尾加压素Ⅱ mRNA在正常肾上腺髓质和嗜铬细胞瘤组织中的表达

目的　研究尾加压素Ⅱ (UrotensinⅡ ,UⅡ )mRNA在正常肾上腺髓质和嗜铬细胞瘤组织中的表达。方法　正常肾上腺髓质组织取自 9例意外死亡的中青年 ,嗜铬细胞瘤组织取自 19例患者手术切除标本 ,分别提取组织总RNA ,用逆转录 聚合酶链反应方法进行研究 ,以UⅡ和内参照GAPDH(甘油醛 3 三磷酸脱氢酶 )进行同管扩增 ,以扩增的目的条带灰度和内参照条带灰度比值UⅡ /GAPDH进行UⅡmRNA表达的半定量分析。结果　UⅡ的PCR扩增产物长度为 385bp ,测序结果与GeneBank所登记碱基序列相同率为 99.7%。正常肾上腺髓质和嗜铬细胞瘤组织UⅡ /GAPDH比值分别为 0 .6 9± 0 .2 9和 0 .2 2± 0 .18(P <0 .0 5 )。结论　UⅡmRNA在正常肾上腺髓质和嗜铬细胞瘤组织中均有表达 ,嗜铬细胞瘤组织中的表达低于正常肾上腺髓质组织。     

肾上腺髓质素及受体在肾上腺和嗜铬细胞瘤中的表达

目的研究肾上腺髓质素(ADM)及其特异性受体-受体活性调节蛋白2/降钙素受体样受体(RAMP2/CRLR)mRNA在正常肾上腺髓质和嗜铬细胞瘤组织中的表达.方法提取8例正常肾上腺髓质和18例嗜铬细胞瘤组织总RNA,行逆转录-聚合酶链反应,以扩增的ADM、RAMP2、CRLR条带灰度与内参照GAPDH条带灰度比值进行半定量分析.结果正常肾上腺髓质和嗜铬细胞瘤组织中均可见ADM及其特异性受体RAMP2/CRLR mRNA的表达,其ADM/GAPDH分别为0.48±0.09和0.75±0.24,RAMP2/GAPDH分别为0.79±0.12和1.29±0.30,CRLR/GAPDH分别为0.40±0.08和0.87±0.22,嗜铬细胞瘤组织中ADM及其特异性受体RAMP2/CRLR mRNA的表达显著高于正常肾上腺髓质(P＜0.05).结论ADM可能通过自分泌或旁分泌方式作用于肾上腺局部,在嗜铬细胞瘤的发生发展中起一定的作用.     

嗜铬蛋白A和神经特异性烯醇化酶及突触素在肾上腺皮质中的分布特点

目的:通过免疫组化方法,研究肾上腺皮质分泌物嗜铬蛋白A(CgA)、神经特异性烯醇化酶(NSE)和突触素(SYN)在肾上腺皮质的分布特点,为进一步深入研究皮髓质之间的相互作用奠定基础. 方法:运用免疫组化方法对肾上腺髓质增生、嗜铬细胞瘤和嗜铬细胞癌56份组织标本进行CgA、NSE和SYN染色,以正常肾上腺作为对照,观察其在皮质中的分布特点. 结果:肾上腺嗜铬细胞瘤和嗜铬细胞癌的皮质中均可见CgA染色阳性细胞,髓质增生和正常肾上腺病例皮质CgA染色阴性;肾上腺髓质增生和嗜铬细胞癌皮质NSE染色呈阳性,嗜铬细胞瘤和正常肾上腺皮质NSE染色呈阴性;肾上腺髓质增生、嗜铬细胞瘤的皮质中SYN染色呈阳性,正常肾上腺嗜铬细胞癌皮质SYN染色呈阴性. 结论:①肾上腺皮质CgA、NSE和SYN分布特点可以帮助鉴别肾上腺髓质增生、嗜铬细胞瘤和嗜铬细胞癌的异同;②肾上腺皮髓质之间联系紧密,受共同机制所调控,除经典的下丘脑-垂体-肾上腺轴和肾素-血管紧张素-醛固酮系统外,肾上腺皮髓质之间存在相互调节的解剖学和内分泌学基础.     

