异氟醚对大鼠海马脑片突触长时程增强的影响

目的 评价异氟醚对大鼠海马脑片突触长时程增强(LTP)的影响.方法 雄性SD大鼠,断头后取出海马组织,制备厚400 μm的海马脑片.采用细胞外微电极记录技术,记录海马脑片CA1区细胞外群体峰电位(PS).取28张脑片,随机分为4组(n=7):用正常的人工脑脊液(ACSF)灌流海马脑片,记录正常的PS,待其稳定后,对照组继续灌流ACSF,不同浓度异氟醚组分别用含异氟醚0.125 mmol/L(异氟醚0.125组)、0.25 mmol/L(异氟醚0.25组)、0.5 mmol/L(异氟醚0.5组)的ACSF灌流,记录PS幅值.另取70张脑片,随机分为10组(n=7):用正常ACSF灌流海马脑片,记录稳定正常的PS 30 min,LTP组继续灌流ACSF,其余各组分别用含异氟醚0.125 mmol/L(异氟醚LTP 0.125组)、0.25 mmol/L(异氟醚LTP 0.25组)、0.5 mmol/L(异氟醚LTP 0.5组)、印防己毒素0 μmol/L(印防己毒素组)、荷包牡丹碱10 μmol/L(荷包牡丹碱组)、CGP353485 μmol/L(CGP35348组)、印防己毒素50 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(印防己毒素+异氟醚组)、荷包牡丹碱10 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(荷包牡丹碱+异氟醚组)、CGP353485 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(CGP353485+异氟醚组)的ACSF灌流,记录PS 30 min后,施以100 Hz的高频强直刺激(HFS),记录PS幅值.结果 与对照组比较,异氟醚0.125组给药后10～45 min PS幅值降低,异氟醚0.25组和异氟醚0.5组给药后5～45 min PS幅值降低(P＜0.05或0.01).LTP组HFS后5～60 min PS幅值增高,较刺激前增加了(52±12)%(P＜0.01).与HFS前比较,异氟醚LTP 0.125组、异氟醚LTP 0.25组和异氟醚LTP 0.5组给予HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05);与LTP组比较,3组PS幅值降低(P＜0.01).与HFS前比较,印防己毒素组、荷包牡丹碱组和CGP 35348组HFS后PS幅值增加(P＜0.01);与LTP组比较,3组PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05).与HFS前比较,印防己毒素+异氟醚组和荷包牡丹碱+异氟醚组HFS后PS幅值增加(P＜0.01),CGP 353485+异氟醚组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05);与LTP组比较,印防己毒素+异氟醚组和荷包牡丹碱+异氟醚组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05),CGP353485+异氟醚组HFS后PS幅值降低(P＜0.01);与异氟醚LTP 0.25组比较,印防己毒素+异氟醚组和荷包牡丹碱+异氟醚组HFS后PS幅值增加(P＜0.01),CGP 353485+异氟醚组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异氟醚可通过激活大鼠海马GABAA受体,抑制LTP的形成,从而影响记忆功能.     

