通窍活血汤对蛛网膜下腔出血大鼠的神经保护作用及机制研究

目的：观察通窍活血汤对蛛网膜下腔出血（SAH）大鼠的神经保护作用，并探讨其作用机制。方法：将60只SD大鼠随机分为假手术组，模型组，通窍活血汤低、中、高（3、6、12 g/kg）剂量组各12只。采用改良二次枕大池注血法制作SAH大鼠模型。造模成功后，通窍活血汤低、中、高剂量组大鼠分别灌胃对应剂量的通窍活血汤溶液治疗，假手术组和模型组大鼠灌胃等量的0.9%氯化钠溶液，连续灌胃7 d。于治疗第1、3、5、7天评估各组大鼠Bederson神经功能评分；每组各取6只大鼠，在治疗第3、7天分批取材，采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠海马组织肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白细胞介素-1β (IL-1β)水平；免疫组织化学法测定各组大鼠醌氧化还原酶1 (NQO-1)、核因子E2相关因子2 (Nrf2)蛋白表达。结果：与假手术组比较，模型组大鼠在治疗第1、3、5、7天的Bederson神经功能评分均升高（P<0.05）；通窍活血汤中、高剂量组大鼠在治疗第5、7天的Bederson神经功能评分均较模型组降低（P<0.05）。与假手术组比较，模型组大鼠治疗第3、7天海马组织中TNF-α、IL-...     

天麻钩藤饮对脑缺血模型大鼠皮层组织中Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的研究天麻钩藤饮对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮层组织中氧化应激损伤的影响及作用机制。方法将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、天麻钩藤饮组和阻断剂组,每组10只。除假手术组大鼠行假手术外,其余各组大鼠均采用线栓法复制大鼠中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型。造模成功后3 h内开始予相应药液灌胃给药,每日灌胃1次,连续给药3 d。末次给药2 h后获取脑组织样本;苏木精-伊红(HE)染色后观察脑组织病理学变化;RT-PCR及Western blot法检测大脑皮层组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)mRNA及蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组Nrf2、HO-1 mRNA表达、HO-1蛋白表达及神经功能评分均明显提高(P<0.05);与模型组比较,天麻钩藤饮组Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达均明显提高(P<0.05),神经功能评分均明显降低(P<0.05);与天麻钩藤饮组比较,阻断剂组Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05),神经功能评分均明显提高(P<0.05)。结论天麻钩藤饮对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与Nrf2/HO-1信号通路被激活有关。     

针刺对急性脑出血大鼠Nrf2/ARE信号通路关键因子表达的影响

目的:探讨"百会"透"曲鬓"针刺法对急性脑出血大鼠Nrf2/ARE信号通路关键因子表达的影响。方法:将健康雄性Wistar大鼠54只随机分为针刺组、模型组和假手术组;再将各组分成3个时间亚组分别为1 d、3 d和7 d,每个亚组6只大鼠。采用自体血注入法建立脑出血大鼠模型。针刺组于造模成功后给予大鼠患侧"百会"透"曲鬓"针刺治疗。采用Longa评分法综合评价各组大鼠的神经功能缺损情况。Western-blot方法检测大鼠脑组织血肿周围转录调节因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)和醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达情况。结果:神经行为学评分结果:模型组大鼠出现不同程度的神经功能缺损症状,术后3 d神经功能缺损最重,术后7 d减轻。针刺组大鼠在各个时间点的评分均低于同时间点模型组,与模型组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。Western blot方法检测结果:模型组大鼠Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量于术后1 d已有较明显增多,术后3 d表达最多,术后7 d较高峰期有所回落,但表达仍高于假手术组,差异具有统计学意义(P0.01)。针刺组大鼠各个时间点Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达量与同期模型组比较,均明显高于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。各组大鼠脑组织中Nrf2与HO-1、Nrf2与NQO1表达呈正相关。结论:"百会"透"曲鬓"头针疗法可以改善大鼠神经缺损症状,促进Nrf2/ARE信号通路关键因子Nrf2、HO-1和NQO1的表达,对抗氧化应激损伤,从而保护脑细胞。     

