胆汁分离携带Panton valentin杀白细胞基因金黄色葡萄球菌流行情况及SCCmec分型

目的 调查消化内科患者胆汁分离携带Panton valentin杀白细胞基因的金黄色葡萄球菌流行情况及SCCmec分型。方法 收集浙江大学医学院附属第一医院2008年7月~2013年7月消化内科患者815名分离的金黄色葡萄球菌75株,采用VITEK 2 COMPACT全自动微生物分析仪分析其药敏结果,采用PCR检测PVL基因,采用多重PCR对所有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec分型。结果 消化内科金黄色葡萄球菌的感染率为9.2%,25例为社区获得性感染,其PVL阳性菌株16例,占64.0%;50例为医院获得性感染,其中PVL阳性菌株11例,占22%。SCC分型显示以SCCmec Ⅲ型为主,占43.3%(13/30),SCCmec Ⅱ型2株,SCCmec Ⅳ型10株,未检出SCCmecⅠ型和Ⅴ型。16株PVL基因阳性MRSA菌株中SCCmec Ⅲ型有9株(56.25%),Ⅳ型有6株(37.5%),另外有1株未成功分型。结论 消化内科胆汁分离的金黄色葡萄球菌PVL基因携带及分子流行情况显示主要以SCCmec Ⅲ型为主,携带PVL基因率较高,存在区域性流行的特点。     

医院烧伤病房MRSA耐药现状及PVL基因检测研究

目的了解宁夏医科大学总医院医院烧伤病房临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药现状及杀白细胞素(PVL)基因携带情况。方法对宁夏医科大学总医院2012年10月至2013年8月烧伤病房患者送检的125株MRSA菌利用药敏纸片法(K-B法)进行20种常用抗菌药物敏感性检测;应用多聚酶链反应(PCR)进行PVL基因检测。结果 125株MRSA菌对青霉素及头孢类抗菌药物呈现100%耐药;万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、替加环素耐药率均为0;125株MRSA菌有21株携带PVL基因,其携带PVL基因菌株的检出率为16.8%。结论宁夏医科大学总医院烧伤病房的MRSA检出率高,携带PVL基因的MRSA菌对9种抗菌药物耐药率高于PVL阴性MRSA菌株,未发现对糖肽类抗菌药物耐药情况。     

医院获得性感染中出现携带SCCmecⅣ/Ⅴ的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 研究某院临床分离的医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)的葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)分型及分子流行病学特征.方法 收集中南大学湘雅医院2012年1月~2012年12月临床分离的71株HA-MRSA,采用多重PCR进行SCCmec分型,PCR检测PVL毒素基因,并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株间的同源性.结果 71株HA-MRSA以SCCmecⅢ型为主,占69.0%(49/71),其次为SCCmecⅣ型、SCCmecⅤ型和SCCmecⅡ型,分别占14.1%(10/71)、4.2%(3/71)和4.2%(3/71),另有6株(8.5%)菌株未能分型.HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA感染者年龄显著低于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA感染者,携带PVL基因阳性率显著高于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA感染者,而两者入院至检出菌株的时间及住院天数均未见明显差异.HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA对左旋氧氟沙星、环丙沙星、利福平、庆大霉素、四环素等的耐药率均显著低于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA(P<0.05).13株HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA菌株在55%的相似度水平形成一个大的组群.按照≥85%的相似度,这些菌株共形成3个PFGE簇以及4个单一菌株的PFGE型.结论 在国内首次发现携带SCCmecⅤ型的HA-MRSA菌株,HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA已有在医疗机构传播的趋势,并成为医院内感染的重要来源.     

院内外环境分离金黄色葡萄球菌的耐药性及毒素基因检测

目的检测医院及环境样中金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）耐药基因及毒素基因,了解其分布情况。方法采用多重聚合酶链反应（multiplex polymeras chain reaction,PCR）技术分别检测耐药基因mecA、femA与毒素基因TSST、PVL。结果 83株金黄色葡萄球菌,仅3株（3.61%）菌检出mecA基因,22株菌（26.50%）检出femA基因,15株菌（18.07%）同时检出mecA与femA基因。医院样本检出12株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）,3株甲氧西林耐药凝固酶阴性的金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant and coagulasenegative Staphylococcus aureus,MRCNS）。83株分离自医院及环境样本SA,2株分离自咽拭子的样本检出TSST基因,检出率4.54%（2/44）;1株分离自血液的样本检出PVL基因,检出率2.27%（1/44）,其余菌株未检出毒素基因。结论院内样本中,部分菌株携带mecA基因,环境样本未发现携带mecA菌株,两者存在差异。83株SA菌,毒素基因携带率较低。检测耐药、毒素基因携带率,为临床治疗及院内感染控制,食物中毒溯源提供依据。     

