二十五味肺病丸改善斑马鱼微血管功能障碍及机制的探究

[目的] 观察二十五味肺病丸是否能够改善微血管功能障碍并探究其潜在机制。[方法] 利用花生四烯酸诱导建立斑马鱼血栓模型,检测二十五味肺病丸给药组和对照组斑马鱼心输出量和血流速度;用辛伐他汀诱导建立斑马鱼微血管缺失模型,计算斑马鱼肠下血管面积和斑马鱼体节间血管直径;给予普纳替尼诱发斑马鱼血管内皮损伤模型,观察尾静脉血栓形成情况,以评价二十五味肺病丸对微血管功能的影响。[结果] 与对照组相比,二十五味肺病丸给药组（27.8 mg/L）心输出量显著性增加（0.11 vs 0.19 nL/s,P<0.05）,血流速度显著增加（398 vs 693 μm/s,P<0.001）,肠下血管面积增加（19 335 vs 25 041像素,P<0.05）,微血管再生促进作用增强;同样,给予二十五味肺病丸处理后（83和250 μg/mL）,斑马鱼节间血管直径明显增大（8.7 vs 11.5 vs 11.8像素,P<0.001）,血栓发生率显著下降。[结论] 二十五味肺病丸可以改善微血管功能障碍,其可能是通过改善微血管血流动力学作用、减少血管内皮损伤、促进内皮再生和减少血栓生成实现。     

丹参酮ⅡA通过调控HMGB1表达抑制TLR4/My D88/NF-κB通路减轻大鼠脓毒症肺损伤机制研究

目的 探讨丹参酮ⅡA对脓毒症大鼠肺损伤中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路的影响。方法 20只清洁级健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠采用盲肠结扎穿孔法（CLP）造模，造模成功后随机分为四组，即模型组，低、中、高剂量治疗组，每组5只。模型组腹腔注射0.9%氯化钠注射液，低、中、高剂量治疗组腹腔注射不同剂量的丹参酮ⅡA(5、10、20 mg/kg)。另取5只SD大鼠作为假手术组，开腹翻动肠道后关闭腹腔并腹腔注射0.9%氯化钠注射液。各组大鼠干预完成后等待24 h处死。测定各组肺湿/干重比（W/D），观察光镜下各组肺组织结构变化，实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测肺组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA的表达。结果 与模型组比较，中、高剂量治疗组的肺组织W/D显著减小[（4.46±0.29）、（4.27±0.21）比（5.09±0.42）,P<0.05或P<0.0...     

大蒜素抑制慢性肾衰竭大鼠炎症反应

[目的]探讨大蒜素对慢性肾衰竭大鼠的治疗作用及机制.[方法]将50只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组及大蒜素低、中、高剂量组,每组各10只.除假手术组,其余各组大鼠采用5/6肾切除法建立慢性肾衰竭模型.造模成功后,大蒜素低、中、高剂量组分别给予10、20、40 mg·kg-1·d-1大蒜素灌胃,假手术组与模型组...     

大麻素受体2在脓毒症大鼠急性肺损伤中的作用及其机制

目的 探讨大麻素受体2 (CB2R)对脓毒症大鼠急性肺损伤的作用及其机制。方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组、CB2R激动剂（JWH133）组和CB2R拮抗剂（AM630）组。模型组腹腔注射脂多糖（LPS）构建脓毒症模型;JWH133组和AM630组在注射LPS前30 min注射JWH133和AM630。6 h后光镜和电镜下观察肺组织结构改变;检测肺组织含水率以及支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α、IL-1β的含量;实时定量PCR检测肺组织ERK1/2及NF-κB p65 mRNA的表达;Western blotting检测肺组织TNF-α、IL-1β、ERK、p-ERK、NF-κB p65、p-NF-κBp65的蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组肺泡结构破坏,大量炎症细胞浸润,超微结构破坏;肺组织含水率升高;BALF中TNF-α、IL-1β水平升高（P <0.05）;肺组织ERK1/2、NF-κB p65 mRNA表达及TNF-α、IL-1β、p-ERK1/2、p-NF-κB p65蛋白表达水平升高（P <0.05）。与模型组相比,JWH133组病理改变及超微...     

