海洛因依赖对大鼠胰岛β细胞表达胰岛淀粉样多肽和葡萄糖转运蛋白2的影响

目的 探讨海洛因依赖对胰岛β细胞表达胰岛淀粉样多肽(IAPP)和葡萄糖转运蛋白2(Glut2)的影响及引起表达变化的可能机制. 方法 正常SD大鼠66只,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组.皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于第10、17、24、31、38天取胰尾组织.应用免疫组织化学SABC法及图像分析、形态计量法进行研究. 结果 1.免疫组织化学法显示,胰岛β细胞IAPP的免疫反应阳性产物定位于胞质.Glut2的免疫染色见于胞膜.2.与正常组和盐水组比较,海洛因依赖组大鼠胰岛IAPP阳性细胞免疫反应明显增强;24d以后细胞面数密度加大,与正常及盐水对照组比较有显著性差异;图像分析显示,海洛因依赖组IAPP阳性细胞的平均灰度值降低(P<0.05),以38d时间点最低.3.海洛因依赖组大鼠Glut2阳性细胞免疫反应也明显增强;图像分析显示海洛因依赖期间大鼠胰岛Glut2阳性细胞的平均灰度值下降,与正常及盐水对照组比较差异有显著性(P<0.05),也以38d时间点最低. 结论 在海洛因依赖期间,胰岛β细胞通过增加细胞数以及合成增多的方式,使IAPP和Glut2的表达增多,并参与了大鼠海洛因依赖期间机体代谢以及糖代谢的调节过程.     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间垂体三叶因子3的变化

目的 通过观察大鼠实验性胃溃疡形成和愈合过程中垂体和血清三叶因子3（TFF3）的改变,探讨垂体TFF3在实验性胃溃疡愈合中的作用。方法 以免疫组织化学染色检测溃疡组（42只）、盐水组（21只）和正常组（6只）大鼠垂体TFF3蛋白的表达;RT-PCR检测TFF3mRNA的转录;酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清TFF3含量变化,原位杂交技术显示TFF3mRNA的定位。结果 大鼠实验性胃溃疡自愈期间TFF3免疫反应阳性物质存在于腺垂体部分细胞和神经垂体,而TFF3 mRNA仅存在于腺垂体。与对照组相比,溃疡第1~6天,腺垂体内阳性信号平均吸光度值明显增大,6d达高峰,10d略有下降,14d复增高,23d下降,但仍高于对照组（P ＜0.01或P ＜0.05）;神经垂体TFF3平均吸光度值在2~23d高水平波动,14d达高峰（P ＜0.01或P ＜0.05）。RT-PCR显示,各组垂体均检测到TFF3 mRNA转录,溃疡组TFF3/GAPDH吸光度比值在溃疡2~23d均高于对照组（P ＜0.01或P ＜0.05）;血清TFF3含量在溃疡组明显高于正常组（P ＜0.01）。结论 垂体TFF3在溃疡期间高表达,可能通过释放入血发挥促进溃疡愈合的作用。     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛胃泌素和生长抑素细胞的免疫组织化学研究

目的　探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间 ,胰岛胃泌素免疫反应细胞 (gastrin ,G)和生长抑素细胞(somatostatin ,SSorD)的变化。　方法　免疫组织化学ABC技术。　结果　大部分G细胞免疫反应深浅不一 ;溃疡术后 4、10d ,胰岛G细胞面数密度增高 ,与正常或盐水组相比P <0 0 5。D细胞面数密度于 4d增加 ,P <0 0 5。　结论　成年大鼠胰岛细胞呈胃泌素免疫反应阳性 ;胰岛G细胞和D细胞可能以内分泌或旁分泌调节的途径间接或直接参与大鼠实验性胃溃疡修复的过程。     

