青蒿素对脓毒症大鼠的保护作用

目的观察青蒿素对脓毒症大鼠的保护作用并探讨其作用机制.方法采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligationand puncture,CLP)制作大鼠脓毒症模型,观察青蒿素对CLP大鼠死亡率的影响,ELISA法检测术后2、6、12、24、48和72 h大鼠血清LPS、TNF-α和IL-6水平;光镜和透射电镜观察72 h大鼠肠粘膜形态学的变化;分离大鼠腹腔巨噬细胞(PMФ),ELISA法检测青蒿素对LPS(100ng/ml)及热灭活大肠杆菌(3.5×107CFU/ml)刺激PMФ释放TNF-α及IL-6的影响.结果青蒿素组大鼠死亡率低于模型组(P＜0.05),CLP术后血清LPS、TNF-α和IL-6水平较模型组降低(P＜0.05或P＜0.01),肠粘膜的损伤程度减轻;青蒿素对LPS和热灭活大肠杆菌刺激PMqФ释放TNF-α和IL-6具有显著的抑制作用并呈量效关系(P＜0.01).结论青蒿素能抑制CLP大鼠巨噬细胞活化并减轻肠粘膜损伤,对CLP大鼠具有保护作用.     

δ阿片受体激动剂对脓毒症大鼠肺功能的保护作用

目的 探讨δ阿片受体激动剂DADLE(D-AIa~2-D-Leu~5-enkephali)对脓毒症大鼠肺功能保护作用及其机制.方法 SD大鼠72只,分为假手术组(SO组)、脓毒症组(SEP组)和DADLE给药组(DADLE组),每组24只.采用改良盲肠结扎穿孔方法 (CLP)建立大鼠脓毒症模型,SO组除不结扎、刺穿盲肠外,其余操作同SEP组,DADLE组模型建立后立即按5 ml/kg体重静脉注射浓度为0.5 mg/ml的DALDE.于手术后2、6、10 h开腹取血行动脉血气分析;测定肺组织湿/干重(W/D)比值;测定肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、三磷酸腺苷(ATP)含量;检测血浆中肿瘤坏死因子-a(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量;观察并比较各组肺组织病理改变.结果 与SEP组相比,DADLE组PaCO_2、PaO_2均明显提高(P<0.05);W/D值明显降低(P<0.05);肺组织MPO、MDA含量明显降低(P<0.05),ATP含量明显升高(P<0.05);血浆TNF-α和IL-6含量明显降低(P<0.05);肺组织病理学改变明显减轻.结论 δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠肺功能具有一定的保护作用.     

甘草酸二铵对脓毒症大鼠心功能的保护作用

目的 观察不同剂量甘草酸二铵(DG)对脓毒症大鼠心功能的保护作用.方法 采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制作大鼠脓毒症模型,随机分为CLP 24、48及72h3个亚组,并设立正常对照组和假手术组,于不同剂量DG干预性治疗前后,通过超声心动图测定各组大鼠心功能指标:左室舒张末内径(LVIDd)与收缩末内径(LVIDs)、射血分数、左室短轴缩短率(FS)、心率、心输出量的变化.结果 脓毒症组大鼠心功能指标相对于正常对照组和假手术组,差异具有统计学意义(P＜0.05);DG小剂量组与CLP组比较,大鼠的LVIDd与LVIDs减小,差异具有统计学意义(P＜0.05);而射血分数、FS、心率、心输出量两组间比较差异无统计学意义.DG中剂量及大剂量组与CLP组各项指标比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 一定剂量DG可减轻脓毒症大鼠心肌损伤,对脓毒症大鼠心功能具有保护作用.     

