肾透明细胞癌转移相关的CD99选择性剪接异构体的筛选

目的:寻找人肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）中CD99转移相关选择性剪接异构体,探讨CD99选择性剪接异构体表达与ccRCC转移的关系。方法:通过选择性剪接数据库(alternative splicing database,ASD)对CD99基因可能存在的选择性剪接异构体进行预测。运用自行设计的5对特异性引物,采用RT-PCR技术,在转移组织、发生及未发生转移的癌组织、癌旁组织的各混合样本中检测6种预测异构体的表达,再对电泳所获条带进行克隆、测序。在各个组织样本中检测CD99Ⅰ、 CD99Ⅱ和新型CD99选择性剪接异构体（CD99-Ⅲ）的表达。结果:从6种预测异构体中筛选出一种新型异构体（CD99-Ⅲ）。该异构体在转移组织中表达率(8/9) 高于未发生转移的原发癌组织(10/21,P<0.05）。CD99Ⅰ型在样本中均表达,CD99Ⅱ型在发生转移的原位癌组织中表达率（6/9）远高于未转移的原发癌组织(3/21,P=0.008）。结论:CD99-Ⅲ为一种新型选择性剪接异构体,且CD99Ⅱ型、CD99-Ⅲ的表达可能与ccRCC的转移进展有关。     

肾透明细胞癌组织中转录因子19基因选择性剪接异构体的类型和表达特点

目的探讨人肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)是否存在与细胞生长调节相关的转录因子19(TCF19)选择性剪接异构体,探索其表达特点及其与ccRCC发生的关系。方法通过选择性剪接数据库(alternative Spli-cing Database,ASD)对TCF19基因可能存在的选择性剪接异构体种类进行预测。设计可能存在的5种异构体引物,采用RT-PCR技术,在32例原发肾透明细胞癌的混合样本及癌旁组织的混合样本中分别检测预测异构体的表达,并对电泳所获条带进行克隆、测序。应用RT-PCR定量检测在各个组织样本中异构体TCF19-1、TCF19-3在原发肾癌及癌旁组织的表达差异。结果 ccRCC组织中存在2种新型TCF19替换剪接异构体(TCF19-1、TCF19-3)。RT-PCR检测结果发现这2种异构体在癌和癌旁组织中均表达,但TCF19-1在原发癌组织中表达率高于癌旁组织(P<0.001);TCF19-3在癌旁组织中的表达率与原发癌组织比较,差异无统计学意义(P=0.082)。结论首次发现ccRCC组织中存在2种TCF19选择性剪接异构体TCF19-...     

胃癌组织Twist基因的荧光实时定量PCR检测

目的探讨Twist基因在人胃癌组织、癌旁组织、胃癌转移灶组织中表达及临床意义。方法应用Trizol法提取总RNA，以总RNA为模板经逆转录合成cDNA，用实时荧光定量PCR的方法检测8例正常胃粘膜，27例胃癌原发灶，19例胃癌转移灶组织中Twist mRNA的表达情况并分析其与临床病理指标的关系。结果荧光实时定量PCR扩增结果显示，Twist基因在正常胃粘膜组织中表达量很低，而在原发性胃癌组、转移性胃癌组中均有较高的表达，原发性胃癌组织及腹膜转移组织中的表达明显高于正常胃粘膜组织（P〈0．05）；Twist基因在淋巴转移组织中的表达与原发组中的表达差异显著（P〈0．05）。结论Twist基因在胃癌中过度表达可能促进胃癌的发生与发展，并与胃癌转移密切相关，又可能成为预测胃癌转移潜能的分子基础。     