大鼠实验性胃溃疡期间海马肠三叶因子的变化

目的:探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF)在海马的表达及其与实验性胃溃疡愈合的关系。方法:以免疫组织化学染色和RT-PCR法分别检测溃疡组(n=42)和正常组(n=6)大鼠海马ITF蛋白的表达和mRNA的转录及变化。结果:ITF免疫反应阳性物质主要位于海马的锥体细胞和颗粒细胞的胞浆内,海马内部分神经纤维也显示阳性。与正常组比较,溃疡1 d海马ITF平均灰度值略降低(P>0.05),溃疡后2、4、6 d逐渐降低,6 d达低谷(P<0.01),10、14、23 d均维持在较低水平(P<0.05)。RT-PCR显示海马ITF mRNA转录水平在溃疡1 d开始增高(P>0.05),溃疡后6 d最高,10、14 d略有下降,但仍高于正常组(P<0.01或P<0.05),23 d和1 d水平接近。结论:实验性胃溃疡大鼠海马可能通过ITF的高表达参与实验性溃疡愈合的神经内分泌调节。     

大鼠海洛因依赖期间胰岛B细胞形态学和功能变化的研究

目的探讨胰岛B细胞在海洛因依赖期间的可能作用.方法应用免疫组织化学SABC法、图像分析法和放射免疫测定法,观察大鼠海洛因依赖期间胰岛B细胞免疫组织化学反应、光密度及血清胰岛素水平的变化.结果与正常组和盐水组比较,海洛因依赖组大鼠B细胞免疫反应明显增强,染色加深,且以24d时最为显著.图像分析结果表明,海洛因依赖组B细胞的平均光密度较正常和盐水组显著降低（P＜0.05）,以24 d时间组最低.放射免疫测定结果显示,海洛因依赖组大鼠血清胰岛素（Ins）浓度始终高于正常组和盐水组（P＜0.05）.结论胰岛B细胞的变化表明,在海洛因依赖期间,大鼠胰岛B细胞胰岛素的合成增多,分泌增强,参与了机体在海洛因依赖期间的调节过程.     

海洛因依赖对大鼠胰岛A细胞胰高血糖素表达和功能的影响

目的探讨海洛因依赖对大鼠胰岛A细胞胰高血糖素免疫反应（Glu-IR）的影响.方法应用免疫组织化学SABC单染法、形态计量及放射免疫测定法,研究大鼠海洛因依赖期间,A细胞面数密度（NA）及血浆胰高血糖素水平的变化.结果与正常组及盐水组比较,A细胞免疫组织化学显色在海洛因依赖组均增强,阳性细胞增多;A细胞的NA在海洛因依赖第38 d组明显增加,P〈0.01;血浆胰高血糖素水平在海洛因依赖第10 d、24 d、38d组均高于正常组和盐水组,P〈0.01.结论A细胞通过增加细胞数和增强合成分泌胰高血糖素的功能,参与海洛因依赖期间大鼠糖代谢的调节过程.     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛A细胞的结构和功能变化

目的　探讨胰岛Ａ细胞参与溃疡自愈调节的可能途径。　方法　应用形态计量、放射免疫测定及透射电镜方法，研究大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛Ａ细胞的面数密度、超微结构及血清胰高血糖素的变化。　结果　与正常组及盐水组比较，Ａ细胞面数密度于溃疡后６ｄ、１０ｄ 明显增加（Ｐ＜ ０．０１）。溃疡后１４ｄ 开始呈减小趋势，２８ｄ 基本恢复正常。Ａ细胞超微结构变化在溃疡后第６～１４ｄ 较明显，主要表现为：（１）细胞核增大，异染色质减少，核周隙扩张；（２）部分Ａ 细胞粗面内质网增多，有的呈板层状排列，有的扩张成囊泡；（３）部分Ａ 细胞内分泌颗粒增多，大小不等，密度不一。血浆胰高血糖素水平从溃疡后１４ｄ 到２１ｄ 呈增高趋势（Ｐ＜ ０．０１），２８ｄ 时接近正常。　结论　胰岛Ａ细胞的形态和功能变化表明，它通过增加其细胞数目及增强其合成与分泌胰高血糖素的功能，积极参与了胃溃疡自愈的调节过程。     

