指数及肺指数抑制率;提取小鼠腹腔巨噬细胞用逆转录PCR(RT-PCR)法检测TLR2(Toll样受体-2)及NF-κB mRNA(核因子κB-mRNA)的表达;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定标本中白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)的浓度,求出IFN-γ/IL-4比值用于了解机体Th1/Ih2(Th1类与Th2类细胞比值)类细胞的平衡状态.结果 正常组、病毒组、复合模型组、阳性药物组和蒿芩清胆汤组小鼠的肺指数分别为(0.79±0.11)%、(1.93±0.38)%、(1.41±0.26)%、(1.10±0.26)%、(1.02±0.16)%;阳性药物组和蒿芩清胆汤组小鼠的肺指数和复合模型组相比均有所减低,有统计学意义(t=0.322,P＜0.05).RT-PCR的结果显示,正常组、病毒组、复合模型组、阳性药物组和蒿芩清胆汤组TLR2 mRNA的表达分别是0.145±0.017、0.991±0.149、0.903±0.124、0.257±0.032和0.413±0.031;蒿芩清胆汤组、阳性药物组比复合模型组的小鼠低,均有统计学意义(t=0.013,F=73.467,P＜0.05).正常组、病毒组、复合模型组、阳性药物组和蒿芩清胆汤组NF-κB mRNA的表达分别是0.075±0.015、379±0.019、0.291±0.012、0.169±0.026和0.175±0.033;阳性药物组、蒿芩清胆汤组与复合模型组相比均有所减低(t=0.422,F=112.834,P＜0.05).正常组、病毒组、复合模型组、阳性药物组和蒿芩清胆汤组小鼠血清中IFN-γ含量分别为(7434.06±323.27)pg/ml、(8679.77±198.70)pg/ml、(8068.78±113.8)pg/ml、(7454.66±301.30)pg/ml和(7484.56±229.85)pg/ml;蒿芩清胆汤组和阳性药物组血清中IFN-γ含量比复合模型组减低,有统计学意义(t=0.201,F=5.390,P＜0.05).正常组、病毒组、复合模型组、阳性药物组和蒿芩清胆汤组小鼠血清中IL-4含量分别为(3701.74±256.00)pg/ml、(3569.64±161.35)pg/ml、(3530.88±334.63)pg/ml、(3481.84±282.25)pg/ml和(3618.00±262.16)pg/ml;各组间差异无统计学意义(t=0.414,F=0.505,P＞0.05).Th1/Th2比值(即:IFN-γIL-4)分别为:2.02±0.19、2.38±0.10、2.36±0.14、2.22±0.17和2.07±0.15;与复合模型组相比,蒿芩清胆汤组和阳性药物组均呈减低趋势,但无统计学意义(t=0.587,F=3.684,P＞0.05).结论 蒿芩清胆汤对流感病毒性肺炎湿热证疗效显著,它通过降低膜表面受体TLR2的表达来抑制NF-κB的活化,降低血清IFN-γ水平,使Th1/Th2类细胞趋于平衡;降低肺泡内炎症反应,从而达到减少肺组织损伤的治疗目的 .     

孕期及哺乳期母鼠邻苯二甲酸酯类暴露对仔鼠呼吸道过敏的影响

目的通过使孕期及哺乳期Wistar大鼠暴露于邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP),探讨DEHP母代暴露对子代呼吸道过敏影响。方法将36只健康2月龄雌性Wistar大鼠分成3个不同剂量组,从妊娠0天(GD0)起,各组孕鼠分别给予0、30和300 mg/(kg·d) DEHP至仔鼠出生后21天(PND21)断乳,建立母体DEHP暴露模型。仔鼠出生后,不同剂量组各笼选取1只仔鼠在PND21、PND28进行卵清白蛋白(OVA)腹腔注射致敏并在PND32、PND33和PND34连续滴鼻致敏激发,PND35与未致敏仔鼠共同取材,包括肺泡灌洗液以及肺组织。ELISA检测肺泡灌洗液中Th2型细胞因子白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13的分泌情况,肺组织进行HE及PAS染色观察肺组织过敏性炎症病理变化;免疫组化检测上皮衍生因子IL-33的表达变化。结果肺泡灌洗液中,与对照组比较,DEHP0+OVA组总炎症细胞以及嗜酸性粒细胞数目上升为(131.500±25.548)×10~4、(32.000±10.079)×10~4(P0.05);DEHP30+OVA组总炎症细胞以及嗜酸性粒细胞数目上升为(156.167±17.994)×10~4、(16.331±6.667)×10~4(P0.05);DEHP300+OVA组总炎症细胞以及嗜酸性粒细胞数目上升为(172.167±19.994)×10~4、(55.000±17.018)×10~4(P0.05)。加入不同剂量DEHP与OVA致敏后,与对照组比较,DEHP0+OVA组IL-4、IL-5、IL-13表达量分别增加为(38.401±6.594)pg/mL(P0.05)、(30.026±2.756)pg/mL(P0.05)、(13.806±4.355)pg/mL(P0.05);DEHP30+OVA组IL-4、IL-5、IL-13表达量分别增加为(57.733±7.293)pg/mL(P0.05)、(31.544±1.043)pg/mL(P0.05)、(18.068±1.497)pg/mL(P0.05);DEHP300+OVA组IL-4、IL-5、IL-13表达量分别增加为(54.943±6.049)pg/mL(P0.05)、(32.377±3.739)pg/mL(P0.05)、(20.168±0.939)pg/mL(P0.05)。肺组织病理观察显示,单纯DEHP暴露组仔鼠肺组织没有明显的过敏性炎症反应,而各DEHP+OVA组仔鼠肺组织有较明显的过敏反应且随着DEHP剂量加重而加剧。免疫组化显示DEHP单纯暴露组IL-33表达无明显增加,而DEHP+OVA各组IL-33表达量增加且有一定的剂量-反应关系。结论孕期及哺乳期DEHP暴露会导致子代呼吸道过敏反应加重,其可能机制是通过增加IL-33表达量启动以Th2型细胞为主的肺部致敏反应所致。     