血管内皮祖细胞移植对脓毒症大鼠的保护作用研究

目的:探讨血管内皮祖细胞移植对脓毒症大鼠的保护作用.方法:盲肠结扎穿孔法构建脓毒症大鼠模型,尾静脉移植血管内皮祖细胞,观察假手术组、模型组及血管内皮祖细胞移植组大鼠的尾动脉平均动脉压、体温、呼吸频率及脉率等主要生命体征,HE染色法检测肺部损伤情况、PAS染色法检测肾脏损伤情况,并用荧光显微镜观察大鼠肺部及肾脏血管内皮祖细胞的聚集情况.结果:盲肠结扎大鼠的尾动脉平均动脉压下降,体温、脉率及呼吸频率上升,但血管内皮祖细胞移植大鼠的生命体征都得到改善;肺部HE染色及肾脏PAS染色显示血管内皮祖细胞移植组肺部炎症细胞浸润及肾小球基底膜损伤均较模型组减轻,追踪血管内皮祖细胞的定位发现,在肺部及肾脏都有血管内皮祖细胞的聚集.结论:血管内皮祖细胞移植可以迅速聚集在血管损伤部位,对脓毒症大鼠的器官功能受损具有保护作用.     

舒血宁对脓毒症大鼠心肌的保护作用

目的探讨舒血宁注射液对脓毒症损害的大鼠心肌是否具有保护作用。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)与舒血宁注射液组(SXN组),CLP组与SXN组采用大鼠盲肠结扎穿孔术制造脓毒症模型。SXN组于盲肠结扎穿孔术前1h经腹腔注射0.3ml/kg舒血宁注射液,Sham组和CLP组于相同时间点给予0.3ml/kg生理盐水。术后6h时经腹主动脉取血行肌钙蛋白T(TnT)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β检测;取部分心肌匀浆,制成10%心肌组织悬液,测定超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量;部分心肌行H-E染色观察病理变化。结果与CLP组比较,舒血宁可显著降低CLP后血浆TnT、TNF-α与IL-1β水平以及心肌组织MDA含量,并使心肌SOD活性增强(P<0.05或0.01);组织学观察可见舒血宁可明显改善脓毒症组大鼠心肌充血、水肿及炎性细胞浸润等病理改变。结论舒血宁对脓毒症大鼠心肌损伤具有保护作用,其机制可能与其对心肌氧自由基的清除作用及对炎性介质的影响有关。     

天然虾青素对脓毒症大鼠急性肾损伤的作用

目的探讨天然虾青素对盲肠结扎穿孔（caecal ligation and puncture,CLP）所致大鼠脓毒症诱导的急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）的保护作用。方法将72只成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分成空白组、假手术（Sham）组、CLP模型组和天然虾青素高、中、低剂量组。采用CLP法建立大鼠脓毒症AKI模型,造模后天然虾青素高、中、低剂量组即刻分别静脉推注虾青素100、50、25 mg/kg,注药后24 h按随机原则处死大鼠。检测血肌酐（serum creatinine,SCr）、血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、血尿酸（blood uric acid,BUA）、胱抑素C（cystatln C,Cys C）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）和白细胞介素6（interleukin 6,IL-6）、肾组织核因子κB（nuclear factorκappa B,NF-κB）的水平,并观察肾组织形态学。结果与CPL模型组相比,天然虾青素降低了血清SCr、BUN、BUA、Cys C、TNF-α、IL-6的含量及肾组织中NF-κB蛋白表达水平,差异有统计学意义（P〈0.05或0.01）。结论天然虾青素对CPL所致的AKI具有一定的保护作用,该作用可能与其降低脓毒症大鼠血清TNF-α、IL-6、NF-κB的水平有关。     

脓毒症大鼠早期心功能的变化

通过心脏彩超观察脓毒症大鼠早期心功能的变化。方法：12只SD大鼠通过盲肠结扎穿孔（CLP）方法复制脓毒症模型,分别在造模前、造模后12小时、造模后3天通过心脏彩超检测大鼠的心功能。结果：CLP造模后12小时大鼠的心功能明显下降,3天后心功能可基本恢复。结论：脓毒症大鼠的心功能下降主要发生在造模后3天内,而且可能是引起大鼠死亡的重要原因之一。     