瘦素受体在肾上腺皮髓质及其肿瘤中的表达及与血浆瘦素的关系

目的 观察长型瘦素受体(Ob-Rb)在正常肾上腺皮、髓质及其肿瘤中的mRNA和蛋白表达;并观察原发性醛固酮增多症(PA)、皮质醇分泌瘤(CS)和嗜铬细胞瘤(PHEO)患者的血浆瘦素水平.方法 提取6名健康者肾上腺皮质和髓质和10例CS、14例醛固酮分泌瘤(APA)、20例PHEO患者的组织总RNA和蛋白,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法检测不同组织中Ob-Rb mRNA和蛋白表达.ELISA方法测定29例PA、11例CS、15例PHEO患者和20名年龄匹配的血压健康者血浆瘦素水平.结果 在肾上腺皮、髓质及其肿瘤中存在Ob-Rb的mRNA和蛋白表达.在正常肾上腺皮质中,Ob-Rb mRNA(0.32±0.12)和蛋白(1.31±0.26)表达明显均高于其余各组(均P＜0.05).Ob-Rb mRNA在APA(0.15±0.10)中的表达明显高于CS(0.05±0.02,P＜0.05).APA中Ob-Rb mRNA表达与立位血浆醛固酮水平正相关(r=0.670,P=0.024),而CS患者瘤内Ob-RbmRNA水平与其24 h尿UFC水平正相关(r=0.870,P=0.005).CS患者血浆瘦素水平明显高于非皮质醇瘤患者(P=0.001).结论 肾上腺皮髓质及其肿瘤广泛表达长型瘦素受体,且其表达之间存在差异,瘦素与肾上腺间的关系还需进一步研究.     

人嗜铬细胞瘤组织中转化生长因子α、肿瘤坏死因子α和血管内皮生长因子的表达

目的观察人嗜铬细胞瘤(PHEO)组织和正常肾上腺髓质中转化生长因子α(TGFα)、肿瘤坏死因子α(TNFα)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的差异.方法RT-PCR法比较22例经手术及病理证实的PHEO组织及18例意外死亡者(符合医学伦理学要求)的正常肾上腺髓质中TGFα、TNFα和VEGF mRNA表达的差异;免疫组化法比较石蜡包埋的27例PHEO和14例正常肾上腺髓质中TGFα、TNFα和VEGF蛋白表达的差异,并分析其与肿瘤的性质、部位、大小、重量的关系.结果PHEO中TGFα、TNFα mRNA和蛋白表达均高于正常肾上腺髓质.PHEO中VEGF145剪接体的mRNA表达高于正常肾上腺髓质;VEGF121和VEGF165剪接体的mRNA在PHEO和正常肾上腺髓质中的表达差异无显著性.PHEO的内皮细胞和肿瘤细胞VEGF的染色阳性率高于正常肾上腺髓质.肾上腺外PHEO中TGFα、TNFα和VEGF蛋白表达高于肾上腺PHEO.恶性和多发PHEO的TNFα蛋白表达高于良性和单发PHEO.结论PHEO中TGFα、TNFα和VEGF的mRNA和蛋白表达高于正常肾上腺髓质,TGFα、TNFα和VEGF在不同特点的PHEO中的表达不同.     

