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相似文献
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1.
目的探讨微小RNA-135a(miR-135a)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、迁移和凋亡的影响及可能的机制。方法构建miR-135a过表达和空载病毒的Saos-2细胞分别为miR-135a UP组(实验组), Control组(对照组)。采用实时定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)检测c-Myc信使核糖核酸(mRNA)的改变, 采用蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测c-Myc蛋白及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)(PAM)通路蛋白的改变。细胞集落形成和细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞增殖能力, 划痕和Transwell实验分别检测迁移和侵袭能力, 细胞流式技术检测抗凋亡能力, 两组比较采用t检验。结果 miR-135a表达量实验组高于对照组(59.006±5.034比1.008±0.151, t=23.031, P<0.01), c-Myc与PAM通路蛋白表达量实验组低于对照组, 细胞增殖能力实验组低于对照组(CCK-8法:1.311±0.048比2.029±0.046, t=24.301, P<0.01...  相似文献   

2.
目的探讨血清微小RNA(miR)-26a、miR-21、miR-192在胃癌中的表达及相关性分析。方法选取2021年1月至2021年12月诊治的102例胃癌患者作为研究对象, 并设立其为观察组, 按照1∶2配对原则选取51例健康体检者设立为对照组。对比不同组别患者血清miR-26a、miR-21、miR-192, 并分析其在不同病理特征胃癌患者中的表达。采用Logistic回归模型构建miR-26a、miR-21、miR-192联合诊断胃癌模型, 采用ROC曲线模型分析miR-26a、miR-21、miR-192及三项联合诊断胃癌的曲线下面积(AUC)值、敏感度、特异度。结果观察组的miR-26a、miR-21、miR-192(20.43±5.96、36.74±12.47、0.15±0.04)均高于对照组(15.23±3.63、23.45±5.25、0.22±0.08, t=5.718、7.286、6.396, P<0.01)。不同TNM分期、肿瘤浸润深度的miR-26a、miR-21、miR-192比较(17.52±4.93、33.82±10.64、0.17±0.03比26.7...  相似文献   

3.
目的探讨LINC00942/微小RNA(miR)-5006/卷曲同源物1(FZD1)通路对肺癌细胞增殖和转移的影响。方法选取2020年2月至2022年2月河南省人民医院收治的51例肺癌组织和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肺癌组织和癌旁组织中LINC00942和miR-5006表达水平。人非小细胞肺癌细胞A549随机分为LINC00942 KD组和长链非编码RNA(lncRNA)对照组, 采用慢病毒建立稳定细胞系。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)染色分析两组细胞的增殖能力;采用Transwell分别两组细胞侵袭能力;蛋白质免疫印迹分析两组细胞上皮间质转化指标;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析LINC00942和miR-5006关系及其靶基因。组间比较采用t检验。结果肺癌组织中LINC00942表达水平(1.99±0.24)明显高于癌旁组织(1.05±0.17), 差异有统计学意义(t=23.200, P<0.05)。LINC00942 KD组吸光度(A)值(1.34±0.08)明显低于lncRNA对照组细胞A值...  相似文献   

4.
目的探讨微小RNA(miR)-214-5p靶向SUZ12对宫颈癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法选取2020年6月到2022年6月商丘市第一人民医院收治的宫颈癌组织和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析miR-214-5p表达水平。人宫颈癌细胞株CaSki随机分为对照组和miR-214-5p组。分别采用对照慢病毒和miR-214-5p慢病毒感染建立稳定细胞株。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和BrdU实验分析两组细胞的增殖活性;采用划痕实验分析细胞的迁移能力;采用Transwell分析两组细胞的侵袭能力。通过数据库和双荧光素酶报告基因分析miR-214-5p的靶基因。采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析靶蛋白的表达水平。组间计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织中miR-214-5p表达水平(1.37±0.13)明显高于宫颈癌组织(0.56±0.14), 差异有统计学意义(t=32.110, P<0.05)。对照组细胞miR-214-5p表达水平(1.16±0.08)明显低于miR-214-5p组细胞(2.79±0.18), 差异有统计学意义(...  相似文献   