依托咪酯对大鼠海马脑片突触长时程增强的影响

目的 评价依托咪酯对大鼠海马脑片突触长时程增强(LTP)的影响.方法 雄性SD大鼠,断头后取出海马组织,制备厚400 μm的海马脑片.采用细胞外微电极记录技术,记录海马脑片CA1区细胞外群体峰电位(PS).取42张脑片,随机分为6组(n=7):用正常的人工脑脊液(ACSF)灌流海马脑片记录正常的PS,待其稳定后,对照组继续灌流ACSF,不同浓度依托咪酯组分别用含依托咪酯1μmol/L(依托咪酯 1 μol/L组)、2/μmol/L(依托咪酯2 μmol/L组)、5 μmol/L(依托咪酯5 μmol/L组)、10μmol/L(依托咪酯10 μmol/L组)、20 μmol/L(依托咪酯20 μmol/L组)的ACSF灌流,记录PS幅值.另取84张脑片,随机分为12组(n=7):用正常ACSF灌流海马脑片,记录稳定正常的PS 30 min,LIT组继续灌流ACSF,其余各组分别用含依托咪酯l μmol/L(LTP-依托咪酯 1 μmol/L组)、2 μmol/L(LTP-依托咪酯2μmol/L组)、5 μmol/L(LTP-依托咪酯 5 μmol/L组)、10μmol/L(LTP-依托咪酯 10 μmol/L组)、20 μmol/L(LTP-依托咪酯20 μmol/L组)、印防己毒素50 μmol/L(印防己毒素组)、荷包牡丹碱10 μmol/L(荷包牡丹碱组)、CGP35348 5 μmol/L(CGP35348 组)、印防己毒素50 μmol/L+依托咪酯10 μmol/L(印防己毒素+依托咪酯组)、荷包牡丹碱10 μmol/L+依托咪酯10 μmol/L(荷包牡丹碱+依托咪酯组)、CGP35348 5 μmol/L+依托咪酯10 μmol/L(CGP35348+依托咪酯组)的ASCF灌流,记录PS 30 min后,施以100 Hz的高频刺激(HPS),记录PS幅值.结果 与LTP组比较,LTP-依托咪酯2 μmol/L组、LTP-依托咪酯5 μmol/L组、LTP-依托咪酯10 μmol/L组、LTP-依托咪酯20 μmol/L组和CGP35348+依托咪酯组HIS后PS幅值降低(P＜0.05或0.01),印防己毒素组、荷包牡丹碱组、CGP35348组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05);与依托咪酯LTP 10μmol/L组比较,印防己毒素+依托咪酯组和荷包牡丹碱+依托咪酯组HIS后PS幅值增加(P＜0.01).结论 依托咪酯可通过激活大鼠海马GABAA受体抑制LTP的形成,从而影响学习和记忆功能.     

ERK1/2信号转导通路在七氟醚后处理减轻大鼠海马脑片缺氧无糖损伤中的作用

目的 评价细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号转导通路在七氟醚后处理减轻大鼠海马脑片缺氧无糖损伤中的作用.方法 选取符合标准的大鼠海马脑片,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n=10):缺氧无糖组(OGD组)海马脑片进行15 min缺氧无糖处理,即将灌流液改为经95％N2-5％ CO2混合气体饱和的无糖人工脑脊液(aCSF);4％七氟醚后处理组(Sevo组)缺氧无糖处理后用4％七氟醚平衡后的aCSF灌流30 min;ERK1/2特异性抑制剂PD98059组(PD组)缺氧无糖处理后用含ERK1/2特异性抑制剂PD98059(50 μmol/L)的aCSF灌流10 min;二甲基亚砜组(DMSO组)缺氧无糖处理后用含1 mol/L DMSO的aCSF灌流10 min;4％七氟醚后处理+PD98059组(SPD组)缺氧无糖处理后用含ERK1/2特异性抑制剂PD98059(50μmol/L)并通人4％七氟醚的aCSF灌流30 min,处理完成 后各组均再用正常aCSF灌流1h.采用脑片灌流及电生理技术,细胞外记录海马CAI区的顺向群峰电位(OPS);采用TTC染色-定量比色法评价海马脑片损伤程度.结果 与OGD组比较,Sevo组OPS恢复程度和恢复率升高,海马脑片损伤程度降低(P＜ 0.01),其余3组各指标差异无统计学意义(P＞0.05);与Sevo组比较,PD组、DMSO组和SPD组OPS恢复程度和恢复率降低,海马脑片损伤程度升高(P＜0.01).结论 ERK1/2信号转导通路参与了七氟醚后处理减轻大鼠海马脑片缺氧无糖损伤的过程.     