老年病房耐甲氧西林金黄色葡萄球菌葡萄球菌染色体mec基因盒基因型和杀白细胞素基因的检测及特点

目的 了解复旦大学附属华东医院老年科临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)葡萄染色体mec基因盒(SCCmec)的分布和杀白细胞毒素(PVL)基因的携带状况.方法 收集复旦大学附属华东医院老年科病房2011年2-7月从临床标本中分离的不重复MRSA共57株.运用多重聚合酶链反应检测金黄色葡萄球菌16S rRNA基因、PVL基因和mecA基因,并同时检测SCCmec的基因型及亚型.采用琼脂稀释法进行13种药物的药物敏感试验.结果 57株MRSA中,SCCmec Ⅰ型1株(1.8％),SCCmec Ⅰ A型5株(8.7％),SCCmecⅡ型30株(52.6％),SCCmecⅢ型15株(26.3％),SCCmecⅢA型2株(3.5％),4株(7.0％)未能分型.57株MRSA中,PVL基因均为阴性.MRSA菌株最敏感的药物为万古霉素和利奈唑胺(敏感率均为100.0％),其次为呋喃妥因和甲氧苄啶-磺胺甲(哑)唑(98.2％、96.5％).结论 复旦大学附属华东医院老年科临床分离的MRSA呈多重耐药,其SCCmec型别主要以SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型为主,未发现PVL基因阳性菌株.     

广州地区儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子特征研究

目的了解广州地区儿童患者分离的社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)临床分离株的分子特征。方法收集2009年—2014年我院分离获得的65株CA-MRSA临床分离株,PCR法检测杀白细胞素(PVL)基因阳性菌株,多位点基因序列类型(MLST)测定MRSA菌株的序列类型,多重PCR法对MRSA菌株进行葡萄球菌mec盒式染色体(SCCmec)分型。结果 65株CA-MRSA分离株中PVL基因阳性31株,阳性率47.69%;MLST分型表明以ST5933.84%(22/65)及ST8823.07%(15/65)为主;SCCmec分型中发现3种类型,分别为SCCmecⅡ32.30%(21/65)、SCCmecⅣ49.23%(32/65)及SCCmecⅤ18.46%(12/65),未存在未能分型菌株。结论广州地区儿童患者分离的CA-MRSA临床分离株的PVL基因阳性率相对较高,SCCmec IV型、V型可形成小范围内的流行,其基因表型存在多种ST分型。     

多重PCR法检测金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因

目的：了解金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）耐药基因及所携带致病毒素基因PVL与TSST-1的特点。方法：应用多重PCR法检测mecA基因、TSST-1基因及Py￡基因。结果：84株金 葡球经多重PCR法对其mecA基因进行检测．检出率为58．3％（49／84）。PVL基因阳性菌株的分离率为23．8％（20／84）,州￡阳性的MRSA为13株（13／49,26．5％）,PyL阳性的MSSA为7株（7／35,20．O％）,差异无统计学意义（P〉0．05）;未检出TSST-1基因。结论：金葡菌的耐药性呈上升趋势,且金葡菌可产生多种毒素,在分离金葡菌的同时,应加强其耐药基因及毒素基因的检测。     

NF-κB通路在TNF-α诱导胃癌细胞凋亡中的作用

 目的探讨肿瘤坏死因子α（TNF_-α）对胃癌细胞凋亡的诱导作用，以及核因子_kB（NF_-kB）通路活性对TNF_-α诱导凋亡的
影响。方法不同浓度TNF_-α处理人胃癌细胞株SGC7901 细胞24 h，采用MTT 方法检测细胞活力；流式细胞术碘化丙锭（PI）
染色分析细胞凋亡；Western blot 检测蛋白表达；采用Lipofectamine 2000 试剂行瞬时转染，实验组转染突变型NF_-kB抑制蛋白
（I_kB）的cDNA，对照组转染空载体。结果100，1 000 及10 000 U/ml的TNF_-α作用SGC7901 细胞24 h后，细胞存活率分别为
（99.2±0.6）%，（92.0±2.7）%和（97.9±2.2）%。TNF-α可快速活化NF_-kB通路。以转染突变型I_kB 的cDNA 阻断NF_-kB通路活化，
可明显增强细胞对TNF_-α诱导凋亡的敏感性。结论NF_-kB 通路参与人胃癌细胞对TNF_-α诱导凋亡的耐药，抑制NF_-kB 通路
可明显增强细胞对TNF_-α的敏感性，逆转耐药。     

