柔红霉素诱导急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡的作用因素研究

目的探讨柔红霉素（DNR）致急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡的作用因素。方法不同浓度（0、0．05、0．1、0．5、1μg／mL）DNR及N-乙酰半胱氨酸（NAC）预处理组作用于Jurkat细胞株,采用MTT法检测细胞活力,Hoechst／PI双染法观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞活性氧（ROS）浓度及凋亡,RT—PCR法检测bax、survivin、bcl-2和bcl—xl基因的表达。结果DNR可明显抑制Jurkat细胞株的活性,0、0．05、0．1、0．5、1μg／mL的DNR及NAC预处理组分别作用于Jurkat细胞株24h后,ROS水平分别为（7．98±0．55）％、（8．88±0．86）％、（9．46±0．98）％、（17．48±2．98）％、（24．46±2．43）％和（11．59±1．29）％,加入NAC后ROS生成受到抑制（P〈0．01）;细胞凋亡率分别为（11．41±1．44）％、（34．96±3．32）％、（45．58±3．12）％、（84．19±2．65）％、（87．93±1．74）％和（80．47±0．63）％,NAC预处理组与0．5μg／mL DNR组比较,细胞凋亡率变化无统计学意义（P〉0．05）。NAC抑制bax基因mRNA表达,上调survivin、bcl-2和bcl—xl表达（均P〈0．05）。结论DNR能够诱导Jurkat细胞株凋亡;ROS参与了DNR诱导的Jurkat细胞株凋亡;凋亡相关基因bax、bcl-2、bcl-xl及survivin能够与ROS相互作用,调节DNR诱导的Jurkat细胞株凋亡。     

CAHB诱导成人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡机制的研究

目的 探讨二乙酰己二胺（diacetyl hexamethylene diamine,CAHB）诱导成人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡的机制,为CAHB应用于临床提供理论依据。方法 采用流式细胞仪分析CAHB处理后Jurkat细胞AnnexinⅤ+/PI-细胞率,观察应用胱天蛋白酶（caspase）-9抑制剂Z-LEHD-FMK处理后AnnexinⅤ+/PI-细胞率的变化;蛋白质印迹法观察凋亡相关蛋白caspase-8、caspase-9、caspase-3的表达变化。结果 CAHB诱导后Jurkat细胞体积缩小、胞膜皱缩、染色质浓染、核固缩或碎裂等,可见典型凋亡小体。CAHB通过激活caspase-9、caspase-3诱导Jurkat细胞发生凋亡,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性,caspase-9抑制剂可在一定程度上抑制CAHB的凋亡诱导作用。结论 CAHB诱导Jurkat细胞凋亡与激活caspase-9及caspase-3有关。     

姬松茸诱导急性淋巴细胞性白血病细胞凋亡的研究

目的探讨姬松茸对急性淋巴细胞性白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法运用MTT法和彗星电泳法检测姬松茸对急性淋巴细胞性白血病细胞的增殖抑制及促凋亡作用,应用Western blot法检测WT1蛋白的表达情况。结果姬松茸在0.625~5 g/L浓度范围内作用72 h以及2.5 g/L姬松茸在作用24,48,72 h后对急性淋巴细胞性白血病细胞有增殖抑制作用,这种作用呈时间-剂量依赖关系。姬松茸在作用浓度为0.625,1.25,2.5,5 g/L时,急性淋巴细胞性白血病细胞凋亡率分别为7.9%,28.4%,44.3%,60.6%,与阴性对照组(1%)差异有显著性;2.5 g/L姬松茸在作用24,48,72 h后,急性淋巴细胞性白血病细胞凋亡率分别为3.91%,18.72%,40.58%,48,72 h作用时间组与阴性对照组(1%)差异有显著性。2.5 g/L姬松茸作用72 h后的细胞,WT1蛋白的表达较对照组显著减少。结论姬松茸具有对急性淋巴细胞性白血病细胞增殖抑制及促凋亡作用,WT1在此过程中可能发挥着重要的作用。     