丙泊酚对大鼠海马脑片CA1区长时程增强的影响

目的观察不同浓度丙泊酚对离体大鼠海马脑片CA1区长时程增强(LTP)的影响。方法30张海马脑片分为五组,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别应用浓度为30、10和3μmolo/L的丙泊酚,Ⅳ组用脂肪乳,Ⅴ组不用药物作为对照。利用细胞外记录方式,以海马脑片CA1区群峰电位(PS)为观察指标,首先观察丙泊酚对CA1区基础传递的影响,待基线稳定后,记录高频刺激(HFS)后海马脑片CA1区PS的变化情况。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组应用丙泊酚后PS降低,在持续给药后30min恢复至基线。实施HFS后,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组的PS较HFS前显著升高(P<0.05,P<0.01);而Ⅰ、Ⅱ组PS与HFS前相比差异无显著意义(P>0.05)。HFS后,Ⅰ组PS显著低于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组(P<0.01),Ⅱ组PS也低于Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组(P<0.05)。结论丙泊酚可以抑制大鼠离体海马脑片CA1区LTP的形成。     

异氟醚吸入对老年大鼠长时程增强和脑源性神经营养因子的影响

目的通过观察异氟醚麻醉后老年大鼠海马长时程增强(LTP)和脑源性神经营养因子(BDNF)的变化,探讨术后认知功能障碍(POCD)的可能机制。方法健康雄性20月龄SD大鼠72只,随机分为异氟醚处理组(I组)和对照组(C组),每组36只。I组大鼠异氟醚吸入及维持浓度为1.2%,维持麻醉3h,以大鼠翻正反射的消失和恢复视为麻醉的开始和结束;C组大鼠不吸入麻醉药。I组大鼠分别于麻醉后7和14d断头,C组大鼠直接断头,常规切取海马组织,制备厚500μm的海马脑片,进行LTP斜率和幅值的测定,Western blot法检测BDNF表达水平。结果与C组比较,异氟醚处理后7和14dI组LTP的斜率和幅值均明显下降(P0.05)。与处理后7d比较,处理后14dI组LTP斜率和幅值均有明显升高(P0.05)。与C组比较,处理后7和14dI组BDNF表达水平明显下降(P0.05)。与处理后7d比较,处理后14dI组BDNF表达水平明显升高(P0.05)。结论异氟醚麻醉后,老年大鼠学习记忆能力损害可能持续14d以上,LTP的改变可能参与POCD的发生机制,并且与BDNF表达水平的降低有关。     

异丙酚对大鼠海马CA1区突触传递可塑性的影响

目的研究异丙酚对海马CAl区突触传递和可塑性的影响。方法断头分离Wistar大鼠海马半脑,制备400μm厚度海马脑片。45张脑片分为六组。脂肪乳剂组和异丙酚组的脑片以印防己毒素预孵30min,然后加入450μl脂肪乳剂或异丙酚(相当于500μmol/L),观察对兴奋性突触后电流(EPSC)的影响。脂肪乳剂长时程增强(LTP)组、脂肪乳剂长时程抑制(LTD)组、异丙酚LTP组、异丙酚LTD组的脑片以90μl脂肪乳剂或异丙酚(相当于100 μmol/L)预孵60 min,给予高频刺激(HFS)或低频刺激(LFS),记录LTP或LTD的发生情况。结果 脂肪乳剂对EPSC无影响(P>0.05);500 μmol/L异丙酚使2/3细胞EPSC下降至基础值的67.5％(P<0.05),使1,3细胞EPSC上升至基础值的140.3％(P<0.05)。脂肪乳剂LTP组给予HFS后EPSC值为基础值的151.6％(P<0.05),脂肪乳剂LTD组给予LFS后EPSC值为基础值的57.9％(P<0.05);异丙酚LTP组给予HFS后,LTP可以产生但不能维持,HFS后EPSC值为基础值的98.8％(P>0.05),异丙酚LTD组给予LFS后EPSC值为基础值的40.8％(P<0.05),明显低于脂肪乳剂LTD组(P<0.05)。结论异丙酚对大鼠海马CAl区突触传递具有双重影响,出现抑制和兴奋两种效果;异丙酚损害大鼠海马CAl区锥体神经元LTP的维持而易化LTD。     

