DHPG和BMI诱导的癫痫样放电模型的建立及比较

目的在离体大鼠海马脑片上,通过激活Ⅰ型代谢型谷氨酸受体（mGluR）或阻断γ-氨基丁酸（GABA）受体,诱导癫痫样放电。方法将离体大鼠海马脑片暴露于Ⅰ型mGluR特异性激动剂对羟基苯甘氨酸（DHPG）或GABA．受体阻断剂荷包牡丹碱（BMI）,利用全细胞记录模式记录海马CA3区域单个锥体细胞的电活动。结果暴露于DHPG或BMI中的海马脑片CA3区域的锥体细胞均产生癫痫样放电,且两者的放电频率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在离体情况下,破坏神经兴奋性和抑制性系统的平衡可以诱导产生癫痫样放电活动。     

马桑内酯在大鼠离体海马脑片上引起的癫痫样放电活动

采用大鼠离体海马脑片技术,建立了马桑内酯(Coriaria lactone,CL)引起的海马CA 1区锥体细胞癫痫样放电活动模型,并初步探讨了CL的致痫作用机理,可能与直接影响锥体细胞固有爆发放电能力有关。     

DHPG诱导的大鼠海马脑片癫癎样放电模型基因表达谱分析

目的 研究代谢型谷氨酸受体-Ⅰ(mGluR-Ⅰ)激动剂D-对羟基苯甘氨酸(DHPG)诱导的大鼠离体海马脑片癫样放电模型的基因表达谱.方法 以含50 μmol DHPG的人工脑脊液持续灌流大鼠离体海马脑片,诱导建立癫样放电模型(DHPG组,n=3).采用cDNA微阵列分析技术获得DHPG组的基因表达谱,与对照组(n=3)比较筛选出差异表达基因,并进行富集功能分类.结果 与对照组比较,DHPG组样本模型分别筛选出的上调基因206个,下调基因489个;其中差异表达达1.5倍的上调基因67个,下调基因86个;2.0倍以上的上调基因6个,0.5倍以下的下调基因25个.富集功能分类结果显示,差异表达基因功能涉及蛋白结合(19个)、分子功能、钙离子结合和核苷酸结合等多方面.结论 癫样放电及mGluR-Ⅰ激动剂的作用均涉及多种基因,是一复杂的调控过程.实验为进一步研究提供了依据.     

介导大鼠海马CA1区癫痫样活动的离子型谷氨酸受体的变化

目的 观察离子型谷氨酸受体在大鼠海马CA1区癫痫样活动中的变化,为进一步探讨癫痫的发生机制提供依据.方法 正常大鼠海马脑片灌流促离子型γ-氨基丁酸受体(GABAA受体)拮抗剂bicuculline (30 μmol/L) 引起癫痫样活动并于右侧海马CA3区注射海人藻酸(KA)建立颞叶癫痫(TLE)大鼠模型,应用离体脑片...     

L—型Ca^2＋通道在马桑内酯致痫中的作用

以马桑内酯大鼠癫痫样行为发作、脑电图改变和离体海马脑片CA1区锥体细胞痫样放电为指标，观察L-型电压依赖性Ca2 通过阻断剂硝苯吡啶对其致痫作用的影响。结果发现：实验组与对照组相比较，大鼠癫痫发作推迟，程度减轻，脑电痫波出现潜伏期延长，波幅下降。离体海马脑片CA1区锥体细胞痫样放电被抑制，EPSP降低（P＜0．05）。结果提示，马桑内酯可能通过激活L-型电压依赖性Ca2 通道，使神经细胞内游离Ca2 增多而致痫。     

串刺激诱发大鼠海马脑片痫样放电模型的建立及谷氨酸对它的影响

作者用串脉冲(60Hz,波宽100μS,串长2S,2～3倍引起最大反应的刺激强度)刺激大鼠离体海马脑片CA3区辐射层,记录CA3区锥体细胞层产生的场电位,在国内首次成功地建立了串刺激诱发的暴发放电(STIB)模型——一种有价值的新型离体海马脑片痫样放电模型;并观察了L-谷氨酸(Glu)对该模型的影响;讨论了STIB的产生和Glu对其抑制的有关机理。     