5.
目的探讨环状RNA(circRNA, Circ)101237调控肝癌细胞进展的分子机制。方法将新乡医学院第一附属医院2019年7月至2021年7月行手术切除的肝癌组织和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析癌旁组织和肝癌组织Circ101237表达水平。采用sh-Con和sh-Circ101237慢病毒感染人肝癌细胞系MHCC97H, 建立sh-Con组和sh-Circ101237组细胞系, 细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验分析Circ101237对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。双荧光素酶报告实验分析Circ101237的靶基因。组间数据比较采用t检验。结果癌旁组织中Circ101237表达水平(1.01±0.18)明显低于肝癌组织Circ101237表达水平(2.09±0.26), 差异有统计学意义(t=30.560, P<0.05)。...  相似文献   

6.
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) MT1JP靶向微小RNA(miR)-18a-5p对非小细胞肺癌恶性细胞生物学的影响。方法选择2018年6月到2021年6月河南省人民医院收治的71例非小细胞肺癌和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织lncRNA MT1JP和miR-18a-5p表达水平。采用对照慢病毒和lncRNA MT1JP慢病毒感染A549细胞, 建立lncRNA组和MT1JP组细胞, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和EdU染色分析两组细胞增殖;采用Transwell分析两组细胞侵袭;采用划痕实验分析两组细胞迁移能力。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析lncRNA MT1JP的靶基因。组间比较采用t检验。结果癌旁组织lncRNA MT1JP表达水平(1.00±0.17)明显高于肺癌组织lncRNA MT1JP表达水平(0.37±0.18), 差异有统计学意义(t=21.330, P<0.05)。癌旁组织miR-18a-5p表达水平 (1.08±0.18)明显低于肺癌组织lncRNA MT1JP表达水平(2.23±0.2...  相似文献   

7.
目的探讨细胞外囊泡(EV)介导的微小RNA(miR)-491递送抑制骨肉瘤肺转移。方法细胞水平检测miR-491靶向降解胫骨来源的骨肉瘤细胞中αB-晶状体蛋白(CRYAB)的信使RNA(mRNA)和蛋白, 分为6组, miR-NC组、miR-491组、Vector+miR-NC组、Vector+miR-491组、CRYAB+miR-NC组、CRYAB+miR-491组。收集我院接受骨折治疗手术的男性患者皮下脂肪组织并分离脂肪组织来源的间充质间质细胞(AD-MSC), 在AD-MSC中过表达miR-491或阴性对照(NC)后收集细胞外囊泡miR-491-EV和NC-EV。随后建立小鼠骨肉瘤肺转移模型并分为两组:NC-EV组和miR-491-EV组, 检测肺转移结节数和肺重量。通过t检验和方差分析检测不同组间差异。结果 miR-491组的CRYAB的mRNA和蛋白水平低于miR-NC组(1.00±0.03比0.19±0.02, t=38.912, P<0.01)。Vector+miR-491组的侵袭能力和迁移能力低于Vector+miR-NC组(1.00±0.08比0.31±0.03...  相似文献   

8.
目的探讨LUCAT1/微小RNA(miR)-181a-5p对喉癌细胞增殖和化疗耐药的影响及其机制。方法选取2017年1月至2022年1月我院手术治疗的65例喉癌组织和癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析两组组织LUCAT1和miR-181a-5p的表达水平;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析LUCAT1和miR-181a-5p的关系。人喉癌细胞系Hep-2采用顺铂诱导传声顺铂耐药喉癌细胞系(Hep-2/R)。采用LUCAT1短发卡RNA(shRNA)和对照长链非编码RNA(lncRNA)慢病毒感染Hep-2/R, 分别为LUCAT1 KD组和对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和体外移植瘤实验分析两组细胞增殖和耐药的变化;采用流式细胞术分析顺铂对两组细胞凋亡的影响。组间计量资料比较采用t检验。结果耐药喉癌组织中LUCAT1表达水平(2.19±0.32)明显高于非耐药喉癌组织(1.61±0.20), 差异有统计学意义(t=8.967, P<0.05)。耐药喉癌组织中miR-181a-5p表达水平(1.10±0.13)明显低于非耐药喉癌组织(1.56±...  相似文献   