氯化锂预先给药对异氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍及海马炎性反应的影响

目的 评价氯化锂(LiCl)预先给药对异氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍及海马炎性反应的影响.方法 老龄雄性SD大鼠80只,20月龄,体重350 ～400g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=20):对照组(C组)吸入30％O2-70％ N26h;异氟醚麻醉组(I组)吸入1.4％异氟醚6h,以30％O2-70％N2作为载气;LiCl+异氟醚麻醉组(L+I组)腹腔注射LiC1 100 mg/kg,1次/d,连续3d,第4d行异氟醚麻醉;LiCl组(L组)腹腔注射LiCl 100 mg/kg,1次/d,连续3d,第4d吸入30％ O2-70％ N26h.麻醉结束即刻行动脉血气分析,麻醉结束后24h取海马组织,采用Western blot法测定海马糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和核因子κB第310赖氨酸乙酰化蛋白[acetyl-NF-κB (Lys310)]的表达,采用实时定量PCR和ELISA法分别检测海马TNF-α、IL1β和IL-6的mRNA表达及其含量;麻醉结束后第2d评估认知功能.结果 与C组比较,I组GSK-3β和acetyl-NF-κB (Lys310)表达上调,TNF-α、IL-1β及IL-6含量及其mRNA表达水平升高,逃避潜伏期延长,探索时间缩短(P＜0.05),L+I组和L组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与I组比较,L+I组GSK-3β、acetyl-NF-κB (Lys310)表达下调,TNF-α、IL-1β、IL-6含量及其mRNA表达水平降低,逃避潜伏期缩短,探索时间延长(P＜0.05).结论 氯化锂预先给药可改善异氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍,其机制与抑制海马炎性反应有关.     

JNK信号通路在异氟醚预处理和七氟醚预处理减轻大鼠海马脑片缺氧无糖损伤中的作用

目的 评价c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在异氟醚预处理和七氟醚预处理减轻大鼠海马脑片缺氧无糖(OGD)损伤中的作用.方法雄性成年SD大鼠,体重270～290 g,断头处死,剥离海马,制备海马脑片.取大鼠海马脑片96张,采用随机数字表法,将其随机分为8组(n=12):对照组(C组)、OGD组、异氟醚预处理组(Iso组)、七氟醚预处理组(Sevo组)、SP600125+异氟醚预处理组(SP+Iso组)、SP600125+七氟醚预处理组(SP+Sevo组)、二甲基亚砜(DMSO)+异氟醚预处理组(DMSO+Iso组)和DMSO+七氟醚预处理组(DMSO+Sevo组).采用电生理技术,细胞外记录CA1区群锋电位(PS)波幅,计算PS恢复程度.采用碘化丙啶染色法,测定细胞活力.结果 与C组比较,其余各组PS恢复程度和细胞活力降低(P＜0.01);与OGD组比较,Iso组、Sevo组、SP+Iso.组、SP+Sevo组、DMSO+Iso组和DMSO+Sevo组PS恢复程度和细胞活力升高(P＜0.01);与180组比较,SP+Iso组PS恢复程度和细胞活力升高(P＜0.01),DMSO+Iso组PS恢复程度和细胞活力差异无统计学意义(P＞0.05);与Sevo组比较,SP+Sevo组PS恢复程度和细胞活力升高(P＜0.01),DMSO+Sevo组PS恢复程度和细胞活力差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异氟醚预处理和七氟醚预处理可通过抑制JNK信号通路,减轻大鼠海马脑片缺氧无糖损伤.

