化疗同步应用丙氨瑞林（GnRHa）对化疗所致卵巢功能损伤影响的实验研究

[摘要] 目的: 研究注射环磷酰胺(CTX)大鼠同时应用促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)对注射环磷酰胺(CTX)大鼠的卵巢功能的影响.方法: 40只大鼠分为4组:空白对照组(10只),GnRHa组(10只),CTX组(10只), CTX + GnRHa组(10只)分别接受0.9%生理盐水、CTX、GnRHa和CTX + GnRHa注射。采用放射免疫分析法测定各组大鼠血清卵泡刺激素( FSH)和雌二醇（E2）浓度的变化.在停药时及停药后两周, 正常对照组各处死5只大鼠,其余三组分别处死4只大鼠. 观察卵巢重量、卵泡数量及卵泡直径的变化。结果:停药后两周,联合治疗组大鼠的血清雌二醇和FSH浓度分别为（43.39±4.40）pg/ml与（3.48±0.16）mIU/mL;与正常对照组比较,差异无统计学意义( P ＞ 0.05);而CTX组大鼠在血清雌二醇和FSH浓度分别为（26.97±5.58）pg/ml与（3.92±0.35）mIU/mL ,与其余3组分别比较,差异均有统计学意义( P < 0.05)。在停药时和停药后两周处死大鼠的卵巢中,CTX组卵泡总数最少,各组间比较,差异均有统计学意义( P < 0.05) ;结论: 注射CTX同时应用GnRHa能够减少CTX对大鼠的卵巢功能的损伤。 [关键词] 促性腺激素释放激素激动剂 环磷酰胺 卵巢 大鼠;     

孕期染毒 PFOS 对胎鼠体重的影响

目的i评价孕鼠染毒全氟辛烷磺酸盐（PFOS）对胎鼠体重的影响。方法：取孕鼠12只随机分为3组：0．05％TW-20（对照组）,5mg（kg．d）低剂量灌胃组,20mg／（kg·d）高剂量灌胃组,各四只,SD大鼠从怀孕1ld开始灌胃给予PFOS,第19d结束灌胃,第20d处死孕鼠取组织。观察测量胎鼠平均体重,取胎鼠胎盘测重量,采用ELISA测孕鼠血清中糖皮质激素（GC）的含量。结果：与正常对照组比较,不同剂量PFOS对各组孕鼠的胎鼠的体重,胎鼠胎盘重量,孕鼠血清中GC含量比较差异有统计学意义。低剂量组与高剂量组胎鼠胎盘重量明显下降（P〈0．001）;低剂量组胎鼠体重下降（P〈0．05）,高剂量组胎鼠体重明显下降（P〈0．001）;低剂量组孕鼠血清中GC含量升高（P〈0．05）,高剂量组孕鼠血清中GC含量明显升高（P〈0．001）。结论：孕期染毒PFOS对胚胎发育有毒性作用,不同剂量有不同的效应。     

褪黑素保护细菌脂多糖引起的小鼠宫内胎儿死亡和生长发育迟缓

目的研究褪黑素（MT）对细菌脂多糖（LPS）引起宫内胎儿死亡（IUFD）和生长发育迟缓（IUGR）的保护作用。方法实验1：LPS组小鼠于受孕第15-17天每天经腹腔注射LPS（75μg／kg）,LPS＋MT组在LPS处理前和（或）处理后经腹腔注射MT,生理盐水和单纯MT处理作为对照。所有孕鼠于受孕第18天处死,统计活胎、死胎和吸收胎数,称量活胎体重,测量胎鼠身长和尾长,并对胎鼠骨骼发育情况进行评价。实验2：LPS组小鼠于受孕第16天经腹腔一次性注射75μg／kg LPS,LPS＋MT组孕鼠于LPS处理前和（或）处理后经腹腔注射MT,生理盐水和单纯MT处理作为对照。LPS处理后6h处死孕鼠,取母肝和胎盘,检测丙二醛和谷胱甘肽水平。结果LPS＋MT处理组宫内胎儿死亡数显著低于单纯LPS处理组,并呈明显剂量-效应关系;MT预＋后和后处理均显著减轻LPS引起生长发育迟缓,并逆转LPS引起的枕骨骨化不全。MT预＋后处理明显减轻LPS引起的母肝和胎盘脂质过氧化,但对LPS所致GSH含量降低无明显影响。结论MT通过其抗氧化功能保护LPS引起的IUFD和IUGR。     