安徽省某三甲医院铜绿假单胞菌分布及耐药特点研究

目的 探讨安徽某三甲医院临床分离的铜绿假单胞菌（PA）的临床分布及耐药相关特点。方法 收集安徽省某三甲医院2015年8月至2017年9月临床分离的1 857株无重复PA的时间、科室以及菌株标本来源分布特点,并进行药敏分析,对耐碳青酶烯类抗菌药物的PA进行耐药相关基因的扩增。结果 ICU和呼吸内科为PA分离最多的科室,标本来源最多为痰液1 261株（67.91%）。药敏结果提示,PA对头孢吡肟和阿米卡星的敏感率较高,分别达到了66.72%和78.08%。PA对亚胺培南的耐药菌株数为607株（耐药率32.69%）,对这607株耐药菌株检出携带bla_TEM34株、bla_PER41株、bla_VEB7株、bla_OXA63株。检出携带VIM基因121株,IMP基因125株,SPM基因65株。其中有98株携带2种耐药基因。测出孔蛋白基因缺失417株。结论 PA感染部位以呼吸道最为多见,破损皮肤、血液和泌尿系感染亦较多。PA耐药机制比较复杂多样,外膜蛋白缺失为耐碳青霉烯类PA的主要耐药机制。     

ICU中MRSA耐药基因检测及其PFGE分型

目的对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株进行分子分型,探讨ICU中MRSA医院感染的特点和流行规律。方法采用表型筛选和PCR扩增mecA基因方法鉴定MRSA菌株,脉冲场凝胶电泳方法(PFGE)进行分子分型。结果12株金黄色葡萄球菌表型筛选为MRSA,MRSA产生A型、B型、C型和D型4种耐药表型,优势耐药模式是A型(75.0%),MRSA对苯唑西林、阿莫西林/克拉维酸和氨苄西林/舒巴坦等10种抗生素产生100%耐药性,11株MRSA携带mecA基因,携带率为91.7%,PFGE指纹图谱分两型,分别为R1型和R2型,11株MRSA为R1型(91.7%),R1型各株间相似度为100%。结论ICU可存在MRSA爆发流行,MRSA产生多重耐药性(MDR),MRSA携带mecA基因可表现为MDR,PFGE分型是理想的分子流行病学溯源手段。     

三株社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因分型研究

目的 了解西南地区社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)流行株的基因特征.方法 用葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)多重PCR分型技术、葡萄球菌A蛋白基因(spa)分型技术和多位点测序分型(MLST)技术对3株分离自临床的CA-MRSA(s35301、s29635、s19165)进行基因分型,并检测其杀白细胞毒素(PVL)基因.结果 3株MRSA的mecA基因(147 bp)全部为阳性扩增,还同时扩增出750 bp左右的片段,该产物经测序后证实为SCCmecⅣa型.spa分型:s35301、s29635为t437,s19165为t008.MIJST分型:s35301、s29635为ST59型,s19165为ST8型.s19165、s35301 PVL基因扩增阳性,s29635 PVL基因扩增阴性.结论 西南地区分离到CA-MRSA ST8-t008克隆株及ST59-t437克隆株.应注意控制CA-MRSA感染及传播.     