Abstract：

Objective To evaluate the role of c-Jun N-terminal kinase (JNK) signaling pathway in the protective effect of isoflurane preconditioning and sevoflurane preconditioning against oxygen-glucose deprivation (OGD) injury in rat hippocampal slices. Methods Male adult SD rats weighing 270-290 g were anesthetized with ether and decapitated. The hippocampi were removed and sagittally sliced (400 μm thick) and placed in artificial cerebral spinal fluid aerated with 95% O2-5% CO2 . Ninety-six hippocampal slices were randomly divided into 8 groups (n = 12 each): control group (group C), OGD group, isoflurane preconditioning group (group Iso),sevoflurane preconditioning group (group Sevo) , SP600125 + isoflurane preconditioning group (group SP + Iso),SP600125 +sevoflurane preconditioning group (group SP + Sevo), DMSO + isoflurane preconditioning group (group DMSO + Iso) and DMSO + sevoflurane preconditioning group (group DMSO + Sevo). Electrophysiological technique was used to record the amplitude of population spike ( PS) in the stratum pyramidale of CA1 region and the degree of recovery of PS was calculated. The cell viability was determined by propidium iodide staining. Results Compared with group C, the degree of recovery of PS and cell viability were significantly decreased in the other groups ( P ＜ 0.01) . Compared with group OGD, the degree of recovery of PS and cell viability were significantly increased in groups Iso, Sevo, SP+Iso, SP+Sevo, DMSO+ Iso and DMSO + Sevo (P＜ 0.01). Compared with group Iso, the degree of recovery of PS and cell viability were significantly increased in group SP+Iso ( P ＜ 0.01) , while no significant change was found in group DMSO + Iso ( P ＞ 0.05) . Compared with group Sevo, the degree of recovery of PS and cell viability were significantly increased in group SP + Sevo ( P ＜ 0.01) , while no significant change was found in group DMSO + Sevo ( P ＞ 0.05). Conclusion Isoflurane preconditioning and sevoflurane preconditioning can attenuate the OGD injury to rat hippocampal slices through inhibiting JNK signaling pathway.     

P2X受体在大鼠海马氧糖缺失时IL-1β合成和释放中的作用

目的 探讨P2X受体在大鼠海马氧糖缺失时IL-1β合成和释放中的作用.方法 成年雄性SD大鼠,体重150～200 g,制备海马脑片,取160张,随机分为4组(n=40),C组:用95%O2-5%CO2饱和aCSF孵育;OGD组:脑片移至经95%N2-5%CO2饱和的无糖aCSF中,并置于持续通入95%N2-5%CO2的容器内进行氧糖缺失处理;BBG组:脑片移至含P2X7受体特异性拮抗剂亮蓝G(BBG,终浓度1μmol/L)的经95%O2-5%CO2饱和的aCSF中,孵育20 min,随后进行氧糖缺失处理,无糖aCSF中加入终浓度1 μmol/L的BBG;OP组:脑片移至加入P2X4受体单克隆抗体(终浓度1.5μg/ml)的经95%O2-5%CO2饱和的aCSF中孵育60 min,随后进行氧糖缺失处理,无糖aCSF中加入终浓度1.5 μg/ml的P2X4受体单克隆抗体.于氧糖缺失前及氧糖缺失20、40和60 min时测定LDH和IL-1β的释放量,并观察病理学结果.于氧糖缺失60 min时测定细胞内IL-1β前体蛋白(pro-IL-1β)的表达水平.结果 与C组比较,其余各组LDH和IL-1β释放量升高,细胞内pro-IL-1β表达上调(P＜0.05);与OGD组比较,BBG组LDH和IL-1β释放量降低,细胞内pro-IL-1β表达上调(P＜0.05),OP组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 P2X7受体介导了大鼠海马氧糖缺失时IL-1β的合成和释放,而P2X4受体没有介导IL-1β的合成和释放.     

褪黑素预处理对异氟醚处理人神经母细胞瘤细胞TRF1蛋白的影响

目的 观察褪黑素预处理对异氟醚处理人神经母细胞瘤细胞(SHSY-5Y)TRF1蛋白含量的影响。方法 选择SHSY-5Y细胞进行培养,将细胞随机分为四组：对照组(C组)、异氟醚组(I组)、异氟醚+褪黑素组(IM组)、异氟醚+褪黑素+抑制剂组(IMB组),每组细胞浓度为4.8×10⁶～8.0×10⁶个/ml。C组未进行药物处理,正常培养。I组予1.5%异氟醚处理6 h。IM组予1 mmol/L褪黑素1μl处理细胞11 h后,1.5%异氟醚处理6 h。IMB组予100 mmol/L磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)(p110α)选择性抑制剂BYL719 1μl处理30 min后,1 mmol/L褪黑素1μl处理11 h, 1.5%异氟醚处理6 h。采用RT-qPCR法检测蛋白激酶B(Akt)和端粒体复制结合因子1(TRF1)mRNA表达量,Western blot法检测Akt、p-Akt(Ser473)和TRF1蛋白含量。结果 与C组比较,I组和IM组Akt和TRF1 mRNA表达量和Akt蛋白含量明显降低(P<0.05),IM组p-Akt和TRF...     

