石杉碱甲对乙酰胆碱酯酶活性选择性抑制作用及促智作用

目的研究石杉碱甲对乙酰胆碱酯酶活性选择性抑制作用及其对东莨菪碱所致的小鼠记忆障碍模型的改善作用.方法用Ellman法分别测石杉碱甲及对照药物他克林抑制小鼠10%脑皮质匀浆上清和血清(119)中胆碱酯酶活性的IC50.用东莨菪碱(2 mg/kg,ip)造成小鼠记忆障碍模型,观察石杉碱甲对模型小鼠上台潜伏期和上台前游泳距离的影响.结果石杉碱甲抑制乙酰胆碱酯酶活性和丁酰胆碱酯酶活性的IC50分别为0.039±0.004 μmol/L和大于10 μmol/L,而他克林抑制这两种酶的IC50分别为1.84±0.09 μmol/L和0.52±0.03μmol/L.石杉碱甲(0.2 mg/kg,ip)组小鼠的潜伏期明显短于东莨菪碱组,两组潜伏期分别为40.9±18.5 s和75.3±19.4 s,上台前路程分别为8.9±2.8m和12.5±5.0m.结论石杉碱甲对乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用具有明显的选择性,且其选择性强于他克林.石杉碱甲对东莨菪碱所致的小鼠记忆障碍有明显的改善作用.     

尼卡地平对脆性X综合征模型小鼠的治疗初探

目的 探讨尼卡地平对脆性X综合征动物模型(FMR1基因敲除小鼠)的治疗效果及行为学评价.方法 成年野生型和FMR1基因敲除鼠(各8只)随机分为尼卡地平治疗组、生理盐水对照组(各4只).使用Morris水迷宫实验评价脆性X综合征模型小鼠尼卡地平治疗30 d后对学习记忆的影响,并应用旷场行为实验和孔板探究实验研究治疗前后精神情绪与自主行为的改变.结果 Morris水迷宫实验表明,与野生型小鼠比较,FMR1基因敲除小鼠找到迷宫平台潜伏时间延长,通过平台区域的次数下降;旷场行为实验与孔板探究实验结果显示,模型小鼠探索性行为、自主活动明显增加.尼卡地平治疗后,与模型小鼠对照组比较,模型小鼠治疗组Morris水迷宫实验未见明显改变,而自发活动显著减少(P＜0.05).结论 FMR1基因敲除小鼠存在空间学习记忆能力障碍,自主活动亢进,尼卡地平对学习记忆的改善无明显作用,但可减少其自主活动的高兴奋性,具有一定的治疗效果.     

新型四氢呋喃衍生物PMS777促智作用的量效关系

目的研究新型四氢呋喃衍生物PMS777对东莨菪碱所致的小鼠记忆障碍模型的改善作用及其量效关系.方法成年雄性小鼠利用Morris水迷宫装置训练4天后,用东莨菪碱(2 mg/kg,i.p)造成小鼠记忆障碍模型,观察不同剂量的PMS777(i.p)对小鼠上台潜伏期和上台前游泳距离的影响.结果 PMS777(0.5-2.5 mg/kg)预处理组小鼠的上台潜伏期及游泳距离明显缩短(与模型组比较,P<0.05或P<0.01).PMS777(0.25-5 mg/kg)对记忆的作用呈现明显的倒"U型"效应;在0.25-1 mg/kg的剂量范围内,PMS777的促智作用随剂量增高而增加.结论 PMS777在一定剂量范围内能显著地改善东莨菪碱所致的小鼠记忆障碍,提示有望成为潜在治疗阿尔茨海默病的先导化合物.     

