硝普钠对人精子获能及顶体反应的影响

目的:探讨一氧化氮(NO)对人精子获能及顶体反应(AR)的影响。方法:在48例健康生育男性的精子悬液中加入不同浓度的NO供体硝普钠(SNP),于37℃孵育1h获能,用孕酮诱导AR15、30、45、60min,采用磷酸苯二钠法分别检测精子获能前后及AR各时间点的精子悬液上清中酸性磷酸酶(ACP),同时用计算机辅助精液分析系统(CASA)分析精子运动参数,观察NO对精子获能及AR的作用。结果:NO浓度在50、100nmol/L时精子悬液中ACP活性增高,精子运动参数明显增强,150、200nmol/L时ACP活性及精子运动参数变化不大,250、300nmol/L时精子悬液中ACP活性和精子运动参数明显降低。结论:NO对精子获能和AR具有双重性,在低浓度下有促进精子获能、AR和精子运动参数增强的作用,而在高浓度下对精子获能、AR和精子运动参数有抑制作用。精子ACP检测对精子群体获能和AR状态的评价是种较为客观、可靠的方法。     

精浆一氧化氮及过氧化物歧化酶与精液参数间的关系及冷冻对其影响

男性不育与精液氧化应激密切相关[1].体外实验表明活性氧代谢失衡会产生氧化应激损伤,其诱导的精子损伤集中在细胞膜尤其是顶体结构,使精子细胞受损,导致精子运动功能下降.一氧化氮(NO)作为重要的活性氧分子,参与精子生成和成熟过程,影响精子的质量和功能,在精子获能、顶体反应、精卵结合中均起重要作用[2].     

钙离子与精子功能

钙离子是生物体内重要的阳离子,虽然钙离子在精子中的调控作用还不清楚,但近些年来有关钙离子在精子中的功能不断有新的报道,如钙离子参与精子的发生,是精子运动的调控者,精子获能的参与者,还是顶体反应的第二信使。现对钙离子与精子功能间的关系进行综述。     

精子获能的研究进展

精卵融合之前精子必须获能。获能曾被定义为精子活动亢进 ,但目前认为精子活动亢进可能为精子获能的一个方面或精子获能的结果 ,两者并不完全一致。目前 ,研究精子获能的方法主要有 :体外授精 ,顶体反应的诱导 ,金霉素荧光分析法和麦胚凝集素、植物血凝素荧光分析法。精子获能的体外研究主要集中于对诱导精子获能的物质和诱导后结果的分析 ,为进一步阐明精子获能的分子机制和从分子水平给予获能下一个准确定义打下了基础     

唾液酸在精子成熟、获能及精卵结合中作用研究进展

唾液酸是位于多种糖结合物末端的酸性九碳单糖,与多种生物学功能相关。精子上的唾液酸与精子功能成熟、获能及精卵识别有紧密联系:精子表面的唾液酸可使精子带负电荷而免于聚积,可掩盖精子上的某些抗原决定簇,从而增加精子在女性生殖道的存活能力;唾液酸的丢失是介导精子获能的一个重要因素;而在精卵识别中,位于蛋白聚合物末端的唾液酸能起到信号识别的作用。本文就唾液酸对精子的成熟、获能及精卵结合的影响做一综述。     

猪精子细胞中胰岛素诱导产生的一氧化氮自由基促进精子获能

近期,胰岛素被证实具有诱导猪精子获能的能力。在不同的哺乳动物中,精子获能被认为与一氧化氮信号通路相关;因此,本研究使用荧光激活细胞分选技术探究经胰岛素处理的猪精子中一氧化氮水平。在同一样本中,用金霉素染色、蛋白质酪氨酸磷酸化模式和顶体状态来评估精子获能。结果显示经胰岛素处理的精子内一氧化氮水平及三种评价精子获能的指标均有显著提高;相反,用一氧化氮合成酶抑制剂（N-硝基-L-精氨酸甲酯）或抗胰岛素受体β抗体预处理的精子中胰岛素相关的作用全被逆转。这些结果表明胰岛素具有增强猪精子细胞内一氧化氮浓聚的能力并且提示胰岛素可能通过一氧化氮促进精子获能。     

钙调素与精子功能

钙调素集中分布于精子头和尾部的多个区域；钙调素通过激活精子内的多种功能酶活性调节精子内的Ｃａ浓度、ＣＡＭＰ水平乃至精子的鞭毛运动，影响精子的获能与顶体反应；钙调素与在受精过程中起重要作用的Ａｃｔｉｎ、ＰＬＡ２等相互作用从而参与精卵融合的调节。     

钙调素与精子功能

钙调素集中分布于精子头和尾部的多个区域，钙调素通过激活精子的多种功能酶活性调节精子内的Ｃａ＾＋＋浓度，ＣＡＭＰ水平及至精子的鞭毛运动，影响精子的获能与顶体反应，钙调素与在受精过程中起重要作用的Ａｃｔｉｎ ＰＬＡ２等相互作用从而参与精卵融合的调节。     