VIP和NPY在肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达及意义

【目的 探讨神经肽Y (Neuropeptide Y, NPY)和血管活性肠肽( vasocative intestinal peptide, VIP)在肾上腺嗜铬细胞瘤组织中的表达与肾上腺嗜铬细胞瘤的关系。 方法 采用免疫组化SP法和图像分析技术对8例正常肾上腺组织20例肾上腺嗜铬细胞瘤中NPY和VIP进行检测。结果 免疫组织化学结果显示， NPY,VIP在肾上腺嗜铬细胞瘤中阳性细胞面积、灰度与正常肾上腺组织比较差异有显著性(P <0.01)。NPY,VIP与尿儿茶酚胺（catecholamine，CA）存在正相关关系。结论 NPY,VIP在肾上腺嗜铬细胞瘤发生发展中可能有重要意义,可能代表肾上腺嗜铬细胞瘤的分子基础，这可能是治疗和诊断AMH新的靶点。 【关键词】肾上腺肿瘤 嗜铬细胞瘤 神经肽Y 血管活性肠肽     

人嗜铬细胞瘤组织中转化生长因子a、肿瘤坏死因子a和血管内皮生长因子的表达

目的 观察人嗜铬细胞瘤(PHEO)组织和正常肾上腺髓质中转化生长因子a(TGFa)、肿瘤坏死因子a(TNFa)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的差异。方法 RT-PCR法比较22例经手术及病理证实的PHEO组织及18例意外死亡者(符合医学伦理学要求)的正常肾上腺髓质中TGFa、TNFa和VEGFmRNA表达的差异；免疫组化法比较石蜡包埋的27例PHEO和14例正常肾上腺髓质中TGFa、TNFa和VEGF蛋白表达的差异，并分析其与肿瘤的性质、部位、大小、重量的关系。结果 PHEO中TGFa、TNFa mRNA和蛋白表达均高于正常肾上腺髓质。PHEO中VEGF145剪接体的mRNA表达高于正常肾上腺髓质；VEGF121和VEGF165剪接体的mRNA在PHEO和正常肾上腺髓质中的表达差异无显著性。PHEO的内皮细胞和肿瘤细胞VEGF的染色阳性率高于正常肾上腺髓质。肾上腺外PHEO中TGFa、TNFa和VEGF蛋白表达高于肾上腺PHEO。恶性和多发PHEO的TNFa蛋白表达高于良性和单发PHEO。结论 PHEO中TGFa、TNFa和VEGF的mRNA和蛋白表达高于正常肾上腺髓质，TGFa、TNFa和VEGF在不同特点的PHEO中的表达不同。     

肾上腺嗜铬细胞瘤中c-myc、bcl-2 mRNA表达及意义的研究

目的　探讨癌基因c -myc、凋亡抑制基因bcl-2mRNA在肾上腺良性及恶性嗜铬细胞瘤中的表达及其意义。方法　应用核酸分子原位杂交方法检测 2 9例良性肾上腺嗜铬细胞瘤及 7例恶性肾上腺嗜铬细胞瘤中c -myc、bcl-2基因表达情况。结果　原位杂交结果显示 :c -mycmRNA在良、恶性肾上腺嗜铬细胞瘤中表达率分别为2 7.5 % (8 2 9) ,71.4% (5 7) (P <0 .0 5 ) ;bcl-2mRNA在良性肾上腺嗜铬细胞瘤中表达率分别为 48.2 % (14 2 9,71.4%(5 7) ,两者比较存在显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　 1、c -myc在肾上腺嗜铬细胞瘤的发生过程中c -myc基因不起主要作用 ,可能对该肿瘤的恶性变起重要作用 ,c -myc基因产物的检测对鉴别良、恶性肾上腺嗜铬细胞瘤有一定意义。 2、bcl-2基因的凋亡抑制作用对肾上腺嗜铬细胞瘤的发生发展有重要意义 ,但在良、恶性肾上腺嗜铬细胞瘤的鉴别上无临床意义。     