利枢针刺法对局灶性脑缺血大鼠Jagged1蛋白表达的影响

目的:探讨利枢针刺法对局灶性脑缺血大鼠Jagged1蛋白表达的影响及可能作用机制。方法:选取健康雄性SD大鼠60只,体重200～250g,适应性喂养1周后选取50只大鼠以线栓法制作右大脑中动脉阻塞(MCAO)局灶性脑缺血模型,将模型制备成功大鼠随机分为模型对照组、利枢针刺组、普通针刺组、西药灌胃组。剩余10大鼠只游离右侧颈总动脉、颈外动脉,颈内动脉作为假手术对照组,共5组。每组干预治疗14 d后以神经功能评分、TTC染色变化,观察模型建立情况和各组大鼠脑缺血脑组织病理变化情况,用Western-Blot法检测Notch信号通路中Jagged1的相对灰度值的表达变化。结果:假手术组无神经功能的缺失,其他各组神经功能的评分在术后1 d、3 d下降无明显差异,术后7 d、14 d下降比较明显,利枢针刺组及普通针刺组在治疗第14天后的神经功能评分显著低于模型对照组、西药灌胃组,有显著性差异(P<0.01);且利枢针刺组与普通针刺组比较也存在统计学差异(P<0.05)。TTC染色:假手术组大鼠脑组织无梗死;利枢针刺组的脑梗死体积百分比显著小于模型组对照、普通针刺组、西药灌胃组,有显著性差异(P<0.01)。Jagged1的表达:利枢针刺法组脑缺血大鼠Jagged1表达显著高于其余5组,与假手术组、模型对照组、西药灌胃组比,有统计学差异(P<0.01);与普通针刺组比较,有统计学差异(P<0.05)。结论:通利枢机针刺法能够改善脑缺血大鼠神经功能评分和梗死体积;增加Jagged1蛋白的表达,激活Notch信号通路,促进海马神经干细胞的增殖,实现对脑缺血的治疗作用。     

基于Nrf2/HO-1通路探讨益气活血化浊解毒方改善大鼠脑缺血再灌注损伤的实验研究

目的：研究益气活血化浊解毒方对大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的脑保护作用，及其与核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路活性的相关性。方法：72只SD大鼠随机分为6组(n=12):假手术组、模型组、尼莫地平组和益气活血化浊解毒方高、中、低剂量组。除假手术组外均采用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型。再灌注后假手术组、模型组大鼠给予生理盐水，尼莫地平组和益气活血化浊解毒方各剂量组给予相应剂量药液。连续灌胃3 d后，对比各组间大鼠神经功能缺损评分；2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积；原位末端标记法(TUNEL)检测脑组织细胞凋亡情况；Western blot检测脑组织Nrf2和HO-1蛋白的表达情况，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测脑组织Nrf2和HO-1 mRNA的表达情况；试剂盒检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量。结果：与假手术组比较，模型组大鼠神经功能缺损评分与脑梗死体积显著增高(P<0.01),大鼠脑组织凋亡细胞显著增多(P<0.01),Nrf2...     

芪仙通络方对MACO大鼠髓鞘再生及MBP表达的影响研究

目的观察芪仙通络方不同剂量对大脑中动脉栓塞大鼠髓鞘再生及髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、芪仙通络方高剂量组(31.32 g/kg)、中剂量组(15.66 g/kg)、低剂量组(7.83 g/kg)和丁苯酞组,线栓法制备大脑中动脉阻塞模型,造模后3 d后开始灌胃给药,同时腹腔注射5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EDU)标记脑内增殖细胞,每日1次,连续12 d。于造模后第3、7、14日对大鼠神经功能进行评分;采用罗克沙尔坚牢蓝(LFB)染色观察大鼠髓鞘的病理形态学改变;免疫荧光染色观察大鼠缺血侧EDU/少突胶质细胞转录因子2(Olig2)双标阳性细胞数;免疫组化检测大鼠缺血侧MBP蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠各时间点神经功能评分均明显升高(P <0.01),LFB染色平均光密度值降低(P <0.01),大鼠缺血侧EDU/Olig2双标阳性细胞数相当,差异无统计学意义(P> 0.05),MBP蛋白表达显著降低(P <0.01);与模型组比较,各给药组大鼠第7、14 d神经功能评分明显降低(P <0.05),LFB染色平...     

丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠侧脑室室管膜下区神经干细胞增殖与c-myc、c-jun表达的影响

目的探讨丹龙醒脑方对局灶性脑缺血再灌注大鼠侧脑室室管膜下区(SVZ)神经干细胞(NSCs)增殖与c-myc、c-jun表达的关系。方法采用线栓法制备大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血再灌注模型。150只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丹龙醒脑方小、中、大剂量组。于再灌注24 h后,丹龙醒脑方各剂量组予相应剂量药液灌胃,模型组和假手术组予等体积蒸馏水灌胃。1次/d,连续7 d。再灌注1、3、7 d采用m-NSS法进行神经功能缺损评分,再灌注7 d取缺血侧SVZ脑组织,采用Brdu免疫组化检测NSCs增殖,RT-q PCR、Western blot分别检测c-jun、c-myc m RNA和蛋白的表达。结果与假手术组比较,其余各组神经功能缺损评分明显升高(P0.01);再灌注3、7 d,与模型组比较,丹龙醒脑方各剂量组神经功能缺损评分明显降低(P0.01)。与假手术组比较,其余各组Brdu阳性细胞率明显升高;与模型组比较,丹龙醒脑方各剂量组Brdu阳性细胞率亦明显升高(P0.01)。丹龙醒脑方各剂量组较假手术组、模型组c-jun、c-myc蛋白及m RNA表达均明显增强(P0.05,P0.01)。结论丹龙醒脑方能改善脑缺血后神经功能,促进SVZ NSCs增殖,其机制可能与增强c-jun和c-myc表达及延长表达持续时间有关。     

基于Nrf2/HO-1信号通路探讨脑清通颗粒对脑缺血再灌注大鼠的保护作用及机制

目的:探讨脑清通颗粒对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:90只大鼠随机分为假手术对照组、模型对照组、尼莫地平6.25 mg/kg组、脑清通颗粒1.3、2.6、5.2 g/kg组,每组15只。除假手术对照组外,其余各组采用高脂饲料喂养、复合应激刺激和线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型。从第6 w起,假手术对照组和模型对照组用等体积生理盐水灌胃,其余各给药组用相应药物灌胃,1次/d,连续给药7 d。观察大鼠体征表现;采用神经功能评分、TTC染色及脑梗死体积测定评价脑缺血再灌注模型;尼氏染色观察神经细胞变化;ELISA法检测SOD活力和MDA含量;免疫组化法和Western blot法检测Keap1、Nrf2和HO-1的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠体征表现符合临床肝热痰瘀证基本特征,神经功能评分、脑梗死体积显著增加,大鼠血清SOD活力显著降低,MDA含量明显升高,脑组织Keap1、Nrf2、HO-1的蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,脑清通颗粒1.3、2.6、5.2 g/kg组可改善大鼠体征表现,明显降低神经功能评分和脑梗...     