皮质醇及肿瘤坏死因子-α对脓毒症大鼠免疫功能的影响

目的 探讨皮质醇及肿瘤坏死因子-α对脓毒症大鼠的免疫功能的影响。方法 将40只大鼠随机分为2组，正常对照组、盲肠结扎并穿孔组各20只。外周血行中性粒细胞吞噬功能测定及白细胞移行抑制实验，直接放射免疫分析方法及酶联免疫吸附法分别测定血清皮质醇及肿瘤坏死因子-α 。结果盲肠结扎并穿孔术后36h大鼠出现低皮质醇血症及过多的肿瘤坏死因子-α，细胞免疫功能减弱，胸腺萎缩。结论 低皮质醇血症及过多的肿瘤坏死因子-α在造成脓毒症大鼠的免疫功能紊乱起重要作用。     

阿托伐他汀对脓毒症大鼠血浆一氧化氮的影响

[目的]探讨阿托伐他汀对脓毒症大鼠血浆一氧化氮(NO) 的影响.[方法]健康雄性大鼠75只,随机分为对照组、脓毒症组、阿托伐他汀组,每组25只.对照组行假手术;脓毒症组行盲肠结扎穿孔术(CPL);阿托伐他汀组,用阿托伐他汀灌胃,行盲肠结扎穿孔术(CPL).分别在术后0 、2 、6、10、24 h时间点采血,检测血浆NO水平.取肺、空肠标本,HE染色后,光镜下检查组织病理学改变.[结果]NO浓度在脓毒症组血浆术后6 h明显升高,24 h达到峰值(329.04±21.14)μmoL/L;在阿托伐他汀组术后10 h明显升高,在24 h达到峰值(209.53±10.68) μmoL/L.在6 h,10 h,24 h时间点,两组比较,差异有显著性意义(P＜0.01).病理改变:对照组无明显病理改变,脓毒症组肺、肠壁组织坏死充血,炎细胞浸润,阿托伐他汀组炎症反应介于两者之间.[结论]阿托伐他汀可能延缓脓毒症大鼠血浆NO上升速度,减轻炎症反应.     

大承气汤对盲肠结扎并穿孔引发脓毒症大鼠的免疫调节

目的：探讨大承气汤对盲肠结扎并穿孔引发脓毒症的免疫调节。方法：大鼠随机分为3组（n=26）假手术组、盲肠结扎并穿孔组、大承气汤组。外周血行中性粒细胞吞噬功能测定及白细胞移行抑制实验,直接放射免疫分析方法及酶联免疫吸附法分别测定血清皮质醇及肿瘤坏死因子-α。结果：大承气汤可提高外周血中性粒细胞的吞噬率及改善胸腺指数、白细胞移行抑制指数;减少肿瘤坏死因子-α过度释放,调节血浆皮质醇水平。结论：大承气汤对盲肠结扎并穿孔引发脓毒症有免疫调节作用。     

大鼠血管生成素-2在脓毒症型急性肺损伤中的变化

[目的]了解血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)在脓毒症型急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中的变化.[方法] SD大鼠45只随机分为对照组10只,采用假手术处理;实验组35只,采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)制作盲肠结扎/脓毒症模型(ALI模型);于假手术及CLP术后24h处死全部大鼠,取肺组织常规石蜡包埋,HE染色观察组织形态学变化及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清Ang-2的水平.[结果]与对照组相比,光镜下实验组动物肺泡部分萎陷,肺泡间隔增宽,期间可见较多中性粒细胞及少许巨噬细胞浸润.实验组血清Ang-2水平(10.72±1.49) ng/mL明显高于对照组(3.87±0.26)ng/mL(P ＜0.01);实验组中死亡鼠血清Ang-2水平(11.48±1.52) ng/mL显著高于存活鼠(7.69±1.83) ng/mL(P ＜0.05).[结论]血清高Ang-2水平提示脓毒症型ALI病例预后较差.     