煤工尘肺患者血清白细胞介素-12和γ-干扰素含量的变化

目的探讨煤工尘肺患者(CWP)血清白细胞介素-12(IL-12)和γ-干扰素(IFN-γ)水平变化及意义。方法用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测49名CWP患者(煤工尘肺组)、36名具有相同接尘史但未患CWP的煤矿工人(井下接尘组)及32名非接尘井上健康工人(井上对照组)的血清IL-12和IFN-γ含量。结果煤工尘肺组IL-12水平[(74.0±16.5)pg/ml]明显高于井下接尘组[(25.1±3.6)pg/ml]和井上对照组[(19.8±2.8)pg/ml],组间差异均具有非常显著性(P<0.01);与井上对照组比较,井下接尘组IL-12虽升高,但差异无显著性(P>0.05)。煤工尘肺组、井下接尘组和井上对照组IFN-γ水平无明显改变。Ⅰ期CWP并发肺气肿和Ⅱ期CWP并发肺气肿患者IL-12水平[(58.3±15.6)pg/ml和(62.8±30.9)pg/ml]均高于单纯Ⅰ期和Ⅱ期[(22.9±2.9)pg/ml和(30.2±4.3)pg/ml],两组差异有显著性(P<0.05);Ⅱ期患者血清IL-12水平高于Ⅰ期,但差异无显著性(P>0.05);单纯Ⅱ期和Ⅰ期并发肺气肿患者IFN-γ水平[(13.3±2.3)pg/ml和(21.5±2.8)pg/ml]均低于Ⅰ期[(49.7±7.5)pg/ml],差异具有非常显著性(P<0.01)。煤工尘肺组IL-12和IFN-γ无明显相关性(r=-0.083,P=0.579)。结论IL-12和IFN-γ参与CWP发展过程,与CWP发生和发展均有密切关系。检测IL-12和IFN-γ可能对CWP早期预防及病情监测有一定参考价值。     

表柔比星联合多西他赛治疗宫颈癌患者的临床疗效及对血清Th1和Th2细胞因子水平的影响

目的 探讨表柔比星联合多西他赛治疗对宫颈癌患者临床疗效及血清Th1、Th2细胞因子水平的影响。方法 选取2019年11月—2020年11月在复旦大学附属肿瘤医院治疗的宫颈癌患者58例为研究对象,随机分为观察组(29例)和对照组(29例)。两组患者均给予保留盆腔神经淋巴结清扫术和广泛子宫切除术,之后对照组患者应用表柔比星治疗,观察组患者应用多西他赛+表柔比星治疗。结果 观察组患者治疗后白细胞介素-2(IL-2)[(27.24±6.22)pg/ml]、白细胞介素-6(IL-6)[(14.45±4.02)pg/ml]、干扰素-γ(IFN-γ)[(33.04±10.54)pg/ml]及白细胞介素-4(IL-4)[(18.35±5.67)pg/ml]水平均低于对照组[(32.64±7.87)pg/ml、(15.97±4.04)pg/ml、(39.40±12.22)pg/ml及(18.53±5.55)pg/ml],差异均有统计学意义(t=15.543、15.442、15.439及15.526,均P<0.05);观察组患者治疗有效率(93.10%)高于对照组(75.86%),差异有统计学意义(χ^(2)=6.137,P<0.05);观察组患者不良反应发生率(10.34%)低于对照组(31.03%),差异有统计学意义(χ^(2)=6.074,P<0.05);观察组患者治疗后IL-2/IL-6(1.68±0.45)、IL-2/IL-4(1.35±0.42)、IFN-γ/IL-4(1.69±0.57)及IFN-γ/IL-6(2.15±0.69)均低于对照组[(1.90±0.41)、(1.54±0.39)、(1.97±0.54)及(2.30±0.68)],差异均有统计学意义(t=15.526、15.237、15.246及15.518,均P<0.05)。结论 宫颈癌患者应用多西他赛+表柔比星治疗效果较好,可以改善机体Th1、Th2细胞因子水平,降低发生不良反应的概率,提高治疗效果,值得推广和应用。     

