补体终末阶段同源限制因子的分离纯化

为了研究补体终末阶段同源限制的作用机制，本文首先分析了正常人红细胞膜不同分子量蛋白组份对反应性溶血的抑制作用。五次重复试验结果均发现１８ＫＤａ６５ＫＤａ的组份具有抑制活性，提示：红细胞膜上同时存在两种具有同源限制功能的蛋白分子。将红细胞膜蛋白抽提物经ＤＥＡＥ－纤维素ＤＥ－３２．Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ６Ｂ层析纯化分离到一个活性峰。进一步用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ制备电泳纯化出ｍｐ１８具有较高的抑制活性。本文还     

生物材料静态血清接触对总补体溶血活性(CH50)影响的实验研究

机体在抗原的作用下产生一系列免疫反应,血清中总补体含量的变化可反映补体活化及免疫反应程度.本文参照有关标准方法,选择八种生物材料,与血清进行体外培养,在不同时间内测定总补体溶血活性(CH50),探讨生物材料免疫反应.试验结果表明,八种材料接触血清测得CH50值均低于对照组,但每种材料降低程度有所不同,CA和PETF降低最明显,CH50定值均＜40单位@ml-1,而对照组为80单位@ml-1.PP和BC材料的CH50值与对照组结果比基本一致.PETF和PES两种材料接触不同时间(30min,90min,120min)随时间的延长逐渐降低,而PETF降低较明显.该研究初步表明CA和PETF材料具有活化补体,降低CH50值,提高免疫反应的作用.     

微量免疫法制备小鼠抗人补体C9抗血清

目的　建立一种简便有效的免疫方法 ,制备抗人补体C9抗血清。方法　将鉴定好纯度的免疫原稀释至恰当浓度 ,以硝酸纤维素膜吸附抗原 ,将之埋入小鼠背部皮下 ,并再次免疫 1～ 2次。间接ELISA法鉴定抗血清效价 ,免疫印迹实验鉴定抗血清的免疫反应特异性。结果　间接酶联免疫吸附实验滴定抗血清的效价约为 1× 10 -5,抗血清对正常人血清成分进行的免疫杂交实验得到特异性的C9蛋白条带。结论　以硝酸纤维素膜吸附抗原的微量免疫方案获得特异性和效价均佳的免疫效果。     

单相扩散法检测补体旁路溶血活性

AP-CH_(50)多管检测法比较繁锁,尽管近年来人们已将多管法改成了单管法,但AP-CH_(50)的检测仍不能作为临床常规项目开展,为了进一步简化操作,我们建立了单相扩散法,收到了满意的效果,现报告如下:     

一种新型的定量测定特异性体液免疫功能的溶血空斑试验

根据补体经典途径激活时，可通过“旁立损伤”机制使邻近正常细胞溶解破坏的原理，该种溶血斑试验不仅可以用来定量检测分泌ＩｇＭ的抗体形成细胞，也可直接用来定量检测分泌ＩｇＧ的抗体形成细胞。与传统溶血空斑试验相比，其最大的优点是可用来检测机体对任何一种可溶性抗原的特异性体液免疫应答能力，从而扩展了应用范围。     

微量溶血分光光度法测定抗体形成细胞

溶血分光光度测定（ＱＨＳ）法是常用的抗体形成细胞功能测定法，它具有灵敏、稳定、客观等优点。ＱＨＳ全量法在试管内进行，抗体产生细胞、补体和ＳＲＢＣ（绵羊红细胞）用量各为１．０ｍｌ，总体积３．０ｍｌ，用量较大及检测不便是全量ＱＨＳ法的不足之处。我室将全量...     

精氨酸修饰壳聚糖基因纳米粒子对血液补体活性和溶血作用的影响

目的 考察精氨酸修饰壳聚糖基因纳米粒子（ACGN）对血液补体活性和溶血的影响.方法 将精氨酸接枝到壳聚糖上制备精氨酸修饰的壳聚糖,用共沉降的方法制备精氨酸修饰壳聚糖基因纳米粒子,用光子相关光谱检测精氨酸修饰壳聚糖基因纳米粒子的粒径,用凝胶电泳阻滞实验对精氨酸修饰壳聚糖与DNA的相互作用进行研究,并考察壳聚糖基因纳米粒子（CGN）和ACGN在体内外对血液补体活性和溶血作用的影响.结果 精氨酸修饰壳聚糖在电荷比为2∶1时能有效地完全包覆DNA,并形成粒径大约为120～180nm的纳米粒子,ACGN和CGN在体内外对红细胞没有明显的破坏作用,在体外对补体系统均没有明显的影响作用,但在体内引起补体的轻微升高.结论 ACGN在体内外没有引起明显的补体激活和溶血作用,有望成为一种新型的、安全的非病毒基因载体.     