姜黄素调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对细菌性阴道炎大鼠炎症反应和阴道菌群的影响

目的：探究姜黄素(CUR)调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对细菌性阴道炎(BV)大鼠炎症反应和阴道菌群的影响。方法：随机把SD大鼠分为对照(Ctrl)组、BV组,低、高剂量CUR(L-CUR、H-CUR)组、TLR4抑制剂组,采用加德纳氏菌(Gardnerella vaginalis)、大肠埃希菌(Escherichia coli)混合细菌悬液阴道注入法建立BV模型(Ctrl组除外);Diff-Quik染色检测阴道分泌物中细胞构成变化;HE染色观察阴道组织病理学变化;ELISA检测阴道分泌物中炎性因子表达情况;高通量测序分析阴道菌群变化[Shannon指数(多样性)、Chao指数(丰富度)及门、属水平变化);Western Blot检测阴道组织中TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。结果：与Ctrl组比较,BV组大鼠阴道分泌物中阴道上皮细胞较少,可见大量白细胞,同时IL-10、TNF-α、IL-1β表达增加(P<0.05);阴道组织发生明显病理改变,阴道壁增厚,可见明显充血水肿、炎性细胞浸润,大量坏死组织脱落;阴道菌群Shannon指数、Chao指...     

白藜芦醇治疗脓毒症大鼠急性肺损伤的作用及机制研究

目的 观察白藜芦醇(Rec)对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用,探讨其相关机制。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组(20只)和造模组(60只),造模大鼠术后随机分为脓毒症模型组、低剂量Rec干预组(20mg/kg)和高剂量Rec干预组(40mg/kg),每组20只,干预组尾静脉注射无菌白藜芦醇,其余尾静脉注射等量0.9%NaCl注射液。ELISA法检测TNF-α和IL-6表达。取左肺下叶组织制作HE病理切片,显微镜下进行肺损伤评分。Western blot法检测肺组织细胞核P65的表达。结果 假手术组、脓毒症模型组和低剂量Rec干预组和高剂量Rec干预组的肺损伤评分为1.04±0.22分、12.25±2.14分、8.63±1.36分和5.18±1.13分,4组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。造模24h后低剂量和高剂量Rec干预组TNF-α和IL-6表达显著低于脓毒症模型组(P<0.01),高剂量Rec干预组TNF-α和IL-6表达显著低于低剂量Rec干预组(P<0.01)。肺组织细胞核P65相对灰度值在假手术组、脓毒症模型组、低剂量Rec干预组和高剂量Rec干预组分别为0.14±0.03、0.82±0.15、0.56±0.09、0.25±0.06,各组间比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 白藜芦醇可以下调脓毒症大鼠肺组织细胞核P65蛋白的表达,抑制核因子κB(NF-κB)炎性通路,对肺损伤具有保护作用。     

口疡防愈凝胶对大鼠放射性口腔炎的保护作用及机制研究

目的 观察口疡防愈凝胶(Kouyang Fangyu gel,KFG)对放射性口腔炎的保护作用,并探讨其机制.方法 将50只SD大鼠随机分为空白对照组、轻度模型组、重度模型组、轻度模型+KFG治疗组、重度模型+KFG治疗组,每组10只.采用单次照射15 Gy和25 Gy X射线的方法分别建立轻度和重度口腔炎模型,并分别...     

虎杖苷通过调控HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路对脓毒症急性肺损伤的保护作用

[目的]观察虎杖苷(polydatin,PD)对脓毒症急性肺损伤大鼠的保护作用,并探究其作用机制.[方法]将50只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级SD大鼠随机分为假手术组、模型组和PD高、中、低剂量组,每组10只.模型组和PD高、中、低剂量组大鼠采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症急性肺损...     

