BMSC促进巨噬细胞M2型极化减轻急性放射性肺损伤

目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对放射性肺损伤(RILI)的治疗作用,初步探讨其作用机制。方法 将45只健康成年雄性C57BL/6小鼠随机分为Control组、Model组、BMSCs组。Model组和BMSCs组单次胸部照射剂量为20 Gy,正常对照组不接受X线照射,照射后6 h内,BMSCs组以1×10⁶个BMSCs通过尾静脉注射小鼠体内。第5周取肺组织HE染色观察肺组织病理变化;免疫组织化学染色观察肺组织炎症因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达变化;巨噬细胞免疫荧光染色观察肺部巨噬细胞极化的变化;免疫蛋白印迹检测肺组织上皮间质转化标志物上皮钙黏着蛋白(E-cadherin)、神经钙黏着蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达。结果 辐射后,Model组肺组织血管扩张充血,肺间隔明显增厚,炎细胞浸润,BMSCs组小鼠肺组织的上述病变明显减轻;Model组明显增高的在炎症因子IL-6和TNF-α的表达在BMSCs组均明显下调(P <0.01,P <0.05);BMSCs的治疗显著增加肺部巨噬...     

冷诱导RNA结合蛋白在放射性肺损伤模型中的表达变化

目的探讨冷诱导RNA结合蛋白(CIRBP)在放射性肺损伤模型中的表达变化。方法将30只雄性C57BL/6小鼠按体重随机分为2组,每组15只,对照组小鼠不做任何处理,模型组小鼠经20 Gy X射线单次胸部照射,构建放射性肺损伤模型,于照射后5周解剖。采用苏木素-伊红(H&E)染色和Masson染色观察肺组织病理改变及胶原的沉积;采用免疫组织化学法检测肺组织炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达;采用qRT-PCR技术检测肺组织中CIRBP mRNA的表达;采用免疫荧光技术和Western blotting技术检测肺组织中CIRBP蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组肺组织血管扩张充血、炎细胞浸润、部分肺泡间隔增厚,IL-6的表达[(187.22±34.77) vs (129.41±5.58),t=3.179,P <0.05]和TNF-α的表达[(187.02±19.16)vs (137.52±23.53),t=5.069,P <0.05]均升高,差异具有统计学意义,而且模型组肺组织中CIRBP mRNA的表达明显升高[(1.97±0....     

免疫抑制状态下内毒素血症模型小鼠急性肺损伤及其机理研究

目的本研究在建立免疫抑制小鼠内毒素血症模型的基础上,观察机体肺损伤的现象以及发生机制。方法免疫抑制小鼠内毒素血症模型建立,选取Blb/c小鼠,腹腔内注射甲基强的松龙30 mg/kg连续3 d,随后静脉注射内毒素,10 mg/kg剂量,于注射后26、h时点取血浆,在此基础上,50只小鼠分为免疫抑制内毒素血症模型组（模型组）以及甲基强的松龙对照组（激素组）与空白对照组,检测指标分别：①肺部病理学改变,采用HE染色;②肺组织细胞因子表达检测：分别用免疫组化与ELISA检测肺组织中TNF-α与IL-10表达水平;采用免疫组化检测肺组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达情况,肺组织一氧化氮（NO）水平采用化学比色法检测;③是采用化学比色法与ELISA检测血浆一氧化氮、TNF-α、INF-γ、IL-10等细胞因子水平。结果免疫抑制小鼠内毒素血症模型小鼠出现急性肺损伤的病理改变,TNF-α、IL-10与iNOS在肺间质浸润的炎性细胞中阳性表达;在2 h与6 h时点,肺组织与血浆TNF-α与NO的水平明显高于激素组与空白组（P〈0.05）;在6 h时点,模型组小鼠肺组织与血浆IL-10的水平明显高于激素组与空白组（P〈0.05）。结论免疫抑制内毒素血症模型小鼠急性肺损伤与机体巨噬细胞过度活化而释放大量炎性细胞因子有关。     