慢性间断性缺氧对帕金森病模型小鼠认知功能及海马神经元结构的影响

目的 探讨慢性间断性缺氧对帕金森病模型小鼠认知功能、海马神经元结构及突触素表达水平的影响.方法 采用百草枯腹腔注射联合慢性间断性缺氧制备帕金森病伴睡眠障碍小鼠模型,通过电迷宫和跳台实验评价其学习和记忆能力,HE和Nissl染色观察海马神经元形态及数目变化、免疫组织化学染色检测海马神经元突触素表达水平、电子显微镜观察海马神经元超微结构.结果 与对照组比较,百草枯组、慢性间断性缺氧组及其联合组小鼠学习和记忆成绩显著下降(均P＜ 0.05),电迷宫和跳台实验总反应时间延长、错误反应次数增加;Nissl染色阳性神经元数目减少、突触素表达水平升高.光学显微镜和电子显微镜观察显示,百草桔组、慢性间断性缺氧组及其联合组小鼠海马神经元均有不同程度损害,但以百草枯联合慢性间断性缺氧组最为明显(均P=0.000).结论 慢性间断性缺氧可加重百草枯所致帕金森病模型小鼠的学习和记忆障碍,可能与海马神经元结构损害、突触功能减弱有关.     

抑肝散对记忆障碍模型小鼠学习记忆能力的影响

目的观察抑肝散对血管性痴呆的核心症状（学习记忆能力减退）的改善作用。方法以东莨菪碱、亚硝酸钠、乙醇分别造成不同类型的小鼠记忆障碍模型，用跳台法观察抑肝散对这些记忆障碍模型小鼠的作用。结果抑肝散明显对抗东莨菪碱、亚硝酸钠和30％乙醇等化学物质诱导的小鼠学习记忆障碍，对学习记忆的三个基本神经活动过程均有明显改善作用。结论抑肝散对不同记忆障碍模型小鼠学习记忆能力具有不同程度的改善作用。     

bFGF对血管性痴呆大鼠海马乙酰胆碱含量及胆碱酯酶活性的影响

目的皮下注射碱性成纤维细胞生长因子于血管性痴呆大鼠,研究用药前后大鼠乙酰胆碱含量及胆碱酯酶活性的变化。方法制作VD大鼠模型,随机取用VD大鼠模型12只,分治疗组6只,痴呆组6只。另外,取假手术组6只。皮下注射碱性成纤维细胞生长因子于治疗组中的血管性痴呆大鼠。治疗5周后,以Morris水迷宫定位航行试验和空间探索试验来检测大鼠的学习记忆能力,观察乙酰胆碱含量及胆碱酯酶活性的变化。结果治疗组大鼠学习记忆能力较痴呆组明显提高,治疗组乙酰胆碱含量较痴呆组明显提高,胆碱酯酶活性明显降低。结论皮下注射碱性成纤维细胞生长因子能明显提高血管性痴呆大鼠乙酰胆碱含量,降低胆碱酯酶活性。     

碱性成纤维细胞生长因子改善血管性痴呆小鼠学习记忆功能：与清除氧自由基有关？

背景：血管性痴呆（Vascular Dementia,VD）是由一系列脑血管因素导致脑组织损害引起的痴呆综合征,患者表现为学习、记忆等功能障碍。bFGF具有神经保护功能。 目的: 研究拟血管性痴呆模型小鼠学习记忆功能的改变及bFGF的治疗作用。 设计、时间及地点: 随机对照动物实验,于2008-03/12在北华大学医学院完成。 材料: 昆明种小鼠60只,体重(30.0±3.12g),♀♂兼用,随机分成4组：正常组、假手术组、模型组、bFGF治疗组（bFGF组）。 方法：采用清醒小鼠反复脑缺血再灌注方法建立VD动物模型。假手术组只分离双侧颈总动脉,不阻断血流。正常组不做任何处理。bFGF组于手术后首次即刻给药,正常组、假手术组、模型组给予等体积生理盐水腹腔注射。 主要观察指标: 应用Morris水迷宫观察bFGF对血管性痴呆小鼠学习记忆的改善作用;尼氏染色观察病理形态学变化;生化分析方法检测脑组织中SOD、MDA的含量;应用Annexin V-F1TC /PI双标记流式细胞术检测海马神经元的凋亡情况。 结果: 与正常组比较,水迷宫实验显示模型组小鼠学习记忆功能明显下降,表现为潜伏期延长、穿越有效区的时间缩短、穿越平台的次数减少（P<0.01,P<0.05）。生化指标显示模型小鼠脑组织SOD的活性下降,MDA 的含量增加（P<0.01）;流式细胞术检测结果显示海马神经元凋亡率显著增加（P<0.01）。与模型组比较,bFGF能够改善小鼠的学习记忆能力,增加SOD活力降低MDA含量（P<0.01）,降低海马神经元的凋亡率（P<0.01）。 结论:（1）清醒小鼠反复脑缺血再灌注引起的学习记忆障碍的动物模型具有较好的仿真VD的特点。（2）bFGF对VD小鼠的学习记忆功能障碍具有一定的改善作用。其机制可能与改善自由基代谢和脂质过氧化反应抑制神经细胞凋亡有关。     

