急性胰腺炎患者血浆磷脂酶A2的变化及维拉帕米的治疗效应

目的观察急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)患者血浆磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)的变化,探讨其在胰腺和器官功能损伤中的作用及维拉帕米(verapamil)的治疗效应。方法符合AP诊断患者48例,随机分成维拉帕米治疗组和常规治疗组,分别在治疗前(入院时)、治疗后第2、4天清晨空腹抽肘静脉血4mL,测定血浆PLA2活性、血清淀粉酶和血钙含量,并设对照组。结果AP患者血清淀粉酶活性显著高于对照组(P<0.01),维拉帕米治疗组血清淀粉酶活性明显低于常规治疗组(P<0.05或P<0.01);AP患者血浆PLA2活性显著高于对照组(P<0.01),维拉帕米治疗组血浆PLA2活性明显低于常规治疗组(P<0.05或P<0.01);AP患者血钙浓度明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),维拉帕米治疗组血钙浓度明显高于常规治疗组(P<0.05或P<0.01);维拉帕米治疗组发生多器官功能不全病例明显少于常规治疗组(P<0.01)。结论PLA2在AP及并发器官功能损伤的病理过程中发挥重要的作用,维拉帕米可以通过钙通道拮抗作用抑制PLA2的活性,减轻胰腺及器官功能的损伤而发挥治疗作用。     

白藜芦醇苷对大鼠急性肺损伤模型的保护机制

目的：研究白藜芦醇甙（PD）对休克大鼠肺损伤的干预机制。方法：将休克性肺损伤大鼠随机分为4组：单纯手术组、内毒素休克组、PD预防组和PD治疗组，检测肺系数、肺组织肺通透指数（LPI）、肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量及磷脂酶A2（PLA2）活性，观察肺组织病理切片。结果：PD预防组和治疗组中LPI、BALF中蛋白含量、PLA2较对照组明显降低；PD可明显减轻内毒素休克性肺损伤的程度。结论：白藜芦醇甙对大鼠内毒素休克性肺损伤具有保护作用，且预防性用药效果更佳。     

正常淋巴液对内毒素休克大鼠肺组织髓过氧化物酶活性及膜泵的作用研究

目的观察外源性正常淋巴液对脂多糖（LPS）所致内毒素休克大鼠肺组织匀浆髓过氧化物酶（MPO）活性及肺组织细胞膜泵功能的作用，探讨其干预机制。方法雄性Wistar大鼠40只，按随机数字表法均分为内毒素组、淋巴液组、血浆组和对照组。除对照组外，其他各组应用LPS5mg／kg复制内毒素休克模型，对照组以等量生理盐水代替LPS；15min后，淋巴液组自颈静脉输入仅占全血量1／15的无细胞淋巴液；血浆组以血浆代替淋巴液；内毒素组和对照组以生理盐水代替淋巴液。给予LPS（或相应液体）后4h，制备体积分数为10％的肺组织匀浆，检测肺组织匀浆MPO及膜ATP酶的活性。结果与对照组相比，内毒素组和血浆组大鼠肺组织匀浆MPO活性显著增高、4种膜ATP酶活性均显著下降（P＜0．05或P＜0．01）。淋巴液组肺组织匀浆MPO活性显著高于对照组，Na^＋-K^--ATP酶活性显著低于对照组，两组比较差异均有显著性（P均＜0．05）；而Ca^2＋-ATP酶、Mg^2＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性与对照组比较差异均无显著性（P均＞0．05）；淋巴液组肺组织匀浆MPO活性显著低于内毒素组及血浆组（P均＜0．01），4种膜ATP酶活性显著高于内毒素组及血浆组（P＜0．05或P＜0．01）。结论外源性正常淋巴液对内毒素休克所致的肺损伤具有干预作用，其机制可能与减少中性粒细胞激活、提升膜ATP酶活性有关。     