香菇多糖对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用

目的探讨香菇多糖(Lentinan)对脓毒症引起的小鼠急性肺损伤的保护作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测香菇多糖对RAW264.7细胞生长的影响。通过脂多糖LPS(Lipopolysaccharide)诱导RAW264.7细胞产生炎症反应,并检测培养基中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和一氧化氮(NO)的浓度,Western blot法检测细胞中环氧化酶(COX-2)、一氧化氮合酶(iNOS)、TLR4及NF-κB p65蛋白的表达水平。体内实验苏木精-伊红染色法(HE)观察小鼠肺组织的病理改变,免疫组化检测p65蛋白表达水平。结果 50μM香菇多糖可明显抑制炎症因子IL-6、IL-1β、NO的释放,且随香菇多糖浓度升高,炎症因子的释放量减少更显著(均P0.05);100μM香菇多糖能下调COX-2、iNOS、TLR4及NF-κB p65蛋白表达水平。体内实验HE染色结果表明:对照组细胞完整,细胞核完整,细胞界限清晰,炎性细胞很少或不可见;而模型组中细胞核染不完整,细胞界限不清,有大量炎性细胞浸润;100μM香菇多糖组明显改善了模型组上述状况,表现出对小鼠肺部损伤的保护作用;免疫组化结果显示模型组p65蛋白表达较对照组升高,而100μM香菇多糖可明显下调p65蛋白表达水平。结论香菇多糖通过抑制IL-6、IL-1β和NO信号分子,下调iNOS、COX-2、TLR4、NF-κB p65蛋白的表达而发挥抗炎作用,对脓毒症诱导急性肺损伤有保护作用。     

辛伐他汀对脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠保护作用及对HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的观察辛伐他汀对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤小鼠保护作用及对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法将48只12～15周龄的SPF级Wistar雄性大鼠随机分为4组,模型组尾部静脉注射0.5 ml的LPS(5 mg/kg)构建急性肺损伤(ALI)模型,对照组给予等体积的生理盐水,地塞米松(DXM)干预组和辛伐他汀干预组则在LPS注射前24 h和10 min时分别给予腹腔注射1 ml的DXM(2 mg/kg)和1 ml辛伐他汀溶液(5 mg/kg)进行预处理,对照组和模型组则给予等体积的生理盐水代替。4 h后苏木精-伊红染色法(HE)染色观察大鼠肺部组织病变,并进行评分,ELISA法检测支气管灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)因子水平,同时显微镜下观察并统计总细胞和嗜中性粒细胞的个数,计算肺组织湿干重比(W/D),ELISA检测肺组织中的髓过氧化物酶(MPO),蛋白免疫印迹检测HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路中的HMGB1、TLR4及NF-κB蛋白表达。结果和对照组相比,模型组大鼠在受到LPS刺激后,W/D比值、BALF中的嗜中性粒细胞、总细胞数量及MPO活力出现明显升高(P0.05),与模型组相比,DXM组和辛伐他汀组上述指标均出现明显下降(P0.05)。和对照组相比,模型组的肺泡腔明显变小,间隔出现增厚,肺泡壁出现充血水肿,且发现了大量的炎性细胞浸润,而DXM组、辛伐他汀组和模型组相比,肺组织结构接近于正常,炎性细胞浸润得到缓解,对照组、模型组、DXM组以及辛伐他汀组的HE评分分别为0.79±0.13、2.58±0.21、1.15±0.19和1.21±0.21,模型组HE评分明显高于对照组(t=25.106,P0.05),DXM组和辛伐他汀组HE评分明显低于模型组,差异有统计学意义(t=17.492、15.980,均P0.05)。和对照组相比,模型组中IL-1β、IL-6和TNF-α水平出现明显的升高(P0.05);与模型组相比,DXM组和辛伐他汀组大鼠BALF中IL-1β、IL-6和TNF-α水平出现明显的下降,差异有统计学意义(P0.05)。和对照组相比,模型组中HMGB1、TLR4及NF-κB蛋白表达明显升高(P0.05);和模型组相比,DXM组和辛伐他汀组大鼠肺组织中HMGB1、TLR4及NF-κB蛋白表达明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论辛伐他汀可以抑制LPS所致肺损伤,其作用机制可能与HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路有关。     