大鼠视上核、室旁核肠三叶因子表达与实验性胃溃疡的关系

目的探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间肠三叶因子(ITF)在下丘脑视上核(SON)、室旁核(PVN)的表达及其与实验性胃溃疡愈合的关系。方法以免疫组织化学染色、酶联免疫吸附实验分别检测溃疡组(42只)和正常组(6只)大鼠下丘脑和血清及ITF的表达及含量变化,RT-PCR检测ITFmRNA的转录情况。结果 ITF免疫反应阳性物质主要位于视上核和室旁核大细胞部。溃疡1d视上核和室旁核ITF积分吸光度略增高,2d、4d和6d逐渐升高,6d达高峰(P0.01),10～23d均维持在较高水平(P0.05)。血清ITF的变化与免疫组织化学法结果相似;溃疡组ITF/3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)吸光度比值在溃疡2～23d均高于正常组(P0.01,或P0.05)。结论胃溃疡自愈期间可能通过下丘脑和血清ITF的高表达参与溃疡愈合的调节。     

胰岛淀粉样多肽、葡萄糖转运蛋白2在海洛因戒断、脱毒和复吸大鼠胰岛β细胞中的表达

目的探讨在大鼠海洛因戒断、脱毒治疗和复吸期间,胰岛淀粉样多肽(IAPP)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)在胰岛β细胞内表达的变化。方法正常雄性SD大鼠32只,随机分为实验组(n=24)和正常对照组(n=8),实验组又分为海洛因依赖戒断组、美沙酮脱毒治疗组和海洛因复吸组。各组大鼠取胰腺组织,采用免疫组织化学SABC法及图像分析方法进行研究。结果海洛因戒断时IAPP和GLUT2阳性细胞免疫染色较正常对照组变深,平均灰度值均低于正常组(P0.05),IAPP面数密度增大(P0.05);美沙酮脱毒期间,IAPP和GLUT2免疫阳性细胞染色变浅,平均灰度值较戒断时升高,与正常组差异无统计学意义,IAPP面数密度于正常组比较差异不显著(P0.05);海洛因复吸期间,IAPP和GLUT2阳性细胞免疫染色又加深,平均灰度值降低(P0.05),IAPP面数密度再次增大(P0.05)。结论在海洛因戒断和复吸期间,表达于大鼠胰岛β细胞的IAPP和GLUT2合成增加,美沙酮脱毒期间合成减少,两者变化规律一致,提示在海洛因戒断,脱毒和复吸过程中,两者的合成同步,可能参与调节海洛因戒断,美沙酮脱毒治疗及复吸大鼠机体能量代谢过程,与调节大鼠摄食、体重及保护胰岛细胞功能有关。     

大鼠实验性胃溃疡自愈过程中胃窦粘膜5－HT免疫反应细胞变化的定量研究

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠１０２只，分为实验性胃溃疡组、盐水对照组和正常对照组。在溃疡４、６、１０、１４、２１及２８ｄ分批处死取材，用免疫组织化学ＰＡＰ法显示胃窦粘膜的５－ＨＴ细胞。在光镜下观察胃溃疡自愈过程中，５－ＨＴ阳性细胞的形态和数量变化。结果表明，溃疡组５－ＨＴ细胞数密度在溃疡４～２８ｄ时明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；盐水组在第４ｄ时亦出现增高趋势（Ｐ＜０．０ｌ），但第６ｄ后基本恢复正常。与盐水组比较，溃疡组５－ＨＴ细胞的数密度在各时间点明显高于盐水组（Ｐ＜０．０ｌ）。因而提示：胃窦粘膜５－ＨＴ细胞参于了大鼠实验性胃溃疡自愈过程中的调节作用。     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间垂体远侧部ACTH细胞的免疫电镜研究

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，分为溃疡组和对照组。用免疫电镜包埋后免疫金间接法村记ＡＣＴＨ细胞，研究胃溃疡自愈过程中垂体远侧部ＡＣＴＨ细胞的超微结构变化，结果显示，在实验性胃溃疡第４ｄ，一些ＡＣＴＨ细胞含少量很小的分泌颗粒，沿质膜分布，有较多的ＡＣＴＨ细胞胞质出现许多空泡。溃疡第６ｄ，ＡＣＴＨ细胞的高尔基复合体发达，其扁囊膨大部含中等电子密度的内容物，其内可见金颗粒标记。溃疡６－１０ｄ，较多的ＡＣＴ     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛素原mRNA原位杂交的形态与计量研究