丹参对大鼠急性坏死性胰腺炎并发肺损伤的影响

目的 探讨急性坏死性胰膜炎（ANP）时肺微循环改变对肺损伤的影响及其丹参的保护作用。方法 SD大鼠192只，随机分为对照组（C组）、胰腺炎组（P组）和治疗组（T组）。5％牛磺胆酸钠胰腺被膜下均匀注射制作ANP模型。采用放射生物微球技术测定制模后0.5、2、6及12h的肺组织血流量，同时观察血清磷脂酶A2（PLA2）活性、血栓素A2（TXA2）与前列环素（PGI2）比值及肺组织学改变。结果 与C组比较，P组各时相肺组织学损伤明显加重（P＜0．01），肺血流量明显降低（P＜0．05），PLA2活性明显增高（P＜0．001），TXA2／PGI2自2h起明显增高（P＜0．05）。与P组比较，自2h起，T组肺组织学损伤明显减轻（P＜0．05），肺血流量明显增加（P＜0．05）；自6h起，PLA2活性、TXA2／PGI2明显降低（P＜0．05）。结论 ANP大鼠肺微循环障碍及相关炎症介质的升高是ANP早期肺损伤的重要原因，丹参对ANP肺损伤具有保护作用。     

大黄对大鼠肠缺血——再灌注所致肺损伤防治作用的实验研究

目的 观察大黄是否对肠缺血－再灌注所致肺损伤具有防治作用，并通过观察大黄对肿瘤坏死因子（TNF）和磷脂酶A2（PLA2）的影响，探讨大黄防治肠源性肺损伤的机制。方法 SD大鼠随机分为肠缺血－再灌注组、假手术组、大黄治疗组和安慰剂组。以病理学改变及^125I标记牛血清白蛋白（BSA）肺摄取指数作为评价肺损伤的指标，分别测定各组动物不同时间血浆、肺组织TNF含量及血清、肺及小肠组织PLA2。结果 大黄可明显减轻ⅡR导致的肺和小肠组织的病理损害，降低肺毛细血管通透性（P＜0．01），抑制肠缺血和再灌注早期出现的血浆及肺组织TNF水平升高（P＜0．01）；抑制肠缺血和再灌注期血清、肺及小肠组织PLA2活性升高（P＜0．05或P＜0．01），结论 早期应用大黄有助于防止肠源性肺损伤的发生，进而发挥组织向多器官功能不全综合征发展的重要作用，这种作用可能是通过抑制TNF和PLA2等介质的释放实现的。     

ANP大鼠心脏组织PLA2与心脏损伤关系分析

目的观察急性坏死性胰腺炎（acute necrotizing pancreatitis,ANP）大鼠心脏组织磷脂酶A2（phos-pholipaseA2,PLA2）的变化,探讨其在ANP并发心脏损伤中的作用。方法将42只SD大鼠分成对照组、模型组和维拉帕米组,腹腔注射左旋精氨酸溶液建模,24、48 h后处死动物,测心脏组织PLA2、血清淀粉酶和血清肌钙蛋白I（CTnI）变化。结果维拉帕米组血清AMS活性、血清CTnI值和心脏组织PLA2均高于对照组（P〈0.05）,且小于模型组（P〈0.05）。结论ANP大鼠心脏组织PLA2明显升高,维拉帕米可抑制PLA2减轻心脏损伤。     

大鼠急性胰腺炎肺损伤组织巨噬细胞炎症蛋白-2和TNF-α基因表达

目的 探讨大鼠急性胰腺炎（AP）肺损伤时，肺组织损伤程度与组织巨噬细胞炎症蛋白-2（MIP-2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）基因表达的关系。方法 胰胆管逆行注射5％脱氧胆酸钠（DCA）复制大鼠AP模型，观察胰腺和肺组织病理学改变，使用RT-PCR法检测肺组织中MIP-2 mRNA、TNF-α mRNA的表达。结果 AP 3h、AP 6h组胰腺和肺组织镜下病理评分明显高于相应对照组。AP 6h组肺组织MIP-2 mRNA表达明显上调。胰腺病理评分与肺组织病理学评分、肺组织MIP-2基因表达呈正相关；肺组织MIP-2与TNF-α的基因表达之间也呈明显正相关。结论 肺组织MIP-2基因表达上调，以及与TNF-α的相互诱生，可能是导致急性胰腺炎中性粒细胞在肺组织浸润和活化，进而导致肺损伤的重要机制之一。     