滋肾丸含药血清对大鼠膀胱平滑肌细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响

目的 观察滋肾丸含药血清对脂多糖(LPS)刺激的大鼠膀胱平滑肌细胞表达Toll样受体4(TLR4)、Toll样受体5(TLR5)及其下游信号转导通路髓样分化蛋白(MyD88),以及MYD88非依赖型途径激活核因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响.方法 用LPS(1μg/mL)刺激大鼠膀胱平滑肌细胞株,同时分别给予滋肾丸含药血清5.54、27.7 g/(kg.U)进行干预,Western-blot方法测定TLR4,TLR5和下游通路相关蛋白的表达,分析评价滋肾丸含药血清的现代药效学基础.结果 滋肾丸含药血清27.7 g/(kg.U)对LPS刺激的TLR4、TLR5及其下游通路的MyD88和NF-κB有抑制作用,滋肾丸含药血清5.54 g/(kg.U)对LPS刺激的病理性升高无抑制作用.结论 滋肾丸的药效学作用可能与抑制TLR4、TL R、MyD88和NF-κB蛋白表达有关,且与剂量呈依赖性.     

萝卜硫素预处理通过TLR4/MyD88/NF-κB通路对缺氧/复氧大鼠心肌细胞的保护作用

目的:探讨萝卜硫素对缺氧/复氧(H/R)大鼠心肌细胞的保护作用及可能机制.方法:大鼠原代心肌细胞分为5组,正常对照组不处理,H/R组建立H/R模型(缺氧3 h/复氧3 h),低、中、高浓度萝卜硫素组在分别给予0.1、1.0、5.0μmol/L萝卜硫素预处理1 h后建立H/R模型.采用倒置显微镜观察细胞形态,应用MTS法...     

黄芪多糖对急性心肌梗死大鼠心室重构及miRNA-21的影响

目的:探讨黄芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)对心肌梗死后心肌重构及miR-21表达水平的影响.方法:选用specific pathogen free级雄性大鼠60只,随机分成假手术组、模型组及黄芪多糖低、中、高剂量组和阿托伐他汀组,每组10只.利用结扎冠状动脉左前降支的方法制备大鼠...     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨针药联合治疗病毒感染后嗅觉障碍的疗效及调控机制

目的 探讨针药联合治疗病毒感染后嗅觉障碍的临床效果及其潜在调控机制。方法 将104例病毒感染后嗅觉障碍患者随机分成对照组和联合组,每组52例。其中,对照组给予常规鼻用激素糠酸莫米松鼻喷剂治疗,联合组在对照组基础上鼻内镜下针刺双侧内迎香穴和鼻丘穴。两组患者治疗前和治疗4周后行Sniffin Sticks嗅棒测试和T&T嗅觉计测试;采用副鼻窦CT扫描评估嗅裂通气情况;采集两组患者静脉血,采用Western blotting检测髓样分化因子88(MyD88)、Toll样受体4(TLR4)和核转录因子-κB(NF-κB)p65蛋白相对表达量,采用流式细胞术检测CD4⁺CD25⁺T细胞和CD4⁺CD25^highT细胞百分率。结果 两组治疗4周后和治疗前TDI评分差值比较,差异有统计学意义(P <0.05),联合组差值高于对照组。两组治疗4周后和治疗前T&T测试差值比较,差异有统计学意义(P <0.05),联合组差值高于对照组。两组治愈率和改善率比较,差异均有统计学意义(P <...     

熊果酸对脓毒症模型大鼠肺损伤的保护作用及对HMGB1/TLR4/NF-κB通路的影响

目的:观察熊果酸对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用及对HMGB1/TLR4/NF-κB通路的影响。方法:Wistar大鼠75只随机分为假手术组,模型对照组,熊果酸低剂量组(20 mg·kg~(-1))、中剂量组(40 mg·kg~(-1))、高剂量组(80 mg·kg~(-1)),每组15只。采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症模型,术后立即及8 h后尾静脉注射给药。造模后24 h处死大鼠,苏木精-伊红染色法评估肺组织病理学变化;ELISA法测定血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;硫代巴比妥酸比色法检测肺组织匀浆丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;Western blot法检测肺组织中高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)、Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠肺组织中MDA、HMGB1、TLR4、NF-κB表达显著增加,SOD活性下降,血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,熊果酸各剂量组大鼠肺组织病理明显改善,MDA、HMGB1、TLR4、NF-κB表达显著降低,SOD活性升高,血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著下降(P<0.01或P<0.01)。结论:熊果酸可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路减轻炎症反应,从而发挥对脓毒症肺损伤的保护作用。     

