人细小病毒B19

细小病毒 B19(Human parvovirus B19. HPVB19)是由Cossart等 (1974年 )从编号为 B19无症状健康供血员血液中偶然发现。属细小病毒科细小病毒属 ,是该属病毒中唯一能感染人类的病毒 ;也是动物病毒中以对人类具有致病性的最小的单链线状 DNA病毒。是近十余年来发现的一个重要病源体 ,与人类多种疾病密切相关 [1 ] 。1　病毒学B19能独立地自我复制 ,其基因组相对较小 ,长约 5 .5 Kb。电镜下 B19颗粒直径平均为 2 3nm,呈对称二十面体 ,分子含量为 (1.5 5～ 1.97)× 10 6 。 B19是一种热稳定病毒 ,在 6 0℃能存活 12 h[2 ]。B19有两种结构…     

细小病毒B19诊断芯片探针的制备

目的 制备细小病毒B19诊断芯片探针。方法 利用Primer Premier5．0软件针对细小病毒B19基因保守区域设计PCR引物，纯化扩增产物，克隆鉴定。结果 序列分析表明，扩增片段均为细小病毒B19特异基因。结论 利用PCR扩增产物可制备细小病毒B19诊断芯片探针。     

自然流产组织中人细小病毒B19的检测

自然流产组织中人细小病毒Ｂ１９的检测许东亮张国成陈星琪王荣平钱新宏（第四军医大学西京医院儿科病毒室西安７１００３３）关键词套式聚合酶链反应人细小病毒Ｂ１９自然流产中图号Ｒ７１５．１０引言人细小病毒Ｂ１９（ｈｕｍａｎｐａｒｖｏｖｉｒｕｓＢ１９，ＨＰＶＢ...     

我国人细小病毒B19VP1和VP2部分基因序列测定及变异分析

目的 探讨B19病毒中国株的基因变异。方法 采用长片段聚合酶链反应技术，从中国再障患儿血清中扩增HPVB19-XA2株的VP1独特区基因和VP1/VP2基因片段，进行核苷酸序列分析。结果 B19-XA2株的VP1独特区和VP1/VP2连接区基因大部分区域核苷酸序列被测定，其与国外Au株基因核苷酸序列比较，有4个核苷酸突变，并引起编码的2个氨基酸改变。结论 我国B19病毒VP1基因独特区和VP1/VP2连接区基因序列与Au株相比有变异。     

细小病毒B19与肝炎的关系

<正> B19病毒是在1975年筛查健康献血员血液中乙型肝炎病毒(HBV)时偶尔发现的。它的全称应为“人类细小病毒B19”。B19可引起许多临床表现,因感染个体的年龄和免疫状态而不同,从无症状感染到严重者甚至可危及生命均可发生。B19所引起的疾病种类较多,在儿童中可引起传染性红斑;在成年妇女可引起短暂的多关节炎或关节痛;孕期感染B19可引起自然流产和胎儿水肿或死产;在潜在红细胞缺陷如镰刀型细胞贫血病人,B19可引起严重的再生障碍危象;持续细小病毒感染可导致慢性骨髓障碍,在免疫缺陷病人导致慢性贫血。B19病毒与肝炎的关系报道还很少,现综述如下。     

应用PCR快速制备细小病毒B19诊断芯片探针

目的 制备细小病毒诊断芯片探针。方法 利用Primer Premier5．0针对细小病毒B19基因保守区域设计PCR引物，将PCR产物克隆pMD-18T载体。结果 序列分析显示，PCR产物均为细小病毒B19特异保守基因。结论 利用PCR扩增产物制备诊断芯片探针是一种简便有效的方法。     

人细小病毒B19中国株VP1蛋白独特区基因片段序列变异分析

目的 研究B19病毒中国株独特区VP1的基因变异。方法 采用聚合酶链反应技术（PCR）从两侧中国再生障碍性贫血患儿血清中扩增VP1独特区基因片段，将其与PUC19连接，酶切鉴定筛选阳性克隆后测序分析。结果 从一个患儿的血清中扩增出约480bp目的片段，并成功构建PUC19－VP1质粒，测序结果显示，与国外已发表的Wi株VP1独特区序列相比，有2处核苷酸发生改变，并可致所编码的氨基酸变化。结论 中国B19病毒VP1独特区有变异。     