急性肺损伤中巨噬细胞因子表达作用机制及肺微血管细胞凋亡情况

目的研究肺泡巨噬细胞特征因子表达情况,以及巨噬细胞对肺微血管细胞凋亡影响。方法建立内毒素性急性肺损伤小鼠模型,将30大鼠随机分为CD11c-DTR转基因小鼠组,野生型健康小鼠组,内毒素血症小鼠组。采用荧光定量PCR测定其巨噬细胞特征因子IL-1β、iNOS、IL-10和CD206基因mRNA表达水平。体外构建M1型巨噬细胞和肺微血管内皮细胞共培养模型,流式细胞仪检测肺微血管内皮细胞凋亡程度。结果 CD11cDTR转基因小鼠实验组的IL-1β、iNOS、IL-10和CD206基因mRNA表达情况均要显著高于CD11c-DTR转基因小鼠对照组(P<0.05)。同样,野生型健康小鼠实验组的IL-1β、iNOS、IL-10和CD206基因mRNA表达情况也要高于野生型健康小鼠对照组(P<0.05)。而且CD11c-DTR转基因小鼠实验组的IL-1β、iNOS的表达量要高于野生型健康小鼠(P<0.05)。共培养体系下,M1型巨噬细胞加快促进肺微血管内皮细胞凋亡。结论内毒素导致的急性肺损伤促进了肺泡巨噬细胞特征因子的显著表达,同时M1巨噬细胞导致肺微血管内皮细胞凋亡也可能参与了急性肺损伤过程中。     

高流量鼻导管氧疗联合氨溴索对ARDS大鼠肺炎症损伤的影响及作用机制的研究

目的 研究高流量鼻导管(high-flow nasal cannula,HFNC)氧疗联合氨溴索(ambroxol,AMB)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的ARDS大鼠肺炎症损伤的保护作用及机制。方法 实验分为正常对照组、ARDS对照组、HFNC氧疗组、AMB治疗组、联合(HFNC+AMB)治疗组。用LPS“两次打击”法建立ARDS大鼠模型,观察五组大鼠动脉血气分析、肺湿/干重比、肺组织病理改变及肺损伤评分,用ELISA法检测肺组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性,qPCR法检测肺组织炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α及核转录因子NF-κB mRNA水平,组织免疫荧光染色法定位肺组织NF-κB表达情况。结果 HFNC氧疗组、AMB治疗组、联合(HFNC+AMB)治疗组均能显著提高动脉血氧分压,增加血氧饱和度,降低肺湿/干重比,改善肺组织病理损伤情况;降低肺组织MPO活性( P ＜0.05);抑制炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α的产生( P ＜0.05);下调核转录因子NF-κB的表达( P ＜0.05)。结论 HFNC氧疗、AMB治疗及二者联合干预的方式均能通过下调ARDS大鼠转录因子NF-κB水平,进而抑制炎性细胞因子的过度表达,发挥对ARDS的治疗作用,且HFNC氧疗联合AMB的干预效果最佳。     

甘草酸单糖对单壁碳纳米管暴露小鼠急性肺损伤的保护作用研究

目的 评估甘草酸单糖（glycyrrhizic acid monoglucuronide,GAMG）对单壁碳纳米管（single-walled carbon nanotubes,SWCNT）诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用。方法 取7～8周龄雌性C57/BL小鼠30只，随机分为3组，每组10只，分别为阴性对照组（生理盐水40μg/只，气管滴注）、SWCNT模型组（SWCNT 40μg/只，气管滴注）、GAMG治疗组（SWCNT 40μg/只，气管滴注+GAMG 200 mg/kg）,GAMG治疗组每天给予1次GAMG腹腔注射，连续3 d，其他组同时给予空白溶剂，在第3天对小鼠进行取材。观察各组小鼠肺组织HE染色病理改变和气管肺泡灌洗液中细胞因子白介素-6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的变化，采用免疫组化法检测TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的蛋白表达水平，免疫荧光法检测NF-κB和HSP47的含量。结果 GAMG治疗组小鼠肺损伤程度明显减轻。与SWCNT组相比，GAMG治疗组BALF中MCP-1和IL-6水平降低（P <0.01）;TLR4和MyD88的表达...     

