肺癌相关抗原的血清学筛选与鉴定

目的:筛选和鉴定肺癌肿瘤相关抗原,为肺癌早期诊断提供血清学标志物,并为研制肺癌疫苗提供候选抗原.方法:5份异体肺癌患者血清采用重组cDNA表达文库的血清学分析(SEREX)技术对肺癌cDNA表达文库筛选;对阳性克隆插入片段进行测序、生物信息学分析.结果:①筛选出70个阳性克隆,插入片段大小为300～2 800 bp.②测序:70个阳性克隆代表63个不同的基因.③生物信息学分析:1个基因与肺癌的发生、发展关系密切;34个基因报道与细胞的分化、代谢及信号转导等有关系,与其他肿瘤的发生、发展有关;26个基因的生理功能未见文献报道;2个插入片段未发现有同源基因,推测可能为新发现的基因.结论:使用SEREX技术成功鉴定了一组肺癌相关的肿瘤抗原.     

11种分枝杆菌抗原用于肺结核和肺癌血清学鉴别诊断的效果比较

目的：对１１种分枝杆菌抗原制备物用于肺结核和肺癌血清学鉴别诊断的效果进行评估。方法：采用ＥＬＩＳＡ技术分别测定１０４例肺结核患者，１０４例肺癌患者和５２例正常人血清中抗１１种分枝杆菌抗原制备物的抗体水平。结果：淋巴分枝杆菌菌体超声抗原Ｂ６ｂ检测肺结核血清抗体阳性率为８２％，显著高于抗ＰＰＤ抗体的阳性率６２％（Ｐ＜０．０５）。Ｂ６ｂ抗原检测肺癌患者血清抗体的阳性率为１．９％，远低于抗ＰＰＤ抗体的阳性检出率１５．４％（Ｐ＜０．０１）。结论：分枝杆菌抗原制备物的菌种来源、细胞培养方法和抗原制备方法对其用于血清学鉴别诊断的灵敏度和特异性，都有重要影响。其中，Ｂ６ｂ抗原用于肺结核和肺癌的鉴别诊断效果最好     

结核分枝杆菌蛋白Rv0315的克隆表达及其抗原性研究

目的评价结核分枝杆菌重组蛋白Rv0315在结核病血清学诊断中的价值。方法采用常规分子克隆方法获得重组Rv0315蛋白,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测84份确诊结核病人血清和48份健康人血清中相应的抗结核抗体水平,并与结核分泌蛋白ESAT-6的检测结果进行比较。结果成功构建了重组蛋白Rv0315,其在E.coli BL21plysS（DE3）中主要以可溶性形式表达,分子量（30.3kDa）与预期相符,ELISA血清学活性评估显示其特异性和敏感性分别为94.0%（45/48）和35.7%（30/84）。结论重组蛋白Rv0315有望成为新的结核病血清学诊断候选抗原。     

鼻咽癌相关肿瘤抗原基因的筛选及鉴定

目的 通过筛选鼻咽癌肿瘤抗原，为鼻咽癌提供一个早期诊断指标；同时为进一步研究鼻咽癌的免疫治疗莫定基础。方法 应用鼻咽癌细胞株异种免疫血清，采用血清学筛选重组cDNA表达文库（SEREX）技术对鼻咽癌cDNA表达文库进行筛选，对阳性克隆测序并进行生物信息学分析。Western Blot检测鼻咽癌及正常人血清中阳性克隆的抗体。结果 共筛选出18个阳性克隆，其中包括MAGE基因、CREM基因、β2-微球蛋白以及核糖体蛋白等已知基因或表达序列标签（EST），另外有6个基因或EST在GenBank数据库中没有同源性，可能是新基因或EST。选取NPC-14、NPC-15、NPC-18克隆进行鼻咽癌患者及正常人群血清的检测，结果显示鼻咽癌患者的阳性率明显高于正常人群。结论 所获得的未知基因产物有可能成为早期诊断鼻咽癌的血清学标志物。     

