白血病抑制因子在骨性关节炎中的发病学意义

目的:探讨白血病抑制因子(Leukemia Inhibitory Factor,LIF)在实验性骨性关节炎(osteoarthritis,OA)不同时期的表达变化。阐明LIF在OA发病学中的意义。方法:设右侧膝为实验侧,采用Colombo兔实验性骨性关节炎模型;左侧膝行假手术为对照侧。于不同时间处死动物,取膝关节滑膜和软骨组织。采用光镜观察骨性关节炎不同阶段的组织学改变,以免疫组织化学技术检测LIF关节软骨和滑膜中的表达变化。结果:实验组术后42d光镜显示关节滑膜及软骨明显的OA组织学改变;实验组关节软骨细胞LIF的表达量明显高于对照组(P<0.05;术后28d软骨细胞中LIF的表达明显高于其他时间点(P<0.05),不同时间点实验组与对照组之间对应比较均有显著性差异(P<0.05);实验组不同时间段滑膜细胞能不同程度的表达LIF,对照组关节滑膜细胞未见LIF表达。结论:LIF在OA软骨和滑膜细胞中的异常表达及变化具有特异性,其原因与OA不同时期软骨和滑膜细胞变性有直接关系。LIF在OA发病中起重要作用,是OA发生发展的重要介导因素之一。     

A-2巨球蛋白对骨关节炎软骨细胞的作用

[目的]研究A-2巨球蛋白(alpha-2-macroglobulin, A2M)在骨关节炎(osteoarthritis, OA)软骨中的表达情况,并观察其对OA软骨细胞的作用。[方法]选取因OA行全膝关节置换术患者胫骨平台24例,将平台软骨面分为相对病变区域与绝对病变区域,q PCR法检测不同区域A2M的表达水平。原代OA软骨细胞进行培养,分为3组:正常培养组(对照组)、IL-1b刺激组、IL-1b刺激后A2M处理组(A2M组),24 h后q PCR法检测软骨细胞合成和分解代谢情况;48 h后,蛋白印迹法检测细胞中基质金属蛋白酶-13 (MMP-13)的表达水平,ELISA法检测上清液中MMP-13的浓度。[结果] OA胫骨平台绝对病变区域A2M表达水平较相对病变区域显著下降(P0.05)。细胞培养中,A2M组II型胶原和Aggrecan的表达水平显著高于IL-1b刺激组(P0.05),而MMP-3和-13的表达水平则明显低于IL-1b刺激组(P0.05)。蛋白印迹和ELISA检测均显示经A2M处理后,MMP-13的水平显著降低。[结论]A2M能够有效地抑制软骨的分解代谢,未来将进行体内试验来验证其对OA的抑制作用。     

紫云英苷对膝关节骨性关节炎大鼠JNK/p38MAPK信号通路的影响

目的 探究紫云英苷对膝关节骨性关节炎（KOA）大鼠的保护作用以及对JNK/p38MAPK信号通路的影响。方法 90只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、塞来昔布组（18 mg/kg）、紫云英苷低（25 mg/kg）、中（50 mg/kg）、高（100 mg/kg）剂量组,每组15只。改良Huith法建立KOA模型,术后灌胃6周。游标卡尺测量大鼠膝关节直径,足趾容积仪测量大鼠足趾容积;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平;HE染色观察膝关节软骨组织病理变化;ELISA法检测软骨组织TGF-β1、MMP-3水平;Western Blot法检测p-JNK、JNK、p-p38MAPK、p38MAPK蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠软骨组织表面被破坏,组织层变薄,细胞数量减少且排列紊乱,潮线被大量破坏;膝关节直径与足趾容积明显变大（P＜0.05）;血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平以及软骨组织中TGF-β1、MMP-3水平,p-JNK/JNK、p-38MAPK/p38MAPK比值显著升高（P＜0.05）。与模型组比较,塞来昔布组与紫云英苷各剂量组软骨组织病变明显减轻;膝关节直径与足趾容积明显缩小（P＜0.05）;血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平以及软骨组织中TGF-β1、MMP-3水平,p-JNK/JNK、p-38MAPK/p38MAPK比值显著降低（P＜0.05）,且紫云英苷各剂量组间具有剂量效应（P＜0.05）;紫云英苷高剂量组与塞来昔布组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 紫云英苷可能通过抑制JNK/p38MAPK信号通路激活,减轻炎症反应,改善KOA大鼠膝关节软骨组织损伤。     