通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤大鼠Keap1-Nrf2/ARE信号通路的影响

目的观察通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤大鼠核因子E2相关因子(Nrf2)表达的影响,探讨通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤抗氧化应激的作用机制。方法采用CLP制作脓毒症模型,将40只成年雄性SD大鼠随机分为正常组、中药组、模型组及假手术组4组,每组10只。正常组于6 h、12 h后予以0.9%氯化钠注射液灌胃。假手术组开腹后将盲肠取出后再回纳到腹腔,术后6 h、12 h予以0.9%氯化钠注射液灌胃。模型组CLP术后立即予以0.9%氯化钠注射液灌胃,术后6 h、12 h予以0.9%氯化钠注射液灌胃。中药组CLP术后立即予以通腑平喘方灌胃,术后6 h、12 h再次予以通腑平喘方灌胃。以上各组均在24 h后麻醉并行腹主动脉采血致死,取出肺组织。术后观察大鼠一般情况,检测各组血清Nrf2、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,RT-PCR法检测肺组织中Nrf2 m RNA表达量。结果中药组的血清Nrf2含量及Nrf2 mRNA表达水平高于模型组(P 0.01)。模型组大鼠血清MDA含量与正常组、假手术组及中药组相比明显升高(P 0.05),血清SOD含量及血清GSH含量与正常组、假手术组及中药组相比明显降低(P 0.05)。结论通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤大鼠有保护作用,其机制可能与其激活Nrf2,上调SOD、GSH有关,起到抑制氧化应激反应、减轻肺组织损伤的作用。     

活血荣络片对大脑中动脉缺血模型大鼠脑组织微囊蛋白-1表达的影响

目的观察活血荣络片对大脑中动脉缺血(MCAO)模型大鼠脑组织中细胞膜微囊蛋白-1(Caveolin-1)表达的影响,探讨活血荣络片对脑缺血后神经功能修复的作用机制。方法将96只SD大鼠随机分为假手术组(24只)和造模组(72只),造模组采用线栓法制作MCAO模型,造模成功后再随机分为模型组、对照组及实验组,各24只。假手术组及模型组予蒸馏水2 m L灌胃,实验组予活血荣络片药液灌胃,对照组以磷酸吡哆醛丁咯地尔胶囊药液灌胃,均造模6 h后首次给药,然后每日灌胃2次,直至处死为止。每日观察大鼠的一般情况,进行神经功能缺损评分,并分别在造模1、3、5及7 d后各组随机选取6只大鼠处死取材,观察比较各组大鼠脑组织Caveolin-1的表达情况。结果造模1 d后,造模组各组大鼠神经功能缺损评分比较差异无统计学意义(P0.05);造模3、5及7 d后对照组及实验组大鼠神经功能缺损评分与模型组比较差异有统计学意义(P0.05),均高于模型组,且对照组与实验组组间比较差异均无统计学意义(P0.05);模型组、对照组及实验组造模1、3、5及7 d后Caveolin-1表达水平与假手术组同期比较差异均有统计学意义(P0.05),均高于假手术组;对照组及实验组造模1、3、5及7 d后Caveolin-1表达水平与模型组同期比较差异均有统计学意义(P0.05),均高于模型组;实验组在造模1、3及5 d后时Caveolin-1表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P0.05),在造模7 d后时Caveolin-1表达水平明显高于对照组,比较差异有统计学意义(P0.05)。结论活血荣络片可明显增加Caveolin-1在梗死周围脑组织中的表达,促进脑血管新生,从而改善脑缺血后神经功能缺损。     

天珠散对缺血性脑卒中大鼠神经功能缺损及Wnt3a、MAP-2表达的影响

目的 研究天珠散对缺血性脑卒中大鼠神经功能损伤的保护作用机制。方法 选取90只雄性SD大鼠，随机取10只作为假手术组，其余大鼠参照Longa线栓法制备大脑中动脉栓塞脑缺血再灌注模型。将造模成功后的大鼠随机分为模型组、尼莫地平组及天珠散低、中、高剂量组，每组16只。造模12 h后，尼莫地平组给予尼莫地平20 mg/kg灌胃，天珠散低、中、高剂量组分别给予天珠散300 mg/kg、600 mg/kg、1 200 mg/kg灌胃，假手术组和模型组给予蒸馏水灌胃，均1次/d,连续10 d。分别于灌胃第1天、第3天、第5天、第7天、第10天对各组大鼠进行Longa评分及转棒实验(记录转棒停留时间);末次灌胃结束后2 h, MRI扫描成像和TTC染色测定大鼠脑梗死体积，HE染色观察脑组织病理形态，Western blot法检测脑组织中Wnt3a、微管相关蛋白2(MAP-2)蛋白表达情况。结果 与假手术组比较，模型组大鼠出现明显神经功能缺损和梗死灶，转棒停留时间明显缩短(P<0.05),脑组织中Wnt3a蛋白相对表达量明显升高(P<0.05),脑组织中MAP-2蛋白相对表达量明显降低(P...     