地西他滨诱导人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡机制的研究

目的研究地西他滨诱导人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡的机制。方法常规体外培养人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株,取对数生长期的细胞传代24 h后加入不同浓度(0.5、1.0、5.0及10.0μmol/L)地西他滨处理,分别继续培养24、48、72 h后,用CCK-8法测定细胞增殖活性;倒置显微镜下观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测地西他滨作用后人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株的凋亡率;应用透射电镜观察人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞发生凋亡的形态学特征;实时荧光定量Real time-PCR法检测凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2在mRNA水平表达变化的情况。结果地西他滨可以抑制Jurkat细胞增殖,并且呈浓度和时间依赖性(P0.05)。倒置显微镜观察到地西他滨作用后细胞形态发生了显著改变;流式细胞术检测细胞凋亡的结果表明地西他滨能够诱导人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡并且呈浓度依赖性(P0.05);透射电镜观察结果证明地西他滨可以诱导人急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞出现凋亡性细胞死亡,5.0μmol/L地西他滨作用Jurkat细胞72 h后出现大量凋亡小体。另外,Real time-PCR实验研究结果发现地西他滨能够上调促凋亡基因Caspase-3的表达,下调凋亡抑制基因Bcl-2的表达。结论地西他滨能通过上调促凋亡基因Caspase-3的表达和下调凋亡抑制基因Bcl-2的表达诱导细胞凋亡。     

柔红霉素诱导Jurkat细胞凋亡的实验研究

目的探讨柔红霉素在体外诱导Jurkat细胞发生凋亡的规律.方法应用DNR体外作用于Jurkat细胞,研究DNR诱导Jurkat 细胞凋亡的规律,Annexin V/PI双标法流式细胞仪检测Jurkat细胞凋亡率,PI染色流式细胞仪检测细胞周期分布.结果 0.1～2.0μmol/L浓度范围DNR作用一定时间后,Jurkat细胞的凋亡率随药物浓度的增加与作用时间的延长而升高.DNR作用后Jurkat细胞G2/M期比例明显增加.结论一定浓度的DNR在体外可诱导Jurkat细胞凋亡,在一定的剂量范围内,呈现剂量-效应、时间-效应关系,其机制可能与DNR抑制细胞有丝分裂有关.     

急性淋巴细胞白血病患者外周血凋亡细胞观察

本文采用瑞氏-姬姆萨染色法对50例急性淋巴细胞白血病缓解期病人及20例治疗前患者外周血中的凋亡淋巴细胞进行了观察。患者经化疗药物诱导治疗缓解后，外周血涂片中均可见到凋亡淋巴细胞；凋亡细胞的阳性率为4％～15％，平均7．63±4．82％。治疗前患者外周血仅1例查出凋亡淋巴细胞，且阳性率极低。与治疗前相比缓解期病人外周血凋亡细胞的出现率及阳性率均显著增加（P＜0．001）。表明恶性淋巴细胞化疗后部分细胞发生凋亡，凋亡细胞的出现可能与临床症状的缓解有关。文中还对凋亡淋巴细胞出现的凋亡小体、细胞膜、细胞浆和细胞核的各种形态学表现进行了讨论。     

柔红霉素细胞毒作用对急性淋巴细胞白血病细胞内活性氧水平的影响

目的 探讨柔红霉素(DNR)细胞毒作用对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞内活性氧(ROS)水平的影响.方法 用Ficoll液从11例ALL患儿骨髓中分离出ALL细胞,用双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)作为ROS捕获剂,经流式细胞术检测细胞的固有ROS水平以及DNR 50、100、500 ng/mL诱导24 h后的ROS水平,每次以U937细胞的ROS值作对照.采用MTT法测定各组诱导48 h后的细胞相对活力,流式细胞术和Hoechst 33342-PI染色法观察细胞凋亡.结果 11例患儿的ALL细胞内固有ROS水平与DNR IC50呈负相关(r=-0.700,P=0.016).ALL患儿细胞内固有ROS水平存在统计学差异(P<0.05).对照组固有ROS水平为0.260±0.118,DNR 50、100、500 ng/mL诱导后细胞内ROS水平为0.291±0.132、0.285±0.125和0.257±0.099,DNR500 ng/mL组明显低于DNR 100 ng/mL组(P<0.05).各浓度DNR诱导后均见典型的凋亡细胞.结论 ALL患儿细胞内固有ROS水平存在差异,与DNR细胞毒性正相关.DNR诱导ALL原代细胞后出现ROS水平改变,可能参与细胞的凋亡.     