熊果酸对脓毒症模型大鼠肺损伤的保护作用及对HMGB1/TLR4/NF-κB通路的影响

目的:观察熊果酸对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用及对HMGB1/TLR4/NF-κB通路的影响。方法:Wistar大鼠75只随机分为假手术组,模型对照组,熊果酸低剂量组(20 mg·kg~(-1))、中剂量组(40 mg·kg~(-1))、高剂量组(80 mg·kg~(-1)),每组15只。采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症模型,术后立即及8 h后尾静脉注射给药。造模后24 h处死大鼠,苏木精-伊红染色法评估肺组织病理学变化;ELISA法测定血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;硫代巴比妥酸比色法检测肺组织匀浆丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;Western blot法检测肺组织中高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)、Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠肺组织中MDA、HMGB1、TLR4、NF-κB表达显著增加,SOD活性下降,血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高(P0.01);与模型组比较,熊果酸各剂量组大鼠肺组织病理明显改善,MDA、HMGB1、TLR4、NF-κB表达显著降低,SOD活性升高,血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著下降(P0.01或P0.01)。结论:熊果酸可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路减轻炎症反应,从而发挥对脓毒症肺损伤的保护作用。     

山莨菪碱对小鼠流感病毒性肺损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨山莨菪碱对小鼠肺损伤的影响及其机制.方法:建立流感病毒甲型鼠肺适应株(FM1)诱导的小鼠肺损伤模型.将60只BALB/c小鼠随机分为6组,每组10只,分别为正常对照组、模型组、达菲组、山莨菪碱低剂量组、山莨菪碱中剂量组、山莨菪碱高剂量组,达菲组灌胃给予27.5 mg/kg达菲,山莨菪碱高、中、低剂量组分别灌胃...     

瓜蒌牛蒡汤对哺乳期乳腺炎小鼠的改善作用及机制研究

目的：通过体内外实验探讨瓜蒌牛蒡汤治疗哺乳期乳腺炎(LA)的作用机制。方法：制备瓜蒌牛蒡汤和头孢曲松钠含药血清，脂多糖(LPS)诱导小鼠乳腺上皮细胞EMT6细胞模拟体外乳腺炎细胞模型后，用5%、10%、15%瓜蒌牛蒡汤血清和10%头孢曲松钠血清干预24h, CCK8实验测定细胞活性，ELISA测定细胞上清液白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1β含量。另将LPS注入产后5～7d的ICR雌鼠乳腺进行LA造模，随后瓜蒌牛蒡汤和头孢曲松钠灌胃治疗4周，行HE染色观察雌鼠乳腺组织炎症病理变化，ELISA测定血清IL-12、IL-10、IL-1β含量。Western blot测定细胞和组织中Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB-p65)、p-NF-κB-p65、TNF-α蛋白表达。结果：不同剂量瓜蒌牛蒡汤或含药血清干预下，乳腺炎细胞活力显著上升(P<0.05或P<0.01),IL-6、TNF-α、IL-1β含量显著下降(P<0.05或P<0.01),乳腺炎组织病理损伤减轻，血清IL-12、IL-1β含量显著下降(P<0.05...     

西红花苷通过调控TLR4/MyD88/NF-κB通路改善糖尿病大鼠视网膜病变机制研究

目的:探讨西红花苷对糖尿病大鼠视网膜病变的影响,并基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路探索其机制。方法:采用高糖高脂饲料喂养+腹腔注射(IP)链脲佐菌素的方法制备糖尿病视网膜病变(DR)大鼠模型,设模型组、西红花苷组、瑞沙托维(TLR4抑制剂)组和西红花苷+瑞沙托维组,每组20只。另取20只大鼠设为正常组。西红花苷组IP给药30 mg/kg,瑞沙托维组IP给药3 mg/kg,西红花苷+瑞沙托维组IP给药30 mg/kg+3 mg/kg, 1次/d。12周后,通过光学相干断层扫描检测视网膜厚度,伊文思蓝渗透实验检测视网膜血管通透性,HE染色行视网膜病理学检查,透射电子显微镜观察视网膜细胞超微结构改变,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测视网膜肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-8、可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)含量,Western blot法检测TLR4、MyD88、总NF-κB p65、胞核NF-κB p65、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)蛋白表达。结果:与模型组比较,西红花苷组、瑞...     