促排卵药对小鼠子宫内膜发育的影响

目的探讨促排卵药对小鼠子宫内膜发育的影响,为临床用药提供实验依据。方法随机将160只雌性昆明小鼠分为非孕组和受孕组,每组又分为对照组、克罗米酚组(CC组)、单纯促排卵组(HMG HCG组)和GnRHa 单纯促排卵组(GnRHa HMG HCG组)4个小组,每小组20只。各用药组分别给予相应的促排卵药,对照组给予生理盐水。于用药后24 h和48 h分批处死非孕组小鼠,取子宫做成石蜡切片,HE染色,观察子宫内膜发育情况。受孕组的分组和用药与非孕组完全相同,于非孕组雌鼠处死取材的当天与雄鼠合笼,让雌鼠受孕。于受孕后6.5 d处死孕鼠,观察孕鼠着床情况以及胚胎发育指标。结果非孕组:对照组子宫内膜厚度明显厚于3个用药组(P<0.05),3个用药组中,GnRHa 单纯促排卵组子宫内膜厚度以及腺体发育略优于另外两组,但无显著性差异(P>0.05)。受孕组:对照组胚胎着床率明显高于用药组(P<0.05),各用药组之间有差异,但无统计学意义(P>0.05)。结论在三种促排卵方案中,GnRHa 单纯促排卵方案对子宫内膜的影响最小,内膜与间质发育的同步性最好,着床率较高。     

环磷酰胺对小鼠胚胎毒性影响的研究

目的探讨环磷酰胺对小鼠的胚胎毒性作用。方法采用小鼠整体致畸试验,环磷酰胺组给予环磷酰胺10mg/kg,对照组给予等容积的生理盐水。测量孕鼠体重、胎鼠体重、胎盘重量,统计胎鼠死亡率和吸收率。结果环磷酰胺组的孕鼠体重、胎鼠体重、胎盘重量较对照组显著减少(P<0.05),环磷酰胺组的胎鼠死亡率和吸收率与阴性对照组比较,有显著性增加(P<0.01)。结论环磷酰胺对小鼠有胚胎毒性作用。     

肉苁蓉对大鼠生殖毒性及致畸的研究

目的了解肉苁蓉是否具有生殖毒性或引起胎儿致畸。方法将SD孕鼠随机分为4组,分别为阴性对照组(蒸馏水)和肉苁蓉0.83 g/(kg·BW)、1.66 g/(kg·BW)和3.33 g/(kg·BW)3个剂量组,在受孕第7~16天连续10 d给大鼠灌胃,第20天解剖取出胎鼠,观察肉苁蓉对母体及胎鼠的影响。结果孕鼠及仔鼠各项指标与阴性对照组比较,未见明显差异。结论肉苁蓉对孕鼠及胎鼠均未见毒性表现。     

苯对小鼠胚胎发育的毒性作用研究

目的探讨苯对小鼠胚胎体内发育的毒性。方法随机选择健康性成熟的昆明种小鼠,雌雄合笼产生孕鼠,孕鼠被随机分成5组（溶剂对照组、高、中、低剂量苯染毒组和环磷酰胺染毒组）,每组8只,分别在小鼠妊娠第6-15天用25（低剂量）、100（中剂量）、400 mg/kg.d（高剂量）的苯进行灌胃染毒,每天一次,同时设植物油溶剂对照和环磷酰胺（10 mg/kg体重）阳性对照。观察孕鼠的体重增长情况;于妊娠第18天处死孕鼠取出胚胎,观察胚胎的生长发育状况、死胎和吸收胎鼠数及畸形发生情况。结果与植物油对照组比较,中、高剂量苯染毒可降低孕鼠体重的增长率（P〈0.05）,高剂量苯染毒孕鼠能使胚胎吸收和死亡发生率增加（P〈0.05）,并可抑制胎盘和胎仔生长发育,中、高剂量苯染毒导致胎鼠畸形发生率增加（P〈0.05）,但对孕鼠和胎仔的毒作用影响均弱于环磷酰胺的毒性作用（P〈0.05）。结论苯在体内对小鼠胚胎具有发育毒作用和致畸形作用。     