化浊解毒活血通络方通过调控核因子E2相关因子2/Kelch 样环氧氯丙烷相关蛋白-1通路发挥对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织抗氧化作用的机制研究

目的 观察化浊解毒活血通络方通过调控核因子E2相关因子2(Nrf2)/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)通路对脑缺血再灌注损伤大鼠的抗氧化作用,探讨其可能的神经保护机制。方法 将80只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组及化浊解毒活血通络方高、低剂量组,每组16只。除假手术组外,其余组采用Longa法制备大脑中动脉闭塞模型大鼠。造模成功后,化浊解毒活血通络方高、低剂量组给分别予化浊解毒活血通络方25、6.25 g/(kg·d)灌胃,尼莫地平组予尼莫地平混悬液9.375 mg/(kg·d)灌胃,模型组及假手术组均予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃。灌胃3 d后比较各组大鼠改良神经功能缺损评分(mNSS),评分后处死取脑,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色比较各组大鼠脑梗死体积;制作苏木精-伊红(HE)染色切片观察脑组织病理变化;干湿法测量脑组织含水量;检测脑组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;蛋白免疫印迹法检测脑组织Nrf2、Keap1蛋白表达量;逆转录聚合酶链式反应检测脑组织Nrf2、Keap1基因表达。结果 与...     

针药结合对脑卒中肢体痉挛大鼠脑组织海马γ-氨基丁酸a型受体和脑源性神经营养因子表达的影响

目的观察针药结合对脑卒中肢体痉挛大鼠脑组织海马γ-氨基丁酸a型受体(GABAa)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探究针药结合治疗脑卒中后肢体痉挛的作用机制。方法采用中动脉线栓结合内囊注射NMDA受体制作脑卒中肢体痉挛大鼠模型。45只实验大鼠随机分为模型组、针药结合组(针刺阳陵泉、曲池+加味芍药甘草汤水煎剂灌胃)、西药组(巴氯芬溶液灌胃)、空白组(不做任何处理)和假手术组(干预同模型组,只分离不结扎不插线)。各治疗组大鼠成模后第1日开始干预,连续5 d。采用RT-PCR和Western blot分别检测大鼠脑组织海马BDNF、GABAa mRNA和蛋白的表达。结果与空白组比较,假手术组大鼠神经功能、肌张力评分差异无统计学意义(P>0.05),模型组大鼠神经功能和肌张力评分明显增加(P<0.01);与模型组比较,西药组和针药结合组大鼠神经功能、肌张力评分明显降低(P<0.05),BDNF、GABAa mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01);与西药组比较,针药结合组变化不明显(P>0.05)。结论针药结合可改善模型大鼠神经功能,保护神经损伤,缓解卒中后肢体痉挛,其机制可能与上调模型大鼠脑组织海马中GABAa、BDNF mRNA和蛋白的表达相关。     

