转化生长因子β1对肾间质成纤维细胞胶原表达的影响

目的　探讨肾间质纤维化的机制。方法　体外培养大鼠肾间质成纤维细胞,采用Ｌ３Ｈ脯氨酸掺入法测定胶原合成及ＲＴＰＣＲ 技术观察转化生长因子β（ＴＧＦβ１） 对体外培养的大鼠肾间质成纤维细胞Ⅰ和Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ 表达的影响。结果　ＴＧＦβ１ 可促进肾间质成纤维细胞的３Ｈ脯氨酸掺入,且随着ＴＧＦβ１ 剂量的增加,３Ｈ脯氨酸掺入量增加,胶原合成增多。ＴＧＦβ１ 可促进Ⅰ和Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ 的表达,且在ＴＧＦβ１ 浓度２ ～１０ ｎｇ／ｍｌ 时ｍＲＮＡ 的表达量与浓度呈现正相关;在６ ～４８小时内与时间呈现正相关。结论　ＴＧＦβ１ 可能通过促进肾间质成纤维细胞胶原的合成及ｍＲＮＡ 的表达而参与肾间质纤维化。     

转化生长因子-β与腹膜纤维化的研究进展

转化生长因子-β(transforming growth factor beta,TGF-β)是一种强效的致纤维化因子，在腹膜纤维化的形成过程中起重要的作用。     

转化生长因子β1对人腹膜间皮细胞结缔组织生长因子的影响

目的 观察转化生长因子(TGF)β1对人腹膜间皮细胞(HPMCs)结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA和蛋白表达影响并探讨其可能的机制。方法 原代培养HPMCs，用5ng／ml TGF-β1刺激第3代细胞，采用免疫组织化学染色、Western印迹、ELISA和RT-PCR等方法，观察CTGF的mRNA和蛋白表达、纤连蛋白(FN)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)的mRNA和蛋白表达，细胞内磷酸化Smad2／3(p-Smad2／3)的蛋白表达以及在细胞内的迁移。结果 (1)刺激组CTGF的mRNA表达与对照组比均显著增加，其中48h为峰值；对照组细胞内仅有少量CTGF的蛋白表达，在TGF-β1刺激后24h表达明显增加，48h达峰值。(2)刺激组FN和ColⅠ的mRNA表达与对照组比均呈时间依赖性显著增加，上清液FN和细胞内ColⅠ的蛋白表达与对照组比也呈时间依赖性显著增加。(3)对照组细胞内几乎不表达p-Smad2／3(阳性细胞率3％)，在刺激后15min表达增加(29％)，细胞着色主要分散在胞质中；1h增加最明显(84％)，细胞着色加深且集中在胞核及周边；2h明显回落(37％)，细胞着色转淡并又分散至胞质中。结论TGF-β1在致腹膜纤维化过程中诱导了HPMCs内CTGF的转录和蛋白表达，可能与TGF-β1激活了HPMcs内Smad信号通路有关。     