肾透明细胞癌中谷胱甘肽S-转移酶M3基因的表达及其启动子区CpG岛的甲基化水平

目的:检测肾透明细胞癌(ceRCC)中谷胱甘肽S-转移酶M3(GSTM3)基因表达水平,观察其启动子区CpG岛的甲基化水平,探讨GSTM3基因甲基化与ccRCC发生和转移的关系.方法:半定量RT-PCR检测ccRCC高转移潜能细胞系(RCC05-TXJ)、低转移潜能细胞系(RCC05-ZYJ)、24例原位ccRCC及其癌旁肾组织和14例ccRCC转移组织的GSTM3基因的表达水平.用去甲基化剂5-Aza-CdR干预RCC05-ZYJ,RT-PCR检测处理前后GSTM3基因的表达变化.用巢式BSP(nes-ted bisulfite sequencing PCR)检测10例原位ccRCC及其癌旁肾组织的GSTM3基因启动子区CpG岛甲基化位点.采用巢式MSP(nested methylation specific PCR)检测10例原位ccRCC及其癌旁肾组织、8例ccRCC转移组织甲基化情况.结果:RCC05-TXJ中GSTM3基因表达强度低干RCC05-ZYJ.5-Aza-CdR处理RCC05-ZYJ后,GSTM3基因表达强度高于处理前.24例原位ccRCC中17例GSTM3基因的表达强度低于其在癌旁肾组织中的表达强度,其余7例原位ccRCC中GSTM3基因的表达强度不低干其在癌旁肾组织中的表达.10例原位ccRCC及其癌旁和8例转移组织中,癌组织GSTM3基因启动子甲基化阳性为4例,癌旁组织2例(P=0.628),转移组织1例(P=0.314),差异无统计学意义.结论:GSTM3基因表达与ccRCC的发生、转移密切相关,其启动子区CpG岛甲基化会降低该基因的表达;初步筛选出ecRCC中GSTM3基因启动子区CpG岛甲基化位点,为后续研究奠定了基础.     

基质金属蛋白酶组织抑制物-1 mRNA在胃癌组织中的表达

①目的　检测基质金属蛋白酶组织抑制物 1(TIMP 1)基因在胃癌及其癌旁组织中的表达 ,以探讨TIMP 1在胃癌发生发展中的作用。②方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测胃癌及相应癌旁组织中TIMP 1基因的表达。③结果　 30例胃癌组织中有 16例表达TIMP 1基因 ,阳性率为 5 3.3% ,30例癌旁组织中有14例表达TIMP 1基因 ,阳性率为 4 6 .7% ,TIMP 1基因在胃癌和癌旁组织中的表达无显著性差异 (χ2 =0 .2 6 7,P >0 .0 5 )。④结论　TIMP 1是一种肿瘤生长、侵袭、转移双向调节因子。     

肝再生磷酸酶3基因与胃癌恶性进展相关性研究

目的：检测肝再生磷酸酶3（PRL-3）mRNA在胃癌、癌旁正常组织及其转移灶中的表达,探讨其与胃癌发生发展以及侵袭转移的生物学行为之间的关系。方法：半定量PCR测定22例胃癌组织及其相对应的癌旁正常组织、6例远处转移灶PRL-3 mRNA相对表达水平,并分析其表达水平与临床病理学指标的关系。结果：22例胃癌组织中PRL-3基因表达量较相应癌旁正常组织中高,但差异无统计学意义（0.95±0.24 vs 0.85±0.27,P〉0.05）。6例转移灶PRL-3基因表达量（2.04±0.44）显著高于原发肿瘤（1.26±0.26）（P〈0.05）。PRL-3基因表达水平与肿瘤远处转移有相关性（P〈0.05）,而与肿瘤大小、分化程度、浸润深度及性别无关（P〉0.05）。结论：PRL-3基因在胃癌恶性进展中起重要作用,PRL-3可能成为判断胃癌转移高危因素的一个生物学标志物。     

Tim4基因定量检测方法的建立及在消化道肿瘤中的初步应用

目的: 建立T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域分子4(T cells immunoglobulin-and mucin-domain-containing molecule 4,Tim4)基因表达的实时荧光定量PCR(实时RT-PCR)的检测方法,探讨Tim4基因在消化道肿瘤中的表达差异.方法: 构建包含Tim4基因片段的标准质粒,通过RT-PCR,实时RT-PCR等检测并比较Tim4基因在37例胃癌组织、19例结直肠癌组织与对应癌旁组织中的表达水平. 结果: 建立的Tim4基因定量检测方法准确可靠;在37例胃癌组织中,26例癌旁组织Tim4基因表达量高于对应癌组织(26/37),且在26例癌旁组织高表达的样本中,18例(69.2%)胃癌癌旁组织与癌组织表达比率大于2;在19例结直肠癌中12例癌旁组织表达高于对应的癌组织(12/19),其中癌旁组织高表达率(大于2)为 75.0%(9/12).结论: 成功建立了检测Tim4基因的实时RT-PCR方法,Tim4基因在结直肠癌和胃癌的癌组织中表达呈低趋势,这为深入探讨Tim4基因与肿瘤的关系提供了实验基础.     