人补体C1—抑制物基因在COS—7细胞中的表达

利用全长人Ｃ１－ＩＮＨ ｃＤＮＡ片段构成建功可在ＣＯＳ－７细胞中瞬间表达重组人Ｃ１－ＩＮＨ的表达质粒ｐＳＶＬＣ１。通过ＤＥＡＥ－Ｅｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ－７细胞，经体外标记、免疫沉淀和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹后发现，转染细胞可分泌一条分子量约１１０ｋＤ的免疫活性蛋白带。     

尿微量白蛋白ELISA测定法及其临床应用

定期监测糖尿病患者的尿微量白蛋白,对尚处于可逆性阶段糖尿病性肾病的早期诊断具有重要价值。尿白蛋白也是高血压病引起血管损伤及肾血管早期病变的敏感指标。我们自制高效价抗人Alb血清、抗(人Alb)IgG-HRP酶标记结合物和抗(人Alb)IgG包被微孔滴定板,建立了一种灵敏、简便的尿微量白蛋白酶联免疫测定法,测定范围为5～500ng/ml;灵敏度0.76ng;批内CV％ 6.4％;批间CV％ 16.4％。24小时尿白蛋白排泌量,正常人为8.86(SD 9.23)mg/24h(n=80);糖尿病患者为40.4(SD 40.4)mg/24h(n=16);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期高血压病患者分别为15.17(SD 14.42)mg/24h、21.46(SD 24.34)mg/24h和24.6(SD 18.9)mg/24h。     

五种叶轮血泵体外溶血试验的研究

血泵的标准溶血指数反映了它对血液的破坏程度，是衡量血泵性能的一个重要指标，选用I型离心，II型轴流，磁耦合，I型和II型螺旋混流5种叶轮血泵，用新鲜抗凝羊血500ml，平均压力100mmHg，流量5L／min,在转泵0，0．5，1．0…4．0h后，测量血浆游离血红蛋白含量和血泵出口处的表面温度，计算标准溶血指数。结果表明，5种血泵的转速，温度变化与溶血指数是没有直接关系的，由结构形成的运动流场是对血液造成破坏的主要原因。本文对5种血泵的温度变化，转速和溶血之间的关系做一探讨。     

三种叶片式血泵的体外溶血试验研究

血泵对血液的破坏程度是衡量血泵性能的一个重要指标。本文针对三种叶片式血泵即离心泵、轴流泵、混流泵的溶血试验做一比较分析。在试验中 ,选用了我们研制的Ⅰ型离心血泵、磁耦合型轴流血泵、螺旋混流泵。在一封闭管道中 ,注入新鲜抗凝羊血 5 0 0ml,水浴温度 37℃ ,血泵辅助流量为 5L min ,平均压力10 0mmHg,分别在泵转后 0、 0 5、 1 0、 1 5、… 4 0h测量血浆中游离血红蛋白 (FHB)和纤维蛋白原 (FIB)含量 ,最后计算出三个血泵整个过程中的标准溶血指数NIH。结果表明三种血泵对血液都有一定的破坏 ,它们的NIH值分别为 0 112 5± 0 0 15 7g 10 0L、 0 0 931± 0 0 137g 10 0L和 0 0 5 6 1± 0 0 0 5 8g 10 0L ,由此可得出混流泵对血液的破坏最小。     

自制轴流血泵溶血实验

在XZ-Ⅱ型轴流血泵基础上,通过计算机流体辅助设计,改进研制出XZ-ⅡA型轴流血泵,之前对其结构、材料、产热和动力学输出性能等做过论述[1],但是其体外溶血性能以及在体适应性都没有检测。这里通过体外模拟循环实验,初步检测XZ-ⅡA型轴流血泵体外溶血性能,通过动物在体实验衡量其在体适应性。试验测得XZ-ⅡA型轴流血泵体外实验NIH值为(0.0473±0.0165)mg/dL。四例实验动物16h在体辅助无机械故障,血泵辅助后实验动物血液FHb开始上升,平均最高达到(32.06±4.64)mg/dL。XZ-ⅡA型轴流血泵实验结果与国外同类型血泵比较不是很理想,应用于临床前仍需做大量改进。     

山莨菪碱对大鼠烫伤后溶血的抑制作用

山莨菪碱１、５、１０ｍｇ／ｋｇ；ｉｐ／４ｈ能明显降低３０％总体表面积三度烫伤大鼠血浆游离血红蛋白浓度，减轻红细胞脆性和红细胞异形率的增加，并能降低血清丙二醛的含量，保护超氧化物歧化酶的活性，抑制磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）的激活，结果显示：６５４－２减轻大鼠烫伤后的溶血程度与其抗氧自由基和降低内源性ＰＬＡ２的活性有关。     

基于溶血性能的离心式旋转血泵设计

溶血性能是衡量血泵性能的一个重要指标.基于平均剪切应力模型,通过减少红细胞流经叶轮的时间和降低它在此过程中所受平均剪切应力的方法,对离心血泵进行设计,进而改善溶血性能.采用商用流体仿真软件Fluent,对血泵内的三维不可压湍流流场进行数值模拟,得到红细胞在血泵内的流动迹线和流动参数;应用溶血估算公式,分析不同流量下血泵的溶血性能,计算得到溶血估算值在0.006-0.015之间,有较好的溶血性能,满足血泵对溶血性能的要求.     