国人细小病毒B19感染相关疾病谱

目的：探讨我国人细小病毒Ｂ１９感染引起的相关疾病谱。方法：用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术及原位杂交技术对６６例先天性心脏病（ＣＨＤ）心肌组织标本及１０８例血小板减少性紫癜（ＴＰ）、４７例急性再生障碍性贫血（ＡＡＡ）、５例传染性红斑（ＥＩ）及４０例缺铁性贫血（ＩＤＡ）患儿的外周血、骨髓标本进行了Ｂ１９－ＤＮＡ检测,并随机对其中２３例Ｂ１９－ＤＮＡ阳性标本作巨细胞病毒（ＣＭＶ）、单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）、     

聚合酶链反应检测人细小病毒B19-DNA

作者业已通过检测血清中特异性IgG,首先在我国证明存在人细小病毒B19感染[王绮云,等.第四军医大学学报 1991;12(2):134～136]。为探索敏感的临床诊断技术,研究B 19病毒的致病性,作者建立了聚合酶链反应检测人细小病毒B 19-DNA方法,并用于临床标本检测。1 材料和方法1.1 PCR引物和试剂 引物选自编码 B19病毒     

人细小病毒B19实验诊断技术研究

目的建立一种快速、准确、特异和定量检测人细小病毒B19的实验检测方法。方法以B19病毒NS1基因为靶序列,设计并合成引物和Taqman探针,优化引物与探针比例,调整镁离子浓度,建立对细小病毒B19进行荧光定量检测的实验方法。同时利用荧光定量PCR技术检测本院收集的490例孕妇血清。结果引物与Taqman探针比例为1∶4,镁离子浓度为2.5mmol/L时,反应的本底最低,荧光信号最强。该方法的灵敏度为1.0×101拷贝,有较好的特异性和重复性。检测的490例临床孕妇血清标本,人细小病毒B19DNA阳性为44例,感染率为8.9%(44/490)。结论使用Taqman探针技术的荧光定量聚合酶链反应,能够准确快速定量检测血清中的人细小病毒B19。     

新诊断儿童免疫性血小板减少症与人细小病毒B19感染的相关性研究

目的 明确人细小病毒B19(human parvovirus B19,B19)感染对儿童新诊断免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia, ITP)的影响。 方法 选取2011年1月~2013年12月间416例首次住院并确诊为新诊断ITP患儿为疾病组;随机选取无血小板减少及其他血液系统疾病的普通呼吸道感染住院患儿130例作为对照组。ITP患儿及对照组儿童按年龄段分为<1岁组(n=187)、1~3岁组(n=127)、3~7岁组(n=71)、7~14岁组(n=31)。观察各年龄段患儿B19感染率,疾病组中B19感染阳性及阴性ITP患儿经过相同治疗后的预后情况。 结果 疾病组中B19感染率较对照组各年龄段B19感染率为高,差异均无统计学意义(P均>0.05)。ITP患儿均未接受针对B19的相关抗病毒治疗,而针对血小板减少经丙种球蛋白和(或)激素治疗后,疾病组与对照组患儿PLT缓解率差异无统计学意义,与各年龄段B19阴性的ITP患儿治疗后缓解率比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。 结论 B19感染可能不是新诊断ITP患儿发病的一个主要致病因素;是否治疗B19并不影响儿童急性ITP的治疗效果,因此B19感染的新诊断ITP患儿无需同时接受B19抗病毒的相关治疗。     

人细小病毒B19感染与早期自然流产关系的探讨

目的探讨人细小病毒B19（HPVB19）感染与早期自然流产的关系。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测52例早期自然流产患者（研究组）和45例无异常人工流产孕妇（对照组）血清中HPVB19-IgM和IgG。结果研究组血中B19V-IgM阳性率为23.08%,而对照组阳性率为6.67%,2组间具有显著性差异（P〈0.05）;研究组近期HPVB19感染的概率是对照组的4.20倍（95%CI 1.10～15.99）。研究组B19V-IgG阳性率为32.69%,对照组为28.89%,2组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 HPVB19感染可能是导致早期自然流产的原因之一。     