miRNA-449b在胃癌组织中的表达及与淋巴结转移的关系

目的:通过对胃癌组织及癌旁组织中miRNA-449b表达的比较,分析miRNA-449b与胃癌发生及淋巴结转移的关系,为进一步探讨其在胃癌中的作用机制提供依据。方法:收集30例胃癌及癌旁组织标本,提取组织总RNA;茎环法反转录成c DNA;用实时荧光定量PCR方法检测miRNA-449b在组织中的表达水平。结果:相比于癌旁组织,miRNA-449b在胃癌组织中有23例(76.67%)表达下调,7例(23.33%)表达上调,其平均表达水平低于癌旁组织,差异有统计学意义(t=2.395,P=0.023,P<0.05)。miRNA-449b在17例有淋巴结转移的样本中16例表达下调(94.12%),13例无淋巴结转移的样本只有7例表达下调(53.85%),淋巴结转移组与无淋巴结转移组miRNA-449b的下调比例,经卡方检验,差异有统计学意义(P=0.025,P<0.05)。结论:miRNA-449b与胃癌的发生及淋巴结转移相关。     

胃癌原发灶与癌旁正常组织及淋巴结转移灶中Her-2表达的研究

目的 探讨表皮生长因子受体2(Her-2)在胃癌原发灶、癌旁正常组织及淋巴结转移灶中的阳性表达及其与胃癌原发灶间的关系.方法 应用免疫组织化学(PV-9000)方法 检测56例胃癌患者的原发灶、淋巴结转移灶及癌旁正常组织中Her-2蛋白的表达.结果 胃癌癌旁正常组织、原发灶、淋巴结转移灶的Her-2蛋白的表达阳性率分别为3.4%、14.3%、12.5%.在56例病例中,癌旁正常组织、淋巴结转移灶的Her-2表达状态与原发灶的一致率分别为89.3%和94.6%,而在Her-2表达阳性的标本中,癌旁正常组织、淋巴结转移灶的阳性表达结果 与原发灶的一致率分别为100.0%、85.7%.胃癌不同组织中Her-2蛋白表达在不同性别、民族、年龄、分化程度的患者间差异无统计学意义(P＞0.05);结论 胃癌癌旁正常组织和淋巴结转移灶不宜作为临床检测Her-2表达的标本,但在无法获得原发灶标本时,淋巴结转移灶的检测结果 有一定的参考价值.     

胃癌标本和正常胃组织中P53基因及其下游基因METTL9表达研究

目的联合检测P53及其下游基因METTL9（P53 Activated Protein 1）在胃癌中的表达并探讨其作用及二者之间的关系。方法提取正常胃组织和胃癌及癌旁组织中的RNA,采用荧光定量PCR方法对标本中P53基因及其下游基因METTL9的表达及相对定量结果。结果胃癌组织P53蛋白表达明显低于正常组织和癌旁组织,胃癌旁组织P53蛋白表达明显低于正常组织,胃癌组织和癌旁组织METTL9表达明显高于正常组织,以上结果具有显著性差异（P〈0.05）,METTL9与P53呈负相关（P〈0.05）。结论 P53与METTL9在胃癌组织中高表达且与胃癌的分化程度及转移密切相关,METTL9作为P53的下游基因与P53的表达呈负相关性。     

野生型survivin表达的上调促进胃癌对多西他赛的耐药性

目的研究胃癌组织survivin基因各转录变异体表达情况及其与胃癌化疗药物抗药性的关系。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,对39例胃恶性肿瘤患者肿瘤标本中的survivin转录变异体进行定量检测。采用组织培养肿瘤药敏实验(HDRA)技术,检测胃癌组织对多种化疗药物的敏感性,并且分析该敏感性与survivin转录变异体表达的关系。结果在39例胃癌组织标本中,survivin的表达率100%(39/39),survivin2B的表达率795%(31/39),survivin△Ex3的表达率667%(26/39)。胃癌标本对顺铂、丝裂霉素、5氟尿嘧啶、多西他赛(TXT,商品名泰索帝)和双氟脱氧胞苷在体外实验中的敏感率分别是368%(14/38)、312%(10/32)、231%(9/39)、205%(8/39)和125%(4/32)。泰索帝耐药组中患者野生型survivin的表达水平显著高于泰索帝敏感组(P=0021)。结论研究结果提示野生型survivin的表达促进了胃癌患者对泰索帝的抗药性。     