谷氨酸NMDA受体在马桑内酯致痫中的作用

采用马桑内酯大鼠癫痫模型和大鼠高体海马脑片CA1区锥体细胞癌样放电模型，观瘵了非竞争性NMDA受体结抗剂氯胶团对马桑内酯致癌作用的影响．结果发现：实验组大鼠的癫痫发作推迟，程度减轻；痫样脑电图出现的潜伏期延长，波幅下降（P＜0．05）；马桑内酯所致高体海马脑片CA1；区锥体细胞的痫样PS波被抑制：EPSPs幅度下降（P＜0．05）．结果提示：马桑内酯致痫的作用之一可能通过激活交触后膜上NMDA受体，使神经元兴奋性突触传递增强而产生痫样放电．     

DHPG诱导的大鼠海马脑片癫癎样放电模型基因表达谱分析

目的 研究代谢型谷氨酸受体-Ⅰ（mGluR-Ⅰ）激动剂D-对羟基苯甘氨酸（DHPG）诱导的大鼠离体海马脑片癫癎样放电模型的基因表达谱。方法 以含50 μmol DHPG的人工脑脊液持续灌流大鼠离体海马脑片,诱导建立癫癎样放电模型（DHPG组,n=3）。采用cDNA微阵列分析技术获得DHPG组的基因表达谱,与对照组（n=3）比较筛选出差异表达基因,并进行富集功能分类。结果 与对照组比较,DHPG组样本模型分别筛选出的上调基因206个,下调基因489个;其中差异表达达1.5倍的上调基因67个,下调基因86个;2.0倍以上的上调基因6个,0.5倍以下的下调基因25个。富集功能分类结果显示,差异表达基因功能涉及蛋白结合（19个）、分子功能、钙离子结合和核苷酸结合等多方面。结论 癫癎样放电及mGluR-Ⅰ激动剂的作用均涉及多种基因,是一复杂的调控过程。实验为进一步研究提供了依据。     

桂枝对致痫大鼠海马CA1区诱发场电位的影响

目的 探讨桂枝对癫痫模型海马脑片诱发场电位的影响。方法 以毛果芸碱致痫大鼠为实验对象，用细胞外玻璃微电极记录方法，观察桂枝对癫痫模型离体海马脑片CA1区锥体细胞诱发群峰电位（population spike,PS）的影响。结果 桂枝提取液使致痫大鼠海马脑片PS幅度平均降低28.73%，平均16.8min恢复。结论 桂枝能降低致痫大鼠海马脑片CA1区顺向诱发PS幅度，提示桂枝对中枢神经系统的突触传递过程有明显的抑制效应。     

红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作时海马mGluR5 mRNA表达变化的动态观察

目的 探讨红藻氨酸（KA,10mg.kg^-1)诱导大鼠癫痫发作时海马代谢型谷氨酸受体5亚型（mGluR5)mRNA表达变化的病理特征。方法 采用同位素S^35 dATP标记寡核苷酸探针原位杂交法检测大鼠癫痫发作前后海马mGluR5mRNA的表达变化。通过图像分析系统进行定量处理。同时观察大鼠行为学及脑电变化。结果 KA注射后大鼠均出现严重边缘性惊厥,脑电图表现为阵发性癫痫样放电,正常大鼠海马中有丰富的mGluR5 mRNA表达,以齿状回和CA1区表达较高,KA注射后海马各区mGLuR5 mRNA表达呈时间依赖性下调,CA1,CA3,CA4区表达在2h呈现出显著性差异（P＜0．05）,齿状回区表达在1h即有显著性差异（P＜0．01）,至72h各区表达均至最低。结论 mGluR5在癫痫发作后表达下降可能有助于限制神经元网络的异常兴奋性,使细胞发挥自身保护性作用。     

缺氧预适应对小鼠海马脑片LTP的影响

目的:观测缺氧预适应对小鼠海马脑片LTP的影响.方法:小鼠缺氧0次(H0)、1次(H1)、4次(H4)后取海马组织,制备成离体海马脑片,刺激海马CA3区Schaffer侧枝,在CA1锥体细胞层记录各组LTP.结果:H1组海马CA1区LTP诱出率最低,H0、H4组诱出率均高于H1组.H0和H4组小鼠海马脑片在高频强直串刺激后PS增幅的百分率和fEPSP斜率增幅的百分比变化均显著高于H1组(P＜0.01).H0组与H4组差异无统计学意义(P＞0.05).结论:缺氧抑制LTP的诱导,缺氧预适应可以恢复对LTP的诱导,突触可塑性的变化可能参与缺氧预适应小鼠脑保护.     