9.
目的探讨AF1q在食管癌中的表达及对细胞增殖和转移的影响。方法选取2018年1月到2022年1月商丘市第一人民医院收集的47例食管癌和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质免疫印迹分析食管癌和癌旁组织AF1q mRNA和蛋白质表达水平;在人食管癌细胞株TE-1细胞采用慢病毒感染建立对照组和AF1q KD组稳定细胞系, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、体外移植瘤、划痕实验、Transwell分析对照组和AF1q KD组细胞增殖、迁移和侵袭能力。采用荧光定量PCR分析AF1q下游基因的表达水平。组间计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织中AF1q mRNA表达水平(1.05±0.18)明显低于食管癌组织AF1q mRNA表达水平(2.10±0.17), 差异有统计学意义(t=28.960, P<0.05)。蛋白质印迹法(Western blot)结果显示, 癌旁组织中AF1q蛋白表达水平(0.75±0.10)明显低于食管癌组织AF1q蛋白表达水平(1.52±0.21), 差异有统计学意义(t=23.460, P<0.05)。对照组细胞48 h吸光度值...  相似文献   

10.
目的探究DNA甲基转移酶1(DNMT1)对前列腺癌细胞增殖和迁移侵袭的影响。方法采用小干扰RNA(siRNA)沉默前列腺癌细胞株(PC3和DU145)中DNMT1表达, 通过定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测沉默效率。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞的体外增殖能力;TransWell检测细胞体外迁移和侵袭能力;Western blot检测si-DNMT1细胞后上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白表达。组间比较采用t检验。结果 qPCR和Western blot实验结果显示DNMT1在前列腺癌细胞中高表达, 并成功构建siDNMT1 PC3和DU145细胞系。4 d后, CCK-8结果显示, siDNMT1细胞增殖能力低于相应对照组[PC3:1.27±0.71和1.44±0.48比1.66±0.58, t=7.268、5.108, P<0.01;DU145:1.43±0.12和1.27±0.10比1.80±0.06, t=4.841、7.493、P<0.01]。Transwell显示, 与对照组细胞比较, siDNMT1细胞迁移和侵袭...  相似文献   

11.
利多卡因作为一种酰胺类麻醉药, 在临床上被广泛用于局部麻醉和心律失常治疗。研究发现利多卡因不仅具有抗炎、抗菌、镇痛等作用, 同时还对多种肿瘤细胞显示出抗肿瘤活性, 能够抑制乳腺癌、肺癌、肝癌、胃癌、结直肠癌、宫颈癌、卵巢癌等多种癌症的发生、发展。文章综述了利多卡因的抗肿瘤机制, 包括诱导肿瘤细胞凋亡, 抑制肿瘤细胞迁移、侵袭和增殖, 协同增敏化疗药物与增敏热疗等, 为进一步深入研究提供相应参考。  相似文献   

12.
目的观察三阴性乳腺癌细胞中长链非编码RNA linc00921靶向调控微小RNA(miR)-9-5p对细胞侵袭能力的影响。方法收集2019年4月至2020年4月期间河北医科大学第四医院乳腺外科三阴性乳腺癌及癌旁标本共30例作为研究对象, 利用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析linc00921与miR-9-5p表达的相关性;将MDA-MB-231细胞分为linc00921过表达组和对照组, 利用细胞侵袭实验观察其对细胞侵袭能力的影响;利用实时荧光定量PCR检测linc00921对miR-9-5p表达的影响;采用生物信息学分析及双荧光素酶报告基因验证linc00921与miR-9-5p的关系;将细胞分为miR-9-5p mimics+ linc00921组和miR-NC+linc00921组, 观察linc00921影响细胞的侵袭能力是否与miR-9-5p有关。两组间比较采用t检验。结果过表达linc00921组侵袭细胞数[(154.50±12.06)个]低于对照组细胞[(400.50±6.36)个, t=61.500, P<0.05];生物信息学分析及双荧光素酶报告基因验证结...  相似文献   