大鼠全脑缺血再灌注损伤及相关分子表达的时间过程

目的：研究大鼠全脑缺血再灌注损伤的时间过程及相关分子的表达变化。方法：在四血管阻断法（4VO）诱导全脑缺血模型上观察脑组织病理改变；同时应用免疫印迹方法检测脑组织NMDA受体亚单位蛋白及VCAM－1水平。结果：全脑缺血再灌注后3－14d海马CA1区产生迟发性神经元死亡。皮层NR1和NR2A亚单位表达分别于再灌注后1和3d显著增加，NR2B亚单位在1－3d也显示较高水平；海马NR1亚单位表达在1d明显下降，以后呈进行性升高，于14d达高峰；NR2A和NR2B表达有相似的趋向并于7d明显增加。海马和皮层VCAM－1分别于再灌注后3和7d表达明显上调。结论：脑缺血再灌注过程中海马神经元数量减少，皮层和海马的NMDA受体亚单位蛋白（NR1、NR2A和NR2B）及粘附分子VCAM－1有不同变化；干预两者的表达可能减轻脑缺血再灌注损伤。     

中国近交系版纳微型猪α1,3-半乳糖基转移酶基因剪接变异体的克隆及其在人类细胞中的表达

目的克隆中国近交系版纳微型猪(Chinese Banna Minipig Inbred Line,BMI)的α1,3-半乳糖基转移酶(α1,3-GT)基因并分离其剪接变异体,构建其真核表达载体并观察BMIα1,3-GT基因在人肺腺癌A549细胞中的表达和功能。方法提取BMI肝组织总RNA,RT-PCR扩增全长的α1,3-GTcDNA,并克隆到pMD18-T载体,挑选15个阳性克隆进行测序,获得GT1、GT2两种基因剪接变异体。将GT1、GT2克隆到pEGFP-N1上构建其真核表达载体,分别命名为pN-GT1、pN-GT2。将pN-GT1、pN-GT2分别转染人肺腺癌A549细胞,RT-PCR检测转染细胞中α1,3-GT mRNA的表达,倒置荧光显微镜和流式细胞术观察转染细胞上α-半乳糖基(α-Gal)的表达,流式细胞术检测人血清中IgM抗体和补体C3与转染细胞上α-Gal的结合。结果在BMI中发现了碱基长度为1116bp和1080bp的两个α1,3-GT基因剪接变异体,后者缺失了外显子5。pN-GT1或pN-GT2转染的A549细胞中,均检测到了α1,3-GT mRNA和α-Gal的表达,转染细胞膜上也检测到IgM和C3的沉积,且两种转染细胞中α-Gal的表达及IgM和C3的沉积没有差异(P>0.05)。结论成功克隆了BMI的α1,3-GT基因,并发现两种α1,3-GT基因剪接变异体。两种基因剪接变异体转染的细胞中,均检测到α1,3-GT mRNA的表达且α1,3-GT能催化合成具有生物学效应的α-Gal,这为BMI用于异种移植中涉及α1,3-GT基因操作的研究提供了基因背景资料。     

胃癌中异常表达剪接因子的生物信息学分析及功能

目的采用生物信息学方法分析胃癌中有表达差异的剪接因子,研究异常表达的富含丝氨酸苏氨酸蛋白家族中的剪接因子10(SRSF10)对胃癌细胞表型的影响。方法通过癌症基因组图谱数据库(TCGA)下载胃癌以及癌旁组织的RNA-seq数据,对其采用生物信息学方法进行分析,最终得到胃癌中差异表达的剪接因子。从中挑选出SRSF10研究其对胃癌发生发展的影响,利用RNA干扰技术构建SRSF10敲低的胃癌细胞,同时采用MTS、Transwell以及细胞划痕方法研究敲低SRSF10后对胃癌细胞表型的影响。结果胃癌中差异表达的剪接因子有48个,其中表达上调35个,表达下调13个。挑选表达上调的剪接因子SRSF10进行进一步研究,发现SRSF10敲低后的胃癌细胞与正常胃癌细胞相比增殖减慢,迁移能力降低,划痕愈合能力下降。结论胃癌患者中存在较多有表达差异的剪接因子,可能在胃癌发生发展中起到重要作用。剪接因子SRSF10在胃癌发生发展中可能发挥重要的作用。     

