黄芩汤对溃疡性结肠炎小鼠Th17/Treg、Th1/Th2细胞平衡的影响

目的：研究黄芩汤对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠道辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)、Th1/Th2细胞平衡的影响。方法：60只雄性C57BL/6J小鼠,按体质量随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(0.2 g·kg^-1),黄芩汤低、中、高剂量组(4.55、9.1、18.2 g·kg^-1),除正常组外均予以2.5%右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮水5 d诱导UC,连续灌胃给药7 d后处死小鼠,取肠系膜淋巴结(MLNs)和结肠组织,流式细胞术检测小鼠肠系膜淋巴结Th17/Treg、Th1/Th2,流式细胞微球芯片捕获技术检测结肠组织白细胞介素(IL)-2、IL-17A、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-10等细胞因子含量,对结肠组织样本进行病理切片观察,并采用免疫组化法检测结肠组织中T细胞表达的T-box(T-bet)、GATA结合蛋白-3(GATA-3)、IL-17A、叉头蛋白P3(FoxP3)的表达水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠结肠组织中转化生长因子-β(TGF-...     

苦参碱调节RhoA-ROCK 信号通路对冠心病模型大鼠Th17/Treg 细胞平衡的影响

目的 探讨苦参碱(Matrine)对冠心病(coronary heart disease,CHD)大鼠辅助T细胞17(helper T cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)细胞平衡及Ras同源基因家族成员A(RhoA)-Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路的影响。方法 建立冠心病模型,将实验大鼠分为对照组、模型组、苦参碱低剂量(50 mg·kg-1)组、苦参碱高剂量(200 mg·kg-1)组及苦参碱高剂量(200 mg·kg^-1)+LPA组(10 mg·kg^-1)。超声心动图进行大鼠心功能检测;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法进行白细胞介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平检测;流式细胞术检测Th17、Treg数量及Th17/Treg比值;免疫组化进行内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素1(ET-1)蛋白表达水平检测;Masson染色进行大鼠心肌组织的病理形态变化观察;TTC染色检测各组大鼠心...     

风湿宁胶囊对类风湿关节炎大鼠Th17/Treg平衡和局部炎性因子的影响

目的：通过观察风湿宁胶囊（FSN）对类风湿关节炎大鼠外周血Th17/Treg平衡和对关节腔滑液中炎性细胞因子的影响,进一步探讨其治疗类风湿关节炎（RA）的作用机制。方法：制备II型胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型,采用流式细胞学检测方法观察风湿宁胶囊对CIA模型大鼠外周血辅助性T细胞亚群中Th17（IL-17⁺CD4⁺）细胞水平和调节性T细胞（CD4⁺CD25⁺Treg细胞）平衡状态的影响,并采用流式多重液相芯片技术检测CIA模型大鼠关节腔滑液中炎性细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-17A、IL-4、IL-10）的含量,同时与正常大鼠、CIA模型大鼠和雷公藤多苷片（TPT）治疗大鼠比较。结果：与模型组比较,FSN中、高剂量组大鼠Th17细胞比率明显降低（P<0.05）,各治疗组调节性T细胞比率有上调趋势,但差异不显著（P>0.05）,各治疗组对Th17细胞和Treg细胞的影响与TPT组比较,均无显著性差异（P>0.05）;与模型组比较,FSN中、高剂量可明显降低大鼠关节滑液炎症因子TNF-α、IL-6、IL-17A水平（P<0.05）,FSN各组对关节滑液IL-4、IL-10水平未见明显的上调作用（P>0.05）,与TPT组比较,各治疗组对局部细胞因子IL-6、TNF-α、IL-17A、IL-4、IL-10的影响均无显著性差异（P>0.05）。结论：FSN能够明显降低外周Th17细胞比率,减少关节滑液炎症因子IL-6、TNF-α、IL-17A的分泌,但对外周Treg细胞比率和关节滑液中抗炎相关因子IL-4、IL-10的分泌无明显影响。风湿宁胶囊调节Th17细胞、改善机体免疫失衡状态、抑制滑膜细胞炎症介质过度分泌等作用可能是其治疗RA的重要机制。     