13.
目的探讨微小RNA(miR)-17-5p对人结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭功能的影响及其机制。方法培养人结直肠癌细胞RKO、SW620、LOVO、HCT116和人正常结肠上皮细胞NCM460, 以上细胞购自美国典型培养物保藏中心。利用反转录实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-17-5p在各细胞系内的表达, 构建miR-17-5p抑制剂miR-17-5p inhibitor及其阴性对照negative control并转染至RKO细胞, 分别设为miR-17-5p抑制剂(miR-17-5p inhibitor)组和阴性对照(NC)组。qRT-PCR法检测miR-17-5p表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活性。平板克隆实验检测细胞克隆形成能力。划痕实验检测细胞迁移能力。Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力。qRT-PCR和蛋白印迹法(Western blot)检测转染后细胞内转移生长因子β受体2(TGFBR2)表达水平变化。两组间比较采用t检验, 多组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)。结果人结直肠癌细胞RKO、SW620、LOVO、HCT116中...  相似文献   

14.
目的探讨USP47促进乳腺癌进展的作用及其机制。方法应用蛋白质印迹法(Western blot)和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)实验技术检测USP47在乳腺癌细胞株MDA-MB-231、BT-549和正常乳腺细胞系MCF-10A(乳腺癌和正常乳腺细胞系均购自ATCC细胞库)中的表达。利用siRNA-USP47敲低MDA-MB-231、BT-549中USP47的表达。应用Transwell检测乳腺癌细胞的迁移能力。利用细胞计数实验(CCK-8)、平板克隆和EDU实验检测MDA-MB-231、BT-549细胞的增殖能力。采用Western blot检测蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达。两组之间比较采用独立样本t检验。结果 USP47在MDA-MB-231和BT-549中USP47的表达明显高于正常乳腺癌细胞MCF-10A(MDA-MB-231:2.70±0.53, BT-549:2.50±0.65, MCF-10A:1.00±0.00)。差异有统计学意义(MDA-MB-231:t=4.49, ...  相似文献   

15.
目的探讨胞裂蛋白9(SEPTIN9)基因甲基化对食管癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法采用亚硫酸盐测序聚合酶链式反应(PCR)法检测正常食管上皮细胞HEEC与食管癌ECA109、KYSE150细胞中SEPTIN9基因甲基化水平。分别应用甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-dc)(实验组)和二甲基亚砜(DMSO)(对照组)与细胞共培养72 h, 采用实时荧光定量聚合酶链反应及蛋白质印迹法(Western blot)检测SEPTIN9 mRNA及其蛋白, 采用噻唑蓝(MTT)法及膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素标记磷脂结合蛋白(Annexin V-FITC)凋亡实验检测增殖与凋亡, Transwell小室法检测迁移和侵袭。组间比较采用独立样本t检验。结果食管癌细胞ECA109、KYSE150的SEPTIN9基因甲基化程度高于正常食管上皮细胞HEEC[(83.69±7.15)%比(21.36±4.58)%;(84.26±6.97)%比(21.36±4.58)%, t=12.714、13.063, P<0.01]。实验组食管癌细胞ECA109、KYSE150 SEPTIN9...  相似文献   

16.
目的探讨血浆和尿液中细胞外囊泡微小RNA-4639和微小RNA-210在膜性肾病中的表达、疾病监测和预后评估价值。方法 2020年9月至2021年3月期间于苏州大学附属第三医院纳入30例健康和30例膜性肾病患者, 聚乙二醇(PEG)沉淀法提取血浆和尿液细胞外囊泡;电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析仪表征形态;蛋白质印迹测定囊泡表面标志物的表达;荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定微小RNA的表达水平;t检验和皮尔森相关系数分析数据;受试者工作特征曲线评价微小RNAs的诊断效能。结果膜性肾病患者尿液细胞外囊泡的浓度及标志物的表达明显高于对照组(4.00×1011±1.00×1010颗粒数/毫升比2.80×1011±1.00×1010颗粒数/毫升, CD63:0.81±0.20比1.00±0.12, CD81:0.43±0.10比1.00±0.44, t=14.70, 1.46, 1.88, F=1.00、3.52、19.68, P均<0.05), miR-4639和miR-210在血浆和尿液细胞外囊泡中的水平显著升高(miR-4639:1.62±1.10比0.69±0.33, 2....  相似文献   