动脉压力感受性反射对盲肠结扎穿孔致脓毒症大鼠生存率的影响

目的：观察动脉压力感受性反射（ABR）对盲肠结扎穿孔（CLP）致脓毒症大鼠生存率的影响.方法：利用破坏反射弧的方法,将雄性大鼠依据反射功能高低分为两组：假手术大鼠（n=22）和去窦弓神经（SAD）大鼠（n=22）.用CLP致大鼠脓毒症模型,采用计算机化清醒大鼠血压连续监测技术,于CLP后动态监测大鼠的血压及心动间期,并观察大鼠12 h内的存活情况.结果：大鼠CLP后收缩压和舒张压随时间逐渐下降,而心动间期则先变短再急剧变长直至动物死亡.12 h后假手术大鼠的生存率为86%,而SAD大鼠的生存率为59%,两组大鼠Kaplan-Meier生存曲线存在显著差异（P＜0.05）.结论：ABR在CLP致大鼠脓毒症中起重要作用.     

异氟醚后处理对盲肠结扎穿孔大鼠急性肺损伤的保护作用

目的观察异氟醚（isoflurane,ISO）后处理对盲肠结扎穿孔术（cecal ligation and puncture,CLP）后大鼠急性肺损伤（acute lung injury,ALI）的保护作用。方法32只SD雄性大鼠随机分为4组（每组n=8）：正常组（N组）,未行任何处理;假手术组（Sham组）,单纯行开腹关腹术;盲肠结扎穿孔术组（CLP组）,行CLP建立大鼠ALI模型;异氟醚组（ISO组）,建立CLP模型后4 h腹腔注射液态异氟醚2 ml/kg。术后12 h各组动物腹主动脉放血处死,右肺进行病理切片和肺湿/干比（W/D）测定,组织匀浆测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和髓过氧化物酶（MPO）的含量;左肺行支气管肺泡灌洗,取上清液测总蛋白、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素10（IL-10）的含量。结果肺组织病理学检测结果显示CLP组大鼠肺组织损伤严重,ISO组肺组织损伤较轻。与N组比较,CLP组和ISO组中SOD含量降低（P〈0.01）,其余检测指标均增加（P〈0.01）。与CLP组比较,ISO组SOD和IL-10含量较高（P〈0.01）;其余检测指标均低于CLP组（P〈0.05或P〈0.01）。结论在本实验条件下,大鼠腹腔注射液态ISO可发挥抗炎、抗氧化作用,对CLP所致大鼠ALI有部分保护作用。     

虎杖苷对脓毒症致急性肾损伤小鼠的保护作用

目的 观察虎杖苷对盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture,CLP）所致脓毒症诱导的急性肾损伤小鼠的影响,并初步探讨其作用机制。方法 建立小鼠CLP诱导的脓毒症致急性肾损伤模型,随后用不同剂量的虎杖苷（50、100、300 mg/kg）干预,观察小鼠一般情况,并于手术24 h后,用试剂盒方法测定血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）水平,ELISA法测定血清白细胞介素-6（IL-6）表达量,Western blotting法检测肾脏诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白水平,并取肾脏组织进行病理分析。结果 与模型组相比,虎杖苷明显改善小鼠一般情况,同时降低血清BUN、Cr、IL-6及肾脏中iNOS蛋白水平,缓解肾脏组织损伤,并呈一定的剂量依赖关系。结论 虎杖苷对脓毒症致急性肾损伤具有保护作用,其作用机制可能与其抑制血清IL-6及肾脏中iNOS蛋白表达有关。     