TLR4、MyD88、NF-κB在乙型肝炎病毒肝硬化患者中的表达及其临床意义

目的 探讨Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）、核转录因子-κ（NF-κB）信号通路在乙型肝炎病毒所致肝硬化中的表达及临床意义。方法 选取2017年1月—2019年1月华北石油管理局总医院收治的130例乙型肝炎肝硬化患者为研究对照（肝硬化组），选择同期130例乙型肝炎患者为乙型肝炎组，选择130例健康人群为对照组。其中肝硬化组进一步根据ChildPugh分为A级（49例），B级（47例），C级（34例）；根据肝硬化程度分为：代偿期肝硬化（49例），失代偿期肝硬化（48例），原发性肝癌（33例）。比较3组丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）的差异，比较3组单核细胞表面TLR4阳性率及血清MyD88、NF-κB水平，以及不同程度肝硬化患者TLR4、MyD88、NF-κB表达水平。采用Spearman或Pearson分析法分析TLR4、MyD88、NF-κB与ChildPugh分级、AST、ALT及TBIL的相关性，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析ALT、AST、TBIL、TLR4、MyD88及NF-κB对肝硬化致原发性肝癌的诊断价值。结果 肝硬化组、乙型肝炎组、对照组AST、ALT、TBIL水平比较，差异有统计学意义（P <0.05）；TLR4、MyD88、NF-κB水平比较，差异有统计学意义（P <0.05）；ChildPughA级、B级、C级患者TLR4、MyD88、NF-κB水平比较，差异有统计学意义（P <0.05）；不同程度肝硬化患者TLR4、MyD88、NF-κB比较，差异有统计学意义（P <0.05）。TLR4、MyD88及NF-κB与ChildPugh分级、AST、ALT及TBIL均呈正相关（P <0.05）。ROC曲线结果显示，ALT截断值为101.44 u/L时，AUC为0.738；AST截断值为136.74 u/L时，AUC为0.706；TBIL截断值为51.86 μmol/L 时，AUC为0.746；TLR4截断值为32.342%时，AUC为0.896；MyD88截断值为931.402 pg/ml时，AUC为0.897；NF-κB截断值为1 243.620 pg/ml时，AUC为0.875。结论 TLR4、MyD88、NF-κB信号通路与乙型肝炎病毒所致肝炎及肝硬化病理进程密切相关，且TLR4、MyD88、NF-κB的检测在诊断肝硬化致原发性肝癌中具有一定临床价值。     

TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路对甲基苯丙胺依赖CPP大鼠海马的影响

  目的  研究TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对甲基苯丙胺（methamphetamine,MA）依赖的条件性位置偏好（conditioned place preference,CPP）大鼠海马的影响,同时采用特异性抑制剂TAK-242抑制Toll样4受体（Toll-like receptor 4,TLR4）,减轻MA依赖诱导的海马神经炎症。  方法  建立MA（10 mg/kg,ip,14 d）依赖大鼠CPP模型,分别为生理盐水组、MA组、TAK-242组、MA+TAK-242组。TAK-242组和MA+TAK-242组先分别腹腔注射抑制剂TAK-242（3 mg/kg）,1h后MA+TAK-242组再腹腔注射MA（10 mg/kg）。采用Western Blot实验和采用荧光定量PCR实验检测MA依赖CPP大鼠海马中TLR4、MyD88、TRAF6、IκB-α、p-IκB-α、NF-κBp65、p-NF-κBp65蛋白的表达和mRNA表达。  结果  与生理盐水组相比,MA组TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κBp65的蛋白和mRNA表达均升高（P < 0.001或P < 0.01）,IκB-α的蛋白和mRNA表达下降（P < 0.01）,p-IκB-α、p-NF-κBp65的表达升高（P < 0.01或P < 0.05）;与MA组相比,MA+TAK-242组TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κBp65的蛋白和mRNA表达均下降（P < 0.001、P<0.01或P < 0.05）,IκB-α的蛋白和mRNA表达升高（P < 0.01）,p-IκB-α、p-NF-κBp65表达下降（P < 0.01或P < 0.05）。  结论  MA依赖可通过激活TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,诱导CPP大鼠海马神经炎症的发生,采用特异性TLR4抑制剂可以减轻MA诱导的神经炎症。