蠲痹颗粒醇提物抑制Th17 细胞表达治疗类风湿关节炎作用机制研究

目的：研究蠲痹颗粒醇提物抑制致病性Th17细胞表达治疗类风湿关节炎(RA)的作用机理,阐述扶阳学派及吴生元教授运用扶阳理论治疗RA的分子机制。方法：构建牛Ⅱ型胶原诱导的DBA/1小鼠关节炎(CIA)模型,模型小鼠按随机数字表法分为CIA模型组(Model组)和蠲痹颗粒醇提物干预组(JBKL组)各10只。苏木精-伊红(HE)染色检测CIA小鼠关节炎病理损伤程度;流式细胞术检测Th17、Treg细胞表达水平;荧光定量PCR法检测Th17细胞相关基因的表达。结果：与Model组比较,JBKL组小鼠关节组织学评分降低(P<0.05)。与Model组比较,JBKL组Foxp3⁺CD4⁺T (调节性T细胞)表达水平上调(P<0.05)。与Model组比较,JBKL组小鼠脾淋巴细胞IL-17⁺CD4⁺比例降低(P<0.05),Treg/Th17比值增加(P<0.05)。JBKL组小鼠脾淋巴细胞IL-17A、IL-23p19、IL-21、IFN-γ的mRNA表达水平低于Model组,Th17...     

积雪草苷对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎中Th17/Treg细胞表达的影响

目的:观察积雪草苷对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)中辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)表达的影响.方法:将SPF级DBA/1雄性小鼠按体质量随机分为6组:正常组,CIA组,甲氨蝶呤组(MTX组,0.5 mg·kg-1),积雪草苷低、中、高剂量(5,15,45 mg· kg-1)组.除正常组...     

基于Th17/Treg细胞平衡探讨抗纤益心方对自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制

目的:探讨抗纤益心方干预自身免疫损伤小鼠免疫调节的作用机制,及其与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞平衡的关系。方法:将60只SPF级BALB/c健康8周龄雄性小鼠按1∶5的比例随机分为正常组和造模组,在第0,7,28天于造模组小鼠腹股沟、腋下、背部多处皮下注射猪心肌肌球蛋白乳化液0.2 m L(含猪心肌肌球蛋白0.1 mg)以制备心肌免疫损伤小鼠模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组,抗纤益心方组(KYP),缬沙坦组(Valsartan),抗纤益心方组给予抗纤益心方20.4 g·kg^-1·d^-1灌胃,缬沙坦组给予缬沙坦12 mg·kg^-1·d^-1灌胃,正常组和模型组给予同计算量的生理盐水灌胃,连续灌胃4周后取材,苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色检测心肌组织中病理损伤情况,酶联免疫吸附法检测小鼠血清中B型钠尿肽(BNP),抗心肌抗体,白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-10(IL-10)的表达,流式细胞术检测脾脏Th17,Treg细胞的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠心肌组织B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠脾脏转录因子维A酸相关孤独受体γt(RORγt),叉头框蛋白P3(Fox P3)m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠心肌病理损伤增加,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17升高,IL-10降低(P<0.05),脾脏Th17细胞表达水平升高,Treg细胞的表达水平降低(P<0.05),心肌组织Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),Bax/Bcl-2值升高,脾脏RORγt m RNA表达升高,Fox P3 m RNA表达降低,RORγt/Fox P3升高(P<0.05);与模型组比较,抗纤益心方组及缬沙坦组心肌病理损伤减轻,血清BNP,抗心肌抗体,IL-17降低,IL-10升高(P<0.05),脾脏Th17细胞表达水平降低,Treg细胞的表达水平升高(P<0.05),心肌组织Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),Bax/Bcl-2降低,脾脏RORγt m RNA表达降低,Fox P3 m RNA表达升高,RORγt/Fox P3值降低(P<0.05)。结论:抗纤益心方可能通过调节Th17/Treg细胞平衡改善心肌免疫损伤。     