影响小鼠Morris水迷宫成绩的因素探讨及改进措施

Morris水迷宫自英国心理学家Richard Morris于1981年首次使用以来,已成为一种研究与海马功能直接相关的空间学习记忆机制的标准模式,能较准确地反映动物的空间参考记忆能力[1].Morris水迷宫能为考察实验动物空间认知能力提供较多的评价指标,全面记录其认知加工过程,客观地反映其认知水平.但是,Morris水迷宫的实施过程中还有很多影响其准确性和可靠性的因素存在,如实验动物的选择、实验设计、实验的实施过程等.因此,笔者现就影响小鼠Morris水迷宫成绩的若干因素(Morris水迷宫自身因素及小鼠主观因素等)进行综述,以期为实验工作者们减少误差提供一些帮助.     

盐酸多奈哌齐对血管性痴呆小鼠海马神经细胞神经元蛋白激酶C表达变化的影响

目的探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆（Vascular dementia,VD）小鼠海马神经元蛋白激酶C（protein kinase C,PKC）变化的影响。方法将3月龄雄性昆明小鼠随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐治疗组。采用双侧颈总动脉结扎,反复缺血-再灌注制备VD模型,药物治疗30d。术后第29、30天,分别进行跳台试验和水迷宫试验观察各组小鼠行为学改变。采用免疫组织化学法观察各组海马CA1区神经元PKC表达的变化。结果药物治疗组小鼠学习、记忆成绩较模型组明显改善（P〈0.05）。模型组PKC免疫反应阳性神经元平均光密度值为（0.2730±0.0709）,与假手术组（0.3206±0.0642）和药物组（0.3036±0.0688）相比均显著降低（P〈0.05）,而药物组与假手术组间无明显差别（P〉0.05）。结论反复缺血-再灌注导致VD小鼠海马神经元PKC表达减少;多奈哌齐通过抑制中枢神经系统中乙酰胆碱的降解,可增加VD小鼠海马神经元PKC表达,从而改善VD小鼠学习、记忆能力,推测此也是该药物改善VD小鼠学习、记忆障碍的一个重要环节。     

用Morris全自动水迷宫评价Sprage Dawley鼠全脑反复缺血后学习记忆功能研究

目的　评价大鼠脑缺血后的学习、记忆功能及其与海马组织学变化的关系。方法　用Morris全自动新式水迷宫试验方法对反复脑缺血再灌注大鼠进行学习获得试验、记忆保持试验 ,光镜观察海马组织学变化 ,并计算海马神经元密度。结果　与对照组比较 ,反复脑缺血大鼠学习记忆成绩显著下降 ,潜伏期显著延长 ,游水迷宫形呈周边型 ;缺血后海马CA1、CA4 和PM区神经元大量丧失。结论　大鼠反复脑缺血出现严重的学习、记忆障碍。认知功能改变与海马神经元缺血性损害有关。用Morris全自动水迷宫评价缺血所致学习、记忆障碍简便、准确、真实。