AG490对喉癌细胞STAT3信号传导通路的抑制作用

目的 探讨JAK激酶抑制剂AG490对人喉鳞癌细胞株Hep-2的增殖及凋亡的影响,揭示AG490对STAT3信号传导通路的抑制作用,探讨AG490在喉癌治疗中的意义.方法 应用AG490作用于Hep-2细胞,MTT法检测细胞增殖状态,流式细胞术检测细胞周期与凋亡,固定化蛋白质印迹法(Western b1ot)检测STAT3和p-STAT3蛋白的表达.结果 AG490能有效抑制体外培养的Hep-2细胞的增殖,该抑制作用具有时间与浓度依赖性的特点.AG490诱导喉癌细胞凋亡,且随作用时间延长,凋亡率增加.AG490能抑制STAT3和p-STAT3蛋白在Hep-2细胞的表达.结论 AG490可以下调Hep-2细胞中STAT3和p-STAT3蛋白的表达,抑制喉癌细胞增殖,促进喉癌细胞凋亡.     

莪术二酮对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡和侵袭作用的研究

目的:研究莪术二酮对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡和侵袭的作用,为开发具有抗肿瘤活性的中药提供依据.方法:将Hela细胞分为对照组,莪术二酮低剂量组(12.5μmol/L)、莪术二酮中剂量组(25μmol/L)和莪术二酮高剂量组(50μmol/L)等四组.不同剂量的莪术二酮作用于Hela细胞12～48 h后,检测肿瘤细...     

青果多酚对人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究青果多酚对体外培养的人宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡的影响。方法：利用超声波提取青果多酚,分光光度法检测其含量,采用MTT法、免疫细胞化学法、流式细胞术检测Hela细胞增殖抑制率与凋亡情况。结果：青果多酚对Hela细胞的增殖有明显抑制作用,并存在时间和剂量依赖性;青果多酚可通过激活caspase-3促进细胞的凋亡。结论：青果多酚对Hela细胞有抑制增殖和促进凋亡的作用。     

DHA对宫颈癌细胞株凋亡、侵袭和转移的影响

目的探讨多不饱和脂肪酸DHA对宫颈癌细胞（HeLa、Siha）凋亡、迁移侵袭的影响。方法HeLa、Siha细胞,分为空白对照 组、不同浓度DHA组,观察不同药物浓度作用于宫颈癌细胞后的形态学改变,Hoechst 33258染色检测48 h后细胞核凋亡情况; MTT法检测DHA作用于宫颈癌细胞24、48、72 h后的细胞凋亡情况;流式细胞仪检测不同浓度DHA作用于宫颈癌细胞48 h后 的凋亡率;细胞划痕实验和Transwell 迁移实验检测不同浓度DHA对宫颈癌细胞体外迁移能力的影响;Western Blotting检测 DHA刺激细胞48 h 后凋亡相关蛋白（Bax、Bcl-2、cleaved-caspase3）及肿瘤转移侵袭相关蛋白MMP-9、VEGF表达情况。结果 倒置显微镜下及经Hoechst33258染色后,随着DHA浓度增加,宫颈癌细胞形态改变越明显,凋亡小体增多;MTT结果显示DHA 呈时间-浓度依赖性抑制宫颈癌细胞增殖,促进其凋亡;细胞划痕实验和transwell迁移实验提示DHA作用于细胞后,浓度越高, 对细胞的体外迁移能力的抑制作用越强;Western Blotting 显示DHA作用于细胞48 h 后,cleaved-caspase3、Bax蛋白表达增加 （P<0.05）,而Bcl-2、MMP-9、VEGF 蛋白表达下降（P<0.05）,Bcl-2/Bax 比值下降（P<0.05）。结论DHA 可通过调控 cleaved-caspase3、Bax及Bcl-2表达,促进宫颈癌细胞凋亡的作用并能通过降低MMP-9、VEGF的表达抑制宫颈癌细胞的迁移和 侵袭。     