11种分枝杆菌抗原用于肺结核和肺癌血清学鉴别诊断的效果 …

目的：对１１种分枝杆菌抗的制备物用于肺结核和肺癌血清学鉴别诊断的效果进行评估。方法：采用ＥＬＩＳＡ技术分别测定１０４例肺结核患者，１０４肺癌患者和５２例正常人血清中抗１１种分枝杆菌抗原制备物的抗体水平。结果：淋巴分枝杆菌菌体超声抗原Ｂ６ｂ检测肺结核血清抗体阳性率为８２％，显著高于抗ＰＰＤ抗体的阳性率６２％。Ｂ６ｂ抗原检测肺癌血清抗体的阳性率为１．９％，远低于抗ＰＰＤ抗体的阳性检出率１５．４％。结论     

细粒棘球蚴重组抗原mMDH用于囊型包虫病血清学诊断的初步研究

目的探讨细粒棘球蚴重组抗原（rEgmMDH）对囊型包虫病的血清学诊断价值。方法将已构建的原核表达菌株mMDH/pET-28a/BL21■lysS,用IPTG诱导表达,经亲和层析纯化获得高纯度rEgmMDH,以rEgmMDH为抗原,应用ELISA和Western-blotting方法对40例手术确诊的囊型包虫病病人血清进行了回顾性检测与分析。结果 ELISA和Western-blotting方法检测囊型包虫病病人血清阳性率为92.5%（37/40）;Western-blotting方法显示囊型包虫病病人血清可特异性识别重组抗原,泡球蚴病人汇集血清不能识别重组抗原。结论 rEgmMDH具有较好的抗原性,可作为囊型包虫病血清学检测的候选诊断抗原。     

Cpn0585蛋白的免疫活性及血清学诊断初步评价

目的克隆肺炎嗜衣原体包涵体膜蛋白Cpn0585基因,初步探讨其在血清学诊断中的应用价值。方法构建pGEX-6p-2／Cpn0585重组质粒,诱导表达并纯化重组蛋白,免疫BALB／c小鼠,间接酶联免疫附试验（ELISA）检测小鼠血清抗体滴度,以重组蛋白作为ELBA包被抗原检测血清中CpnIgG抗体和检测36份Cpn-／Ct＋IsG阳性参考血清。结果高效表达和纯化出一相对分子质量约为95kDa的重组蛋白,蛋白质印迹法证明其能与人抗CpnIgG抗体发生反应;在被免疫的BALB／c小鼠体内,特异性IgG抗体的滴度为1：12800;检测104例临床血清标本中的IgG抗体,与以色列SavyonDiagnostics公司SeroCPTMIgGELISA诊断试剂盒的检测结果进行比较,符合率为98．3％。结论表达的Cpn0585重组蛋白具有良好的免疫活性,在Cpn的血清学诊断中具有较高的应用价值。     

两种新的HCC抗原的特异性

目的：检测两种新的人肝细胞癌(HCC)抗原(编号为HCC-1-8a和HCC-3-13)对HCC的特异性。方法：应用重组克隆表达抗原的血清学技术(SEREX),用异体HCC血清和非HCC血清检测两种新的HCC抗原的特异性。结果：相应的抗体主要见于HCC患者,检测10例HCC血清,阳性反应例数分别为8例及9例;胃癌5例,阳性反应分别为0例及1例;正常人28例各有阳性2例;乳癌10例,无阳性例数。结论：两种新的HCC抗原对HCC有高度特异性,可考虑作为HCC血清学诊断的指标之一。     