黄芪多糖对流感病毒感染小鼠急性肺损伤的保护作用的实验研究

目的研究黄芪多糖对流感病毒感染小鼠急性肺损伤的保护作用及机制。方法实验分为正常对照组、流感病毒模型组、黄芪多糖治疗组,黄芪多糖预防组,利巴韦林抗病毒阳性对照组。用甲型H1N1流感病毒鼠肺适应株PR8构建小鼠流感模型,观察黄芪多糖在治疗(PR8感染后给药)和预防(PR8感染前给药)两种不同给药方式下小鼠生存率和肺组织病理变化情况,RT-PCR法检测肺组织炎性相关因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-αmRNA表达,Western blot法检测肺组织TLR4、TLR7、My D88、NF-κB蛋白表达。免疫组化法对肺组织NF-κB表达进行定位。结果黄芪多糖治疗和预防组均能延长小鼠生存时间,减轻肺组织病理变化;下调肺组织炎性相关因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-α水平(P0.01);抑制TLR4、TLR7、My D88、NF-κB的表达(P0.01)。结论黄芪多糖治疗给药和预给药的方式均能缓解流感病毒诱导的肺炎性病理损伤,通过TLR4/7-My D88-NF-κB信号转导通路降低肺组织的炎性反应,发挥抗流感病毒感染的作用。     

铍病大鼠肺组织TNF-α的水平和NF-κB的表达及其意义

目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及核因子-κB(NF-κB)在铍病发病中的作用.方法 采用一次性非暴露式气管注入法染毒建立铍病模型.用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织匀浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α水平,免疫组化法测定肺组织NF-κB的表达.同时HE染色观察肺组织的大体病理改变.结果 大鼠模型组肺组织的病理改变基本符合人类铍病的特点.模型组大鼠肺组织匀浆及BALF中TNF-α水平、肺组织中NF-κB的表达较生理盐水对照组明显升高(P＜0.01);且模型组内TNF-α的水平、NF-κB的表达,60 d组明显高于20 d组(P＜0.05).结论 TNF-α和NF-κB相互作用,在铍病的发病机理中起着重要作用,并可作为判定疾病活动性的一项重要参考指标.     

肺泡巨噬细胞极化加剧内毒素性急性肺损伤的机制研究

目的探讨内毒素肺损伤肺泡巨噬细胞的极化特征及其加剧炎症损伤的机制。方法用脂多糖(LPS)气管滴注法构建内毒素性急性肺损伤小鼠模型,Q-PCR方法检测巨噬细胞特征因子IL-1β、iNOS、IL-10和CD206及流式细胞术检测i NOS和CD206阳性细胞率,对巨噬细胞极化特征进行分析;体外构建M1型巨噬细胞和肺泡Ⅱ型上皮细胞共培养模型,检测共培养体系下肺泡Ⅱ型上皮细胞的细胞活性和凋亡情况。结果 LPS诱导的内毒素促进了肺部组织后续IL-1β、iNOS、IL-10和CD206的表达,6 h时即达显著差异;但是,流式细胞术结果发现6 h时模型组CD68阳性细胞中i NOS阳性细胞比率(26.47%±2.14%)显著高于假手术组(11.62%±1.21%),而模型组CD206阳性细胞比率6 h时仅为12.64%±1.01%,揭示6 h时巨噬细胞的极化特征仍然是以M1型巨噬细胞激活为主;此外共培养体系下,M1型巨噬细胞降低了肺泡Ⅱ型上皮细胞活性并促进了其凋亡。结论内毒素导致的急性肺损伤过程中,肺泡M1巨噬细胞的激活加剧了肺组织的炎症反应,同时M1巨噬细胞导致肺泡Ⅱ型上皮细胞的凋亡也可能参与了肺组织损伤进程。     

烟碱对油酸型急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征大鼠肺组织中NF-κB及HMGB1表达的影响

目的探讨胆碱能抗炎通路被烟碱激活后对急性肺损伤的治疗作用,并研究其作用机制,为急性肺损伤的治疗寻找新的途径。方法将用油酸制备的32只急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)雄性大鼠模型随机分为4组,每组8只,4组分别为对照组、烟碱处理组(烟碱组)、ARDS组、烟碱与α-银环蛇毒素处理组(蛇毒素组),试验中测肺湿干重比、氧分压,制备肺组织病理切片,采用WESTERN-BLOTTING法检测肺组织中NF-κB p65、HMGB1(高迁移率族蛋白)值,ELISA法测大鼠血液中白介素-6(IL-6)值。结果 ARDS组、蛇毒素组大鼠肺组织病理改变较烟碱组明显加重;IL-6的浓度、动脉血氧分压(PaO2)、NF-κB p65及HMGB1的灰度值、肺湿干重比(W/D),ARDS组及蛇毒素组与烟碱组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论烟碱通过作用于烟碱受体的α7亚基激动胆碱能抗炎通路,能明显减少炎症因子的表达,对肺组织具有保护作用。     