髓过氧化物酶在腹腔灌洗治疗重症急性胰腺炎急性肺损伤中的作用

目的探讨髓过氧化物酶(MPO)在腹腔灌洗治疗重症急性胰腺炎(SAP)急性肺损伤中的作用。方法成年Wistar大鼠60只,随机分为4组:①阴性对照组(C组):开腹后仅翻动胰腺;②SAP组(S组):采用3.5﹪牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制成SAP模型;③腹腔灌洗组(W组):复制SAP模型成功后于胰腺被膜外放置灌洗管,于下腹部留置引流管,0.9%生理盐水行腹腔持续灌洗;④腹腔注射组(E组):取S组大鼠胰腺匀浆及腹水,于正常大鼠腹腔内注射。于造模后3、6和12h分批处死大鼠,采下腔静脉血2ml行淀粉酶测定;取左肺下叶组织行MPO检测;对胰腺及肺组织进行病理评分。结果 S组及E组肺泡间质水肿、出血,并有中性粒细胞、巨噬细胞浸润。在不同时间点,S组、W组和E组血清胰淀粉酶、肺MPO均高于C组(P0.01),W组升高的程度小于S组。结论 SAP相关性腹水可以导致急性肺损伤,肺组织中MPO表达升高,提示其参与了急性肺损伤的发生过程,其原因可能与相关性腹水激活了粒细胞有关。早期腹腔灌洗将SAP相关性腹水进行稀释并引出体外,减少了腹膜巨噬细胞的活化,下调了MPO水平,减轻了肺损伤的程度,具有较好的治疗作用。     

HES200溶液复苏失血性休克对肺损伤保护作用的实验研究

目的探讨羟乙基淀粉200/0．5（HES200）溶液复苏失血性休克对大鼠肺损伤保护作用及其机制。方法制作SD大鼠失血性休克模型，分别用HES200、羟乙基淀粉40溶液（HES40）、乳酸林格液（RL）复苏大鼠，观察复苏后1、2、4h动脉氧分压（PaO2）、血清TNF-α、肺组织核因子kBNF-kB）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的表达、肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性、肺组织湿干重比值（W／D）。结果失血性休克大鼠复苏后各生物学指标HES200组较其它液体复苏组低，肺损伤程度减轻。结论羟乙基淀粉200溶液通过减轻失血性休克大鼠复苏后炎症反应从而对肺损伤具有保护作用。     

rhGH对肠道缺血再灌注损伤大鼠促炎介质介导性肺损伤的影响

目的:观察重组人生长激素(rhGH)对肠道缺血再灌注(GIR)损伤大鼠促炎介质介导性肺损伤的影响.方法:42只Wister大鼠随机分为GIR损伤组和治疗组,每组分为缺血前30 min,再灌注后48 h和72 h3个时相点(n=6).治疗组分别于再灌注后3 h和12 h使用rhGH向大鼠腹壁皮下注射1 U/kg,每间隔12 h追加一次.采用夹闭肠系膜前动脉(60 min)技术复制GIR损伤大鼠模型.观察各时相点:(1)血浆内毒素(LPS)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平的变化;(2)肺组织中髓过氧化酶(MPO)、弹性蛋白酶(NE)、磷脂酶A2(PLA2)活性的变化;(3)肺组织湿干重比值(W/D)的变化.结果:成功复制了大鼠GIR损伤模型,rhGH用药后可引起:(1)血浆LPS和INF-α水平与GIR组比较明显降低(P<0.01或P<0.05);(2)再灌注3 h和12 h用药组肺组织PLA,含量与GIR组比较在再灌注后48 h显著下降(P<0.05,P<0.01),其余时象点MPO、PLA2、NE活性与GIR组比较有不同程度变化,但均无统计学意义;(3)再灌注后3 h用药组肺组织的W/D与GIR组比较有显著差异(P<0.05).结论:rhGH能减轻促炎介质介导性肺损伤,可能与降低GIR损伤大鼠血液中LPS和TNF-α的水平和肺组织中PLA2活性有关.     