血清中白介素4和白介素10的检测对矽肺合并肺结核的诊断价值

目的 探讨血清中白介素4(IL-4)和白介素10(IL-10)的检测在矽肺合并肺结核诊断中的意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测20例矽肺合并肺结核患者、27例矽肺患者和17例健康人血清中IL-4和IL-10的水平.结果 与健康人相比较,矽肺合并肺结核组和矽肺组血清中IL-4[(45.32±18.83) pg/ml、(38.79±16.71) pg/ml vs (14.55±8.48)pg/ml]和IL-10[(37.56±13.78)pg/mnl、(32.26±11.63) pg/mlvs(25.76±9.33) pg/ml]的水平均明显升高(均P＜0.01).结论 血清中IL-4和IL-10的测定有助于矽肺合并肺结核患者的诊断.     

IL-12单克隆抗体对克罗恩病模型小鼠Th1/Th2免疫平衡的调节作用

目的研究白细胞介素-12(IL-12)单克隆抗体对克罗恩病模型小鼠辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)免疫平衡的调节作用。方法选择BALB/c健康小鼠30只,将30只小鼠分为正常对照组(10只)和实验小鼠(20只),实验组小鼠做克罗恩病模型,建模成功后将实验组小鼠分为克罗恩病组和IL-12单克隆抗体组各10只,IL-12单抗组小鼠腹腔注射IL-12单抗(25 mg/kg),正常对照组和克罗恩病组小鼠腹腔注射0.2 ml的生理盐水。处理4周后,对三组小鼠疾病活动程度、结肠重量、结肠长度进行评价,使用酶联免疫吸附试验法检测三组小鼠结肠组织中Th1型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-8和Th2型细胞因子IL-4、IL-10及IL-12、IL-23表达水平。结果克罗恩病组小鼠疾病活动程度评分、结肠组织中Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-12、IL-23分别为(4.12±0.23)分、(563.49±21.36)ng/ml、(120.69±6.69)ng/L、(43.73±3.58)ng/ml、(179.68±4.26)ng/ml、(148.69±6.58)ng/L、(762.58±26.58)pg/ml高于IL-12单克隆抗体组(1.62±0.17)分、(472.59±15.64)ng/ml、(106.25±3.27)ng/L、(37.62±2.16)ng/ml、(163.57±3.12)ng/ml、(98.67±5.12)ng/L、(412.68±16.98)pg/ml)和对照组,而结肠重量/长度为(42.36±3.16)mg/cm大于IL-12单克隆抗体组(33.59±2.07)mg/cm)和对照组小鼠;结肠组织中Th2型细胞因子IL-4、IL-10为(55.27±1.62)pg/ml、(90.27±3.68)pg/ml低于IL-12单克隆抗体组(61.27±2.21)pg/ml、(98.67±1.68)pg/ml)和对照组(P<0.05)。结论IL-12单克隆抗体通过改善Th1型细胞因子、Th2型细胞因子的异常表达,对Th1/Th2免疫平衡进行调节,进而抑制克罗恩病的炎症反应,起到治疗的效果。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血辅助性T细胞22及白细胞介素-22水平分析

目的了解慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血辅助性T细胞22(Th22)及白细胞介素-22(IL-22)水平。方法纳入44例COPD急性加重期患者、36例COPD稳定期患者和30名健康体检者为研究对象,采用流式细胞术检测外周血Th22比例,采用酶联免疫吸附试验检测IL-22表达水平,比较三组差异。结果三组研究对象年龄和性别构成比较,差异均无统计学意义(P0.05)。COPD急性加重期组外周血Th22比例[(0.96±0.71)%]高于COPD稳定期组[(0.29±0.12)%]和对照组[(0.28±0.11)%](均P0.05);COPD稳定期组与对照组外周血Th22比例差异无统计学意义(P0.05)。COPD急性加重期组血清IL-22表达水平[(3.34±1.32)pg/m L]高于COPD稳定期组[(1.49±0.64)pg/m L]和对照组[(1.81±0.56)pg/m L](均P0.05);COPD稳定期组和对照组血清IL-22表达水平差异无统计学意义(P0.05)。结论 COPD急性加重期患者外周血Th22及IL-22呈高表达,可能参与COPD发病过程。