白藜芦醇对人宫颈癌Hela细胞凋亡、增殖影响的实验研究

目的研究白藜芦醇对宫颈癌Hela细胞体外生长的影响,并初步探讨其作用机制。方法用不同浓度的白藜芦醇作用于人宫颈癌Hela细胞,通过MTT法来检测白藜芦醇对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响;TdT酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL试剂盒）检测白藜芦醇对Hela细胞凋亡的影响。结果不同浓度白藜芦醇浓度对Hela细胞均有抑制作用。白藜芦醇在25～100μmol/L范围内呈时间和剂量依赖。在100μmol/L已达到作用浓度平台期。50μmol/L及以上浓度的白藜芦醇对Hela细胞有明显的凋亡阳性反应,随时间延长凋亡率增加。结论达到一定浓度的白藜芦醇就能够对人宫颈癌Hela细胞产生明显的抑制增殖作用。白藜芦醇在对Hela细胞抑制其增殖的同时诱导其凋亡。     

Janus激酶抑制剂AG490对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭转移的影响

目的 研究Janus激酶抑制剂AG490对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭转移能力的影响,探讨JAK2/STAT3信号通路在肝癌侵袭调控中的作用。方法实验分为对照组、实验组（5、10 μmol/L AG490处理的SMMC-7721细胞）。采用Transwell小室检测肝癌细胞的侵袭能力,RT-PCR检测MMP-2 m...     

干扰STAT3的siRNA真核表达载体对人卵巢癌的侵袭转移性的相关研究

目的：通过构建针对STAT3的siRNA真核表达载体,研究STAT3对卵巢癌SKOV3细胞侵袭转移能力的影响。方法：使用软件Primer Premier 5设计siRNA靶序列,在合成修饰靶序列之后,构建siRNA-STAT3-脂质体复合物,并转染卵巢癌SKOV3细胞;通过Western blot检测细胞STAT3的表达,通过Transwell小室及对卵巢癌SKOV3细胞侵袭相关蛋白MMP-2的检测,探讨siRNA-STAT3对卵巢癌细胞侵袭力的影响。结果：构建干扰STAT3的siRNA真核表达载体转染SKOV3细胞可显著抑制细胞中STAT3的蛋白表达;与SKOV3细胞对照组和SKOV3细胞阴性对照组相比,SKOV3细胞siRNA-STAT3组中细胞侵袭转移能力明显下降。结论：构建干扰STAT3的siRNA真核表达载体可有效抑制STAT3的表达及卵巢癌SKOV3细胞的侵袭转移能力。     

白藜芦醇对人宫颈癌SiHa细胞增殖与凋亡作用的影响

目的：探讨白藜芦醇（Res）诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的作用及可能的机制．方法：MTT法检测不同浓度（0,12．5,25,50,100,200,300,400和600μmol／L）Res处理24,48和72h对SiHa细胞的抑制率;流式细胞仪采用AnnexinV和PI双染检测细胞的凋亡率．荧光显微镜观测SiHa细胞的形态学改变．分光光度法检测Caspase-3活性．结果：Res在一定浓度范围内,以浓度和时间依赖的方式抑制宫颈癌SiHa细胞的生长（P〈0．05）．以0,200和300μmol／L Res处理细胞48h,SiHa细胞早期凋亡率分别为1．1％,8．9％和11．1％,晚期凋亡比例为3．1％,15．0％和14．0％．荧光显微镜下细胞呈现典型的凋亡性改变．200μmol／L Res处理8h后,Caspase-3活性增加,24h达高峰,后逐渐下降,经50,100和200μmol／L Res处理24h后,Caspase-3活性与对照组相比,分别增加了1．92倍,2．51倍和4．53倍（P〈0．05）．结论：白藜芦醇通过诱导Caspase-3活性增加以时间依赖和浓度依赖的方式抑制宫颈癌SiHa细胞增殖,诱导细胞凋亡．     