白藜芦醇通过重塑肠道菌群改善类风湿性关节炎的作用机制研究

目的:探讨白藜芦醇对类风湿性关节炎的影响,研究肠道菌群的重塑及其作用机制。方法:选取雄性DBA/1小鼠作为实验对象,采用尾根部皮下注射Ⅱ型胶原与弗氏不完全佐剂混合物的方法诱导小鼠(CIA)模型。将诱导成功的小鼠随机分为CIA模型组、CIA+甲氨蝶呤组、CIA+白藜芦醇低剂量干预组及CIA+白藜芦醇高剂量干预组,每组10只。造模第21天灌胃给予不同剂量白藜芦醇[2、0.5 g/(kg·d)],对照组给予等量0.9%氯化钠溶液,甲氨蝶呤组给予0.5 g/(kg·d),连续21 d。采用关节炎分数法对小鼠关节炎症程度进行评分,通过苏木精-伊红染色法(HE)染色评价关节破坏程度,观察各组小鼠关节组织病理变化情况;提取小鼠血清采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6 (IL-6)及白细胞介素-1β(IL-1β);使用流式细胞术检测免疫小鼠第42天脾脏Treg细胞(Treg),辅助性T细胞17 (Th17)和CD8+T细胞的变化情况;提取免疫第42天小鼠粪便样品中微生物基因组DNA,采用实时PCR (RT-PCR)定量分析拟杆菌、乳杆菌、双歧杆菌以及放线菌...     

白头翁汤通过调节T 淋巴细胞平衡治疗溃疡性结肠炎小鼠的机制研究

目的 探讨白头翁汤(Baitouweng Decoction)通过调节T淋巴细胞平衡治疗溃疡性结肠炎(UC)小鼠的机制。方法 将60只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉秦组(500 mg·kg^-1)及白头翁汤低、中、高剂量组(5、10、15 g·kg^-1),每组10只。除正常组外,其他各组小鼠均采用自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液,连续7 d,诱导建立UC小鼠模型;给药组小鼠造模同时按上述剂量灌胃给药(20 mL·kg^-1),正常组和模型组给予等体积蒸馏水,每日1次,连续给药10 d。实验期间记录小鼠体质量变化,观察粪便性状,检测并记录小鼠便血情况,进行疾病活动指数(DAI)评分;测量结肠长度及脾脏、胸腺湿质量,计算脾脏及胸腺指数;采用HE染色法观察结肠组织病理变化,并进行病理学评分;采用阿尔新蓝染色法观察杯状细胞黏蛋白的表达;采用流式细胞术检测小鼠肠系膜淋巴结及脾脏中辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞17(Th17)及调节性T细胞(Treg)细胞的比例;采用ELISA法检测小鼠结肠组织中炎性...     

清热活血方对胶原诱导性关节炎大鼠肠道微生态及Th17/Treg平衡的影响

目的通过观察清热活血方对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠的肠道微生态和Th17/Treg平衡的影响,探讨其治疗类风湿关节炎(rhumatoid arthritis,RA)的机制。方法SD大鼠30只,采用随机数字表法分为与正常组、模型组、甲氨蝶呤(MTX)组、清热活血方组、益生菌组,每组6只。除正常组外,其余组大鼠均以Ⅱ型胶原和完全弗式佐剂的混合乳化剂为抗原,尾根部注射制作CIA模型。MTX组每周给予MTX 1.0 mg/kg;清热活血方组和益生菌组每晨分别给予20 g/kg清热活血方和350mg/kg益生菌。连续灌胃4周后,采用16Sr DNA技术对大鼠肠道粪便菌群测序并分析;采用流式细胞术检测各组大鼠脾脏辅助性细胞亚群Th17(CD4~+IL-17~+)细胞和调节性T细胞Treg(CD4~+CD25~+Foxp3~+)的比例。结果与正常组比较,模型组菌群丰度降低(P0.05,P0.01),Th17水平升高,Treg水平降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,清热活血方组菌群丰度升高(P0.05,P0.01),Th17水平降低,Treg水平升高(P0.05);MTX组和益生菌组Treg水平均上调(P0.05),但下调Th17水平不明显(P0.05)。结论清热活血方缓解RA的关节症状可能与其改善肠道菌群失调,调节机体Th17/Treg免疫失衡有关。     