精液凝固蛋白Semenogelin对精子运动抑制机制的研究进展

精液的液化和精子的获能是精子取得向前运动的关键,精液凝固蛋白Semenogelin(Sg)在这个过程中起着至关重要的作用,它们直接参与了精液凝胶的形成,并协同其他一些来源于男性生殖道的蛋白酶类和金属离子等,与精子细胞表面发生作用,参与调控精液液化和精子获能,最终使精子取得向前运动。本文综述了当前Sg对精子活动抑制机制的研究进展。     

人类精子的趋化性:接触前的精-卵通讯

已经通过各种实验证实了人类和鼠类精子在卵泡液中具有趋化性。业己发现在给定的精子群中只有一小部分 (平均 10 %左右 )具有趋化性应答 ,这一小部分精子构成了获能精子。精子的趋化性应答和获能状态都是短暂的 (寿命在 5 0min到 4h) ,它们在精子的一生中只出现一次。已有人提出 ,精子趋化性在哺乳动物 (至少在人类 )所起的作用是获能精子为使卵子受精的选择性募集现象。趋化性或获能精子的不断置换可延长其在女性生殖道内有效的时间。精子化学引诱剂至今尚未被鉴定出来 ,但它们可能是一些对热稳定的肽。尚不清楚精子趋化性在体内的定位 ,但许多可能的位置将在本文中讨论     

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路对精子功能的影响

在附睾中精子的成熟依赖于复杂的MAPK信号传导通路.MAPK信号通路家族还参与调节成熟精子的生成与凋亡、运动、获能和顶体反应等.本文就近年来丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对精子发生、凋亡和功能的影响作一综述.     

ZK 93426对小鼠和人精子获能的影响研究

目的探究小分子化合物ZK 93426对小鼠和人精子获能的影响及作用机制。方法采用蛋白质印迹技术(Western Blot)检测ZK 93426对小鼠精子和人精子获能相关的酪氨酸磷酸化的影响;运用Western Blot检测ZK 93426在正常以及缺少HCO3-,BSA,Ca~(2+)的获能缓冲液(modified Krebs-Ringer bicarbonate medium,HMB)中对获能的作用;选取精子特异钙离子通道CatSper抑制剂NNC 55-0396及PKA通路抑制剂H89进一步探索ZK 93426对于精子获能的机制。结果 ZK 93426对小鼠精子和人精子获能相关蛋白酪氨酸磷酸化均有促进作用,且在缺少Ca~(2+)的获能缓冲液中具有更明显的促进蛋白酪氨酸磷酸化作用。NNC 55-0396不会抑制ZK 93426对于获能相关的酪氨酸磷酸化的促进作用,而PKA抑制剂H89可抑制其作用。结论 ZK 93426对精子获能相关的蛋白酪氨酸磷酸化的促进作用不依赖CatSper通道,可能通过作用于PKA通路的上游发挥相应的作用。     

钙调蛋白抑制剂对小鼠精子获能影响的研究

目的:探讨钙调蛋白是否参与小鼠精子获能过程。方法:用50、100、200μmol/L浓度的钙调蛋白抑制剂W7和10、20、30μmol/L浓度的钙调蛋白抑制剂卡米达佐(CZ)分别与小鼠精子孵育2h,通过金霉素染色法计算出B型精子百分率。并用100μmol/L钙调蛋白抑制剂W7和10μmol/LCZ分别与小鼠精子孵育2h后,再加入5μmol/L孕酮诱发顶体反应,计算精子顶体反应百分率。结果:不同浓度的W7和CZ作用小鼠精子,B型精子百分率呈浓度依赖性方式下降,与对照组比较,均有显著性差异(P<0.05)。顶体反应率与对照组相比均有极显著差异(P<0.01)。结论:钙调蛋白参与小鼠精子获能,是精子获能过程中的关键蛋白。     

离子通道、磷酸化和哺乳动物精子获能

有性生殖动物需要精子和卵子之间进行精心协调的交流才能产生新的个体。精子获能是发生在女性生殖系统中的生殖细胞成熟的一个复杂现象，让精子能够和卵子联结并融合，是哺乳动物生育的必要条件。精子获能过程包括了质膜重组、离子渗透调节、胆固醇减少和许多蛋白质磷酸化状态的变化。研究精子离子通道的新工具能用更好的时空解析度将细胞内的离子变化和蛋白图像化，这些工具正在一步步阐明离子运输和磷酸化状态中的一系列调节是如何引起获能的。最近的证据表明有两条平行的通路调节引起获能的磷酸化发生。其中一条通路要求蛋白激酶A活化，另一条通路需要丝氨酸／苏氨酸磷酸酶失活。本文综述了精子获能所要求的离子运输参与和磷酸化信号处理。理解导致生育的分子机制，对于人们应对男性不育率升高、开发安全的以雄性配子为基础的避孕药、通过辅助生殖策略保持生物多样性都至关重要。     