柔红霉素细胞毒作用对急性淋巴细胞白血病细胞内活性氧水平的影响

目的 探讨柔红霉素(DNR)细胞毒作用对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞内活性氧(ROS)水平的影响.方法 用Ficoll液从11例ALL患儿骨髓中分离出ALL细胞,用双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)作为ROS捕获剂,经流式细胞术检测细胞的固有ROS水平以及DNR 50、100、500 ng/mL诱导24 h后的ROS水平,每次以U937细胞的ROS值作对照.采用MTT法测定各组诱导48 h后的细胞相对活力,流式细胞术和Hoechst 33342-PI染色法观察细胞凋亡.结果 11例患儿的ALL细胞内固有ROS水平与DNR IC50呈负相关(r=-0.700,P=0.016).ALL患儿细胞内固有ROS水平存在统计学差异(P<0.05).对照组固有ROS水平为0.260±0.118,DNR 50、100、500 ng/mL诱导后细胞内ROS水平为0.291±0.132、0.285±0.125和0.257±0.099,DNR500 ng/mL组明显低于DNR 100 ng/mL组(P<0.05).各浓度DNR诱导后均见典型的凋亡细胞.结论 ALL患儿细胞内固有ROS水平存在差异,与DNR细胞毒性正相关.DNR诱导ALL原代细胞后出现ROS水平改变,可能参与细胞的凋亡.     

先天性急性淋巴细胞性白血病1例

1临床资料 患女,32天,因皮疹7天,低热3天入院。患儿系第2胎第2产,足月顺产出生,出生体重3450g,生后情况良好。其母孕3个月时曾患“感冒”。否认有放射线、毒物接触史。父母非近亲结婚,家族中否认本病病史。     

白藜芦醇诱导急性T淋巴母细胞白血病Jurkat细胞凋亡

目的：探讨白藜芦醇抑制急性T淋巴母细胞白血病Jurkat细胞增殖、引发S期阻滞和诱导凋亡的作用。方法：白藜芦醇体外处理培养的Jurkat细胞后,采用MTT法测定细胞活力,Wrigh-Giemsa染色、Hoechest 33258/PI荧光染色和透射电镜观察Jurkat细胞的形态学改变;流式细胞术分析细胞周期。结果：白藜芦醇0.2 mmol·L^-1处理组的抑制Jurkat细胞增殖率达64.01%,并具有剂量和时间依赖性。白藜芦醇处理细胞24 h后可见凋亡形态学改变,Hoechest 33258/PI染色显示白藜芦醇处理组细胞部分细胞核呈亮蓝色,随培养时间延长,亮蓝色荧光染色细胞数量逐渐增多。Wrigh-Giemsa染色和透射电镜观察发现部分细胞体积缩小、染色质浓缩及边集等现象的出现。流式细胞术检测表明,0.05 mmol·L^-1白黎芦醇处理48 h组62.57％的细胞被阻滞于细胞周期S期,亚二倍体细胞数量12.01%,未加药对照组细胞亚二倍体细胞数量2.05%。结论：白藜芦醇可以抑制Jurkat细胞的增殖,引起细胞周期的S期阻滞,并诱导其发生凋亡     

Vindesine induces rhabdomyolysis in patients with acute lymphoblastic leukemia

Rhabdomyolysis is a syndrome which involves myoglobin and other intracellular proteins and electrolytes that occurs from breakdown of skeletal muscleand leak into the circulation. The clinical symptoms of rhabdomyolysis include myalgia, tenderness on palpation, weakness, brown urine, fever, myoglobinuria, electrolyte imbalance, and acute renal failure. Rhabdomyolysis can be severe enough to be life threatening. The causes of rhabdomyolysis include alcohol, electrolyte imbalance （potassium, phosphorus, and magnesium depletion）, viral myositis, trauma, connective tissue diseases, drug reaction, toxication, exercise, metabolic diseases, seizures, and hereditary enzyme deficiencies. The exact mechanisms underlying rhabdomyolysis are not fully understood, but it is clear that muscle damage can be caused by direct muscle injury or metabolic inequalities between energy production and energy consumption.     

急性淋巴细胞白血病合并糖尿病临床分析

目的探讨急性淋巴细胞白血病合并糖尿病的发病机制及防治措施.方法对我院收治的及文献报道的急性淋巴细胞白血病合并糖尿病的病例进行总结分析.结果急性淋巴细胞白血病合并糖尿病发病机制多样,处理措施各异.结论了解急性淋巴细胞白血病合并糖尿病的发病基础,有利于对疾病的诊治.     

急性淋巴细胞白血病血清乳酸脱氢酶同功酶的观察研究

本文对50例正常人和20例急淋患者血清乳酸脱氢酶(LDH)和同功酶进行了观察研究,发现:急淋患者血清LDH较正常人明显增高,和就诊时WBC多少无关,而和免疫学类型直接相关,T—ALL的血清LDH总酶活性明显增高,伴有LDH3和LDH4增高的同功酶改变,和N—ALL及正常人相比,差异非常显著。T—ALL血清LDH明显增高说明其糖酵解增强,可能与T—ALL浸润明显及增殖迅速有关。T—ALL具有和胸腺细胞相似的同功酶类型,反映T—ALL起源于胸腺,具有胸腺细胞的特征。动态观察急淋患者血清LDH有助于判断其免疫学类型和预后。     