常春藤皂苷元通过JNK/p38 MAPK信号通路抑制膀胱癌细胞体外和裸鼠体内增殖能力的相关研究

目的探索常春藤皂苷元(hederagenin, HE)在体外和裸鼠体内对膀胱癌细胞T24增殖能力的影响。方法把人膀胱癌细胞T24分为对照组和实验组, 实验组给予含25 μg/ml常春藤皂苷元的DMEM培养基进行培养, 用CCK8检测细胞的增殖能力;将裸鼠分为对照组和实验组并注射T24细胞, 实验组细胞按30 mg/kg隔天注射常春藤皂苷元。提取T24细胞和瘤块蛋白检测其p-JNK/JNK、p-p38/p38的表达量。结果膀胱癌细胞T24经常春藤皂苷元处理后, CCK8结果显示实验组细胞增殖能力明显下降(P<0.05);实验组与对照组细胞p-JNK的表达量分别为(0.21±0.06)和(0.89±0.15), p-p38的表达量分别(0.38±0.09)和(1.44±0.26), p-JNK、p-p38的表达均上调(均P<0.05)。体内实验发现, 常春藤皂苷元处理后, T24细胞裸鼠皮下瘤实验组瘤块与对照组瘤块体积分别为(1192.07±250.92)μm3和(2280.50±600.10)μm3, 质量分别为(0.65±0.29)g和(1.62±0.38)g, 实验组质量...     

白细胞介素1β在膝关节骨性关节炎滑液中临床意义

目的探讨膝关节液内白细胞介素1β(IL-1β)与膝骨性关节炎(OA)关节镜下分级的关系,寻找反映骨关节炎严重程度的生化指标。方法选择膝关节镜及人工膝关节置换的患者40例,其中11例单纯半月板损伤为对照组;OA患者29例为实验组,再根据其软骨损伤程度分为轻、中、重度3组。抽取其膝关节液送检,测量关节液内IL-1β的浓度。结果对照组与实验组IL-1β浓度差异有统计学意义(P<0.01),实验组不同分级组间差异也具有统计学意义(P<0.01)。OA患者关节液中IL-1β的含量与关节镜下OA的严重程度成正相关(r=0.887,P<0.01)。结论 OA患者关节液中IL-1β的含量与关节镜下OA的严重程度成正相关,可有效反应OA严重程度。     

膝关节骨性关节炎中WISP-1调控机制的研究

目的使用膝关节骨性关节炎（OA)临床组织标本与人软骨细胞株(NHAC).以分子生物学手法探讨WISP4在骨关节 软骨基质合成和分泌中的调控机理，明确其在骨性关节炎中的作用。方法NHAC细胞以1. 4 x 106/mL密度播种于6孔板 (直径3.5 cm)后培养48 h，于含有0.2%牛血清白蛋白（BSA)的DF中继续培养12 h，使细胞处于静止状态。向含0.02% BSA 的 DF 培养基中加人 10、50 和 100 ng/mL 的 Wnt 刺激细胞 6 h。对照 siRNA 与 P~catenin siRNA，使用 EntranserTM~R (Engreen)转染试剂转染至NHAC。转染24 h后使用PBS清洗细胞两次。向含0.02% BSA的DF培养基中加人50 ngjnL的 Wnt刺激细胞。向NHAC负荷不同剂量WISP4，24 h后观察MMPs和ADAMTS4。利用总RNA提取试剂盒提取组织标本和细 胞RNA，反转录产物cDNA作为PCR扩增模板进行定量PCR;使用蛋白提取试剂盒提取蛋白。结果在膝关节组织标本中发 现，在骨性关节炎关节软骨中WISP~1、Wnt和b相似文献   