体外牛磺酸抑制糖酵解调控M1型巨噬细胞极化

目的研究牛磺酸调控M1型巨噬细胞极化的分子机制。方法人急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞经100 nmol/L佛波酯处理24h后诱导分化为M0型巨噬细胞;M1型极化组—M0型巨噬细胞经10 ng/ml脂多糖和20ng/ml干扰素γ刺激48h诱导极化为M1型巨噬细胞;牛磺酸处理组—在M1型极化组的基础上,分别加入的牛磺酸与脂多糖、干扰素γ共培养48h。实时荧光定量PCR检测M1型巨噬细胞极化相关标志物:肿瘤坏死因子α(TNF-α)、环加氧酶2(COX-2)、CXC趋化因子配体-10(CXCL-10)和白细胞介素6(IL-6)的mRNA表达水平;微量法试剂盒分别检测糖酵解相关酶—己糖激酶(HK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;用刃天青检测细胞内线粒体呼吸链代谢酶活性。结果 M1型极化组:M1型极化相关标志物COX-2、TNF-α、IL-6和CXCL-10的mRNA水平明显升高,己糖激酶(HK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性均增加,线粒体呼吸链代谢酶活性降低;牛磺酸处理组:M1型巨噬细胞极化相关标志物COX-2、TNF-α、IL-6和CXCL-10的mRNA水平明显降低,己糖激酶(HK)、乳酸脱...     

白藜芦醇对脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎性因子生成的调控

目的探讨白藜芦醇(Res)对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化及炎性细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)]基因表达的调节。方法分别用1mg/LLPS或25mmol/LRes+1mg/LLPS处理体外培养的小鼠巨噬细胞,采用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测细胞中NF-κB活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA和蛋白的表达。结果LPS组NF-κB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量在刺激后6～12h明显高于正常对照组(P<0.001),而Res+LPS组NF-κB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著低于LPS组(P<0.005)。结论LPS可诱导巨噬细胞NF-κB活化,导致TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达增强,而Res能抑制NF-κB活化而调节TNF-α、IL-1β、IL-6基因的表达。     

生长抑素对内毒素诱导感染性休克大鼠肺损伤的保护作用

目的基于Toll-样受体4/核因子кB(TLR4/NF-κB p65)信号通路探讨生长抑素(SST)对内毒素诱导感染性休克大鼠肺损伤的保护作用。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组[10 mg/kg脂多糖(LPS)]、BAY11-7082组(LPS+10 mg/kg BAY11-7082)、SST组(LPS+22μg/kg SST)和SST+BAY11-7082(LPS+SST)组各12只。注射LPS后12 h,检测各组大鼠肺组织病理变化和细胞凋亡、肺组织湿/干质量(W/D)比值、LPS、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、TLR4、髓样分化蛋白抗原(MyD88)、p65、磷酸化的NF-кB抑制蛋白(p-IκB)和裂解天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cleaved Caspase)-3表达。结果与对照组比较,模型组大鼠肺组织W/D比值和细胞凋亡率升高,LPS、IL-6、IL-10和TNF-α水平升高,TLR4、MyD88、p65、p-IκB和cleaved Caspase-3表达升高(P0.05);与模型组比较,BAY11-7082组和SST组肺组织病理学评分、W/D比值和细胞凋亡率降低,LPS、IL-6和TNF-α水平下降,IL-10水平升高(P0.05),TLR4、MyD88、p65、p-IκB和cleaved Caspase-3蛋白表达下降(P0.05);与SST组比较,SST+BAY11-7082组肺组织病理学评分、W/D比值和细胞凋亡率降低,LPS、IL-6和TNF-α水平下降,IL-10水平升高,TLR4、MyD88、p65、p-IκB和cleaved Caspase-3蛋白表达下降(P0.05)。结论 SST可以抑制TLR4/NF-κB信号通路,降低肺组织炎症反应,减轻内毒素诱导感染性休克大鼠肺损伤。     