17.
目的使用生物信息学方法构建铁死亡相关微小RNA(miRNAs)-信使RNA(mRNAs)的调控网络并探讨其在骨关节炎(OA)中的分子作用机制。方法从基因表达综合数据库(GEO)下载软骨相关数据集GSE175961和GSE1140007, 利用生物信息学方法筛选铁死亡相关miRNAs和mRNAs, 并进行富集分析、miRNA-mRNA网络构建以及诊断价值分析。最后采用荧光实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证关键基因表达, 并采用独立样本t检验比较其差异。结果 GSE175961数据集中共筛选获得了15个差异表达miRNAs。使用TargetScan和miRDB数据库分别预测差异表达miRNAs的下游靶基因, 共获得了5 115个共存的靶基因。与GSE1140007数据集中19个差异表达铁死亡基因取交集后共获得了4个下游铁死亡基因(PARP15、KLF2、CDKN1A、PDK4)。基于上述研究结果构建了由15个差异表达的miRNAs和4个下游铁死亡基因组成的miRNA-mRNA调控网络。进一步富集分析表明, 4个下游铁死亡基因与多种生物学功能和信号途径有关, 如脂肪酸代谢、细胞周期调...  相似文献   

18.
目的探讨长链非编码RNA锌指蛋白反义链1(lncRNA ZFAS)靶向调控微小RNA-512-3p(miR-512-3p)表达及对透明细胞肾细胞癌(ccRCC)侵袭和迁移的影响。方法收集2019年2月至2020年4月我院泌尿外科接受肾癌根治术的ccRCC患者30例, 获取肾癌及癌旁组织标本。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测30个ccRCC癌肿组织和30个邻近非肿瘤正常组织中lncRNA ZFAS和miR-512-3p和可能靶向miRNAs的表达水平。分别通过细胞计数盒(CCK-8)测定、细胞克隆试验、Transwell迁移和侵袭测定测定敲低lncRNA ZFAS1对细胞增殖、细胞克隆、迁移和侵袭的影响。lncRNA ZFAS1和miR-512-3p的相关性通过生物信息学软件RAID v2.0和AnnoLnc预测进行分析。lncRNA ZFAS1和miR-512-3p之间的相互作用通过荧光素酶报告基因检测验证。两组间比较采用独立样本t检验, 多组间比较采用单因素方差分析, 进一步两两比较采用SNK-q检验。结果 RT-qPCR结果显示lncRNA ZFAS1在ccRC...  相似文献   

19.
目的探讨IgG1重链(IGHG1)编码基因在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌细胞(PANC-1)增殖、迁移及侵袭的影响。方法选取2018年6月至2020年12月期间在湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院进行手术治疗的65例胰腺癌患者, 手术取癌组织及癌旁正常组织, 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测胰腺癌组织及癌旁组织IGHG1 mRNA表达水平, 分析IGHG1表达与胰腺癌临床病理特征的相关性;将PANC-1细胞分为对照组、IGHG1阴性对照组(si-NC)和干扰IGHG1表达组(si-IGHG1), 分别检测PANC-1细胞IGHG1 mRNA表达、增殖、迁移、侵袭与凋亡, 及上皮间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin及Bax、Bcl-2、caspase3蛋白表达。结果胰腺癌组织中IGHG1 mRNA表达水平为(2.47±0.23), 显著高于癌旁组织的(1.03±0.12)(P<0.05), IGHG1表达与肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴转移有关(P<0.05);与正常组HPDE细胞mRNA(1.05±0.14)及蛋白(...  相似文献   

20.
目的探讨微小RNA(miRNA, miR)-499-5p靶向CYLD对肿瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法选取2020年5月至2022年5月我院收治的宫颈癌组织和癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析miR-499-5p表达水平。采用对照miRNA和miR-499-5p抑制剂转染宫颈癌细胞Hela, 命名为对照miRNA组和miR-499-5p KD组, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-Ethynyl-2′-deoxyuridine, EdU)染色法分析肿瘤细胞增殖能力;采用划痕和Transwell分析两组细胞的迁移能力。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-499-5p靶基因。采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析两组细胞增殖、侵袭和靶蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果宫颈癌组织中miR-499-5p表达水平(1.78±0.21)明显高于癌旁组织(1.07±0.14), 差异有统计学意义(t=22.920, P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值水平(2.23±0.15)明显高于mi...  相似文献   

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