P2X7受体在大鼠海马脑片和神经元突触体氧糖缺失时谷氨酸和γ-氨基丁酸释放中的作用

目的 评价P2X7受体在大鼠海马脑片和神经元突触体氧糖缺失(OGD)时谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)释放中的作用.方法 健康成年雄性SD大鼠,体重150～200 g,制备海马脑片和神经元突触体,放入95%O2-5%CO2预充饱和人工脑脊液(aCSF)中35 ℃下孵育30 min后,取大鼠海马脑片96张,随机分为3组(n=32);取大鼠海马神经元突触体72份,随机分为3组(n=24).对照组(C组)于95%O2-5%CO2预充饱和的aCSF中孵育60 min;OGD组于95%N2-5%CO2预充饱和的乏糖aCSF中35 ℃下孵育60 min;亮蓝G组(BBG组)于预先加入P2X7受体拮抗剂亮蓝G 1 μmol/L、95%O2-5%CO2预充饱和的aCSF中孵育20 min,随后移至2 ml含亮蓝G l μmol/L、95%N2-5%CO2预充饱和的乏糖aCSF中孵育60 min.于OGD即刻、20、40、60 min(T1-4)时,分别随机取海马脑片和神经元突触体各6份,测定Glu和GABA的释放量.各时点分别取海马脑片2张,光镜下观察病理学结果.结果 与C组比较,OGD组和BBG组T2-4时海马脑片Glu和GABA释放量增加(P＜0.05);与OGD组比较,BBG组T3-4时海马脑片Glu释放量减少,T4时GABA释放量减少(P＜0.05),病理学损伤减轻.与C组比较,OGD组和BBG组T2-4时海马神经元突触体Glu和GABA的释放量增加(P＜0.05);与OGD组比较,BBG组T2-4时海马神经元突触体GABA释放量差异无统计学意义(P＞0.05),Glu释放量增加(P＜0.05).结论 P2X7受体介导了大鼠海马OGD时Glu和GABA的释放,其中胶质细胞上的P2X7起主导作用.     

Volatile anesthetic isoflurane inhibits LTP induction of hippocampal CA1 neurons through α4β2 nAChR subtype-mediated mechanisms

Background and purpose

Volatile anesthetic isoflurane contributes to postoperative cognitive dysfunction and inhibition of long-term potentiation (LTP), a synaptic model of learning and memory, but the mechanisms are uncertain. Central neuronal α₄β₂ subtype nicotinic acetylcholine receptors (nAChRs) are involved in the induction of LTP in the hippocampus. Isoflurane inhibits α₄β₂ nAChRs at concentrations lower than those used for anesthesia. Therefore, we hypothesized that isoflurane-inhibited LTP induction of hippocampal CA1 neurons via α₄β₂ nAChRs subtype inhibition.

Methods

Transverse hippocampal slices (400 μm thick) were obtained from male rats (6–8 weeks old). Population spikes were evoked using extracellular electrodes by electrical stimulation of the Schaffer collateral-commissural pathway of rat hippocampal slices. LTP was induced using high frequency stimulation (HFS; 100 Hz, 1 s). Clinically relevant concentrations (0.125-0.5 mM) of isoflurane with or without nicotine (nAChRs agonist), mecamylamine (nAChRs antagonist), 3-[2(S)-2-azetidinylmethoxy] pyridine (A85380) and epibatidine (α₄β₂ nAChRs agonist), dihydro β erythroidine (DHβE) (α₄β₂ nAChRs antagonist) were added to the perfusion solution 20 min before HFS to test their effects on LTP by HFS respectively.