结核分支杆菌ESAT6蛋白的表达、纯化及抗原性研究

目的：获得重组ESAT6蛋白,研究其免疫学特性,评价其在结核病血清学诊断中的价值。方法：分别用生理盐水和卡介苗免疫小鼠8周后,以结核分支杆菌接种小鼠。应用基因工程技术表达、纯化ESAT6蛋白,分别以结核分支杆菌PPD或纯化的rESAT6蛋白为抗原,通过ELISA方法及结核病一步法检测小鼠或人血清中抗结核抗体。结果：重组质粒pET24b-ESAT6在大肠杆菌BL2（DE3）细胞内以包涵体形式存在,分子量约6kDa,每100ml培养菌可获得约18mg纯化的重组蛋白。生理盐水和卡介苗免疫小鼠血后血清中抗ESAT6抗体无区别。结论分支杆菌攻击后,两组小鼠血清中抗ESAT6抗体均明显升高,但只有卡介苗组小鼠抗体水平超过平均值＋2标准误。以33例正常人血清的OD值＋2S为正常界限值,33例正常人和32例结核病人血清一步法和PDD、rESAT6 ELISA检测抗结核抗体的特异性和敏感性分别为：一步法87.9%(29/33),65.6%(21/32),PPD93.9%(31/33),62.5%(20/32);rESAT6 97%(32/33),18.2%(4/32)。结论：pET24b-ESAT6大肠杆菌工程菌能以包涵形式高效表达重组ESAT6蛋白,卡介苗免疫对血清中ESAT6抗体无影响,结核病人血清中抗ESAT6抗体阳性率低,rESAT6纯化蛋白可作为结核病血清学诊断的混合抗原之一。     

衰老标记蛋白-30--一种新的肝细胞癌相关抗原

目的：寻找人肝细胞癌（ＨＣＣ）特异抗原。方法：应用重组克隆表达抗原的血清学鉴定技术（ＳＥＲＥＸ）,用病人自身血清从广西肝细胞癌ＣＤＮＡ文库中选出编码ＨＣＣ肿瘤抗原的基因克隆,用肝癌患者及其他人血清检验ＨＣＣ肿瘤抗原原肝癌的特异性,测定抗原ＤＮＡ序列并一基因库核对寻找其同源结构。结果：其中一种ＨＣＣ肿瘤抗原与衰老标记蛋白－２０（ＳＭＰ－３０）是同源结构。相应抗体主要只见于ＨＣＣ病人,在２０例其它５种     

联合检测血清NSE、CEA和CYFRA21—1对肺癌的诊断价值

目的：了解血清中血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）和细胞角蛋白19片段（CEFRA21-1）三种肿瘤标志物在肺癌中的临床诊断价值。方法：采用化学发光免疫分析（CLIA）技术测定73例肺癌患者、67例肺良性疾病患者〈70例健康人血清中的NSE、CEh和CYFRA21—1水平。结果：肺癌组的三种肿瘤标志物水平均高于肺良性疾病组和正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;NSE、CEA和CYFRA21—1的敏感性分别为47：09％．50．7％和56．2％;特异性分别为90．5％、88．3％和86．9％;三者联合检测的敏感性和特异性分别为89．1％和94．2％。结论：血清NSE、CEA和CYFRA21—1是诊断肺癌的重要指标,3项联合检测可以互补,有助于临床对肺癌的早期诊断、疗效检测及预后判断。     

联合检测血清肿瘤标志物在肺癌诊断中的应用价值分析

目的：探究联合检测血清肿瘤标志物在肺癌诊断中的应用价值。方法：选取40例肺癌患者、30例肺部感染患者以及20例健康者,作为肺癌组、对照组及健康组,采用化学发光法测定CEA水平,ELISA法测定CYFRA21-1、NSE、CA125等水平,分析三组人群肿瘤标志物的水平。结果：肺癌患者血清肿瘤标志物的水平明显高于对照组及健康组（P〈0.05）;联合检测对肺癌诊断的准确度和灵敏度明显高于单项检测（P〈0.05）,但特异度与单项检测比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：联合检测血清肿瘤标志物对肺癌诊断的准确度和灵敏度均优于单项检测,可作为肺癌早期诊断的重要依据。     