二妙散对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎中Th17/Treg细胞分化的影响

目的 观察古代经典名方二妙散（EMS）对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎（CIA）中辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）分化的影响。方法 按体质量将20只DBA/1小鼠随机分为正常组、CIA组,EMS（5.4 g·kg^-1）组及甲氨蝶呤（MTX,0.5 mg·kg^-1）组。CIA组、EMS组及MTX组在第1天以等体积牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠,于第21天以等体积牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂于尾根部有别于第1次免疫部位免疫DBA/1小鼠建立CIA模型（此为第2次免疫）,并于第2次免疫当天开始灌胃给药,除MTX为每周3次外,其余每天1次,共给药28 d。第22天开始观察CIA小鼠的关节红肿等症状并进行关节炎评分,第49天取材后,采用苏木素-伊红（HE）染色观察CIA小鼠关节滑膜炎症的情况;免疫荧光（IF）双标法检测CIA小鼠关节中CD4⁺T细胞中Th17细胞标志物白细胞介素-17（IL-17）和Treg细胞标志物叉头框转录因子P3（FoxP3）在关节滑膜中的表达情况;流式细胞术检测小鼠脾脏及淋巴结中Th17和Treg的细胞比例情况。结果 与正常组比较,CIA组小鼠关节滑膜炎症情况明显,小鼠关节结构严重紊乱,关节软骨及骨破坏明显,骨侵蚀严重（P<0.01）;小鼠关节组织中Th17/Treg值显著升高（P<0.01）;小鼠脾脏及淋巴结中Th17的细胞表达比例显著增高（P<0.01）,Treg细胞表达比例显著减少（P<0.01）;与CIA组比较,EMS组和MTX组两组小鼠关节结构均相对正常,骨侵蚀、骨破坏较轻,关节面相对完整光滑;EMS组和MTX组两组中Th17/Treg值显著降低（P<0.01）;小鼠脾脏及淋巴结组织中,EMS组、MTX组Th17细胞表达比例显著降低（P<0.01）,Treg细胞的表达比例显著增加（P<0.01）。结论 EMS通过调节Th17/Treg平衡,抑制CIA小鼠中Th17细胞的表达,促进Treg细胞的表达,进而治疗RA。     

清益调免方通过调控细胞因子纠正自然流产模型小鼠母胎界面Th17/Treg失衡

目的 探讨清益调免方通过对关键细胞因子的调控来调节辅助性T细胞17(Helper T cells 17,Th17)/调节性T细胞（Regulatory T cell,Treg）平衡的作用机制。方法 采用随机对照试验设计,将CBA/J雌鼠分为3组：正常对照组（Normal control group,N）、模型组（Model group,M）、清益调免方治疗组（QYTMtreated group,Q）,每组8只。N组雌鼠和BALB/c雄鼠合笼,M组和Q组雌鼠与DBA/2雄鼠合笼,Q组给予清益调免方溶剂,N组和M组给予等体积的蒸馏水。妊娠第14.5天处死孕鼠取材,计算胚胎丢失率;苏木精-伊红（HE）染色观察蜕膜组织的形态变化;流式细胞术检测孕鼠脾脏中CD4+CD25+Foxp3+(Treg)细胞、CD4+IL-17A+(Th17)细胞占CD4+T细胞的比例;酶联免疫吸附测定胎盘中白介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白介素17A(IL-17A)、白介素6(IL-6)水平变化;实时荧光定量PCR检测胎盘组织中维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、叉头状螺旋转录因子3(...     