Effects of ketamine-midazolam anesthesia on the expression of NMDA and AMPA receptor subunit in the peri-infarction of rat brain

BACKGROUND: Activation of N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptors and alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionic acid (AMPA) receptors play an important role in the neurons death induced by ischemia. The mitigating effect of intravenous anesthetics on ischemic neuron injury is related to their influence on NMDA receptors. This study was performed to investigate the effect of ketamine-midazolam anesthesia on the NMDA and AMPA receptor subunits expression in the peri-infarction of ischemic rat brain and explore its potential mechanism of neuroprotection. METHODS: Thirty Sprague Dawley (SD) rats were subjected to permanent middle cerebral artery occlusion under ketamine/atropine (100/0.05 mg/kg) or ketamine-midazolam/atropine (60/50/0.05 mg/kg) intraperitoneal anesthesia (n=15 each). Twenty-four hours after ischemia, five rats in each group were killed by injecting the above dosage of ketamine or ketamine-midazolam intraperitoneally and infarct size was measured. Twenty-four and 72 hours after ischemia, four rats in each group were killed by injecting the above dosage of ketamine or ketamine-midazolam intraperitoneally. After staining the brain tissue slices with toluidine blue, the survived neurons in the peri-infarction were observed. Also, the expression level of NMDA receptors 1 (NR1), NMDA receptors 2A (NR2A), NMDA receptors 2B (NR2B) and AMPA (GluR1 subunit) were determined by grayscale analysis in immunohistochemical stained slices. RESULTS: Compared with ketamine anesthesia, ketamine-midazolam anesthesia produced not only smaller infarct size [(24.1+/-4.6)% vs (38.4+/-4.2)%, P<0.05], but also higher neuron density (24 hours: 846+/-16 vs 756+/-24, P<0.05; 72 hours: 882+/-22 vs 785+/-18, P<0.05) and lower NR2A (24 hours: 123.0+/-4.9 vs 95.0+/-2.5, P<0.05; 72 hours: 77.8+/-4.1 vs 54.2+/-3.9, P<0.05) and NR2B (24 hours: 98.5+/-2.7 vs 76.3+/-2.4, P<0.05; 72 hours: 67.2 +/-7.5 vs 22.2+/-2.6, P<0.05) expression level in the peri-infarction following ischemia. CONCLUSION: The protective effects of ketamine-midazolam anesthesia on ischemic brain injury may related to decreasing NR2A and NR2B expression.     

核受体NR4A1蛋白在大鼠卵泡发育中的定位及其表达规律

目的：通过研究核受体NR4A1蛋白在正常雌性SD大鼠不同卵巢功能周期和不同发育阶段卵泡及黄体细胞中的表达，推测其在卵泡发育中的生物学作用。方法：利用阴道涂片的方法，按不同的卵巢功能周期将实验大鼠24只分为四组，采集不同时期卵巢标本，采用免疫组织化学方法观察卵巢中NR4A1蛋白的定位及其表达情况。结果：NR4A1蛋白主要表达于卵巢卵泡膜细胞和黄体细胞胞质中，且在成熟卵泡卵泡膜细胞的表达量显著高于生长卵泡（P〈0．01）；在新鲜黄体细胞中表达量最高，显著高于动情前期和动情期的生长卵泡和成熟卵泡以及陈旧黄体细胞中的表达水平（P〈0．01）。结论：核受体NR4A1蛋白表达与卵泡的发育、成熟、闭锁、黄体萎缩有明显的相关性。     

听源性惊厥刺激使P77PMC大鼠脑内NR2A/2B基因表达下调

目的：研究遗传性癫疒间易感大鼠P77PMC惊厥后脑内N-甲基- D -门冬氨酸(N-methl- D -asparta te, NMDA)NMDA 受体亚基NR2A 及NR2B mRNA 表达情况。方法：以原位杂交技术研究P77PMC大鼠在听源性惊厥刺激后不同时间脑内不同脑区NR2A及NR2B mRNA表达。结果：惊厥后NR2A mRNA 表达在P77PMC大鼠大脑运动、感觉皮层,海马CA1、CA2、CA3区和齿状回均呈时间依赖性下调。惊厥后30 min NR2A mRNA表达即出现下降,惊厥后2 h mRNA水平降至最低,4～8 h后恢复到基础水平,24 h再次低于基础水平。惊厥后8 h内上述脑区NR2B mRNA表达规律与NR2A基本相同。结论：P77PMC大鼠在发生听源性惊厥后脑内NR2A及NR2B mRNA表达出现下调,这可能影响随后的NR2A、NR2B的蛋白表达,从而导致惊厥后脑内NMDA受体的亚基组成发生改变,并进一步引起NMDA受体的功能变化。     