咖啡因暴露对小鼠胚胎发育的影响

目的：评价孕前和孕期咖啡因对雌性小鼠受孕、着床及胚胎发育的影响。方法：孕前和孕期灌胃给予不同剂量咖啡因（60,120和240 mg/kg.d）,以等容积蒸馏水作正常对照。记录各组母鼠体重增长率、小鼠受孕率、着床数和胎盘重量,进行活胎的一般情况检查（体重、身长、尾长）及外观、内脏、骨骼畸形检查。结果：与正常对照组比较,咖啡因组母鼠体重增长率明显降低（P〈0.01,P〈0.05）,咖啡因组小鼠的受孕率明显降低,受孕延迟,吸收胎和死胎数发生率亦增加,呈剂量依赖性,但各组着床数无明显差异。咖啡因小、中、大剂量组胎鼠平均体重、身长、尾长、胎盘重均明显低于正常对照组（P〈0.01,P〈0.05）,胎鼠宫内发育迟缓（FGR）发生率分别为6.8%、23.3%、98.3%;各组胎鼠外观、内脏、骨骼畸形检查未见异常。结论：孕前和孕期咖啡因暴露可致小鼠受孕延迟,胎鼠吸收胎、死胎、FGR发生率升高。     

菘蓝对环磷酰胺引起的小鼠胚胎发育障碍的保护作用

目的：研究菘蓝叶氯仿提取物对环磷酰胺（CP）引起的小鼠胚胎发育障碍的保护作用。方法：采用小鼠胚胎致畸实验，观察受孕母鼠体重变化，活胎率，死胎率，吸收胎率及胎鼠的形态指标；骨骼染色法及内脏组织切片染色，观察骨骼及内脏畸形情况，结果：环磷酰胺 菘蓝叶氯仿提取物100mg/kg.w剂量组，可增加胎鼠的活胎率，降低吸收胎率及胎鼠畸形率的发生，并可明显增加胎鼠身长，尾长和体重。提示：菘蓝叶氯仿提取物本身对胚胎发育无毒性影响，而对CP引起的胚胎发育障碍有一定的保护作用。     

化疗同步应用丙氨瑞林对化疗所致卵巢功能损伤的影响

目的研究注射环磷酰胺(CTX)大鼠同时应用促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)对注射CTX大鼠的卵巢功能的影响。方法40只大鼠分为4组:正常对照组(10只),GnRHa组(10只),CTX组(10只),CTX GnRHa组(10只)分别接受生理盐水、CTX、GnRHa和CTX GnRHa注射。采用放射免疫分析法测定各组大鼠血清卵泡刺激素(FSH)和雌二醇(E2)浓度的变化。在停药时及停药后两周,每组各处死5只大鼠。观察卵巢重量、卵泡数量及卵泡直径的变化。结果停药后两周,联合治疗组大鼠的血清雌二醇和FSH浓度分别为(43.39±4.40)pg/ml与(3.48±0.16)mIU/ml;与正常对照组比较,差异无显著性(P>0.05);而CTX组大鼠血清雌二醇和FSH浓度分别为(26.97±5.58)pg/ml与(3.92±0.35)mIU/ml,与其余3组分别比较,差异均有显著性(P<0.05)。在停药时和停药后两周处死大鼠的卵巢中,CTX组卵泡总数最少,各组间比较,差异均有显著性(P<0.05)。结论注射CTX同时应用GnRHa能够减少CTX对大鼠的卵巢功能的损伤。     