电针对肥胖小鼠脾脏调节性T细胞/辅助性T细胞17平衡及血清炎性因子的影响

目的:以调节性T细胞(Treg)与辅助性T细胞17(Th17)平衡及血清相关炎性因子为切入点研究电针治疗肥胖的潜在机制。方法:雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、电针组，每组10只。采用高脂饮食建立小鼠肥胖模型，电针组选取“足三里”“丰隆”“中脘”“关元”给予电针治疗，20 min/次，每周3次，共干预8周。观察各组小鼠进食量、体质量并计算Lee’s指数；多重液相芯片定量技术检测各组小鼠血清中白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达；流式细胞术检测各组小鼠脾脏组织中Treg、Th17细胞水平；荧光定量PCR法检测各组小鼠脾脏组织中叉头框蛋白P3(Foxp3)、维甲酸相关孤儿受体(ROR-γt) mRNA的表达水平。结果:与正常组相比，模型组小鼠的进食量、体质量、Lee’s指数明显升高(P<0.01,P<0.001);血清中IL-2、IL-6、IL-17A、IFN-γ、TNF-α含量升高(P<0.01),IL-4、IL-10含量降低(P<0.001,P<0.0...     

宣肺平喘方对哮喘小鼠气道炎症及Th17/Treg平衡的影响

目的:探讨宣肺平喘方对卵清蛋白(OVA)致敏哮喘小鼠模型气道炎症及Th17/Treg平衡的影响。方法:55只6~8周雌性Balb/C小鼠随机分为正常组、模型组、泼尼松组(7.5 mg·kg-1·d-1)、宣肺平喘方低、高剂量组(16.72,66.88 g·kg-1·d-1),每组11只。除正常组用生理盐水注射及气道雾化外,其余各组小鼠均采用OVA致敏及激发的方法建立哮喘模型,各干预组于哮喘激发后给予相应的药物灌胃,正常组、模型组用生理盐水,连续15 d,末次给药后处死小鼠,取肺组织进行病理切片及苏木素-伊红(HE)染色,酶联免疫吸附法(ELISA)法检测小鼠血清白细胞介素(IL-4),转化生长因子-β(TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,流式细胞术检测血液中Th17细胞和Treg细胞的比例。结果:与模型组比较,各治疗组的肺组织损伤均有减轻,IL-4,TNF-α水平均低于模型组(P0.05),TGF-β水平均高于模型组(P0.05),血液中Th17细胞水平低于模型组,Treg细胞水平高于模型组。宣肺平喘方低、高剂量组在降低IL-4,TNF-α水平,升高TGF-β水平方面与泼尼松组比较无统计学差异,在降低血液Th17细胞比例,升高血液Treg细胞比例方面优于泼尼松组。结论:宣肺平喘方对哮喘小鼠的肺组织黏膜损伤具有一定的保护作用,其机制可能与下调Th17细胞水平,上调Treg细胞水平,恢复Th17/Treg细胞平衡,从而使得血清中炎症因子IL-4,TNF-α的含量降低,抑炎因子TGF-β的含量增加有关。     

消水方联合顺铂对肺癌移植瘤胸腔积液小鼠模型Th17/Treg免疫平衡的影响

目的:探讨消水方联合顺铂对肺癌移植瘤胸腔积液小鼠模型Th17/Treg细胞免疫平衡的影响。方法:将75只C57BL/6小鼠随机分为消水方(33.5 g·kg~(-1))组、顺铂(6 mg·kg~(-1))组、消水方(27 g·kg~(-1))+顺铂(6 mg·kg~(-1))组、模型组、空白组。除空白组小鼠胸腔内注射磷酸盐缓冲液(PBS)外,其余各组小鼠均采用Lewis肺癌细胞胸腔注射建立模型,连续给药10 d后各组取10只小鼠处死,采用流式细胞技术检测外周血中Th17,Treg细胞数量;流式微球阵列法(CBA)以及酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血中白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-17A(IL-17A),白细胞介素-21(IL-21),白细胞介素-23(IL-23)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠脾组织维甲酸相关孤核受体γt(RORγt),叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA及蛋白表达。结果:各组小鼠外周血Th17,Treg细胞数量均高于空白组(P0.05,P0.01)。其中消水方+顺铂组、消水方组较模型组能明显增加Th17细胞数量(P0.05),降低Treg细胞数量(P0.01)。消水方+顺铂组IL-6,IL-17A,IL-21含量分别较其余各组均显著升高(P0.01);消水方+顺铂组较消水方组、模型组IL-23含量升高(P0.05),TGF-β1含量降低(P0.05)。与顺铂组、模型组比较,消水方+顺铂组、消水方组可上调脾组织中RORγt mRNA表达(P0.01),下调Foxp3 mRNA表达(P0.05)。与模型组比较,消水方+顺铂组可上调脾组织RORγt蛋白表达(P0.05),下调Foxp3蛋白表达(P0.01)。结论:消水方联合顺铂可能通过上调Th17细胞水平,下调Treg细胞水平,从而纠正Th17/Treg免疫失衡,发挥抑制MPE作用。     