酪氨酸激酶受体RON蛋白质在胃癌患者中的表达及其临床意义

目的 探讨RON蛋白在人胃癌组织中表达及与预后关系.方法 采用免疫组织化学技术检测胃癌、癌旁和正常胃黏膜组织的RON表达及用免疫印迹技术检测新鲜胃癌、癌旁、伴转移的淋巴结和正常对照组织的RON表达,并对胃癌术后患者进行随访(3～89个月).结果 (1)胃癌组织RON表达率为56.1%(55/98),癌旁组织为25.6%(8/29)(P＜0.01),而正常胃黏膜不表达;(2)RON表达与胃癌细胞浸润深度、有否伴淋巴结转移和临床病理分期有明显关系(均P＜0.05),而与Borrmann分型、组织学类型及是否伴远处转移无明显关系(均P＞0.05);(3)RON阳性表达组与阴性组术后生存率差异无统计学意义(P＞0.05);(4)新鲜胃癌组织,相应癌旁组织和伴转移的淋巴结中RON变异体(RONA165)均呈强表达,而正常胃黏膜和正常淋巴结未见RON变异体表达.结论 RON在胃癌发生,发展和转移过程中扮演重要作用,其对评估胃癌生物学行为有一定参考价值.     

头穴透刺对AD模型大鼠记忆能力及海马区NMDA受体的影响

目的:观察头穴透刺对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)模型大鼠记忆能力及其海马区N-甲基-D天冬氨酸(N-methy-D-aspartate,NMDA)受体表达的影响,探讨头穴透刺改善AD模型大鼠学习记忆能力的机制。方法:采用链脲佐菌素侧脑室注射建立AD模型大鼠模型,随机分为空白组、假手术组、模型组、针刺组、西药组。采用Morris水迷宫实验观察大鼠的学习记忆能力,Western blot检测大鼠海马NR2A、NR2B蛋白的表达。结果:大鼠记忆能力比较:造模后,与空白组、假手术组比较,模型组、针刺组、西药组逃避潜伏期明显延长、跨越平台次数明显减少(P<0.05)。治疗后,与模型组、空白组及假手术组比较,针刺组、西药组逃避潜伏期缩短、跨越平台次数增加(P<0.05)。大鼠海马NR2A、NR2B蛋白相对表达量比较:与空白组、假手术组比较,模型组NR2A相对表达量升高明显(P<0.05),NR2B表达降低明显(P<0.05);与模型组比较,针刺组、西药组NR2A相对表达量明显降低(P<0.05),NR2B相对表达量明显升高(P<0.05),且针刺组NR2A的相对表达量低于西药组(P<0.05),NR2B的相对表达量高于西药组(P<0.05)。结论:头穴透刺能够减少AD模型大鼠海马NR2A的表达,提高NR2B的表达,从而改善AD模型大鼠的记忆能力。     

NMDA受体NR2B亚单位特异性单克隆抗体的制备及人胚脑皮层NR2B蛋白表达的研究

目的：制备NMDA受体NR2B亚单位特异性单克隆抗体，并对人胚脑皮层NR2B的表达作免疫印迹分析。方法：制备NR2BC末端934～1457氨基酸与GST的融合蛋白，并以此作为免疫原，经常规杂交瘤技术制备单克隆抗体。用该抗体对不同周龄的人胚脑皮层的NR2B蛋白作免疫印迹分析。结果：本研究制备的NR2B单克隆抗体能特异地识别180kDa的NR2B蛋白，并首次发现人胚脑皮层NR2B亚单位蛋白的表达。结论：成功制备了NR2B特异的单克隆抗体；12周龄的人胚脑皮层组织已有NR2B的表达，表达量随胎龄增大而增高。