阿里红多糖对大鼠脑缺血灌注损伤的保护及JAK/STAT信号通路的影响

目的:研究阿里红多糖对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及抗炎作用。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和阿里红多糖干预组,每组20只。除假手术组之外,其余各组均建立脑缺血再灌注损伤模型,术后阿里红多糖干预组给予40mg/(kg·d)阿里红多糖灌胃,而模型组与假手术组分别给予等量生理盐水灌胃,连续7d。对各组大鼠进行神经功能评分,ELISA检测血清IL-6、TNF-α与IL-10含量,Western blot检测脑组织JAK2和STAT3蛋白的表达,显微镜下观察各组大鼠脑组织神经元形态结构。结果:与模型组比较,阿里红多糖干预组大鼠在灌胃3d、7d后神经功能评分明显降低(P<0.05);与模型组比较,阿里红多糖干预组大鼠血清TNF-α、IL-6含量明显降低,IL-10含量明显升高(P<0.05);与模型组比较,阿里红多糖干预组大鼠JAK2和STAT3蛋白表达水平明显降低(P<0.05);阿里红多糖干预组大鼠神经元病变程度得到明显改善。结论:阿里红多糖是通过抑制脑内JAK2/STAT3信号通路来减轻炎症反应,从而减弱脑缺血再灌注损伤。     

天麻乙酸乙酯提取物对大脑中动脉栓塞模型大鼠神经突触可塑性的影响

目的:观察天麻乙酸乙酯提取物对大脑中动脉栓塞模型大鼠神经突触可塑性的影响。方法:将动物随机分为3组,即假手术组、模型组、天麻乙酸乙酯提取物组(以下简称乙提组,剂量按生药量计为7.29 g·kg-1)。预防性连续灌胃给予药物7 d,末次给药0.5 h后复制大鼠大脑中动脉栓塞模型,然后再进行治疗性连续灌胃给药7 d,统计模型复制后7 d时的死亡率、各组大鼠在规定时间点进行神经行为学评定及脑组织取材检测GAP-43的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠死亡率和神经病学评分明显升高、肌力评分和GAP-43表达明显降低;与模型组比较,乙提组大鼠术后第7天死亡率和神经病学评分明显降低、肌力评分和GAP-43表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:天麻乙酸乙酯提取物对大脑中动脉栓塞模型大鼠神经突触可塑性有一定的改善作用。     

六味地黄汤通过调节AMPK/Akt/GSK3β/Nrf2通路减轻糖尿病抑郁大鼠vHIP髓鞘损伤及抑郁样行为

目的:观察六味地黄汤对糖尿病抑郁(DD)大鼠抑郁样行为的影响,并探讨其作用机制。方法:50只SPF级雄性SD大鼠采用高脂饮食喂养加尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)的方法制备糖尿病模型,随后糖尿病大鼠予28 d慢性不可预测的轻度应激(CUMS)的方法建立DD模型。随机分为5组,模型组,氟西汀组(10 mg·kg^-1·d^-1),六味地黄汤低、中、高剂量组(3.375,6.75,13.5 g·kg^-1·d^-1),每组10只。另取正常组10只,生理盐水灌胃。连续灌胃4周后,悬尾实验和旷场实验用于评估大鼠的抑郁表型,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测腹侧海马(vHIP)中丙二醛(MDA),活性氧(ROS),8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽(GSH);采用免疫荧光检测vHIP区域髓鞘碱性蛋白(MBP)表达,蛋白免疫印迹法检测MBP,髓鞘脂蛋白(PLP),髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)表达水平及通路蛋白磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶/腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK/AMPK),磷酸化蛋白激酶B/蛋白激酶B(p-Akt/Akt),磷酸化糖原合成酶激酶3β/糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β/GSK3β),核因子E2相关因子2(Nrf2)表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠在悬尾实验中不动时间增加(P<0.01),在旷场实验中,模型组大鼠中心区时间下降(P<0.01)。与模型组比较,中、高剂量六味地黄汤干预后,大鼠的不动时间均有不同程度的下降(P<0.01),大鼠中心区时间明显增加(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠vHIP中髓鞘相关蛋白MBP,PLP,MOG蛋白表达降低(P<0.01),与模型组比较,低剂量组MBP表达量增加(P<0.05),MOG,PLP表达差异无统计学意义,氟西汀组、六味地黄汤中、高剂量组MBP,PLP,MOG蛋白表达增加(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组vHIP区域MBP荧光强度显著减少(P<0.01);与模型组比较,六味地黄汤中、高剂量组及氟西汀组MBP荧光表达强度增加(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组SOD,GSH下降(P<0.01),MDA,ROS,8-OHdG表达水平均有所增加(P<0.01);与模型组比较,六味地黄汤中、高剂量组及氟西汀组MDA,ROS,8-OHdG表达水平均下调(P<0.05,P<0.01),SOD,GSH表达水平上调(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠p-AMPK,p-Akt,Nrf2表达下调,p-GSK3β表达增加(P<0.01);与模型组比较,低剂量组p-AMPK蛋白表达明显增加(P<0.05),p-Akt,Nrf2蛋白表达明显增加,但差异无统计学意义,中、高剂量组及氟西汀组p-AMPK,p-Akt,Nrf2蛋白表达上调,p-GSK3β蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论:六味地黄汤改善DD大鼠抑郁样行为,其机制可能是通过激活AMPK/Akt/GSK3β/Nrf2通路,影响vHIP的氧化应激状态,促进髓鞘修复。     