氟乙酰胺经miR-223及TLR4-NF-κB信号通路诱导的大鼠急性肺损伤

目的探讨氟乙酰胺诱导大鼠急性肺损伤的分子作用机制。方法将40只健康成年SPF级SD大鼠按照体重随机分成4组,分别为对照(去离子水)组和4.0、6.0、9.0 mg/kg氟乙酰胺染毒组,每组10只,雌雄各半。采用一次性灌胃方式进行染毒,染毒容量为20 ml/kg。24 h后,进行肺损伤评分,测定动脉氧分压(PaO_2)以及肺组织miR-223、TLR4、NF-κBp65mRNA和TLR4、NF-κBp65、IL-2、TNF-α蛋白的表达水平。结果与对照组比较,各剂量氟乙酰胺染毒组大鼠肺损伤评分升高,而PaO_2水平降低,差异均有统计学意义(P0.05);且随着氟乙酰胺染毒剂量的升高,大鼠肺损伤评分呈上升趋势,而PaO_2水平呈下降趋势。与对照组比较,各剂量氟乙酰胺染毒组大鼠肺组织miR-223、TLR4、NF-κBp65 mRNA和TLR4、NF-κBp65、IL-2、TNF-α蛋白的表达水平升高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着氟乙酰胺染毒剂量的升高,大鼠肺组织miR-223、TLR4、NF-κBp65 mRNA和TLR4、NF-κBp65、IL-2、TNF-α蛋白的表达水平均呈上升趋势。结论氟乙酰胺可诱导大鼠急性肺部炎症反应,其机制与氟乙酰胺上调miR-223表达和激活TLR4-NF-κB炎症信号通路有关。     

褪黑素对肺炎克雷伯菌感染大鼠炎症因子和NF-κB表达的影响

目的分析褪黑素对肺炎克雷伯菌感染大鼠炎症因子和核因子-Kappa B(NF-κB)表达的影响。方法 32只雄性SD大鼠随机分为4组,各8只。对照组为健康大鼠,模型组采用气管滴入方法建立克雷伯杆菌感染肺炎大鼠模型,褪黑素组造模后给予2 mg/kg褪黑素灌胃,阳性对照组造模后予以10 mg/kg左氧氟沙星灌胃,统计各组大鼠一般情况、肺组织病理组织学变化、外周血检测白细胞(WBC)和中性粒细胞(PMN)计数、肺组织炎症因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、NF-κB mRNA、NF-κB抑制蛋白α(IκBα) mRNA。结果肺炎克雷伯菌接种后模型组出现呼吸喘鸣音明显,呼吸急促,面部四肢紫绀等肺炎症状,褪黑素组、阳性对照组症状较模型组轻,对照组试验过程进食、活动度无明显变化;肺组织组间表现比较相似,对照组未见明显异常,模型组肺泡上皮见退行性变化,肺泡管扩张,各级支气管周围、肺泡间隔结缔组织血管周围、小叶间炎性细胞大量浸润,病变严重区域连成片,肺泡壁血管充血,褪黑素组、阳性对照组较模型组明显减轻;模型组WBC、PMN计数高于对照组(P0.05),褪黑素组和阳性对照组比较无显著差异,但均低于模型组(P0.05);模型组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平均高于对照组(P0.05),褪黑素组、阳性对照组比较无显著差异,但均低于模型组(P0.05);模型组NF-κB、IκBαmRNA高于对照组(P0.05),褪黑素组、阳性对照组比较无显著差异,但均低于模型组(P0.05)。结论褪黑素可通过抑制NF-κB信号通路发挥降低肺组织炎症因子水平,改善肺部炎症反应的作用,其效果与左氧氟沙星相似,可能为肺炎克雷伯菌感染的治疗提供了一个新思路。     