全膝关节置换术治疗膝关节骨性关节炎与类风湿关节炎的疗效比较

目的比较膝关节骨性关节炎(OA)与类风湿关节炎(RA)患者行人工全膝关节置换术(TKA)治疗的效果差异。方法回顾性分析自2011-01—2015-05完成的123例TKA,其中OA组78例,RA组45例。比较2组术后12个月膝关节KSS评分(临床评分与功能评分),并评估患者满意度。结果 123例均获得随访,随访时间平均36(12～60)个月。OA组出现5例(6.4%)并发症,RA组出现10例(22.2%)并发症;OA组并发症发生率低于RA组,差异有统计学意义(P 0.05)。术后12个月OA组KSS临床评分为(85±15)分,高于RA组的(65±22)分;OA组KSS功能评分为(85±15)分,高于RA组的(60±20)分,差异有统计学意义(P 0.01)。术后12个月OA组患者满意度评分为(85±10)分,RA组为(80±10)分,2组差异无统计学意义(P0.05)。结论 OA患者行TKA的临床疗效比RA患者更好,术后切口感染和切口延迟愈合发生率更低,但是患者满意度没有明显差别。     

膝关节骨性关节炎的分类治疗

骨性关节炎(osteoarthdtis OA)以关节软骨退变为特征，其中，膝关节OA最为多见。临床观察膝关节OA的临床表现、疼痛部位和疼痛程度有很大差别，根据每一位患者的临床特点进行针对性治疗是提高疗效的关键。然而，目前尚缺乏对膝关节OA疼痛部位和对治疗有指导意义的理想分类方法。本研究对266例膝关节OA患者进行了详细临床观察和临床分类，对每一位患者进行针对性治疗，取得了良好疗效。     

微小RNA-215-5p/锌指结构E-box同源结合框2促进白细胞介素-1β诱导软骨细胞凋亡在骨关节炎中的作用机制

目的探讨微小RNA(miR)-215-5p对白细胞介素(IL)-1β诱导的骨关节软骨细胞凋亡的影响及其机制。方法将骨关节炎软骨细胞ATDC5随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)处理对照组和IL-1β处理模型组。为了分析miR-215-5p对IL-1β诱导细胞凋亡的影响, 进一步的将IL-1β组分为:模型组+miR对照组, 模型组+miR-215-5p抑制剂组。细胞转染后采用10 ng/ml IL-1β处理软骨细胞。采用流式细胞术检测细胞凋亡水平。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-215-5p和锌指结构E-box同源结合框2(ZEB2)的表达水平。蛋白质印迹法(Western blot)检测ZEB2、p65、磷酸化p65、裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白水平。将野生型ZEB2的3’-非编码区(pmiR-ZEB2-WT)或者突变型ZEB2的3’-非编码区(pmiR-ZEB2-Mut)分别与miR-215-5p模拟物(miR-215-5p mimic)和对照物(miR-NC)共转染细胞, 双荧光素酶报告基因测定实验研究miR...     

RNAi对基质金属蛋白酶13在兔骨性关节炎中表达的抑制作用

目的 观察RNA干扰技术(RNAi)是否能有效抑制兔OA模型膝关节软骨中基质金属蛋白酶13(MMP13)的表达.方法 体外化学合成MMP13序列特异性双链RNA与脂质体混合后转染OA模型中软骨细胞,实验分四组,特异性RNAi组:特异性RNAi+Lipofectamine2000,非特异RNAi组:非特异RNAi+Lipofectamine2000,脂质体组:Lipofectamine2000,对照组:无血清DMEM.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法检测软骨细胞中的MMP13的表达.噻唑蓝(MTT)比色法检测各组的软骨细胞生长情况.结果 RT-PCR显示RNAi组较对照组、非特异性组和脂质体组的MMP13基因的PCR扩增条带明显减弱,免疫组织化学法显示RNAi组中MMP13阳性细胞数比对照组明显减少.与对照组比较,非特异性组、RNAi组、脂质体组软骨细胞的存活率显著降低(P<0.05),但在3组间两两差异无统计学意义.结论 使用RNA干扰技术可有效抑制兔OA模型中膝关节软骨细胞MMP13的表达,RNA干扰技术为基因治疗OA提供了新策略.     