转化生长因子-β与腹膜纤维化的研究进展

转化生长因子 β(transforminggrowthfactorbeta ,TGF β)是一种强效的致纤维化因子 ,在腹膜纤维化的形成过程中起重要的作用     

RhoA-Rock信号通路在转化生长因子β1诱导大鼠腹膜间皮细胞转分化中的作用

目的　探讨RhoA-Rock信号通路在转化生长因子β1（TGF-β1）诱导大鼠腹膜间皮细胞（RPMC）转分化中的作用。 方法　体外培养SD大鼠原代腹膜间皮细胞,静止24 h后,采用随机数字表法随机分为以下4组：正常对照组、TGF-β1（10 μg/L）刺激组、TGF-β1（10 μg/L）＋Y-27632（Rock特异性抑制剂,10 μmol/L）组（Y-27632预处理2 h）、Y-27632（10 μmol/L）组。用TGF-β1（10 μg/L）刺激RPMC不同时间,观察α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）,E钙黏素（E-cadherin）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）的表达。RT-PCR法检测E-cadherin、α-SMA 和ColⅠmRNA表达。Western印迹法检测RhoA（包括总RhoA及活化的RhoA）、E-cadherin、α-SMA、ColⅠ和波形蛋白（vimentin）表达。活化的RhoA由膜蛋白提取试剂盒提取。 结果 （1）TGF-β1（10 μg/L）刺激RPMC能诱导RhoA活化,于10 min开始出现活性升高,为对照组的（2.57±0.52）倍（P < 0.05）;1 h达高峰,为对照组的（4.35±0.41）倍（P < 0.05）。（2）TGF-β1（10 μg/L）刺激RPMC能导致E-cadherin mRNA和蛋白表达下调,α-SMA、ColⅠmRNA和蛋白表达上调,呈时间依赖性。（3）Rock特异性抑制剂Y-27632能显著下调α-SMA、ColⅠmRNA的表达,较TGF-β1刺激组各降低了53.8%和55.7%（均P < 0.05）,并且能下调α-SMA、ColⅠ和vimentin蛋白的表达,较TGF-β1刺激组分别降低了42.6%、60.1%和58.1%（均P < 0.05）,但不能上调E-cadherin mRNA和蛋白的表达。 结论　TGF-β1可通过RhoA-Rock信号通路介导大鼠腹膜间皮细胞转分化,抑制该通路可作为防治腹膜纤维化的潜在靶点。     

转化生长因子β1及相关生物分子在移植肾纤维化中的表达

目的 研究转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原、波形蛋白、细胞角蛋白(Pan)在不同分期移植肾纤维化组织中的表达及意义.方法 对21例肾移植后不同程度纤维化病变及10例正常肾组织进行TGF-β1、MMP-2、TIMP-1、α-SMA、FN、Ⅳ型胶原、波形蛋白、Keratin免疫组化检测并作图像定量分析. 结果 纤维化早期其TGF-β1、MMP-2、TIMP-1、α-SMA与Keratin免疫染色阳性强度与量均较正常肾组织明显增加;而FN、Ⅳ胶原、波形蛋白则较弱.随着纤维化进展,TGF-β1、TIMP-1、FN、Ⅳ型胶原和波形蛋白阳性强度与量增加;而MMP-2、α-SMA、Keratin免疫染色阳性减弱.结论 TGF-β1诱导产生的成肌纤维细胞可能呈启动、推进肾纤维化的关键性因素,TIMP-1活性增加是促进细胞外基质积聚形成纤维化的重要条件.     

高脂饮食对单侧肾切除大鼠留存肾内转化生长因子β1表达的影响

目的：观察高脂血症对单侧肾切除大鼠留存肾内转化生长因子β1表达的影响。方法：选取雌性SD大鼠，随机分为4组：正常组，单侧肾切除组，高脂组，高脂＋单侧肾切除组。观察各组大鼠血脂、尿蛋白和肾功能变化，肾脏病理学改变，肾组织转化生长因子β1和Ⅳ型胶原的表达。结果：高脂＋单侧肾切除组大鼠血总胆固醇、低密度脂蛋白、血肌酐和尿蛋白明显升高，内生肌酐清除率显著降低（0．71±0．18vS1．17±0．24，P〈0．01），在血脂升高和肾功能损害同时，肾组织内TGF-β1mRNA（1．24±0．18vS0．78±0．11，P〈0．01）和TGF-β蛋白（2．88±0．37VS1．39±0．09，P〈0．01）显著上调，Ⅳ型胶原表达增加，细胞外基质产生增多。结论：高脂血症可通过上调肾切除术后留存肾内TGF-β表达，导致留存肾功能损害进行性恶化，加速肾硬化进程。     

环孢素A对大鼠肾转化生长因子β1、肾素mRNA的影响

目的：探讨环孢素A（CsA)慢性肾毒性的发生机理。方法：给予进正常饮食或低盐饮食的大鼠灌服CsA 30mg.kg^-1.d^-1,采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）研究CsA对大鼠肾内转化生长因子β1（TGF－β1）及肾素mRNA表达的影响。结果：给予CsA的大鼠均有肾内TGF－β1 mRNA,肾素mRNA表达的增加，给予低盐饮食的大鼠这些改变更为明显。结论：CsA的慢性肾毒性与肾内TGF－β1 mRNA，肾素mRNA表达的增加有关。β     