急性淋巴细胞白血病免疫表型的研究及其临床意义

目的 研究急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)免疫表型的特点及其临床意义.方法 应用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测33例初诊ALL患者的免疫表型.结果 ①33例ALL分为B-ALL(75.76％),T-ALL(12.12％)和T/B-ALL(12.12％).②B-ALL中CD19表达率最高,占100％;T-ALL中CD7与cCD3表达率均为100％;CD20在成人及儿童组B-ALL表达率分别为23.53％、62.5％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);CD22在成人及儿童组B-ALL表达率分别为29.41％、62.5％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).③33例ALL中髓系抗原表达阳性率为60.61％,髓系抗原阳性与阴性患者完全缓解率之间的比较无统计学差异(P＞0.05).④33例ALL中CD34阳性表达率为66.67％,CD34阳性与阴性患者CR率之间的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CD19、cCD79a分别是B-ALL中高敏感性抗原和高特异性抗原,CD7、cCD3分别是T-ALL中高敏感性抗原和高特异性抗原;儿童组CD20和CD22表达率明显高于成人组;髓系抗原和CD34的表达与CR率无相关性.     

急性淋巴白血病细胞的DNA含量分析

本文利用细胞分光光度法结合放射自显影技术,对处于G_0/G_1期的急性淋巴白血病细胞DNA含量进行了分析,发现15例患者中,13例为超二倍体,3例含二个倍体值不同的白血病细胞干系。结果表明超二倍体及不均一性是本病的特征。     

髓系抗原在成人急性淋巴细胞白血病中的表达及其意义

目的 探讨髓系分化抗原在急性淋巴细胞白血病（ALL）中的表达及其临床意义。方法 采用碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶法和流式细胞仪检测68例初治成人ALL的免疫表型，并观察髓系抗原不同表达的临床特征。结果 68例ALL中有10例除表达淋系抗原外尚有髓系抗原表达（My^ ALL）（阳性率14.7％）。My^ ALL组皮肤粘膜出血严重、肝脾肿大明显、白细胞总数增高显著，完全缓解（CR）率较My^-ALL低。结论 具有髓系抗原表达的My^ ALL CR率较低，临床出血及白血病负荷较高，具有独特的临床生物学特征。     

急性淋巴细胞白血病患儿社交焦虑水平及影响因素

目的：探究急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿社交焦虑水平及其影响因素,为临床护理提供理论指导。方法：采用便利抽样法,选取2018年12月至2019年9月在温州医科大学附属第二医院育英儿童医院与浙江大学医学院附属儿童医院住院的104例ALL患儿为研究对象,应用儿童社交焦虑量表、儿童生活质量量表进行调查。运用非参数检验、多元线性回归分析以及Spearman法分析数据。结果：ALL患儿社交焦虑发生率为48.08%,社交焦虑总分为7（2,10）。多元线性回归分析结果显示,诱导缓解期、13～18岁、屏幕时间长是ALL患儿社交焦虑的危险因素,民主型教养方式是社交焦虑的保护因素（均P＜0.05）;社交焦虑水平与生活质量呈负相关（P＜0.05）。结论：ALL患儿社交焦虑发生率较高,对生活质量有负性影响;应重点关注诱导缓解期、13～18岁患儿的社交焦虑情况,减少患儿的屏幕时间,提倡民主型教养方式。     

成人急性B淋巴细胞白血病免疫表型分析

目的研究成人急性B淋巴细胞白血病(B cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)的免疫表型特点。方法采用四色流式细胞术CD45/SSC双参数散点图设门检测145例B-ALL患者免疫表型,并分析白血病相关免疫表型(leukemia associated immunophenotypes,LAIP)。结果所有检测病例中,表达率最高的淋系抗原为CD19、HLA-DR和CD79a,其次为CD34、CD10和CD20;髓系抗原CD13、CD33和CD15常伴随表达,CD117与T系抗原CD7和CD56很少表达。成人不同年龄组中Ⅱ型(CD10+/CD34+型)患者比例最高。B-ALL患者Ⅰ型和Ⅱ型的LAIP检出率较高,分别为100%、90.1%,Ⅲ型和Ⅳ型患者LAIP检出率明显低于Ⅰ型和Ⅱ型,分别为72.7%、63.6%。不同年龄组中,B-ALL各亚型之间及与总体之间检出率差异无统计学意义(P>0.05)。结论流式细胞术分析B-ALL免疫表型对白血病的正确诊断及其微小残留病(minimal residual disease,MRD)检测有重要意义。