微小RNA-214-3p介导神经营养酪氨酸激酶受体2型通路调节血管内皮生长因子旁分泌在骨关节炎发展中的作用

目的:探讨微小RNA(miR)-214-3p在骨关节炎(OA)软骨细胞中的表达及其调节内皮细胞迁移和血管生成的机制。方法:选取2020年6月至2020年12月在郑州大学第一附属医院接受全膝关节置换的16例OA患者及12例无膝关节疾病但因创伤导致下肢截肢的患者分别作为OA组和健康组,获取软骨标本,提取软骨细胞。采用蛋白印...     

核因子-κB信号通路在股骨头坏死发病机制中的作用

目的观察核因子-κB(NF-κB)信号通路在股骨头坏死(ONFH)发病中的作用及其分子机制。方法髋关节置换术中对股骨头坏死患者的骨髓(实验组)和非股骨头坏死患者的骨髓(对照组)进行采样, 利用密度梯度离心法分离提取实验组和对照组的骨髓间充质干细胞(BMSCs), 并进行纯化和培养。应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测BMSCs成骨分化关键因子Runx2表达情况。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测实验组和对照组BMSCs中NF-κB信号通路p65蛋白磷酸化水平及Runx2的表达差异。采用噻唑蓝法(MTT)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3/7活性细胞凋亡检测法分别检测实验组和对照组BMSCs的增殖活性及凋亡情况。对实验组和对照组的BMSCs进行成骨诱导后, 进行茜素红染色, 检测BMSCs成骨分化水平的差异。通过雷公藤甲素(Triptolide)抑制经脂多糖(LPS)预处理的实验组BMSCs, 观察磷酸化p65及Runx2的表达水平, 同时, 应用茜素红染色, 验证抑制磷酸化p65对NF-κB信号通路对成骨分化的作用。采取单因素方差分析和t检验...     

胶原蛋白酶诱发兔膝关节骨性关节炎软骨组织中HIF2α表达上调

目的 研究低氧诱导因子HIF2α在胶原蛋白酶诱发兔膝关节骨性关节炎（Osteoarthritis, OA )模型中的表达情况,为下一步以HIF2α为靶点进行OA靶向治疗研究提供实验基础。方法 取健康16周龄雄性日本大耳白兔24只,随机分为磷酸盐缓冲液（PBS)对照组和胶原蛋白酶诱发OA ( Collagenase-induced OA, CIOA)组。利用右侧膝关节腔内注射II型胶原蛋白酶 (剂量为0. 5 mg)方法建立膝关节OA模型。给药后24周处死动物,采用大体形态观察与HE、甲苯胺蓝染色观察关节软骨退变程度,应用微型CT( Micro-CT)观察软骨下骨改变情况,采用免疫组织化学（immunohistochemistry ,IHC)、蛋白质免疫印迹 (Western Wotting, WB)和实时荧光定量PCR( quantitative real time PCR, qRT-PCR)检测软骨中 HIF2α 表达情况。结果 大体形态观察结果显示,CIOA组关节面粗糙、糜烂,与溃疡形成,关节囊增厚,滑膜增生。组织病理学检测结果显示,CIOA组关节软骨缺损,软骨细胞数量减少,排序紊乱,有细胞簇聚现象。Micro-CT结果显示,CIOA组软骨下骨可见大量骨赘形成,关节间隙狭窄。IHC结果显示,CIOA组关节软骨中HIF2α蛋白阳性细胞数增加;WB结果显示,CIOA组关节软骨组织中HIF2α蛋白表达显著增加;而qRT-PCR结果显示,HIF2α mRNA表达显著降低。结论 在成功建立膝关节OA模型基础上,发现HIF2α在胶原蛋白酶诱发兔膝关节OA软骨中表达上调,其表达调控可能在转录后水平进行。我们的实验结果提示HIF2α特异性抑制剂可能被用于缓解OA发生。     