131I-MIBG核素显像对肾上腺髓质病变诊断的价值

目的:评价131I-MIBG核素显像对肾上腺髓质病变诊断的价值.方法:观察12例原发性高血压(对照组)、21例嗜铬细胞瘤及15例肾上腺髓质增生患者(后两组均经术后病理检查证实)131I-MIBG肾上腺髓质显像的结果,并与CT、B超等检查结果进行对照分析;采用感兴趣区(ROI)技术计算肾上腺(包括腺外嗜铬细胞瘤组织)与本底及心肌的摄取比值.结果:131I-MIBG核素显像:嗜铬细胞瘤组11例呈一侧肾上腺区域异常放射性浓聚,2例为腺外异常放射性浓聚影(术后证实为腺外嗜铬细胞瘤),3例单侧肾上腺异常放射性浓聚伴全身多处异常放射性浓聚(术后证实为单侧肾上腺恶性嗜铬细胞瘤伴转移),3例为一侧肾上腺清晰显影,2例仅表现为隐约显影(术前被诊断为正常),本组阳性检出率为90.5%;增生组8例表现为一侧肾上腺清晰显影,3例双侧肾上腺清晰显影,4例表现为双侧肾上腺仅隐约显影,阳性检出率为73.3%.摄取比值计算:上两组均明显高于对照组(P＜0.01),嗜铬细胞瘤组明显高于增生组(P＜0.01).结论:131I-MIBG核素显像对定位、定性诊断肾上腺髓质病变具有重要价值,可作为首选功能检查方法,ROI技术定量分析可提高阳性检出率并有利于鉴别病变性质.     

血管活性肠肽和神经肽Y在肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达及意义

目的探讨神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)和血管活性肠肽(vasocative intestinal peptide,VIP)在肾上腺嗜铬细胞瘤组织中的表达与肾上腺嗜铬细胞瘤的关系。方法采用免疫组化SP法和图像分析技术对8例正常肾上腺组织20例肾上腺嗜铬细胞瘤中NPY和VIP进行检测。结果免疫组织化学结果显示,NPY,VIP在肾上腺嗜铬细胞瘤中阳性细胞面积、灰度与正常肾上腺组织比较差异有显著性(P<0.01)。NPY,VIP与尿儿茶酚胺(catecholamine,CA)存在正相关关系。结论NPY,VIP在肾上腺嗜铬细胞瘤发生发展中可能有重要意义,可能代表肾上腺嗜铬细胞瘤的分子基础,这可能是治疗和诊断AMH新的靶点。     

肾上腺嗜铬细胞瘤凋亡相关基因bak蛋白表达的意义

目的：探讨凋亡相关基因ｂａｋ在人肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达及其对肿瘤发生的意义。方法：应用免疫组织化学的ＳＡＢＣ方法,和兔抗人Ｂａｋ了隆抗体,对２３例肾上腺嗜铬瘤（其中良属于 １８例,恶笥５例）和１０例正常肾上腺组织进行了检测。结果：Ｂａｋ在 腺髓质中不表达,而在良恶笥嗜铬细胞瘤中表达,阳怀率分别为８９％和４０％,在良性肿瘤中Ｂａｋ表达显著强于恶性肿瘤。结论：Ｂａｋ不同程度地参与了良恶性嗜铬细胞中的     

血管内皮生长因子在良恶性嗜铬细胞瘤中的表达及意义

目的 研究血管内皮生长因子（VEGF）在良恶性。肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达及意义。方法 用免疫组化和原位杂交研究24例良性肾上腺嗜铬细胞痈、11例恶性肾上腺嗜铬细胞瘤及11例正常肾上腺组织中VEGF的表达情况。结果 在正常肾上腺组织中VEGF阴性或可疑阳性表达,良性肾上腺嗜铬细胞瘤中VEGF呈阴性至弱阳性强度表达,在肾上腺恶性嗜铬细胞瘤中,二者均呈强阳性表达。结论 VEGF在良恶性嗜铬细胞瘤中表达有差异,可以作为牲别诊断的依据之一。     