乌司他丁对脓毒症小鼠生存率及淋巴细胞凋亡的影响

目的观察乌司他丁(UTI)对脓毒症小鼠生存率及淋巴细胞凋亡的影响,探讨UTI对脓毒症的可能作用机制。方法 8～10周C57BL/6雄性小鼠40只,随机分成4组:假手术(Sham)组,盲肠结扎穿孔(CLP)组,CLP+UTI(10万U/kg)术后30 min腹腔内给药(UTI ip)组和CLP+UTI(10万U/kg)术后30 min尾静脉给药(UTI iv)组。在CLP模型建立成功后,每组10只小鼠首先进行7 d生存状况观察研究,描绘7 d生存曲线。另选取40只小鼠按以上方法分组,在CLP术后24 h取材,计数外周血、胸腺和脾脏淋巴细胞,检测胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡情况。数据采用Prism5.01(GraphPad Software,USA)软件包进行统计学处理。结果 UTI治疗组7 d生存率高于CLP组,差异有统计学意义(P<0.05)。UTI组外周血、胸腺和脾脏淋巴细胞计数高于CLP组,差异有统计学意义(P<0.05);UTI组脓毒症小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡低于CLP组,差异有统计学意义(P<0.05)。UTI ip和UTI iv组之间各项指标差异均无统计学意义。结论应用UTI腹腔或尾静脉给药可明显改善脓毒症小鼠的生存状况,可能与其升高脓毒症小鼠外周血、胸腺和脾脏淋巴细胞数量,有效降低脓毒症小鼠胸腺和脾脏组织淋巴细胞凋亡等有关。     

脓毒症模型大鼠循环内皮细胞与肝功能状态间关系的相关性研究

目的 探讨大鼠脓毒症中循环内皮细胞(circulating endothelial cells, CEC)数量的变化及其与肝功能改变的关系.方法 利用盲肠结扎穿孔模型(CLP)在大鼠制作脓毒症模型.观察CEC数量、白细胞数量的变化、以及肝组织病理组织学、血天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)的改变.并探讨CEC数量与AST和ALT的相关关系.结果 CLP 6 h后动物肝细胞明显肿胀,24 h组肝细胞大量空泡变性,乃至坏死.CLP 3 h组白细胞和CEC数量比对照组明显升高.而CLP 6 h后AST、ALT才出现明显增高.CEC数量与AST和ALT水平呈负相关,Pearson相关系数(r)分别为-0.774 和-0.734(P＜0.01).用非线性回归分析CEC数量与AST和ALT的关系,发现CEC数量对ALT的最佳拟合曲线为幂函数(P＜0.05),其方程为ALT=33.052 681 24.097 309 CEC -1.CEC数量对AST的最佳拟合曲线为对数函数,但无统计学意义(P=0.607).结论 在大鼠脓毒症模型中,比起常规肝功能指标,CEC数量更能敏感反映肝脏病理进程.当肝功能指标高于正常阈值时肝细胞已经出现了显著损伤.因此,早期监测CEC数量结合已有的肝功能指标有助于早期提示肝功能损害,及时针对治疗.     

促肝细胞生长因子对脓毒血症大鼠多器官损伤的保护作用

目的 探讨促肝细胞生长因子(HGF)对脓毒血症诱导的大鼠多器官损伤的保护作用.方法 将雄性SD大鼠分为对照组、假手术组、模型组、HGF治疗组、血红蛋白加氧酶-1(HO-1)抑制剂组及HO-1抑制剂+HGF治疗组.采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制大鼠脓毒血症模型.尾静脉注射给药,2次/d;HO-1抑制剂及HO-1抑制剂+ HGF治疗组于给予HGF后2h静脉注射锌原卟啉.术后72 h处死存活大鼠,取血清及主要脏器检测相关指标.结果 静脉注射HGF(75、150 μg/kg ·d)能够降低脓毒血症大鼠死亡率,显著降低血清IL-1β水平(P＜0.05);明显改善脓毒血症对大鼠肺、肾和肠的病理改变,增强肺、肾和肠中SOD活性.HO-1抑制剂锌原卟啉可部分拮抗HGF的保护作用.结论 HGF对脓毒血症造成大鼠多器官损伤具有保护作用.