Methicillin-resistant Staphylococcus aureus in the Australian community: an evolving epidemic

OBJECTIVE: To describe antimicrobial resistance and molecular epidemiology of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) isolated in community settings in Australia. DESIGN AND SETTING: Survey of S. aureus isolates collected prospectively Australia-wide between July 2004 and February 2005; results were compared with those of similar surveys conducted in 2000 and 2002. Main outcome measures: Up to 100 consecutive, unique clinical isolates of S. aureus from outpatient settings were collected at each of 22 teaching hospital and five private laboratories from cities in all Australian states and territories. They were characterised by antimicrobial susceptibilities (by agar dilution methods), coagulase gene typing, pulsed-field gel electrophoresis, multilocus sequence typing, SCCmec typing and polymerase chain reaction tests for Panton-Valentine leukocidin (PVL) gene. RESULTS: 2652 S. aureus isolates were collected, of which 395 (14.9%) were MRSA. The number of community-associated MRSA (CA-MRSA) isolates rose from 4.7% (118/2498) of S. aureus isolates in 2000 to 7.3% (194/2652) in 2004 (P = 0.001). Of the three major CA-MRSA strains, WA-1 constituted 45/257 (18%) of MRSA in 2000 and 64/395 (16%) in 2004 (P = 0.89), while the Queensland (QLD) strain increased from 13/257 (5%) to 58/395 (15%) (P = 0.0004), and the south-west Pacific (SWP) strain decreased from 33/257 (13%) to 26/395 (7%) (P = 0.01). PVL genes were detected in 90/195 (46%) of CA-MRSA strains, including 5/64 (8%) of WA-1, 56/58 (97%) of QLD, and 25/26 (96%) of SWP strains. Among health care-associated MRSA strains, all AUS-2 and AUS-3 isolates were multidrug-resistant, and UK EMRSA-15 isolates were resistant to ciprofloxacin and erythromycin (50%) or to ciprofloxacin alone (44%). Almost all (98%) of CA-MRSA strains were non-multiresistant. CONCLUSIONS: Community-onset MRSA continues to spread throughout Australia. The hypervirulence determinant PVL is often found in two of the most common CA-MRSA strains. The rapid changes in prevalence emphasise the importance of ongoing surveillance.     

无菌部位金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学特征

目的:了解无菌部位分离的金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药性及分子流行病学特征,为临床预防和控制其感染以及合理使用抗菌药物提供实验依据。方法:收集2011年8月至2012年6月某三甲医院无菌部位分离的非重复金黄色葡萄球菌50株。VITEK-2微生物分析系统进行菌株鉴定,PCR检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)杀白细胞毒素(PVL)基因,多重PCR对MRSA进行SCCmec基因分型。结果:在18种抗菌药物中,青霉素和红霉素的耐药率最高,分别为90.0%和62.0%;尚无对万古霉素、替加环素、替考拉宁、利奈唑胺、达托霉素的耐药菌株。50株金葡菌中,MRSA 15株(30.0%),MSSA35株(70.0%),MRSA对12种抗菌药物的敏感率明显低于MSSA。15株MRSA中,SCCmecⅢ型11株(73.3%),SCCmecⅣ型4株(26.7%),PVL基因扩增均为阴性。结论:该院无菌部位分离的金黄色葡萄球菌以MSSA为主;MRSA对抗菌药物呈多重耐药性,且以SCCmecⅢ型为主。     

多重耐药耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的红霉素耐药基因和PVL基因检测

目的 了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌红霉素耐药基因和杀白细胞毒素基因的检出情况。 方法 收集MRSA 45株,采用聚合酶链式反应对45株MRSA的红霉素耐药基因ermA/B/C和杀白细胞毒素基因PVL进行检测。 结果 45株MRSA中有33株检出红霉素耐药基因,的检出率为73.3％;有12株检出杀白细胞毒素基因,检出率为26.7%。结论 多重耐药的MRSA中红霉素耐药基因ermA/B/C检出率较高,是MRSA对大环内酯类抗生素耐药的主要机制;杀白细胞毒素基因PVL检出率较高,是MRSA的重要致病因子。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MLST 联合SCCmec 基因分型与耐药性分析

目的 了解滨州医学院附属医院MRSA 菌株多位点序列分型（MLST）联合SCCmec 基因型分布 和各种基因型的耐药特征。方法 采用聚合酶链反应（PCR）对MRSA 菌株进行MLST 联合SCCmec 基因分型； 采用WalkWAY96PLUS PC33 药敏板检测MRSA 抗菌药物敏感性。结果 SCCmec 基因分型结果以Ⅲ型为 主（63/67 株，占94.03%），MLST 分型共检测出6 种基因型：ST 88、ST 121、ST 221、ST 82、ST 239 及ST 399， 其中以ST 239（61/67，91.04%）为主，耐药性分析显示SCCmec Ⅲ型MRSA 菌株表现为多重耐药。结论 ST239-MRSA-SCCmec Ⅲ型菌株为鲁北地区MRSA 主要流行菌株，该型菌株对多种抗生素呈多重耐药； MLST 联合SCCmec 基因分型方法是MRSA 遗传背景研究简便快速的方法。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型研究