环状RNA 0001846对骨关节炎生物学功能的影响及其机制

目的探讨环状RNA 0001846(circ₀001846)调控滑膜巨噬细胞极化在骨关节炎中的生物学功能及其机制。方法收集常州市第二人民医院2021年12月至2022年9月行全膝关节置换术骨关节炎患者及遭受膝关节创伤且无骨关节炎患者的滑膜组织各10例, 将10例骨关节炎滑膜组织作为研究组, 10例非关节炎滑膜组织作为对照组。使用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)测定环状RNA(circRNA)及巨噬细胞标志物在滑膜组织的mRNA表达水平;使用THP-1细胞上清液孵育软骨细胞, 通过细胞计数试剂盒(CCK-8)与流式细胞术测定软骨细胞活力、软骨细胞凋亡率;蛋白质印迹法(Western blot)检测软骨细胞凋亡相关蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果实验组患者滑膜组织中M1巨噬细胞标志物表达高于对照组[诱导型一氧化氮合酶(iNOS):2.67±0.34比0.98±0.10, t=15.140, P<0.01;肿瘤坏死因子-α(TNF-α):2.51±0.31比1.02±0.22, t=12.422, P<0.01和白细胞介素(IL)-1β:4.27...     

膝关节骨性关节炎血液和滑液MMP-3 水平与其病变程度的相关性

目的探讨膝关节骨关节炎（osteoarthritis’OA)患者血液和滑液MMP-3水平与其病变严重程度的关系。方法随机选取33例膝关节0A患者[男20例,女13例;年龄55?87岁,平均（65. 8 ±6. 8)岁]和15名健康对照者[男9例,女6例;年龄53?83岁,平均（62. 3 ± 7. 2)岁]作为研究对象。采用Kellgren-Lawrence标准进行放射学分级,酶联免疫吸附法（ELISA)测定关节血液和滑液MMP-3 水平。结果0A患者与对照者相比,关节血液MMP-3水平（178. 61 ±83. 82) ： (73. 26 ±21.51)ng/ml 和滑液MMP-3水平（5612.31 ± 3013.93)： (782. 63 ±426. 22)ng/ml均明显升高。关节血液和滑液 MMP-3水平均与0A病变严重程度（KL分级）呈正相关卜=0. 627,P<0. 001;r=0. 55,P =0.001)。关节血液MMP-3水平与滑液MMP-3水平呈正相关（r =0. 509,P =0. 002)。结论0A患者血液和滑 液MMP-3水平都与病变严重程度相关。因此,MMP-3在0A的病理过程中起关键作用,并且可以作 为0A病变严重程度的生物标记。     

膝关节骨性关节炎患者尿液中C2C水平检测

目的观察并探讨尿液中Ⅱ型胶原羧基末端3/4片段(C2C)水平与膝关节骨性关节炎(KOA)患者病变程度的关系。方法收集90例膝关节骨性关节炎患者及20例非膝关节骨性关节炎患者清晨尿液标本5 mL及膝关节正侧位影像学资料,尿液标本置-80℃冰箱保存,影像学资料根据Kellgren-Lawrence放射学分级标准对膝关节骨性关节炎患者的影像学表现进行分级,实验分为五组,对照组,I级组,II级组,III级组及IV级组。各组间年龄及性别构成比较没有显著性差异,无统计学意义。尿液标本收齐后采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测尿液中C2C水平。结果与对照组(261.235±39.944 pg/mL)相比,膝关节骨性关节炎组C2C水平(218.341±22.270 pg/mL)明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。各组C2C水平比较:IV组(311.872±18.759 pg/mL)III组(273.753±18.595 pg/mL)II组(256.251±23.379 pg/mL)I组(219.009±13.431pg/mL)或正常组(218.341±22.270 pg/mL)(P=0.000)。I级膝关节骨性关节炎组患者尿液C2C与对照组水平相差无统计学意义(P0.05)。结论骨性关节炎患者C2C水平较正常对照组高,C2C升高水平与膝关节骨性关节炎病变程度平行,且二者呈高度正相关。     