比较5种血清肿瘤标志物联合检测对肺癌诊断和治疗的临床效果

目的:探讨分析5种血清肿瘤标志物联合检测对肺癌诊断和治疗的临床效果。方法:通过酶联免疫法对50例肺癌患者和50例肺良性疾病患者的血清肿瘤标志物进行检测,主要检测的项目为血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段(Cy-fra21-1)、糖类癌抗原199(CA199)、糖类抗原125(CAl25)和癌胚抗原(CEA),进而探讨分析5种血清肿瘤标志物联合检测对肺癌诊断和治疗的临床效果。结果:肺癌患者5种血清肿瘤标志物的水平均明显高于肺良性疾病患者的检测水平,比较差异均有统计学意义(P0.05)。其中NSE在小细胞肺癌中高表达,CAl25在腺癌中高表达,不同肺癌类型患者的CA199、CAl25、NSE三种血清肿瘤标志物的阳性率比较差异均有统计学意义(P0.05),而CEA和Cy-fra21-1两种血清肿瘤标志物的阳性率比较差异无统计学意义(P0.05),不同病理类型的肺癌患者的CA123和Cy-fra21-1两种检测水平比较差异均有统计学意义(P0.05),而其余三种肿瘤标志物检测水平比较差异均无统计学意义(P0.05)。而5种肿瘤标志物联合检测的灵敏度、准确度和特异度分别为92.0%、89.0%、88.0%,均明显优于单个肿瘤标志物的检测,比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:血清肿瘤标志物的联合检测可显著提高肺癌患者的灵敏度和准确度,对肺癌患者的诊断和治疗有显著的临床意义。     

肿瘤标志物联合检测肺癌的临床价值

目的：评价肿瘤标志物多项联合检测肺癌的临床意义。方法：采用放射免疫法检测91例肺癌、58例肺良性疾病（如肺炎等）患者和48例正常健康人群血清中CEA,NSE,CYFRA21—1,CA125的水平。结果：肺癌组CEA,NSE,CYFRA21—1,CA125肿瘤标志物水平及阳性率均高于肺良性疾病组和正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。4项肿瘤标记物测定水平和灵敏度与病理类型有关,其中血CEA以腺癌最高,血NSE以小细胞肺癌最高,血CYFRA21—1以鳞癌最高,CAl25以非小细胞肺癌最高。联合检测血清CEA,NSE,CA125及CYFRA21—1水平,对诊断肺癌的敏感性为90．8％,特异度为86．5％。结论：肿瘤标志物的联合检测可提高肿瘤诊断的敏感性和特异性。     

血清多种肿瘤标志物联合检测对肺癌的诊断价值

目的探讨7种血清肿瘤标志物单项和联合检测对肺癌诊断的临床价值。方法检测234例肺癌患者、84例肺良性病变患者和28名健康人血清癌胚抗原（CEA）、糖类抗原125（CA125）、细胞角蛋白19片段（CYFRA211）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、恶性肿瘤生长因子（TSGF）、鳞癌相关抗原（SCC）、组织多肽特异性抗原（TPS）。结果 （1）肺癌患者的7种血清肿瘤标志物水平均明显高于肺良性病变组（均P〈0.05）和健康对照组（均P〈0.01）。（2）肺癌组7种血清肿瘤标志物阳性率均明显高于肺良性病变组（均P〈0.05）。（3）肿瘤标志物测定水平与病理类型有关,血清NSE水平升高以小细胞肺癌为主,CYFRA211以鳞癌为主,而CAl25则以腺癌为主。（4）不同组合的联合检测较单项检测均能提高敏感度和准确度,但特异度略有降低。在联合检测效能的评价中,7种肿瘤标志物组合为最佳检测指标。结论肿瘤标志物联合检测可提高肺癌诊断的敏感性和准确性。     