脐带间充质干细胞移植缓解肺泡细胞衰老的作用探讨

目的 探讨脐带间充质干细胞（UC-MSCs）移植对放射性肺纤维化（RIPF）、RIPF小鼠的肺内衰老细胞的作用。方法 C57BL/6小鼠单侧右肺接受17 Gy照射构建RIPF模型,照射后3个月尾静脉注射UC-MSCs,照后6个月取材,记录小鼠生存率、统计肺脏器比,苏木素-伊红（H&E）染色、Masson染色观察肺部结构及胶原沉积;qRT-PCR检测衰老分泌相关表型（SASP）表达情况;β-Gal免疫组化评估肺内细胞衰老;WB检测P53-P21、P16通路关键蛋白表达水平;组织免疫荧光检测肺内P21表达情况。结果 经UC-MSCs治疗的RIPF小鼠生存率较未治疗组升高,胶原蛋白沉积减少,塌陷增厚的肺泡结构改善;RIPF小鼠肺内增多的β-Gal阳性衰老细胞和高表达的SASP(IL-6、IL-8、IL-1β)在UC-MSCs治疗后均下降;UC-MSCs治疗降低了RIPF小鼠体内异常增高的P53、p-P53、P21、P16蛋白水平。结论 UC-MSCs可能通过抑制P53-P21及P16通路减轻纤维化肺内细胞的衰老,缓解放射性肺纤维化,有望用于放射性肺损伤的治疗。     

异丙酚注射液和微量肝素对新生大鼠高氧肺损伤的影响

目的:探讨异丙酚注射液和微量肝素对新生大鼠高氧肺损伤的影响,为高氧肺损伤的临床治疗提供理论依据。方法:选取Wistar乳鼠120只,随机分为空气对照组、高氧模型组、异丙酚治疗组和微量肝素治疗组,每组各30只。实验开始第3、7及14天各处死10只动物,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),采用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(MDA)水平,取肺组织测定肺湿/干质量比(W/D),观察肺水肿情况,采用HE染色观察肺组织的病理变化,采用免疫组化染色观察肺组织中TNF-α的表达和Clara细胞的数量。结果:异丙酚治疗组BALF中MDA水平、肺W/D、肺组织中TNF-α的表达强度明显低于高氧模型组,Clara细胞数明显高于高氧模型组,差异均有统计学意义(P均<0.01);但各药物之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:异丙酚注射液及微量肝素可以减轻新生大鼠高氧肺损伤程度,对高氧环境下的肺组织具有一定的保护作用。     

核因子-κB及细胞因子在百草枯致大鼠肺损伤中的动态变化

目的 观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠细胞因子白介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血小板源性生长因子(PDGF)和肺组织核因子-kappa B(NF-κB)的变化及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的干预效果,以探讨百草枯致肺损伤机制.方法 SD大鼠随机分为对照组6只、PQ染毒组56只、PDTC干预组46只.染毒组和十预组给予生理盐水稀释PQ80 mg/kg一次性灌胃后2 h,染毒组给予等量生理盐水腹腔注射,PDTC干预组给予PDTC 100 mg/kg一次性腹腔注射;对照组给予生理盐水1 ml/kg灌胃后2h,给予等量生理盐水腹腔注射.ELISA法测定大鼠血清IL-1β、TGF-β1、TNF-α及PDGF水平,并分析它们分别与肺脏系数、羟脯氨酸含量的关系;电泳迁移率改变分析法测定肺组织NF-κB活性.结果 与对照组比较,染毒组IL-1β含量1、3、7 d明显升高,TGF-β1、TNF-α含量各时段均明显升高,PDGF含量7、14、28、5 6d明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);IL-1β、TNF-α分别与肺脏系数成正相关(r=0.37,0.46,P<0.05或P<0.01),TGF-β1、PDGF分别与羟脯氨酸含量成正相关(r=0.56,0.89,P<0.01);与对照组比较,染毒组肺组织NF.KB活性1、3.7、14 d明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).与染毒组比较,干预组血清IL-1β、TGF-β1、TNF-α、PDGF含量明显降低,相应时点差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);肺组织NF-κB活性1、3、7、14 d明显降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 NF-κB活化及细胞因子IL-1β、TGF-β1、TNF-α、PDGF的过度表达是参与PQ致肺损伤的重要机制;PDTC通过抑制NF-κB活化进而抑制上述细胞因子的表达,减轻PQ中毒大鼠的肺损伤.