磁力驱动轴流血泵溶血实验和动物实验

目的对研制开发的一种新型的磁力外驱动轴流式心室辅助血泵的血液相容性能进行测试。方法利用特制血袋作为模拟循环管道,羊血作为循环介质,采用标准溶血指数衡量体外溶血实验性能。通过3只山羊12h在体实验衡量其在体适应性。结果实验测得轴流血泵体外实验标准溶血指数(NIH)为(0.158±0.043)mg/L。3例实验动物12h在体辅助无机械故障,血泵辅助后实验动物血液中游离血红蛋白(FHb)开始上升,最高达到164.8mg/L。结论磁力外驱动轴流血泵实验结果比较理想,值得进一步改进。     

离心血泵内部流场数字模拟及溶血分析

血泵是心脏辅助循环装置的核心部件之一,其运行过程中所产生的血栓和溶血超出安全范围将会引发多种并发症,严重者甚至危及病人生命,因此血栓和溶血问题是衡量血泵性能的重要指标也是血泵的重要研究课题。研究表明,溶血主要是由血泵内叶轮的机械运动及血液的复杂流动的高剪切力引起。因此溶血多出现在血液与固壁接触面上及复杂流动的流体问。本次研究的目的是要探索用数值模拟的方法分析离心血泵内部的流场及溶血情况,在研究中通过与上海某医院合作实验采集一种叶片式离心血泵运行过程中的实验数据,再对该叶片式离心血泵内部流场进行数值模拟,通过对比血泵实际运行情况与数值计算结果对其内部血栓和溶血问题进行系统的分析研究,最终数值模拟分析的情况与该血泵在实际运行中的血栓和溶血情况基本相符。通过本次研究探索用数值模拟的方法对血泵的血栓和溶血现象进行分析,特别是对溶血现象进行一定程度的定量分析,此分析结果及分析方法可为血泵优化及临床应用做方法指导之用。     

两种不同运动方式血乳酸浓度对血管内溶血的影响

目的 观察运动中血乳酸浓度的变化对血管内溶血的影响。方法 受试者为大学体育系学生10名健康男子,通过功率自行车,进行渐增负荷和稳定负荷两种不同运动。最大负荷运动从1kp的强度开始,每1分钟增加0．25kp,直到力竭为止。稳定负荷运动为最大运动负荷时的最大心率的50％（50％HRmax),进行30分钟的稳定负荷运动。在运动前、运动结束后即刻及运动后恢复期30分钟,由肘静脉采血。血液中指标有血乳酸、Ht和Hp。结果 最大负荷运动结束后血乳酸浓度明显高于运动前水平,运动结束1小时后血乳酸浓度恢复到运动前水平,可是在稳定负荷运动结束后却没有变化。此外,最大负荷运动结束后即刻Hp浓度下降,但没有显著性差异。结论 虽运动中血乳酸引起血pH下降,但并未引起溶血发生。     

叶片倒角对FDA标准血泵流场和溶血预测的影响

目的采用计算流体力学(computational fluid dynamics, CFD)方法研究FDA标准离心血泵叶片倒角对流场和溶血的影响。方法针对FDA标准离心泵,模拟3个工况下水力学性能、流场形态、溶血指数等血泵关键性能,并进一步比较叶片结构有、无倒角时对前述模拟结果造成的影响。结果血泵叶轮倒角对血泵压头(无倒角特征与有倒角特征压头计算值最大百分比差异为57.38%)、流场等均有影响,从而导致溶血预测值也有显著差别(两者最大误差超过1个数量级)。结论对叶轮进行有倒角处理有助于优化血泵的性能。研究结果对更好使用CFD辅助血泵的血液相容性设计具有重要意义。     

磁液悬浮离心血泵体外溶血的实验及耐久性实验

通过建立模拟循环管路系统来研究磁液悬浮离心血泵的溶血性能及机械稳定性。建立体外模拟循环管路系统,体外溶血实验中以新鲜羊血为循环介质,调节前负荷和后负荷分别为15、100 mmHg,血泵转速设定为2 900 rpm,测定血浆游离血红蛋白含量（FHb）和红细胞压积（Hct）,计算血泵标准溶血指数（NIH）;耐久性试验其他各项设定同体外溶血实验,循环介质改为甘油水溶液。在体外溶血实验中,测得磁液悬浮离心血泵NIH值为（0.0038±0.0008）g/100L;耐久性实验中血泵连续正常运转90 d,期间无卡壳、停泵等现象,电压、电流、转速稳定。该血泵溶血性能处于较高水平,机械性能稳定可靠,满足进一步进行动物实验的要求。