三七总皂苷对腹膜纤维化大鼠转化生长因子-β_1的影响

目的：探讨三七总皂苷对腹膜纤维化大鼠转化生长因子-β1的影响。方法：21只惠斯脱（WISTAR）大鼠分成三组：（1）对照组（n=7）：每日腹腔内加入一次生理盐水100 ml/kg;（2）模型组（n=7）：每日腹腔内加入一次4.25%葡萄糖腹透液100 ml/kg,同时在第1、3、5、7天联合脂多糖腹腔注射,按0.6 mg/kg;（3）试验组（n=7）：每日腹腔内加入一次4.25%葡萄糖腹透液100 ml/kg同时每天加入一次三七总皂苷35 mg/kg,在第1、3、5、7天联合脂多糖腹腔注射,按0.6 mg/kg;透析4周后行1 h腹膜平衡试验,并分别测定透析液和血浆尿素氮的比值（D/P）、葡萄糖重吸收值（D1/D0）、超滤容积,透析液中白细胞总数、用ELISA方法行腹膜透析液转化生长因子-β1（TGF-β1）。结果：模型组、试验组与对照组相比较,超滤量均显著下降（P〈0.05）;而透析液中TGF-β1、表达均显著增多,腹膜组织增厚也均显著增多（P〈0.05）。试验组与模型组比较,其超滤量明显改善（P〈0.05）,而透析液中TGF-β1显著减少（P〈0.05）,腹膜组织增厚明显改善（P〈0.05）。结论：PNS可以通过下调腹膜分泌TGF-β1,从而改善试验性腹膜纤维化,在一定程度上保护腹膜功能。     

膀胱癌转化生长因子β1过表达的临床意义

目的　探讨膀胱移行细胞癌TGFβ1蛋白及mRNA异常表达的临床意义。 　方法　采用SP法检测 74例膀胱癌组织中TGFβ1蛋白的表达 ;QRT PCR方法检测 43例膀胱癌TGFβ1mRNA转录水平。　结果　膀胱癌TGFβ1蛋白表达阳性率为 89.2 % ,T2 ～T4 浸润性膀胱癌TGFβ1过表达率为 83.8% ,明显高于Ta～T1表浅性膀胱癌 (33.3% ) ,P <0 .0 5 ;复发转移组 30例中TGFβ1过表达 2 9例 ,而无瘤存活组 44例中过表达 30例 ,P <0 .0 0 5 ;膀胱癌组织TGFβ1mRNA含量明显高于正常膀胱组织。　结论　TGFβ1过表达与膀胱癌浸润生长方式和预后等有密切关系 ,可能成为评价膀胱癌预后的有效指标之一。     

转化生长因子β1诱导肾间质成纤维细胞表型转化及其对结缔组织生长因子基因表达的影响

目的 研究转化生长因子β1（transforming growth factor beta-1,TGF-β1）诱导大鼠正常肾间质成纤维细胞（NRK-49F）表型转化过程中结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）基因表达的变化.方法 以不同浓度的TGF-β1（0、0.5、1、2、5、10 ng/ml）刺激NRK-49F细胞,分别应用MTT比色法、Western Blot、Northern Blot方法,检测TGF-β1刺激后肾间质成纤维细胞的增殖、Ⅰ型、Ⅲ型前胶原mRAN的表达、细胞表型标志物α-SMA mRNA及蛋白质表达、CTGFmRNA的表达变化.结果 1 ng/ml浓度以上TGF-β1能显著促进NRK-49F细胞增殖,上调Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达水平,诱导肌成纤维细胞表型标志α-SMA mRNA及蛋白质的表达,显著上调CTGF mRNA的表达水平（P＜0.01或P＜0.05）;以上效应均呈浓度依赖性.同时CTGF mRNA表达水平的增高与细胞表型转化的程度相一致.结论 TGF β1能诱导肾间质成纤维细胞发生表型转化,并促进了细胞增殖及细胞外基质的合成;该效应与TGF β1显著上调CTGF的基因表达一致.     