西洋参胶囊对手机频率电磁辐射大鼠肝脏组织氧化损伤及Nrf2蛋白表达的影响北大核心CSCD

目的观察西洋参胶囊对900MHz手机频率电磁辐射大鼠肝脏组织氧化损伤和肝Nrf2蛋白表达的影响。方法 40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、水飞蓟宾组和西洋参组,每组10只。正常组不接受辐射,模型组、水飞蓟宾和西洋参组每天暴露于900MHz手机频率辐射4h,连续12天。水飞蓟宾组和西洋参组辐射同时分别灌服水飞蓟宾胶囊混悬液和西洋参胶囊混悬液(1mL/200g体重),正常组和模型组每日灌服生理盐水。采用HE染色观察肝脏组织形态学变化,比色法检测大鼠肝组织MDA、SOD、GSH、GSH-PX含量,免疫组化法、Western blot检测大鼠肝Nrf2蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肝细胞核缩小或部分消失,肝组织MDA含量及Nrf2蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),SOD、GSH含量降低(P<0.05)。与模型组比较,水飞蓟宾和西洋参组大鼠肝细胞核固缩均明显减轻,接近正常;水飞蓟宾组MDA含量及Nrf2蛋白表达降低(P<0.05),SOD、GSH、GSH-PX含量升高(P<0.05);西洋参组MDA含量及Nrf2蛋白表达降低(P<0.05),SOD、GSH含量显著性增加(P<0.01,P<0.05)。结论900MHz手机频率电磁辐射可影响大鼠肝细胞Nrf2表达,致氧化损伤,引起肝细胞形态异常;水飞蓟宾和西洋参可促进肝细胞形态的修复,其机制可能与影响大鼠肝细胞Nrf2表达,减轻氧化损伤有关。     

安脑平冲方对脑出血大鼠脑血肿周围组织Tf及TfR的影响

目的观察安脑平冲方对脑出血模型大鼠神经功能缺损、脑组织铁沉积及脑血肿周围组织转铁蛋白(Tf)、转铁蛋白受体(TfR)表达水平的影响。方法将240只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、安脑平冲方低剂量组、安脑平冲方中剂量组、安脑平冲方高剂量组、吡拉西坦组,每组再分为6 h、3 d、7 d、14 d 4个亚组,每个亚组10只大鼠。使用大鼠自体全血于左侧尾状核立体定位注射,并采用二次注血退针法复制脑出血大鼠模型。造模成功后的大鼠,除假手术组和模型组外,均给予相应药物进行干预,并对各组各时间点的动物采用Berderson法进行神经功能缺损评分,摩列利铁染色法检测脑组织铁沉积的变化,Western blotting法检测脑血肿周围组织Tf和TfR的蛋白表达水平。结果模型组及各药物组不同时间点的神经功能缺损评分均高于假手术组(P<0.01);安脑平冲方低、中、高剂量组7、14 d的神经功能缺损评分均低于模型组(P<0.05)。铁沉积平均光密度值统计分析结果显示模型组6 h可见铁离子沉积,3 d逐渐升高,第7日达峰值,第14日有所降低;模型组和各药物组在不同时间点的铁沉积密度值均显著高于假手术组(P<0.01),各药物组在3、7、14 d的铁沉积平均光密度值与同期模型组比较下降显著(P<0.01)。Western blotting检测结果表明,模型组各时间点Tf和TfR蛋白表达较假手术组明显升高(P<0.01),安脑平冲方低、中、高剂量组各时间点Tf和TfR蛋白表达较模型组降低(P<0.05或P<0.01)。结论安脑平冲方能改善脑出血大鼠的神经功能损伤,其机制可能为通过下调Tf和TfR来减少铁离子向神经细胞中转移,从而产生神经保护作用。     