目的 了解本地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)流行株的来源和遗传背景.方法 回顾分析华西医院127例MRSA感染者的病例资料,用SCCmec多重PCR技术、葡萄球菌A蛋白(spa)分型技术和多位点测序分型技术对其中10株MRSA临床分离株进行基因分型,并检测其杀白细胞毒素基因.结果 病例资料显示127株MRSA中3株为社区获得性MRSA(CA-MRSA),其余均为医院获得性MRSA(HA-MRSA).进行分型研究的10株MRSA中,7株HA-MRsA为SCCmecⅢ-ST239-PVL(一),呈现高度的克隆一致性,spa分型进一步显示4株为t030,另外3株为t037;CA-MRSA s19165分型为ST8-t008,与USA300属同一克隆,并且携带SCCmecⅣa和PVL基因,符合USA300一般基因特征.另外2株CA-MRSAs5301、s29635均为SCCmecⅣa-ST59-t437,与我国其他地区的报道不同.结论 该院分离的MRSA仍以医院获得性为主(124/127),HA-MRSA呈现高度的克隆一致性,并与我国的主要流行株为同一克隆;分离到与美国主要CA-MRSA流行株USA300相同克隆的菌株,另外分离到的CA-MRSA ST59-t437克隆株在我国其他地区未有报道.MLST和spa分型技术是金黄色葡萄球菌分子流行病学研究的更为简便快速的方法.     

PVL大鼠JAKs-STATs信号转导的研究

目的 探讨新生大鼠脑室周围白质软化(PVL)模型侧脑室室管膜下区和脉络丛酪氨酸蛋白激酶(JAKs)-信号转导和转录激活因子(STATs)信号转导途径的变化.方法 采用右侧颈总动脉结扎并4 h 6%氧气处理,建立2日龄SD大鼠缺氧缺血(HI)PVL模型,对照组进行假手术,不进行缺氧处理.HI后0 h、3 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d处死动物,用免疫组化方法检测室管膜下区和脉络丛P-JAK2、P-STAT3表达的变化.结果 与对照组相比,实验组大鼠P-JAK2、P-STAT3明显升高,P-JAK2、P-STAT3在HI后即刻就有表达,1 d达峰,7 d仍高于对照组水平,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 HI后侧脑室室管膜下区和脉络丛JAKs-STATs途径被激活,该途径可能参与PVL的病理生理过程.     

Bacteriophage types of methicillin-resistant Staphylococcus aureus in a tertiary care hospital

Background

Phage typing had been utilised extensively to characterise methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) outbreak strains in the past. It is an invaluable tool even today to monitor emergence and dissemination of MRSA strains.

Aims

The aim of this study was to determine the prevalent phage types of MRSA in south India and the association between phage types, antibiotic resistance pattern and risk factors.

Method

A total of 48 non-duplicate MRSA strains recovered from various clinical samples during January to December, 2010 were tested against a panel of anti-staphylococcal antibiotics. Phage typing was carried out at the National Staphylococcal Phage Typing Centre, New Delhi. Out of 48, 32 hospitalised patients were followed up for risk factors and response to empirical and post sensitivity antibiotic therapy. The risk factors were compared with a control group of 30 patients with methicillin sensitive Staphylococcus aureus (MSSA) infection.

Results

Amongst the five prevalent phage types, 42E was most common (52%), followed by a non-typable variant (22.9%), 42E/47/54/75 (16.6%), 42E/47 (6.2%) and 47 (2%). Phage type 42E was the predominant strain in all wards and OPDs except in the ICU where 42E/47/54/75 was most common. Although not statistically significant, strain 42E/47/54/75 (n=8) showed higher resistance to all drugs, except ciprofloxacin and amikacin, and were mostly D-test positive (87.5%) compared to the 42E strain (32%). Duration of hospital stay, intravenous catheterisation and breach in skin were the most significant risk factors for MRSA infection.

Conclusion

We found MRSA strain diversity in hospital wards with differences in their antibiotic susceptibility pattern. The findings may impact infection control and antibiotic policy significantly.