吡格列酮抑制肺组织TLR2、TLR4的mRNA表达进而减轻重症急性胰腺炎肺损伤的机制探索

目的:探讨吡格列酮减轻重症急性胰腺炎肺损伤的机制。方法:将30只健康雄性SD大鼠,随机（随机数字法）分为假手术组、模型组、吡格列酮组,每组10只。假手术组大鼠麻醉后,胰胆管逆行注射生理盐水。模型组麻醉后,胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠构建重症急性胰腺炎肺损伤模型。吡格列酮组腹腔注射吡格列酮后再构建模型。每组随机选择6只大鼠于手术后12 h剖杀,留取肺组织及静脉血。检测并比较三组大鼠血清淀粉酶水平及肺组织匀浆中TNF-α、NO水平;采用RT-PCR检测并比较三组肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达情况;比较三组间肺组织病理损伤评分和肺渗漏指数。分析TLR2和TLR4的mRNA表达情况与肺病理损伤评分、肺渗漏指数的相关性。结果:模型组血清淀粉酶及肺组织匀浆中TNF-α、NO水平均显著高于假手术组,吡格列酮组上述指标水平均显著低于模型组,差异均有统计学意义（ P<0.05）。模型组肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达水平以及肺组织病理损伤评分、肺渗漏指数均显著高于假手术组,吡格列酮组上述指标均显著低于模型组,差异均有统计学意义（ P<0.05）。由Spearman相关分析可见肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达水平与肺组织病理损伤评分呈显著正相关关系（rs=0.959, P<0.001;rs=0.924, P<0.001）;由Pearson相关分析可见肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达水平与肺渗漏指数均呈显著正相关关系（r=0.957, P<0.001;r=0.958, P<0.001）。 结论:吡格列酮可能通过抑制肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA的表达进而减轻重症急性胰腺炎肺损伤程度。     

吡格列酮抑制肺组织TLR2、TLR4的mRNA表达进而减轻重症急性胰腺炎肺损伤的机制探索

目的:探讨吡格列酮减轻重症急性胰腺炎肺损伤的机制。方法:将30只健康雄性SD大鼠,随机（随机数字法）分为假手术组、模型组、吡格列酮组,每组10只。假手术组大鼠麻醉后,胰胆管逆行注射生理盐水。模型组麻醉后,胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠构建重症急性胰腺炎肺损伤模型。吡格列酮组腹腔注射吡格列酮后再构建模型。每组随机选择6只大鼠于手术后12 h剖杀,留取肺组织及静脉血。检测并比较三组大鼠血清淀粉酶水平及肺组织匀浆中TNF-α、NO水平;采用RT-PCR检测并比较三组肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达情况;比较三组间肺组织病理损伤评分和肺渗漏指数。分析TLR2和TLR4的mRNA表达情况与肺病理损伤评分、肺渗漏指数的相关性。结果:模型组血清淀粉酶及肺组织匀浆中TNF-α、NO水平均显著高于假手术组,吡格列酮组上述指标水平均显著低于模型组,差异均有统计学意义（ P<0.05）。模型组肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达水平以及肺组织病理损伤评分、肺渗漏指数均显著高于假手术组,吡格列酮组上述指标均显著低于模型组,差异均有统计学意义（ P<0.05）。由Spearman相关分析可见肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达水平与肺组织病理损伤评分呈显著正相关关系（rs=0.959, P<0.001;rs=0.924, P<0.001）;由Pearson相关分析可见肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达水平与肺渗漏指数均呈显著正相关关系（r=0.957, P<0.001;r=0.958, P<0.001）。 结论:吡格列酮可能通过抑制肺组织TLR2 mRNA、TLR4 mRNA的表达进而减轻重症急性胰腺炎肺损伤程度。     