原发性IgA肾病肾组织及血中转化生长因子-β1表达的相关性

目的：探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）在肾组织的表达与原发性IgA肾病（IgAN）各病理类型关系及其与血中的TGF-β1之间的关系。方法：分析了2003年1月～2008年6月的67例原发性IgAN患者肾组织中TGF-β1的表达与其各病理类型关系,及其与血中TGF-β1之间的关系。结果：IgA肾病患者各病理分级肾组织中TGF-β1的表达量差异有统计学意义（P〈0.01）,随病理分级增高,TGF-β1表达量越多。IgA肾病患者肾组织中TGF-β1的表达量与血中TGF-β1显著相关（r=0.918,P〈0.01）。结论：原发性IgA肾病患者可通过检测血中的TGF-β1来反映肾组织中TGF-β1水平,从而预测其肾脏病理等级,有助于预测其预后,避免反复肾活检。     

氟伐他汀对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β1表达的影响

目的 探讨羟甲基戊二酰辅酶Ａ（ＨＭＧＣｏＡ）还原酶抑制剂氟伐他汀对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子表达的影响。方法 将实验动物随机分为正常对照组,糖尿病模型Ｄ组及氟伐他汀治疗组ＤＦ组,第２,８周分别取各组的一半收集标本,检测血糖,血胆固醇,血甘油三酯,血肌酐尿白蛋白及肾脏肥大指标的变化,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测肾皮质中ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达,免疫组化检测肾内ＴＧＦβ１,纤维连接帽白和ＩＶ型胶原蛋白表     

类胰岛素生长因子1对转化生长因子β1诱导前列腺增生间质细胞类胰岛素生长因子结合蛋白3生成的抑制作用

目的　探讨类胰岛素生长因子（ＩＧＦ１） 和转化生长因子（ＴＧＦβ１） 在调节前列腺间质细胞ＩＧＦ结合蛋白———类胰岛素生长因子结合蛋白３（ＩＧＦＢＰ３） 中的作用。方法　前列腺增生组织原代培养分离间质细胞。分别用ＴＧＦβ１（５ μｇ／Ｌ）、ＩＧＦ１（５００ μｇ／Ｌ） 及ＴＧＦβ１＋ ＩＧＦ１ 处理间质细胞。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测间质细胞内的ＩＧＦＢＰ３ 水平。结果　间质细胞用ＴＧＦβ１ 处理２ 小时后,ＩＧＦＢＰ３ 比对照组增加１３２ ％ ,４ 小时后比对照组高出２５１％ ,８ 小时后接近原来水平。ＩＧＦ１ 可以明显逆转ＴＧＦβ１ 诱导增加的ＩＧＦＢＰ３,而单纯ＩＧＦ１ 则对间质细胞的ＩＧＦＢＰ３ 水平没有明显的影响。结论　ＩＧＦ１ 有抑制ＴＧＦβ１ 诱导前列腺间质细胞ＩＧＦＢＰ３ 表达的作用。     

用免疫组化研究转化生长因子-β_1在肝细胞癌中的表达

转化生长因子—β_1(TGF—β_1)是肝细胞生长的主要负性调节因子和分化成熟促进因子,对肝癌细胞生长也具明显抑制作用。本文用免疫组化染色(LSAB法)对12例肝细胞癌病人手术切除标本进行TGF—β_1免疫染色,经计算机图像分析系统分析,发现肝癌组织的TGF—β_1表达明显低于癌旁肝组织。阳性染色面积,肝癌与癌旁肝组织分别为9.96±10.70％和56.60±26.62％(P<0.01);阳性细胞数,肝癌与癌旁组织分别为2.42±5.39％和34.48±28.68％(P<0.01)。本研究提示肝癌细胞TGF—β_1表达降低可能与其细胞的转化和生长失控有关,也是其生物学特征之     