散寒除湿法对寒湿痹阻型类风湿关节炎患者Th17/Treg 细胞平衡的影响

目的:观察基于散寒除湿法立方的穴位贴敷治疗类风湿关节炎(RA)寒湿痹阻证患者的临床疗效及对辅助性T细胞17 (Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法:将102例RA患者随机分为对照组与治疗组。对照组采用甲氨蝶呤联合来氟米特治疗,治疗组在对照组基础上加用中药穴位贴敷治疗。比较2组治疗前后疾病活动度评价表(DAS28)评分及中医证候积分。采用流式细胞术检测患者外周血Th17、Treg细胞的表达比例,采用酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素-10 (IL-10)、白细胞介素-17 (IL-17)水平。结果:治疗组总有效率为92.31%,高于对照组的76.00%(P0.05)。与同组治疗前比较,治疗后2组关节压痛数、关节肿胀数、视觉模拟评分(VAS)、红细胞沉降率(ESR)、DAS28评分、外周血Th17细胞比例、血清IL-17含量均降低(P0.05),Treg细胞比例、IL-10含量均升高(P0.05)。与对照组治疗后比较,治疗组关节肿胀数、ESR、DAS28评分、外周血Th17细胞比例、IL-17含量均较低(P0.05),Treg细胞比例、IL-10含量均较高(P0.05)。结论:基于散寒除湿法立方的穴位贴敷能有效改善活动期寒湿痹阻型RA患者的临床症状,纠正RA患者体内Th17/Treg细胞失衡状态。     

风湿祛痛汤对实验性关节炎大鼠的治疗作用及机制研究

目的:研究风湿祛痛汤对实验性关节炎大鼠的治疗作用并初步探讨其作用机制。方法:采用完全弗氏佐剂和鸡胶原Ⅱ型制备实验性关节炎(CIA)大鼠模型,灌胃给予风湿祛痛汤(10、20、40 g/kg)共4 w,测定各组大鼠治疗前后足关节炎指数(AI)和右后足肿胀度,辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg),血清IL-1β、IL-6、IL-17α、IL-23、TNF-α及TGF-β含量,以及胫骨上段次松质骨区骨组织形态计量学参数。结果:(1)治疗2、4 w时风湿祛痛汤可剂量依赖性降低CIA大鼠的AI评分以及右后足肿胀度(P0.01);(2)治疗4 w时风湿祛痛汤可剂量依赖性降低CIA大鼠Th17、Th17/Treg,升高Treg,降低血清IL-1β、IL-6、IL-17α、IL-23和TNF-α含量,升高TGF-β含量,升高CIA大鼠胫骨上段次松质骨区的骨小梁面积、骨小梁宽度和骨小梁数量,降低骨小梁分离度(P0.05或P0.01)。结论:风湿祛痛汤对实验性关节炎大鼠具有良好的治疗作用,可降低其四趾AI评分和右后足肿胀度,纠正Th17和Treg紊乱,并通过抑制骨小梁数量减少及骨小梁分离度的增大而减少骨破坏作用。     