Results

A brief HFS induced stable LTP in rat hippocampal slices, but LTP was significantly inhibited in the presence of isoflurane at concentrations of 0.125-0.5 mM. The inhibitive effect of isoflurane on LTP was not only reversible and could be prevented by nAChRs agonist nicotine and α₄β₂ nAChRs agonist A85380 and epibatidine, but also mimicked and potentiated by nAChRs antagonist mecamylamine and α₄β₂ nAChRs antagonist DHβE.

Conclusions

Inhibition of α₄β₂ nAChRs subtype of hippocampus participates in isoflurane-mediated LTP inhibition.     

右美托咪啶后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注时线粒体损伤的影响

目的 探讨右美托咪啶后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注时线粒体损伤的影响.方法 健康雌性Wistar大鼠,体重220～250 g,成功制备Langendorff离体灌注模型的40个心脏随机分为5组(n=8):缺血再灌注组(A组)、右美托咪啶10 nmol/L组(B组)、右美托咪啶100 nmol/L组(C组)、线粒体通透性转换孔开放剂苍术苷组(D组)及右美托咪啶联合苍术苷组(E组).离体心脏经K-H液平衡灌注20 min后,采用全心停灌40 min再灌注60 min的方法制备离体心脏缺血再灌注模型.于再灌注即刻B组、C组、D组和E组分别灌注含10 nmol/L右美托咪啶、100 nmol/L右美托咪啶、20μmol/L苍术苷、100 nmol/L右美托咪啶和20 μmol/L苍术苷的K-H液10 min.再灌注结束即刻取心尖组织,分离线粒体,测定SOD、Na+ -K+ -ATP酶、Ca2+-ATP酶活性和MDA和Ca2+含量.结果 与A组比较,B组和C组线粒体SOD、Na+ -K+ -ATP酶和Ca2+ -ATP酶活性升高,MDA和Ca2+含量降低(P＜0.05),D组和E组上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05);与C组比较,D组和E组线粒体SOD、Na+-K+-ATP酶和Ca2+ -ATP酶活性降低,MDA和Ca2+含量升高(P＜0.05),B组上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 右美托咪啶后处理可减轻大鼠离体心脏缺血再灌注时的线粒体损伤,其机制可能与抑制线粒体通透性转换孔开放有关.     

不同浓度褪黑激素对新生大鼠海马锥体神经元电压门控性Ca2+通道的影响

目的 探讨不同浓度褪黑激素对新生大鼠海马锥体神经元电压门控性ca2通道的影响.方法 原代培养新生Wistar大鼠(出生时问<12 h)海马锥体神经元7～12 d.配制褪黑激素溶液,终浓度依次为1 nmol/L、10 nmol/L、100 nmol/L、1 μmol/L、10μmol/L、100μmol/L和1 mmol/L.选择胞体清晰、光晕良好、轴突明显的锥体神经元,采用膜片钳全细胞记录模式观察Ca2+通道的基本电生理特点,记录不同浓度褪黑激素作用下Ca2+电流,分析Ca+2通道动力学特性,并计算Ca2+电流变化率.结果 不同浓度褪黑激素均可快速、可逆性地增强Ca2+电流,10 nmol/L和100 nmol/L褪黑激素使Ca2+电流激活曲线向超极化方向移动,其余浓度褪黑激素对Ca2+电流激活曲线的动力学特性无影响.与100 mol/L褪黑激素比较,其余浓度褪黑激素作用后Ca2+电流变化率降低(P<0.05或0.01);与Iμmol/L褪黑激素比较,10 μmol/L、100μmol/L和1 mmol/L褪黑激素作用后Ca2+电流变化率降低(P<0.05).结论 l nmol/L～1 mmol/L褪黑激素均可增强体外培养的新生大鼠海马锥体神经元Ca2+电流,100 nmol/L褪黑激素作用最强.     