为了探讨胰岛素水平与消化道溃疡的关系，将成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠制成胃溃疡动物模型，用地高辛标记的ｐｒｏ－ＩｎｓｃＲＮＡ探针原位杂交方法，观察大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛Ｂ细胞内ｐｒｏ－ＩｎｓｍＲＮＡ的变化，并对其杂交信号进行定量分析。结果显示，在胃溃疡模型术后第６和第１０ｄ，胰岛Ｂ细胞内的杂交信号增强，表明在溃疡愈合早期ｐｒｏ－ＩｎｓｍＲＮＡ的表达量增加。结合本室以往的研究结果，初步讨论了胰岛素参与胃溃疡自愈的调节过程及其意义     

海洛因依赖对大鼠胃窦胃泌素、生长抑素阳性细胞的影响

目的 探讨海洛因依赖对大鼠胃窦胃泌素(Gas)、生长抑素(SS)阳性细胞的影响,以及Gas、SS在海洛因依赖时的可能作用.方法 应用免疫组织化学SABC法和图像分析技术.结果 1.与正常组和盐水对照组相比,海洛因依赖大鼠胃窦内的Gas阳性细胞数量增加(P＜0.05),染色强度随依赖时间逐渐增强,平均灰度值明显低于空白及盐水对照组(P＜0.05),且随依赖时间的延长呈下降的趋势,38d时最低.2.海洛因依赖组大鼠胃窦SS阳性细胞染色强度增强,细胞数量显著高于空白和盐水对照组(P＜0.05),平均灰度值低于空白及盐水对照组(P＜0.05).结论 大鼠胃窦Gas、SS阳性细胞可能通过增加细胞数量和增加Gas、SS的合成来参与大鼠海洛因依赖的调节过程.     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胃窦粘膜G、D细胞变化的免疫组织化学研究

本实验用成年雄性Wistar大鼠53只,分为溃疡组、盐水对照组和正常对照组。在手术后4、10,14、21及28天分批取材。用Sternberger PAP法进行免疫组织化学染色,分别显示胃窦粘膜胃泌素细胞(G细胞)和生长抑素细胞(D细胞),观察大鼠实验性胃溃疡自愈期间,G和D细胞的形态变化,并进行了细胞计数和统计学分析。本文结果表示,溃疡组G细胞数量在术后10至14天明显增多(P<0.01),21、28天趋于减少,但仍高于对照组。有些G细胞排列成群,密集呈明显带状。正常时G细胞分布在幽门腺的中、下1/3处,而溃疡组可见有些G细胞分布在腺的上部。D细胞数量仅在术后10天增多(P<0.01),与正常对照组相比差异显著。用免疫组织化学双重染色法,可见G细胞和D细胞之间存在着形态上的接触。溃疡自愈期间,G/D细胞比值未见明显改变。本实验结果提示,胃窦粘膜局部G、D细胞的变化和大鼠实验性胃溃疡自愈修复之间有着一定的联系。     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间肾上腺髓质神经肽Y、5羟色胺及嗜铬颗粒素A免疫阳性细胞的变化

目的:探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间肾上腺髓质神经肽Y(NPY)、5羟色胺(5-HT)及嗜铬颗粒素A(CgA)免疫阳性细胞的变化。方法:免疫组织化学方法显示阳性细胞并用病理图像分析系统软件做面密度分析。结果:溃疡组NPY阳性细胞面密度于术后4d升高,术后6、10d降低;溃疡组5-HT阳性细胞面密度于术后4d增高,6d达高峰;溃疡组CgA阳性细胞面密度于术后4、6、10、14d低于正常组。结论:肾上腺髓质NPY、5-HT及CgA阳性细胞可能直接或间接参与大鼠实验性胃溃疡修复的调节。