葛根素对6-羟多巴胺所致帕金森病大鼠黑质组织Nrf2/ARE通路的影响

目的:研究葛根素对6-羟多巴胺(6-OHDA)致帕金森病(PD)大鼠黑质组织核转录因子(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)通路的影响。方法:建立帕金森SD大鼠模型,随机分成5组:模型组、美多巴阳性组(40 mg.kg-1)及葛根素低、中、高剂量组(20,40,80 mg.kg-1)。持续灌胃给药30 d。Elisa法检测黑质组织中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)活性。RT-PCR法检测黑质组织细胞色素c氧化酶(COX)mRNA表达。Western blot法检测转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keapl)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组黑质中r-GCS,GSH,CAT活性显著降低,COX mRNA Nrf2,Keapl蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,葛根素有效地增加帕金森病大鼠黑质γ-GCS,GSH,CAT活性(P<0.01)。葛根素低,中,高剂量组能明显上调黑质COX mRNA水平(38.5±4.3)%,(43.2±5.1)%,(57.4±6.2)%(P<0.01),显著增加Nrf2,Keapl蛋白表达(38.5±3.6)%,(52.4±4.8)%,(78.5±7.3)%;(31.7±2.3)%,(40.8±3.5)%,(65.9±6.1)%(P<0.01)。结论:葛根素有效地对抗6-OHDA诱导PD大鼠黑质神经细胞氧化应激性损伤,其机制可能与其调节Nrf2/ARE通路有关。     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经血管单元的保护作用

目的:观察电针对大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型大鼠神经行为学及脑组织血管内皮生长因子(VEGF)、神经生长相关蛋白-43(GAP-43)、突触囊泡蛋白(SYN)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、勿动蛋白A(Nogo-A)表达的影响,探讨电针对MCAO/R模型大鼠神经血管单元的保护作用及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组20只。采用线栓法制作大鼠MCAO/R模型。电针刺激在造模成功90min后进行,针刺双侧"内关"水沟"三阴交"及"百会"穴,留针30min,每天针刺1次,共14d。各组大鼠在7、14d两个时间点各取10只进行神经功能评估并行免疫组化SP法检测缺血脑组织VEGF、GAP-43、SYN、MBP、Nogo-A的表达。结果:模型组出现明显神经功能缺损症状,14d电针组大鼠神经功能恢复明显优于模型组(P<0.05)。与假手术组比较,模型组7、14d缺血组织VEGF、GAP-43、Nogo-A的表达增多,SYN在两个时间点的表达均减少(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,电针组7、14d缺血组织VEGF、GAP-43、SYN、MBP阳性表达均增多(P<0.01,P<0.05),Nogo-A的表达减少(P<0.01)。结论:①电针能有效改善局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经功能;②电针能通过上调各时间点局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织内VEGF、GAP-43、SYN、MBP的表达,下调Nogo-A的表达,促进血管、神经元、神经胶质细胞的恢复,从而保护脑缺血再灌注大鼠的神经血管单元。