氯胺酮复合咪达唑仑对谷氨酸诱导PC12细胞凋亡的影响

目的 探讨氯胺酮复合咪达唑仑对谷氨酸诱导PC12细胞凋亡的影响.方法 诱导分化4 d的神经元样PC12细胞随机分为5组:对照组(c组);谷氨酸组(Glu组)加入20 mmol/L谷氨酸;氯胺酮组(K组)、咪达唑仑组(M组)、氯胺酮+咪达唑仑组(K+M组)均加入20 mmol/L谷氨酸后,分别加入50 μmol/L氯胺酮、1μmol/L咪达唑仑、50 μmol/L氯胺酮+1 μmol/L咪达唑仑.各组细胞继续培养24 h后采用MTT法检测细胞活力,Hoechst33258核染色法及Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测凋亡细胞.结果 与C组比较,Glu组细胞活力降低,细胞凋亡率升高(P<0.01);与Glu组比较,K组和M组细胞活力升高,细胞凋亡率降低(P<0.05);与K组和M组比较,K+M组细胞活力升高,细胞凋亡率降低(P<0.05);K组和M组细胞活力及细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05).结论 氯胺酮复合咪达唑仑可更有效地抑制谷氨酸诱导PC12细胞凋亡.     

红花黄色素减轻受体相互作用蛋白3硝化保护大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的 探讨红花黄色素(safflower yellow,SY)对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤(myocardium ischemia/reperfusion injury,MI/RI)的保护作用及其降低受体相互作用蛋白3(receptor interacting protein 3,RIP3)硝化的可能机制. 方法 SD雄性大鼠36只,采用随机数字表法分为6组(每组6只):正常对照组(A组)、缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI) 组(B组)、SY干预组(C组,10 μmol/L;D组,30 μmol/L;E组,90 μmol/L)、阳性对照药依达拉奉组(F组,10 μmol/L).再灌注120 min末,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色法测定心肌梗死面积百分比,免疫印迹法及免疫沉淀法测定RIP3、受体相互作用蛋白1(receptor interacting protein 1,RIP1)的表达水平及RIP3硝化水平、RIP1磷酸化水平,化学比色法测定心肌组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量. 结果 与B组[(36.3±4.7)％]比较,D组[(15.3±4.2)％]、E组[(6.9±4.4)％]、F组[(9.6±1.2)％]心肌梗死面积减小(P＜0.05);与B组比较,D组、E组、F组SOD活性升高(P＜0.05),MDA含量降低(P＜0.05);各组RIP3及RIP1表达水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);与B组比较,D组、E组、F组RIP3硝化水平均降低(P＜0.05),RIP1磷酸化水平均降低(P＜0.05). 结论 SY降低I/RI中的氧化水平,下调RIP3硝化及RIP1磷酸化水平,对MI/RI发挥保护作用.     

吗啡预处理-后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨吗啡预处理-后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠,体重180～200 g,应用Langendorff体外灌流装置,采用全心停灌45 min、再灌注60 min的方法制备大鼠离体心脏缺血再灌注模型.取模型制备成功的心脏40个,随机分为5组(n=8):缺血再灌注组(IR组)、吗啡预处理组(M1组)、吗啡后处理组(M2组)、吗啡预处理-后处理组(M1+M2组)、5-羟葵酸(5-HD)混合吗啡后处理组(5-HD+M2组).M1组全心停灌前30 min灌注含3.0 μmol/L吗啡的K-H液20 min,随后灌注K-H液10 min.M2组再灌注即刻灌注含3.0 μmol/L吗啡的K-H液10 min,随后灌注正常K-H液50 min.5-HD+M1组再灌注即刻灌注含3.0 μmol/L吗啡+10-4nunol/L 5-HD的K-H液10 min,随后灌注正常K-H液50 min.于再灌注60 min时,测定心肌肌酸激酶(CK-MB)活性,计算心肌梗死区与缺血危险区的比值(IS/AAR).结果 与IR组相比,其余各组IS/AAR减少,CK-MB活性降低(P<0.05);与M2组比较,5-HD+M2组CK-MB活性及IS/AAR升高(P<0.05);M1组、M2组和M1+M2组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 吗啡预处理.后处理虽然可减轻大鼠离体心脏缺血冉灌注损伤,但是与单独应用时效果相似,其原因可能是两者单独应用减轻心脏缺血再灌注损伤的机制均与开放线粒体ATP敏感性钾通道有关.