转化生长因子β1在单侧肾切除糖尿病大鼠肾皮质中表达

目的 研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）在单侧肾切除糖尿病大鼠肾皮质中表达。方法 将Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分成单侧肾切除Ａ组和单侧肾切除糖尿病Ｂ组，观察ＳＴＺ注射一、四周后血糖、血胰岛素水平、体重、肾重、肾重／体重及肾组织蛋白含量变化。利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测肾皮质ＴＧＦβ１、１α（ＩＶ）前胶原及纤维连接蛋白（ＰＮ）ｍＲＮＡ表达，Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交检测ＴＧＦβ１蛋白水平。另外，使用荧光分光度法测     

老年大鼠骨痂中转化生长因子-β_1的表达

目的　探讨增龄对骨折愈合过程中转化生长因子 β1(TGF β1)表达的影响。方法　建立老年大鼠股骨骨折模型 ,于第 1、2、4、8、12周取骨痂 ,进行组织学观察 ,并用免疫组织化学方法进行TGF β1表达测定。结果　在 2、4周TGF β1主要在软骨细胞、间充质细胞而在 8周新生类骨质中有TGF β1表达。结论　增龄可引起成骨细胞功能降低 ,导致TGF β1分泌减少 ,使骨折的愈合延缓     

糖肾康对糖尿病肾病患者尿转化生长因子-β1的影响

目的:观察糖肾康对糖尿病肾病患者尿转化生长因子-β1的影响,进一步证实糖肾康对DN的治疗作用,并探讨其作用机制.方法:治疗组73例采用糖肾康和卡托普利联合治疗,对照组75例单服卡托普利,两组其他治疗相同,治疗时间为6个月,观察治疗前后尿TGF-β1 的变化.结果:治疗后尿TGF-β1显著下降(P<0.01),与对照组治疗后比较有统计学差异(P<0.05),同时血糖、血脂、胰岛素抵抗(IR)、血流动力学和肾功能明显改善.结论:糖肾康通过改善血糖、血脂、IR、血流动力学和直接抑制TGF-β1功能及分泌达到保护肾脏,使尿TGF-β1产生减少.     

阿魏酸哌嗪对肾大部切除大鼠肾皮质中转化生长因子β1和Smad7的影响

目的 探讨阿魏酸哌嗪(PF)对肾大部切除大鼠肾皮质中转化生长因子β1(TGF-β1)及其下游分子Smad7表达的影响。方法 采用5/6肾大部切除模型,分别给予阿魏酸哌嗪(50mg·kg~(-1)·d~(-1))和福辛普利(fosinopril,25mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃。8周后观察大鼠24h尿蛋白、BUN、血肌酐以及肾脏病理改变。同时观测了肾皮质中TGF-β1和Smad7的表达。结果 术后大鼠出现明显的原蛋白[(205.6±16.8)mg/24h],且有明显的肾小球硬化,而PF和fosinopril(F)均能减少尿蛋白[PF(107.5±10.5)mg/24h,F(95.3±13.8)mg/24h,与假手术组比,P<0.01]和肾小球硬化指数。肾大部切除后肾皮质TGF-β1和Smad7的表达明显升高,用药组上述指标明显降低(F组和PF组比肾大部切除组,P<0.01)。结论 在5/6肾大部切除模型中,阿魏酸哌嗪对5/6肾大部切除大鼠肾脏有明显的保护作用,其机制至少部分与它能下调TGF-β1和Smad7有关。     

输精管阻断对大鼠睾丸转化生长因子β1表达的影响

目的　了解大鼠输精管阻断和阻断解除后睾丸内TGFβ1表达状况。　方法　大鼠 90只 ,随机分为输精管阻断 (VG)组 35只 ,输精管阻断解除 (VOG)组 2 0只 ,假手术组 (SOG) 35只 ,采用免疫组织化学染色和原位杂交技术检测TGFβ1的表达。　结果　VG组从实验第 8周起近基底膜的管周细胞和精原细胞TGFβ1表达较SOG组增强 ,其中 8、16、2 0、2 4周与SOG组相比差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。表达量在 8周后并不随结扎时间延长而改变 ,而是维持在相对稳定的水平。VOG组TGFβ1表达亦较SOG组显著增高。　结论　输精管阻断后TGFβ1表达升高可能是导致睾丸细胞凋亡的原因 ,而阻断解除后TGFβ1水平无明显下降可能是导致生精功能恢复不完全的原因。