促性腺激素释放激素激动剂对卵巢癌大鼠化疗效果的影响

目的 研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)对大鼠卵巢组织中雌激素受体α(ERa),ERB,孕激素受体(PR)和雄激素受体(AR)的表达的影响以及对环磷酰胺在卵巢癌大鼠模型中治疗效果的影响。方法 (1)80只Fischer-344大鼠分为4组,分别接受生理盐水、环磷酰胺((3TX)、GnRHa和CTX GnRHa治疗,采用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法比较各组大鼠卵巢组织中ERα,ERB,PR和AR的表达水平;(2)使用NuTu-19卵巢癌细胞系在20只Fischer-344大鼠上建立卵巢癌模型,分为3组,分别接受生理盐水、CTX和CTX GnRHa治疗,比较各组大鼠的生存时间。结果(1)4组大鼠卵巢组织中ERct、ERβ、PR、AR mRNA强度分别为0．24～0．29、1．13～1．35、0．68～0．88、1．39～1．63,免疫组化评分结果分别为4．7～5．1、15．1～15．5、8．5～9．1、17．9～19．0,各组大鼠的受体表达水平差异没有统计学意义;(2)(3TX组和联合治疗组大鼠的生存时间分别为76．0d和79．6d,两者差异没有统计学意义。结论 在大鼠模型中应用GnRHa的过程中不会改变大鼠卵巢组织中ERα、ERβ、PR、AR的表达水平,也不会影响CTX对卵巢癌大鼠模型的治疗效果。     

不同超促排卵方案对子宫内膜性激素受体和白血病抑制因子表达的影响

目的：探讨促性腺激素释放激素激动剂（GnRHa）长方案和单纯促性腺激素（PMSG）超促排卵对分泌期子宫内膜雌、孕激素受体和白血病抑制因子（LIF）表达的影响。方法：以小鼠为超促排卵动物模型，采用GnRHa＋PMSG长方案促排卵，以单用PMSG促排卵和自然周期为对照，在排卵后取子宫内膜，免疫组化定量测定腺上皮细胞雌、孕激素受体表达水平；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量检测内膜LIFmRNA表达。结果：免疫组化显示：GnRHa＋PMSG组在注hCG后内膜腺上皮细胞ER、PR免疫组化阳性细胞百分率为（88．46&#177;2．51）9／5、（84．71&#177;2．21）9／5，染色强度为（0．415&#177;0．048）AU、（0．454&#177;0．046）AU，均低于自然周期组同期值，分别为（92．36&#177;2．33）％、（87．82&#177;1．22）％和（0．602&#177;0．051）AU、（0．542&#177;0．055）AU（P〈0．01）；但高于单纯PMSG组，分别为（82．62&#177;1．63）％、（74．19&#177;1．39）％和（0．366&#177;0．044）AU、（0．364&#177;0．028）AU（P均〈0．05）。RT-PCR显示：GnRHa＋PMSG组注入hCG后内膜LIFmRNA表达相对量（1．703&#177;0．549）高于单纯PMSG组（1．535&#177;0．641，P〈0．01），但两者均低于自然周期组（1．959&#177;0．778，P〈0．01）。结论：GnRHa长方案辅助超促排卵可影响子宫内膜性激素受体和LIF的表达水平，可能对内膜容受性有一定影响，但优于单纯促性腺激素方案。     

促性腺素释放激素拟似剂对大鼠生长的影响及机制

目的　观察抗早熟药物-促性腺素释放激素拟似剂(GnRHa)对大鼠身长增长的影响,并探讨药物作用的机制。方法　选择正常青春启动期雌性SD大鼠60只(4 周龄),随机分为 GnRHa注射组和空白对照组,每周观测身长、体重,观察阴门开启情况;用逆转录和荧光定量 PCR的方法,从 mRNA转录水平分析各组动物下丘脑 GH IGF轴相关激素及其受体表达水平的变化。结果　(1) 空白组大鼠阴门至 6 周龄全部开启,而 GnRHa组至 10 周龄全部开启;GnRHa组青春期生长速度较空白组减慢,但两组成年期身长无显著差异;(2) 用药期间,两组均未影响下丘脑 GH IGF轴中促生长激素释放激素及其受体(GHRH、GHRHR)的 mRNA转录水平,但 GnRHa 组生长抑素(SRIH) mRNA转录水平增高;生长激素(GH)及其受体(GHR)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)mRNA转录水平降低。结论　(1) GnRHa可延缓大鼠性成熟发育,同时减慢大鼠青春期生长速度,但对成年期身长无影响;(2) 其作用主要通过影响下丘脑 GH IGF轴中SRIH、GH、GHR、IGF-1和 IGF-1R而实现。     