血清CEA、CYFRA21-1、NSE、CA724联合检测对肺癌的诊断价值

目的：探讨癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、神经特异性烯醇化酶（NSE）、癌抗原72-4（CA724）联合检测对肺癌的诊断价值.方法：采用电化学发光法检测56例肺癌（腺癌组24例,鳞癌组20例,小细胞肺癌组12例）、34例肺部良性疾病（良性疾病组）、30名健康人（对照组）血清CEA、CYFRA21-1、NSE、CA724水平并进行分析.结果：5组血清CEA、CYFRA21-1、NSE和CA724水平差异均有统计学意义（P＜0.01）.腺癌组CEA、鳞癌组CYFRA21-1和小细胞肺癌组NSE均明显高于相应其他4组（P＜0.01）.腺癌组CA724均明显高于对照组和良性疾病组（P＜0.01）.腺癌组CEA、鳞癌组CYFRA21-1、小细胞肺癌组NSE和腺癌组CA724阳性率均高于对照组和良性疾病组（P ＜0.05 ～P＜0.01）.4种标志物单项检测时,特异性为88.9％～ 94.4％,敏感性为28.6％ ～41.1％.联合检测后,特异性略下降（83.3％）,但敏感性明显提高（87.5％）.结论：血清CEA、CYFRA21-1、NSE、CA724水平和肺癌的病理分型有一定的相关性,其联合检测可提高对肺癌的阳性检出率.     

肿瘤标志物联合检测对肺癌的诊断价值

目的:探讨血清肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和细胞角质蛋白19片段(CYFRA21-1)在肺癌诊断中的意义。方法:分别应用化学发光和电化学发光技术检测肺癌患者(50例)、肺良性疾病患者(38例)及健康对照组(42例)的血清CEA、CA125、NSE和CYFRA21-1的表达水平,并进行比较。结果:肺癌组血清CEA、CA125、NSE、CYFRA21-1表达水平明显高于肺良性疾病组和健康对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);肺癌组血清4种标志物阳性率高于良性疾病组和健康对照组,在肺腺癌中CEA和CA125阳性率均为55.6%,小细胞肺癌NSE阳性率为87.5%,肺鳞癌CYFRA21-1阳性率为80.0%;4种肿瘤标志物联合检测与单个项目比较,敏感度和准确度都有显著提高。结论:联合检测血清肿瘤标志物CEA、CA125、NSE和CYFRA21-1可提高对肺癌诊断的敏感度和准确度,且可鉴别肺癌的病理类型。     

肺肿瘤三项标志物检测在肺癌诊断中的临床意义

目的观察与探讨肺肿瘤三项标志物检测在肺癌诊断中的临床意义。方法选择2D12年4-12月来我院治疗的肺癌患者60例．用电化学发光法对患者血清中的角蛋白质19片段（CYFRA21—1）,血清癌胚抗原（CEA）以及血清胸苷激酶1（TK1）的含量进行检测,并将其与肺部良性疾病患者50例及健康者50例进行比较。缩果肺癌患者体内三种类型墩清肿瘸标志物的检测水平中CEA及TK1含量较肺部良性疾病组与健康对照组高,且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论血清肿瘤标志物CYFRA21—1、CEA及TK1的联合检测能够使肺癌诊断的阳性率显著提高．联合检测可以明显提高肺癌的早期诊断率。     

P27及Ki67在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的:探讨P27及Ki67在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化法(S-P法)检测72例NSCLC组织与20例正常肺组织中P27及Ki67的表达,并结合临床资料进行统计学分析。结果:P27蛋白在NSCLC中的阳性表达率为40.27%,显著低于正常肺组织的90%(P<0.05);Ki67蛋白在NSCLC中的阳性表达率为70.83%,显著高于正常肺组织的5%(P<0.05)。P27与Ki67表达与肿瘤的分化程度、TNM分期及淋巴结转移与否相关(P<0.05),但与性别、年龄、组织学类型不相关(P>0.05)。NSCLC中P27与Ki67表达呈负相关(P<0.05)。结论:P27的低表达和Ki67的高表达可能在NSCLC发生发展中起重要作用,对其进行联合检测可能对NSCLC的早期诊断及判断预后有一定价值。