Effects of fluid percussion injury on the neuronal activity in the hippocampal CA1 area and the dentate gyrus of the rat

The effect of fluid percussion injury (FPI) on the propagation of neuronal activity in the rat hippocampus was investigated by using optical and extracellular recording techniques. Under anesthesia with pentobarbital sodium, a moderate impact (1.5-2.0 atm) was applied to the parietal cerebral cortex of the left hemisphere at -3 mm (i.e. caudal) from bregma, 3.5 mm lateral from the sagittal suture. Systemic oxygenation remained normal during the anesthesia. The rats recovered fully from anesthesia within 30-60 min, and their subsequent behavior, such as feeding and grooming, was normal. After a survival period of 1 week from the FPI or sham-operation, neuronal activities were recorded from the hippocampal CA1 region and the dentate gyrus (DG) in either coronal or horizontal brain slice preparations. In sham-operated rats, there was no significant difference in the neuronal activity between contralateral and ipsilateral hippocampal CA1 areas and DG. In coronal slices (-5.6(-)-6.4 mm from bregma), moderate impact (1.5-2.0 atm) markedly depressed the neuronal activity of the ipsilateral (impact side) CA1 region and of the DG directly under the cerebral cortex that received the impact. In horizontal slices, on the other hand, the neuronal activity was markedly enhanced in the ipsilateral hippocampal CA1 region and the DG adjacent the temporal lobe of the cerebral cortex. Field potentials were recorded from the dentate granule cell layer and the hippocampal CA1 pyramidal cell layer in either coronal or horizontal slice. Moderate impact strongly depressed the field potential in the ipsilateral CA1 region and DG directly under the injured cerebral cortex. In horizontal slices, the field potential was followed by multiple population spikes in ipsilateral hippocampal CA1 and the DG neurons. Bicuculline (15 microM) increased the number of spikes of the field potential even after the brain injury. These results suggest that FPI depresses the neuronal activity in the ipsilateral hippocampus directly under the injured parietal cortex, while it enhances the neuronal activity of the ipsilateral hippocampus adjacent to the temporal cortex. The facilitation of neuronal activity following FPI is not due to disinhibition resulting from depression of GABAergic interneuron activity.     

血管性痴呆大鼠认知障碍的NMDAR机制研究

目的：观察四血管阻断（4VO）大鼠海观NMDA受体NMDAR的变化规律，探讨其在血管性痴呆（VD）形成中的作用机制，方法：改良的Pulsinelli 4VO法建立大鼠血管性痴呆模型，电脑控制的穿梭箱系统和离体海马脑片诱导的CA1区LTP检测大鼠学习记忆，原位杂交方法检测大鼠海马NMDAR1 mRNA的表达。结果：VD组大鼠的主动回避反应在2周时较对照组显著下降（P＜0．05），4周和2月时更加明显（P＜0．01），海马脑片长时程增强（LTP）的诱导出现明显障碍；VD组2周时CA1和CA3区NMDAR1 mRNA表达较对照组增高，DG区无明显改变；4周和2月时海马各区表达均减低。结论：大鼠海马区NMDAR与学习记忆有关，在脑缺血的早期表达增高介导了兴奋毒性作用；但在,缺血后期，NMDAR mRNA表达减低可能与学习记忆损害有关，为进一步进行NMDAR拮抗剂和激动剂治疗VD的研究提供了实验依据。     