重症急性胰腺炎大鼠模型的改良

目的：探讨5％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射诱导重症急性胰腺炎大鼠模型的相关技术的改良。方法：将36只健康雄性SD大鼠随机分为模型组（n=18）和假手术组（n=18），应用经胆胰管近十二指肠开口端逆行刺入注射5％牛磺胆酸钠诱导重症急性胰腺炎动物模型；两组均在模型诱导后3、6、12h检测血淀粉酶、胰腺组织含水量，观察胰腺组织形态变化．光镜下进行胰腺病变程度Kusske评分。结果：模型组在模型诱导后3、6、12h血淀粉酶、胰腺组织含水量、胰腺大体病理的Hughes评分和胰腺组织学Kusske评分比假手术组明显升高（P〈0．05，P〈0．01）。结论：此大鼠模型是SAP大鼠模型诱导方法的有效改进，具有创伤小，操作简便，存活时间长、模型诱导成功率高的特点，是较为理想的SAP动物模型。     

大鼠重症急性胰腺炎时急性肺损伤的实验研究

目的　研究内毒素 (endotoxin ,ET)、细胞因子 (cytokine,CK)、氧自由基 (oxygenfreeradi cals ,OFR)等在重症急性胰腺炎 (severeacutepancreatitis,SAP)时急性肺损伤 (acutelunginjury ,ALI)发病机制中的作用。方法　采用胰管逆行注射 1 5 %去氧胆酸钠制成大鼠重症急性胰腺炎时ALI模型。选用纯雄性健康Wistar大鼠共 4 0只 ,体重 2 2 0～ 2 5 0g,随机分成两组 :假手术对照组 (Sham ,n =10 ) ;SAP模型组(SAP ,n =30 ) ,分别于造模后 2 4h活杀。测定动脉血气 ,血清淀粉酶的含量 ,血清内毒素及血清和肺组织匀浆中的TNF α、IL 6、MDA、SOD的含量 ,肺湿 /干系数以及肺组织病理学改变。结果　SAP组血清内毒素 ,血淀粉酶 ,血清及肺组织匀浆中TNF α、IL 6、OFR均较Sham组明显升高 (P <0 0 1) ;动脉血气显示肺损伤严重 ,肺湿 /干比值较Sham组明显升高 ,肺通透性明显升高 ,肺病理学形态改变加重。结论　ET、TNF、IL 6、OFR在SAP时ALI发生发展中起了重要作用     

Role of Toll-like receptor 4 on pancreatic and pulmonary injury in a mice model of acute pancreatitis associated with endotoxemia

OBJECTIVE: Infection of pancreatic necrosis is a severe complication of acute pancreatitis. Because Toll-like receptor 4 (TLR4) has been identified as a receptor necessary to transduct the signal of bacteria-derived lipopolysaccharide into cells, we investigated the role of TLR4 on pancreatic and pulmonary injury in acute pancreatitis and acute pancreatitis associated with endotoxemia in wild-type and TLR4-deficient mice. DESIGN: Laboratory investigation. SETTING: University laboratory. SUBJECTS: Heterozygous TLR4 mice. INTERVENTIONS: Mice were injected intraperitoneally with a supramaximal dose of cerulein each hour for 10 hrs. To mimic infection, additional groups of mice were injected with lipopolysaccharide in the presence or absence of cerulein injections. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: The severity of acute pancreatitis was assessed by serum amylase activity, pancreatic edema, acinar cell necrosis, and pancreas myeloperoxidase activity. Lung injury was quantitated by lung microvascular permeability and lung myeloperoxidase activity. Injections of cerulein induced an edematous pancreatitis that was of similar severity in wild-type and TLR4-deficient mice. Lipopolysaccharide alone had no toxic effect on pancreas and lungs and did not worsen the pancreatic injury induced by cerulein in wild-type and TRL4-deficient mice. In contrast, lipopolysaccharide worsened pancreatitis-associated lung injury, and the deficiency in TLR4 fully prevented this aggravation. CONCLUSIONS: TLR4 may not play a role in the pancreatitis-associated lung injury but participates in the pulmonary injury mediated by endotoxemia.     