孕酮趋化诱导人精子线粒体功能与ROS产生的关系

目的:使用计算机辅助精液分析仪和流式细胞分析仪,比较经上游法处理前后、孕酮诱导上游法处理前后精子线粒体相对活性以及活性氧自由基(ROS)阳性精子比例的变化,研究受精精子的线粒体功能特点。方法:收集正常人类精子(达到《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》第5版标准),利用"上游法"获能培养1 h,获得"获能前组"和"获能后组"精子。获能后组的精子继续在37℃和5%二氧化碳培养箱中,使用"孕酮诱导"垂直上游法再处理1 h,获得孕酮诱导超激活运动精子,分别称为"孕酮诱导组"和"对照组"。分别使用线粒体膜电位特异性染色剂JC-1和ROS染色剂DCF,标记人类精子线粒体膜电位,并计算线粒体相对活性指数,标记ROS阳性细胞比例。结果:正常人类精子经获能处理及继续垂直上游后,线粒体相对活性(高活性线粒体/低活性线粒体比值)显著上升。获能前组、获能后组、对照组和孕酮诱导组的线粒体活性分别为1.42、6.23、14.36和12.33;获能前组、获能后组、对照组和孕酮诱导组含有均衡线粒体(含有等量高膜电位和低膜电位的线粒体)比例分别为21.64%、4.27%、5.03%和8.57%,说明孕酮诱导能够在激活线粒体活性的同时,维持低活性线粒体的比例。ROS同时在精子的头、颈、尾部出现,获能前组、获能后组、对照组和孕酮诱导组ROS阳性细胞比例分别为2.89%、0.7%,4.25%和1.90%。上游1 h后的精子ROS阳性比例显著低于上游前精子。再经过1 h垂直上游后,"对照组"精子的ROS阳性比例大大增加;孕酮诱导组精子的ROS阳性比例显著低于"对照组"。结论:孕酮体外诱导上游精子,能够显著提高精子运动速度,使其呈现超激活运动状态,同时抑制精子的线粒体相对活性持续增高,保持线粒体活性均衡,降低ROS产量,可能有利于体外受精率和胚胎质量的提高。     

促发精子获能的分子机制

获能是精子在雌性生殖道中转运期间获得受精能力的过程。获能的分子机制相当复杂 ,目前尚未明确 ,但促发获能的起始分子事件已初步确定 ,包括精子细胞膜表面胆固醇外流、膜电位的改变、蛋白磷酸化等。本文综述了促发精子获能的分子机制及其研究前景。     

获能时间对人精子染色体制备的影响

获能时间对人精子染色体制备的影响蔡敏，鄢采芹，计垣关键词获能，精子染色体自以色列学者Ｒｕｄａｋ首创制备人精子染色体标本以来［１］，这项技术在国内外不断得到改进，日臻完善。有关人精子染色体制备方法国内、外有很多报道，而获能时间的长短对精子的授精、精子染...     

CRISP1在性腺中的定位和表达及其生殖调节功能的研究进展

富含半胱氨酸分泌蛋白1(CRISP1)已被证实参与了受精过程中的多个步骤,其在性腺中的定位及表达因物种不同而异。CRISP1有两种不同的形式,分别以不同的机制与精子结合进而参与了精子获能、精子-透明带结合及精卵融合的调控,还有研究发现CRISP1可能成为无精症诊断的标志物。目前CRISP1已成为避孕干预领域中具有前景的靶点。现就CRISP1在人及不同动物性腺中的定位、表达及其生殖调节功能的相关研究进展进行综述。     

一氧化氮对精子的调节作用及影响

一氧化氮 (NO)是一种不稳定的小分子有害气体 ,又是一种生物活性物质 ,参与了多种疾病的病理生理过程。NO在体内由L 精氨酸在一氧化氮合酶的作用下生成。它分布于睾丸、附睾及输精管等组织中 ,也分布于精子的顶体和尾部 ,对生精过程 ,精子活力、活率 ,受精能力以及精子脂质过氧化反应等具有重要的影响和双向调节作用。低浓度NO有益于增加精子活力、活率 ,降低精子脂质过氧化反应 ,提高精子的受精能力 ;高浓度NO对精子具有损伤作用 ,使精子活力、活率下降 ,脂质过氧化反应加强。本文简要介绍了NO在体内的产生机制 ,并着重概述了NO对精子的调节作用及影响。     

可溶性腺苷酸环化酶介导精子获能及其信号转导通路

研究证明,精子中存在一种可溶性腺苷酸环化酶(sAC),在获能中起重要作用。精子获能过程中存在着Ca2+、cAMP及sAC的调节系统。本文综述sAC的来源、结构及其作用机制,旨在探讨sAC在精子获能过程中的作用及其信号转导通路。