红花多糖对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡及侵袭作用机制研究

目的:研究红花多糖对人宫颈癌细胞(hela)体外增殖、凋亡及侵袭蛋白表达的影响.方法:将宫颈癌细胞分为4组(3组为实验组,1组为对照组),3个实验组红花多糖质量浓度分别为0.16、0.32、0.64 g/L,连续干预培养48 h,进行形态学观察,并采用MTT法检测各诱导组与对照组第12、24、36、48 h的OD值,绘制各组细胞生长曲线,并计算不同浓度红花多糖对hela的增殖抑制率.采用Annexin V-FITC/PI双标法检测48 h各组细胞凋亡率,采用RT-PCR检测各组中VEGF,Notch1,Notch2的表达,westening blotting检测各组MMP-9的表达,进行各组对比研究.结果:4组间的细胞增殖曲线、增殖抑制率有明显差异(P<0.05),明确红花多糖能抑制人宫颈癌细胞的生长、増殖,呈现时间和浓度效应关系.流式细胞仪分析结果提示红花多糖促进人宫颈癌细胞凋亡.VEGF、Notch1、Notch2 mRNA在3组实验组的表达量较对照组低(P<0.05),MMP-9蛋白在3组实验组的表达较对照组低(P<0.05).结论:红花多糖能促进宫颈癌细胞凋亡,可抑制宫颈癌细胞增殖,其作用机制可能与VEGF、Notch信号通路有关,抑制癌细胞转移机制与MMP-9蛋白表达减少有关.     

血根碱对宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力影响机制研究

目的 探讨血根碱对宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力的影响机制.方法 分别用MTT法、流式细胞仪、细胞划痕实验、Transwell小室检测血根碱作用后的宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力.Western blot检测经血根碱作用后宫颈癌细胞中E-Cadherin、PTEN、β-catenin、MMP2的蛋白表达水平.结果 0.6、0.8μmol/L血根碱对宫颈癌细胞增殖具有抑制作用.0.8 μmol/L血根碱作用48 h后宫颈癌细胞HeLa和Siha凋亡率高达(45.68±2.26)％和(31.89±3.80)％.0.8μmol/L血根碱作用3 h后宫颈癌细胞HeLa和Siha黏附率仅有(67.45士2.13)％和(73.59±2.61)％.0.8μmol/L血根碱作用16 h后宫颈癌细胞HeLa和Siha侵袭数目仅有(39.64±1.98)个和(43.87±2.83)个.经血根碱作用后的宫颈癌细胞中E-Cadherin和PTEN的表达量增加,β-catenin和MMP2的表达量减弱.结论 血根碱对宫颈癌细胞具有抑制增殖及促凋亡作用,其机制可能与黏附蛋白E-Cadherin、β-eatenin和PTEN、MMP2有关.     

MicroRNA-182在宫颈癌中的表达及对肿瘤细胞增殖、侵袭及迁移的影响

探讨MicroRNA（miR-182）在宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变组织（CIN）和正常宫颈组织中的表达,及其对宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法应用实时聚合酶链反应（real-time PCR）技术方法检测78例宫颈癌组织、30 例CIN组织及20例正常宫颈组织中miR-182的表达,并分析其与宫颈癌临床病理特征之间的关系。在宫颈癌细胞株CaSki中,应用细胞转染技术上调miR-182的表达,应用Cell CountingKit-8（CCK-8）试剂盒检测细胞增殖能力的变化,Transwell 实验检测细胞侵袭迁移能力的变化。结果RealtimePCR结果显示miR-182 在宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变（CIN）组织与正常宫颈组织比较,差异有统计学意义﹙p <0.05﹚;两两比较,miR-182 在宫颈癌组织和CIN组织中的表达较正常宫颈组织降低﹙ p<0.05﹚,miR-182 在宫颈癌组织与CIN组织比较,差异无统计学意义（p >0.05）,宫颈癌组织中miR-182 的表达与分化程度、淋巴转移密切相关,而与年龄、肿瘤直径、浸润深度及临床分期等无关（p >0.05）。在人宫颈癌上皮细胞（CaSki）中,上调miR-182表达能够抑制肿瘤细胞的侵袭和迁移﹙p <0.05﹚,但不改变细胞的增殖能力。结论miR-182在宫颈癌组织中低表达,miR-182的表达水平与分化程度和淋巴结转移有关,上调miR-182的表达能够抑制宫颈癌CaSki细胞的迁移及侵袭。     