PI3K/PKB信号转导通路活性在重症急性胰腺炎急性肺损伤中的变化

目的 探讨重症急性胰腺炎急性肺损伤中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(P13K/PKB)信号转导通路的活性变化规律.方法 健康成年雄SD大鼠40只,随机分为SO组(n=10)、SAP组(n=30),BD针胰胆管逆行注入牛磺胆酸法建立重症急性胰腺炎急性肺损伤大鼠模型.SAP组3、6、12h检测血淀粉酶、血气分析、肺含水量,肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,光镜下进行胰腺和肺组织病变程度评分.免疫组化法检测肺组织ICAM-1和P-PKB的表达,蛋白印迹(Western blot)法检测PI3K/PKB信号通路的活性变化.SO组在术后12h检测上述相关指标.结果 肺损伤程度逐渐加重,组织含水量及MPO活性逐渐升高(P<0.05),PaO_2明显降低(P<0.05).制模后3h随p-PKB的活性逐步增强,ICAM-1表达逐渐增多,两者呈正相关(r=0.910,P<0.05);PI3K/PKB信号通路逐步被激活,至12h达到峰值,与肺损伤程度呈正相关(r=0.871,P<0.05).结论 P13K/PKB信号传导通路被激活是重症急性胰腺炎急性肺损伤的重要发病机制之一.     

己酮可可碱对急性肺损伤鼠肺内磷脂酶A2的影响

目的研究己酮可可碱（PTX）对于内毒素性急性肺损伤（ALI）鼠肺磷脂酶A2（PLA2）和表面活性物质（主要成分为磷脂酰胆碱PC和磷脂酰乙醇胺PE）的影响。方法健康鼠分4组,静脉注射内毒素建立急性肺损伤的模型,应用FIX治疗后,检测支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织内PLA2的活性和PC、PE含量。结果内毒素诱导的鼠ALI中,动物BALF和肺组织内PLA的活性均明显升高,PC下降,PE增加（P〈0．05）。而PTX的使用均抑制了上述各变化（P〈0．05）,并明显改善肺组织病理变化。结论FIX通过抑制ALI鼠肺PLA2的活性,提升肺表面活性物质的含量,而抑制了ALI的发生与发展,对ALI有一定的治疗作用。     

参附注射液对大鼠胰腺移植的保护作用

目的：探讨参附注射液对大鼠胰腺移植的保护作用。方法：糖尿病大鼠随机分为缺血再灌注组（I-R组）和参附注射液组（SF组）各30只，2组移植前2日,再灌注3和7日各随机处死6只大鼠，取血测血糖及淀粉酶,同时取胰腺组织行HE染色，用于观测各种代谢指标；其余6只大鼠观察1个月存活率。结果：再灌注后SF组1个月存活率高于I-R组（5/6∶3/6），各时间点血糖、血淀粉酶、进食量、排尿量和饮水量均低于I-R组（P〈0.01或0.05）；I-R组移植胰的损伤程度大于SF组。结论：参附注射液预处理可增加大鼠胰腺移植的存活率，降低血淀粉酶活性，减轻胰腺的再灌注损伤程度，对大鼠胰腺移植具有保护作用。