TKA治疗膝关节骨性关节炎238例临床分析

目的分析采用全膝关节置换术(TKA)治疗膝关节骨性关节炎(OA)的临床疗效。方法笔者自2014-01—2014-12采用TKA治疗238例OA,采用膝关节功能HSS评分评价手术前后膝关节功能。结果术后失访28例,210例获得随访平均10(3~15)个月,均无不良反应及严重并发症。患者术前HSS评分为(48.8±7.6)分,术后HSS评分为(93.7±3.6)分,手术前后HSS评分差异有统计学意义(Z=-12.569,P0.001);术后膝关节伸屈活动度100°~140°(122.8±10.3)°,明显优于术前屈伸活动度15°~135°(81.7±20.1)°,差异有统计学意义(Z=-13.694,P0.001)。结论 TKA治疗OA是一种安全、高效的手段,能够极大程度地改善、消除患者所承受的痛苦,促进下肢运动功能的恢复,使患者的生活质量得到很大提高,是比较理想的治疗手段。     

神经肽Y与膝关节骨性关节炎关节疼痛关系分析

目的 探讨膝关节骨性关节炎(KOA)膝关节液中神经肽Y(NPY)的水平与KOA关节疼痛的关系.方法 用放射免疫分析法(RIA)法检测KOA 100例和健康志愿者20例的关节液标本中NPY的含量.结果 KOA的关节液标本按疼痛标准分组关节液中NPY含量,随着疼痛的加剧,NPY呈现上升趋势.KOA的关节液标本按膝关节病变X线表现分组关节液中NPY含量,随着病变的加剧,NPY呈现先上升后下降的趋势.结论 NPY在KOA疼痛发生、发展中起重要作用.     

老年人膝关节骨性关节炎影响因素分析研究

目的通过对老年人群的膝关节骨性关节炎(OA)发病危险因素进行研究,为膝关节骨性关节炎的预防和治疗提供依据。方法选取经过确诊的1380例OA病例和1500例对照病例,进行病例对照研究;采用非条件Logistic回归分析,筛选出影响OA的危险因素。结果多因素分析结果显示:性别(OR=2.447,95%CL:1.767～3.127)、体质指数(OR=2.469,95%CL:1.911～3.028)、膝关节史(OR=3.343,95%CL:2.289～4.398)、潮湿(OR=4.586,95%CL:2.930～6.242)、阴暗(OR=5.099,95%CL:3.280～6.918)、低强度锻炼(OR0.468,95%CL:0.258～0.678)、职业运动锻炼(OR=7.374,95%CL:4.830～9.918)、关节负重(OR=5.766,95%CL:3.342～8.191)、盘坐习惯(OR=4.600,95%CL:2.924～6.276)。结论膝关节骨性关节炎的发病受性别、肥胖、膝关节史、潮湿阴暗、低强度的运动习惯、职业运动锻炼、关节负重、盘坐习惯等因素的影响。     

全膝人工关节置换术治疗重度膝骨性关节炎

重度膝骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)不但膝关节疼痛较为严重,而且膝关节增粗肥大、内外翻畸形或屈曲挛缩畸形,严重影响患者的工作和生活质量.近年来,随着全膝人工关节(Total knee arthoplasty,TKA)置换手术的开展,采用TKA治疗重度膝关节OA引起了人们的重视.现报道22例(38膝).……