通迪胶囊对Ⅱ型胶原诱导性关节炎小鼠的影响

目的 观察通迪胶囊对Ⅱ型胶原诱导性关节炎小鼠的影响.方法 建立鸡Ⅱ型胶原诱导性关节炎小鼠模型,随机分为正常组、模型组、通迪胶囊组(0.55 g/kg)、甲氨蝶呤组(2.055mg/kg),各组于初次免疫后16d开始灌胃给药,给药50 d.HE染色观察各组小鼠关节病理变化;ELISA法检测小鼠血清因子C-反应蛋白(C-Reactive protein,CRP)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;流式细胞术检测小鼠Th1、Th2、Th17和Treg脾脏细胞水平.结果 通迪胶囊组小鼠的关节损伤减轻,血清因子CRP、TNF-α水平较模型组降低(P<0.05),Th1/Th2及Th17/Treg细胞比例较模型组降低(P<0.05).结论 通迪胶囊可以调节CD4+T淋巴细胞亚群Th1/Th2、Th17/Treg细胞比例平衡,降低炎性因子的水平,减轻小鼠关节病理损伤,缓解关节炎症状.     

牛膝总皂苷对类风湿关节炎大鼠Th17/Treg平衡和滑膜组织中IL-2、IL-6、TNF-α的影响

目的:观察牛膝总皂苷对类风湿关节炎大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡和滑膜组织中白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:将50只SD大鼠按照体质量随机分为正常对照组,模型对照组,牛膝总皂苷低、中、高剂量组5组。皮下注射Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂建立类风湿关节炎模型。造模后第7 d开始给药。牛膝总皂苷低、中、高剂量组分别以牛膝总皂苷60,120,240μg/g灌胃,正常对照组和模型对照组灌胃等体积的纯水,1 d 1次,连续28 d。以流式细胞术检测外周血Th17和Treg水平;用酶联免疫吸附法检测滑膜组织匀浆中IL-2、IL-6和TNF-α;以苏木精-伊红染色,观察大鼠关节组织病理变化。结果:与正常对照组对比,模型对照组大鼠外周血中Th17水平升高,Treg水平降低,滑膜组织中IL-2、IL-6、TNF-α水平升高,差异均有统计学意义(P0.01);踝关节组织炎性改变。与模型对照组对比,牛膝总皂苷中、高剂量组外周血中Th17水平降低,Treg水平升高,滑膜组织中IL-2、IL-6、TNF-α水平降低,差异有统计学意义(P0.01);踝关节组织炎性病变明显改善。结论:牛膝总皂苷可能通过逆转Th17/Treg的失衡、抑制炎症因子分泌来发挥治疗类风湿关节炎的作用。     

重症脑梗死患者血清免疫炎性细胞因子水平变化研究

目的分析重度脑梗死患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平与Treg/CD4+细胞、Th17/CD4+T细胞比例变化,比较Treg/CD4+细胞、Th17/CD4+T细胞比例与患者病情严重程度GCS评分相关性。方法选择重度急性脑梗死患者80例,依据入院后24 h病情严重程度评分(格拉斯哥昏迷评分,Glasgow Coma Scale,GCS)将患者分为重度组(30例)与特重组(50例)。酶联免疫吸附法检测发病后24 h患者外周血清中hs-CRP、IL-6、TNF-α水平。流式细胞术检测外周血清中Treg/CD4+细胞、Th17/CD4+T细胞比例变化,采用Pearson直线相关分析Treg/CD4+细胞、Th17/CD4+T细胞比例与GCS评分之间相关性。结果发病后,重度组与特重组患者hs-CRP、IL-6、TNF-α水平比较差异有统计学意义。外周血Treg/CD4+细胞百分比、Th17/CD4+T细胞比例2组比较差异有统计学意义(P0.05)。血清Th17/CD4+T细胞百分比与GCS评分呈正相关(r=5.981,P0.05),血清Treg/CD4+细胞百分比与GCS呈直线正相关(r=-4.872,P0.05)。结论急性重症脑梗死患者发病后体内存在严重的免疫抑制炎症反应。主要表现为炎性细胞因子hs-CRP、IL-6、TNF-α水平上升以及Treg/CD4+细胞比例升高、Th17/CD4+T细胞比例下降。免疫调节性T细胞、抑制性T细胞比例变化与临床病情严重程度存在相关性。