自噬对血管性痴呆大鼠海马CA1区突触素及突触后膜致密物质95表达的影响

目的 探讨自噬对血管性痴呆大鼠海马CA1区突触素(synaptophysin,Syn)及突触后膜致密物质95(postsynaptic density material 95,PSD-95)表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠96只,随机分为假手术组(Sham 组)、血管性痴呆模型组(VD组)、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤预处理组(3-MA组)和自噬激动剂雷帕霉素预处理组(Rap组).每组又分为模型制备成功后1、2、4、8周4个亚组,每个亚组6只大鼠.应用改良的Pulsinelli四血管阻断法制备血管性痴呆模型,采用蛋白质印迹法检测大鼠海马CA1区微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Syn、PSD-95蛋白表达.结果 (1)与Sham组比较,VD组各时间点LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加,Syn、PSD-95蛋白表达均减少,差异有统计学意义(P均＜0.01);与VD组比较,3-MA组各时间点LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值减少,Syn、PSD-95蛋白表达增加(P＜0.05或P＜0.01),Rap组各时间点LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加,Syn、PSD-95蛋白表达降低(P均＜0.01).(2)自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与Syn、PSD-95蛋白表达呈负相关(P均＜0.01).结论 自噬对血管性痴呆大鼠海马CA1区突触可塑性相关蛋白Syn、PSD-95表达具有抑制作用,抑制自噬有利于血管性痴呆大鼠海马CA1区神经突触重塑.     

碱性成纤维细胞生长因子对癫痫大鼠海马神经元Caspase-3表达的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对癫痫大鼠海马神经元的神经保护作用及可能的机制。方法戊四氮诱发大鼠癫痫发作后,腹腔分别注射生理盐水(B组)和bFGF(C组),与空白对照组(A组)按一定时段断头取脑,进行HE染色和Caspase-3免疫组织化学染色。观察各组大鼠海马神经元的损伤以及Caspase-3的表达。结果HE染色:B组神经元形态散乱,大量神经元凋亡、坏死;C组可见散在的神经元凋亡,变性坏死少见。Caspase-3免疫组化染色:B组6 h可见海马CA1、CA3和齿状回门区部分细胞的胞浆和核内有棕黄色沉淀物,24 h阳性细胞数及着色深度达到高峰,持续至72 h,120h后表达减弱。C组阳性细胞数及染色度与B组有相似的时间依赖性,但总体表达较B组弱,组间各时间点中12～72 h的差异均有统计学意义(P<0.01),6 h及120 h的差异则无统计学意义(P>0.05)。结论bFGF能显著减轻癫痫所致的大鼠海马神经元损伤。     

调督安神胶囊对PTX致痫大鼠海马神经元超微结构的影响

目的：观察调督安神胶囊对PTX致痫大鼠海马神经元超微结构的影响。方法：建立PTX癫痫大鼠模型。随机分为模型对照组，中药低、高剂量组及西药组。分别给予双蒸水和调督安神胶囊、西药灌胃。采用透射电镜法观察海马CA3区神经元超微结构的变化。结果：PTX致痫大鼠海马神经元水肿、变性，损伤明显。经过中药治疗后的大鼠海马神经元损伤较轻，尤以中药高剂量纽海马神经元损伤最轻。结论：调督安神胶囊可减轻海马神经元的损伤，进而起到神经保护作用，这可能是其改善癫痫大鼠学习和记忆障碍的机制之一。     

红藻氨酸对海马CAl区突触传递的作用

OBJECTIVE: To investigate the effect of activated kainate receptor on both the excitatory and inhibitory synaptic transmission in the neurons in the hippocampal CA1 region. METHOD: Blind whole-cell voltage-clamp recordings were performed on the CA1 pyramidal cells in adult rat hippocampal slices to examine and analyze the effect of bath-applied kainate (10 micromol/L) on CA1 afferent fiber-evoked excitatory postsynaptic currents (EPSCs) and inhibitory postsynaptic currents (IPSCs), respectively. RESULTS: Activation of kainate receptor significantly depressed both IPSCs (P <0.01) and EPSCs (P <0.01) in neurons in the hippocampus CA1 region. CONCLUSION: Activation of kainate receptors directly inhibit excitatory and inhibitory input in those neurons, which contributes to the development of epilepsy in the hippocampus by affecting the dynamic balance of the hippocampal neurons.     

大鼠海马锥体细胞甘氨酸受体的药理学特性

目的：探讨生后早期大鼠海马CA1区神经元上功能性甘氨酸受体的分布及其药理学特性。方法：选用出生 后11~13 d大鼠的海马脑片,采用膜片钳全细胞记录技术,观察外源性甘氨酸诱导的电流反应。结果：甘氨酸可诱导 出士的宁敏感的甘氨酸受体电流,其作用于甘氨酸受体的EC50为123.23 μmol/L,Hill系数为1.24;印防己毒素可部分阻 断该电流。结论：生后早期大鼠海马CA1区锥体神经元上存在着功能性士的宁敏感的甘氨酸受体,部分甘氨酸受体 的为αβ异聚体。