小剂量雌激素联合促性腺激素释放素类似物治疗儿童特发性中枢性性早熟

目的观察小剂量雌激素联合促性腺激素释放素类似物(GnRHa)治疗特发性中枢性性早熟(ICPP)的效果。方法 45例ICPP伴生长减速患儿分为3组:雌激素联合GnRHa治疗组、重组人生长激素(rhGH)联合GnRHa治疗组、单纯GnRHa治疗组,每组15例。分别于治疗前和治疗6个月后观察3组患儿骨龄(BA)、年生长速率(GV)、体质量、身高(Ht)、骨龄身高(Htba)、成年预测身高(PAH)、血脂、血糖、胰岛素、甲状腺功能、雌二醇(E2)、睾酮(T)、泌乳素(PRL)、血胰岛素样生长因子1(IGF-1)、乳房及子宫卵巢B超等的变化;另行GnRH激发试验监测促黄体生成素(LH)和促卵泡雌激素(FSH)水平。结果 3组患儿治疗前Ht、Htba、骨龄/年龄(BA/CA)、PAH、GV、体质量、IGF-1比较差别均无统计学意义(P>0.05)。治疗6个月后,雌激素联合GnRHa治疗组患儿GV、Ht、PAH明显高于治疗前(P<0.05),rhGH联合GnRHa治疗组患儿GV、Ht、PAH、IGF-1明显高于治疗前(P<0.05);且雌激素联合GnRHa治疗组和rhGH联合GnRHa治疗组患儿GV、Ht、PAH明显高于单纯GnRHa治疗组(P<0.05);rhGH联合GnRHa治疗组患儿IGF-1明显高于雌激素联合GnRHa治疗组和单纯GnRHa治疗组(P<0.05)。3组治疗前后E2、T、PRL、乳房及子宫和卵巢B超结果均无明显变化,GnRH激发试验LH、FSH和LH/FSH亦无明显变化(P>0.05)。结论小剂量雌激素联合GnRHa治疗ICPP,能在不加速BA的情况下有效地提高生长速率,且雌激素价格便宜,患者依从性好。     

维生素D缺乏对大鼠肺发育影响的形态学研究

目的:研究维生素D(VitD)缺乏对大鼠肺发育的形态学影响.方法:雌性SD孕鼠随机分为正常对照组、VitD缺乏模型组及干预组3组,每组6只.对照组予光照及含VitD的正常饲料喂养;模型组及干预组予以避光、不含VitD的饲料喂养,2周后与成熟SD雄性大鼠交配,于孕17、18、19天干预组以活性VitD(0.5 mg/kg)灌胃,并恢复光照及正常喂养;模型组及对照组予以等体积生理盐水灌胃.各组取孕20天的胎肺及生后1天新生鼠肺组织,通过光镜观察和电镜技术.分析研究VitD缺乏对肺发育的形态学影响.结果:光镜下,孕20天模型组及干预组胎肺肺泡平均表面积、平均呼吸膜周径均小于同龄正常对照组(P<0.05),平均肺泡间隔厚度大于对照组(P<0.05);生后1天新生鼠模型组肺泡平均表面积、平均呼吸膜周径小于对照组(P<0.05),平均肺泡间隔厚度大于对照组(P<0.05),干预组肺泡平均表面积、平均呼吸膜周径大于模型组,平均间隔厚度小于模型组(P<0.05).电镜下,孕20天及生后1天的模型组的板层小体数量均明显少于对照组,且孕20天模型组糖原沉积丰富,生后1天模型组板层小体结构疏松,可见板层小体排空现象;干预组上述变化较模型组有所改善.结论:孕期VitD缺乏抑制了孕晚期胎鼠及新生大鼠的肺发育,补充活性维生素D可逆转上述抑制作用.     