miRNA221对宫颈癌细胞株Siha侵袭转移行为的影响

目的:探讨干扰miRNA221对宫颈癌细胞侵袭转移行为的影响.方法:实验分为Siha,Siha-模拟物即(siha-mimic),阴性对照Siha-nc(mimic),Siha-抑制剂即(Siha-inhibitor),阴性对照Siha-nc(inhibitor)五组.采用qPCR、Western blotting、划痕实验和Transwell小室实验对miRNA221在宫颈癌siha细胞株侵袭转移中的作用.结果:在siha-mimic组,miRNA221表达明显高于Siha组和Siha-nc(mimic)组,E-钙粘素(E-cadherin,E-cad)表达水平明显降低,N-钙粘素(N-cadherin,N-cad)及波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平明显上调;在Siha-inhibitor组,miRNA221表达明显低于Siha组和Siha-nv(inhibitor)组,E-cad蛋白表达水平明显升高,N-cad和Vimentin表达水平显著下调.结论:干扰miRNA221抑制宫颈癌细胞侵袭转移.     

桦木酸通过调控JAK2/STAT3信号通路对骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的:探讨桦木酸(BA)通过介导Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子(STAT3)信号通路对多发性骨髓瘤(MM)细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法:骨髓瘤U266细胞给予不同浓度(0、20、40、60、80、100、120和160μmol·L-1)BA作为不同浓度BA组,同时设置空白组(不加入BA且无细...     

调控miR-181d-5p表达对宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响

目的 探究miR-181d-5p对宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭影响及对细胞硫酰化限速酶(sulfation rate-limiting enzyme, PAPSS2)/蛋白聚糖(proteoglycans, VCAN)信号通路的影响。方法 细胞学实验：人宫颈癌细胞Hela细胞分为对照组、NC组和miR-181d-5p组,MTT、流式细胞技术及Transwell实验分别检测各组细胞增殖、凋亡和侵袭能力,Western blot检测各组PAPSS2和VCAN蛋白表达水平。裸鼠荷瘤实验：20只SPF级裸鼠随机分为对照组(n=10)和miR-181d-5p组(n=10),分别接种野生型细胞和转染miR-181d-5p细胞,模型建立后每3 d测量1次小鼠肿瘤体积,连续测量21 d,于实验终点测量肿瘤质量和体积。结果 细胞学实验表明：与对照组和NC组比较,miR-181d-5p组细胞增殖能力显著降低、细胞凋亡比例显著增加、细胞侵袭能力显著降低、PAPSS2,VCAN表达水平显著下调(P<0.05),NC组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。裸鼠荷瘤实验表明：miR-181d-5p组...     