类风湿关节炎患者B19病毒感染及细胞因子变化

目的：了解国内类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA)，幼年类风湿关节炎（juvenile rheumatoid arthritis,JRA)患人细小病毒B19（B19）的感染情况及其细胞因子（CK）IL－6，IL－8，sIL-2R和TNF－α水平的变化。方法：采用巢式PCR技术和丧心ELISA法对23例RA及30例JRA患血清（BS），4例JRA，6例骨性关节炎（OA）和9例半月板损伤（MT）关节液（SF）进行B19－DNA和IL－6，IL－8，sIL-2R,TNF-α等CK水平的检测。结果：（1）23例RA，30例JRA患BS B19－DNA均12例阳性，阳性率分别为52．1％和40．0％，与对照组比较差异显（P＜0．05）；（2＿4例JRA患SF中，3例B19－DNA阳性，6例OA和9例MT患均阴性；（3）23例RA，30例JRA患BS中，IL－6,SIL-2R水平与对照组相差非常显（P＜0．05）；（4）23例RA，30例JRA患B19－DNA阳性组与阴性组4种CK比较均无显差异（P＞0．05）；（5）SF标本中，4例JRA患的sIL-2R与其他两组有显差异（P＜0．01）。结果：（1）国内RA，JRA患有较高B19感染率，提示B19感染与RA，JRA密切相关；（2）IL－6 ,sIL-2R与RA，JRA活动性有关，是类风湿活动性的主要指标；（3）sIL-2R可能是参与JRA关节局部病理损伤最主要的CK之一；（4）BS中CK水平的变化与是否感染B19无关，即B19并非是导致RA，JRA的唯一因素。     

人类微小病毒B19感染的最新进展

人类微小病毒B19主要侵袭人体骨髓造血系统,损害人体多种脏器,是儿科出疹性疾病——传染性红斑的病原。还可使慢性溶血患者发生再障危象、关节病、血管性紫癜和雷诺肢端综合征等。在免疫缺陷患者,可造成持续感染。妊娠期受到病毒侵害,引发宫内感染,可导致流产、胎儿水肿和死胎。此外,还与多种造血系统异常(中性粒细胞减少症和血小板减少症等)有关。     

骨髓增生异常综合征患儿骨髓人细小病毒B19感染对巨核系祖细胞增殖的影响祆

目的研究骨髓增生异常综合征（MDS）患儿人细小病毒B19（HPVB19）骨髓感染及对巨核系祖细胞增殖的影响。方法对61例MDS患儿骨髓进行HPVB19DNA检测，体外培养巨核细胞集落形成单位祖细胞（CFU-MK）。结果MDS患儿HPVB19骨髓感染组CFU-MK形成较非感染组及对照组明显下降（均P〈0．05）。血小板计数MDSHPVB19骨髓感染组低于非感染组，差异有显著性意义（P〈0．05）。结论HPVB19感染骨髓导致CFU—MK形成减少可能是MDS患儿外周血小板减少的原因之一。     

HBsAg和人微小病毒B19 VP2联合抗原的克隆及表达

目的构建乙肝表面抗原-人微小病毒B19VP2融合蛋白的原核表达系统，并检测其表达蛋白的抗原反应性。方法用PCR扩增乙肝表面抗原（HBsAg）基因及B19病毒VP2基因，分别重组入pGEM-T，构建出pGEM-T-HBs及pGEM-T-VP2并测序分析；测序证实序列正确后，将pGEM-T-HBs中的HBs基因克隆入pQE30表达载体中，得到pQE30-HBs；再将pGEM-T-VP2中的VP2基因克隆入pQE30-HBs中，得到pQE30-HBs-VP2后转化至BL21（DE3）宿主菌中，并以IPTG诱导表达融合蛋白，以Western-blot鉴定。结果pQF30-HBs-VP2可在大肠杆菌BL21（DE3）中高效表达，Western-blot检测结果显示所表达融合蛋白均可与抗-HBs和抗-VP2结合反应。结论成功构建pQE30-HBs-VP2原核表达载体，且其表达的重组蛋白具有良好的HBsAs和VP2蛋白的双重抗原的反应原性。从而建立了表达B19和HBV的联合抗原表达系统，同时给HBV和B19病毒重组联合疫苗的研制和复合诊断试剂提供了抗原参考。