不同方案超排卵下小鼠子宫内膜种植窗期整合素β3的表达

目的 以超排卵下小鼠子宫内膜种植窗期整合素β3的表达为指标,比较不同超排卵方案对小鼠子宫内膜容受性的影响。方法 模拟人类超排卵长周期,对小鼠进行超促排卵。根据超排卵方案的不同,按随机表顺序将40只小鼠分为4组,分别为促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRHant)组、促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)组、孕马血清促性腺激素(PMSG)组及对照组,每组10只小鼠。用免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别检测小鼠子宫内膜种植窗期整合素β3蛋白和mRNA的表达。结果 免疫组织化学结果显示,与对照组相比GnRHa组小鼠整合素β3蛋白的表达明显下降(P=0．023),GnRHant组和PMSG组小鼠整合素β3蛋白的表达明显降低(P=0．001);与PMSG组小鼠相比,GnRHa组小鼠整合素β3的表达明显增高(P=0．001),而GnRHant组整合素β3的表达差异无显著意义(P=0．768);RT-PCR结果与免疫组化结果相符。结论 与小鼠自然周期相比,3种超排卵方案均使小鼠子宫内膜种植窗期整合素β3的表达明显下降,可能降低了子宫内膜容受性;与单一PMSG超排卵方案相比,GnRHa辅助超排卵方案能明显改善小鼠子宫内膜的容受性;而GnRHant辅助超排卵方案则对小鼠子宫内膜容受性的改善作用不明显。     

朱砂灌胃给药后汞在孕大鼠脏器内的分布和排泄途径研究

目的:探讨朱砂口服后汞在孕大鼠体内的分布和排泄途径。方法:结合生殖毒性Ⅱ段试验,雌性SD大鼠交配后随机分成朱砂悬液高(1 000 mg/kg)、中(300 mg/kg)、低(100 mg/kg)剂量组和阴性对照组(0.5%CMC-Na)4组,妊娠第6天至第15天每天1次,连续灌胃10 d,于妊娠第20天处死。取孕大鼠各主要脏器(心、肝、脾、肺、肾、脑、子宫)和全血、胎盘、胎仔、尿液,每组10只,用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS);取不同时间的粪便,用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES),分别测定汞含量,分析汞在各脏器的分布情况以及排泄途径。结果:在测定的各脏器中,心、肝、肾和子宫组织内汞含量均高于阴性对照组,并随剂量的增加而增加;脑、肺、胎盘和胎仔组织内各剂量组的汞含量与阴性对照组比较,差异无统计学意义。给药第2天粪便中就出现大量汞,日排泄量折合成HgS约占摄入量的38.2%～50.4%;而给药第10天日排泄量上升到72.2%～86.6%;停药第4天粪便中HgS排泄量急剧下降。尿液中排泄的汞极其微量,并有剂量依赖性,停药第4天排泄量仍在较高水平。结论:①汞在不同脏器内蓄积与给药剂量有关,其中以肾、肺、子宫、肝内汞含量较高;②血脑屏障和胎盘屏障在阻止汞进入脑内和胎儿内上可能具有一定作用,但应谨慎评价;③口服朱砂主要经肠道排泄,而组织内蓄积汞的排泄可能经肾脏排泄。     

不同时段修复雄鼠坐骨海绵体肌对改善勃起功能障碍的影响

目的 探讨坐骨海绵体肌损伤性勃起功能障碍的修复治疗效果.方法 选用生殖期雄性Wistar大鼠150只,采用抓阄法随机分为修复组1(n=30)、修复组2(n=30)、修复组3(n =30)、修复组4(n ==30)、未修复组(n=10)、假手术组(n=10)及正常组(n=10).修复组1切断双侧坐骨海绵体肌后立即将其缝...     

妊娠特用固体饮料对鼠胚胎的优化作用

以自制的“妊娠特用固体饮料”喂养妊娠后wistar鼠,每只每天1～1.5ml。于孕鼠分娩后与对照组比较新生鼠的身长、体重,同时取肝、肾等器官常规制片,显微镜观察。结果表明,喂养组新生鼠身长、体重均较对照组有显著增加(Ρ<0.05)。喂养组无1只死亡,对照组死亡5只,两组的死亡率有显著差异(Ρ<0.05)。两组各器官发育均正常,但喂养组的组织分化较好。