原发性肾上腺皮质肿瘤组织中间隙连接蛋白32和43的表达及其临床意义

目的研究间隙连接蛋白(Cx)32和43在原发性肾上腺皮质肿瘤中的表达,探讨其在原发性肾上腺皮质肿瘤的临床诊断及预后评估中的价值。方法应用免疫组化NovolinkTMPolymer法检测21份正常肾上腺组织、45份肾上腺皮质腺瘤及14份肾上腺皮质癌标本中Cx32、Cx43的表达水平,运用SPSS13.0统计软件进行统计学处理。结果 Cx32和Cx43在肾上腺皮质癌中表达阳性率分别为21.4%和35.7%,明显低于肾上腺皮质腺瘤中的68.9%和75.6%(P=0.002,P=0.010)及正常肾上腺组织中的85.7%和100%(P=0.000,P=0.000);肾上腺皮质腺瘤中Cx43表达的阳性率低于正常肾上腺组(P=0.013)。Cx43的表达与肾上腺皮质腺癌患者的预后相关(P<0.05),Cx43表达越低患者预后越差。在肾上腺皮质癌中,Cx32和Cx43之间的表达呈明显正相关(P=0.015)。结论联合检测Cx32和Cx43的表达对鉴别良、恶性肾上腺皮质肿瘤具有重要的参考意义。Cx43在原发性肾上腺皮质癌组织的表达与患者预后相关,增加其表达可能改善患者预后。     

尾加压素Ⅱ及其受体在大鼠肾成纤维细胞中的表达及银杏叶的干预作用

目的：探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对大鼠肾间质成纤维细胞尾加压素Ⅱ（UⅡ）及其受体（GPR14）表达的影响和银杏叶(GBE）的干预作用。方法：体外培养大鼠肾成纤维细胞，以未处理细胞作为正常对照组，以AngⅡ作为刺激因素，分别加入终浓度为0、25、50、100和200 g•L^-1的GBE，RT-PCR检测各组细胞UⅡ及GPR14 mRNA表达，免疫印迹法检测各组细胞UⅡ及GPR14蛋白含量，ELISA法检测培养上清中Ⅰ型胶原（ColⅠ）含量。结果： AngⅡ组UⅡ、GPR14表达量及培养上清中ColⅠ含量明显高于正常对照组（P<0.01），与AngⅡ刺激组比较，AngⅡ+GBE组UⅡ及GPR14的mRNA表达量下降（P<0.01），蛋白含量减少（P<0.01或P<0.05），培养上清中ColⅠ含量明显降低（P<0.01或P<0.05）。结论：GBE可抑制AngⅡ诱导的肾间质成纤维细胞UⅡ及受体mRNA表达，降低其蛋白含量，减少细胞外基质ColⅠ分泌。     

子宫内膜癌中KiSS-1及GPR54 mRNA的表达及意义

目的检测KISS-1及GPR54 mRNA在子宫内膜癌组织中的表达,探讨其在子宫内膜癌浸润及转移中的作用.方法采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测32例子宫内膜癌,10例子宫内膜上皮内瘤样病变(EIN)及12例正常子宫内膜组织中KiSS-1及GPR54 mRNA的表达情况和其与各种临床参数的关系.结果KiSS-1 mRNA在子宫内膜癌组中的表达率(37.5%)明显低于EIN组(80.0%)及正常内膜组(83.3%),并且其在子宫内膜癌组中的表达率与临床分期、肌层浸润深度及淋巴结转移密切相关,P均＜0.05.GPR54 mRNA在子宫内膜癌组的表达率(78.1%)高于EIN组(70.0%)和正常内膜组(66.7%),但无明显差异(均P＞0.05).GPR54 mRNA在子宫内膜癌组中的表达与临床分期、组织分级、肌层浸润深度及淋巴结转移情况均无相关性(均P＞0.05).结论KiSS-1与其受体GPR54结合在抑制子宫内膜癌的浸润和转移过程中可能起着重要的作用.