半乳糖凝集素3在宫颈癌转移中的作用

目的检测宫颈癌样本中半乳糖凝集素3（Gal-3）的表达水平,研究其在宫颈癌转移中的作用。方法选取2009年6月1日至2010年6月1日于广州市第一人民医院妇产科诊治的宫颈癌患者为研究对象。癌组织活体取材,结合病理切片及临床诊断,将患者分为正常宫颈组织组（n=8）,原位癌（CINⅢ）组（n=12）,鳞癌I期组（n=10）,鳞癌Ⅱ期组（n=9）。所取标本分别为正常对照宫颈组织和不同临床分期的宫颈癌组织标本。免疫印迹法检测Gal-3蛋白的表达情况。体外培养宫颈癌细胞株HeLa及SiHa细胞,转染siRNA（50nmol/L）抑制Gal-3表达后,采用MTT法、Transwell侵袭小室法观察其对宫颈癌细胞株增殖和侵袭的影响。结果随着宫颈癌临床分期升高,Gal-3蛋白表达水平随之增加,与正常宫颈组织组比较,CIN、鳞癌I期（S（I））、鳞癌Ⅱ期（S（Ⅱ））组Gal-3蛋白分别增加了（35.2±8.4）%、（97.6±18.2）%和（179.4±20.7）%,差异均有统计学意义（P〈0.05）。在培养的宫颈癌HeLa、SiHa细胞株上,与转染对照siRNA比较,转染Gal-3siRNA48h后可明显抑制Gal-3蛋白表达,抑制率分别为（81.6±4.7）%、（87.5±6.8）%。转染特异性siRNA48h后,以普通培养液（含10%胎牛血清）继续培养细胞24h,与对照组（转染非特异性siRNA组）比较,HeLa及SiHa细胞增殖率分别降低（42.4±6.4）%、（50.6±7.2）%,差异均有统计学意义（P〈0.01）,侵袭细胞数目分别降低（48.6±5.8）%、（52.4±8.3）%,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论 Gal-3蛋白表达与宫颈癌临床分期密切相关,Gal-3可能通过促宫颈癌增殖和侵袭能力,促进宫颈癌的恶性进展。     

氧化苦参碱对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的:探讨氧化苦参碱(OMT)对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响,并阐明其作用机制.方法:SiHa细胞分为对照组、低剂量OMT组、中剂量OMT组和高剂量OMT组,分别以含二甲基亚砜(DMSO)及含0.4、0.8和1.6 g·L-1 OMT的RPMI 1640培养基培养.培养24 h后,Hoechst33258染色法观...     

TrkB在结肠癌中的表达及其对LoVo细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 探讨tropomysin相关激酶B(TrkB)在结肠癌中的表达及其对LoVo细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法 采用western blot方法检测TrkB在30例结肠癌和相应癌旁组织中的表达水平.分别采用MTT、流式和Transwell小室研究转染TrkB-siRNA对结肠癌细胞LoVo增殖、凋亡和侵袭的作用.结果 TrkB在结肠癌组织中表达上调,特异性siRNA干扰TrkB表达后,转染细胞凋亡率增加,但细胞增殖和侵袭受到抑制.结论 结肠癌中TrkB过表达可能通过抑制细胞凋亡,促进细胞增殖和侵袭,从而对结肠癌的发生发展具有重要作用.     

INI1调节胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭能力的机制研究

目的：探讨INI1在胃癌进展中的作用及其调节胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭能力的相关机制。 方法：以荧光定量RT-PCR和Western-blot技术检测胃癌、癌旁组织的INI1表达情况并进行比较;将INI1-GFP真核表达质粒转染人胃癌SGC7901细胞株,MTT法检测肿瘤细胞增殖活性、流式细胞术检测细胞周期,以TUNEL法和流式细胞术检测细胞凋亡情况,细胞划伤试验和侵袭小室试验检测细胞侵袭转移能力。同时,用荧光定量RT-PCR和Western-blot技术检测转染前后细胞株的INI1水平,检测增殖相关基因P16、P21、Cyclin D1、Cyclin A水平,检测凋亡相关基因P53、Bax、Bcl2、Caspase3水平和侵袭相关基因ICAM1、MMP2、MMP9、TIMP1水平。 结果：胃癌组织的INI1表达水平低于癌旁组织。INI1-GFP真核表达质粒转染人胃癌SGC7901细胞株后细胞的增殖和侵袭能力受到抑制、凋亡能力及G0/G1期细胞增高。转染后INI1和P16、P21、P53、Bax、TIMP1表达增高,Cyclin D1、Cyclin A、Bcl2、ICAM1、MMP2、MMP9表达下调,而Caspase3表达无明显变化。 结论：INI1在胃癌癌变、进展中发挥重要作用,这种作用是通过调节胃癌细胞的增殖、凋亡、侵袭能力而实现的。