错配修复、微卫星不稳定性与散发性结直肠癌

目的：探讨DNA错配修复基因、微卫星不稳定性与散发性结直肠癌发生发展的关系。方法：采用放射性同位素为基础的聚合酶链式反应（PCR）技术，对48例散发性结直肠癌中错配修复基因和四个位点微卫星不稳定性进行了检测。结果：48例散发性结直肠癌中hmsh3、hmsh6基因突变率分别为10．4％和25％，四个位点微卫星不稳定性阳性率分别为D2S123（12．5％）、BAT－26（18．8％）、D17S261（10．4％）、D17S799（8．3％），hmsh3、hmsh6 基因突变和微卫星不稳定性多为分化不良的吕，多位于右半结肠，而与患者的性别、淋巴结转移、Ducks分期无关。结论：错配修复基因突变与微卫星不稳定性是散发性结直肠癌发生的早期分子事件，是除LOH致癌途径以外的又一新的致癌途径。     

DNA错配修复系统和微卫星不稳定性与结直肠癌

结直肠癌(CRC)是消化系统常见的恶性肿瘤之一。其发生发展涉及到一系列遗传学改变。已有大量的研究证实，微卫星不稳定性(MSI)存在于遗传性非息肉性结直肠癌(HNPCC)，部分散发性结直肠癌(SCRC)胃癌等当中，MSI是错配修复基因的异常造成的。DNA错配修复基因的突变可以解释90％以上的HNPCC，少部分的HNPCC肿瘤和散发性MSl 的肿瘤可由其他途径所致，比如基因的甲基化。     

微卫星不稳定性与结直肠癌关系的研究

微卫星不稳定性（microsatellite instability,MSI）作为结直肠癌（colorectal cancer,CRC）重要的发生机制广泛存在于生物基因组中。MSI的发生由错配修复蛋白表达缺失（deficient mismatch repair,dMMR）引起,MSI也是CRC患者判断预后、指导化疗辅助手段及评价免疫治疗效果的标志物,其在治疗过程中具有重要的临床意义。     

散发性结直肠癌与微卫星不稳定性的关系

结直肠癌 (colorectalcancer,CRC)是消化系统常见的恶性肿瘤之一 ,其发生发展涉及到一系列遗传学改变 ,近来研究发现 :由错配修复 (mismatchrepair ,MMR)基因突变引起的微卫星不稳定性 (microsatelliteinstability ,MSI)是散发性结直肠癌发生的重要机制。1　肿瘤微卫星不稳定性微卫星 (microsatellite ,MS)是指基因组中小于 10个核苷酸的简单重复序列 ,以两个核苷酸组成的 (CA) n 重复序列最为丰富 ,重复次数为 10～ 5 0次 ,主要包括在基因的非编码区 ,其序列短 ,多数小于 2 0 0bp ,但有的长且序列独特 ,易于体外经PCR扩增 ,其重复单…     

HES1、JAG1、MT2A和MAFA介导茶多酚抑制微卫星不稳定结直肠癌

目的:探讨茶多酚是否能特异性抑制结直肠癌微卫星不稳定及其可能机制。方法:使用茶多酚的水溶液处理LoVo细胞(MSH2基因缺失的结肠癌细胞株)和SW480细胞(错配修复基因正常的结肠癌细胞株),四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖,基因扫描法检测细胞的微卫星序列变化,基因芯片检测茶多酚处理后LoVo细胞基因表达的变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测有变化的基因。结果:茶多酚对LoVo细胞和SW480细胞的抑制率随着药物浓度的增加而增加,随着时间的延长也呈逐渐上升趋势,但茶多酚对LoVo细胞的抑制率高于SW480细胞,在24、72h和1周时间点测得二者抑制率的差异有统计学意义。经过茶多酚处理后,LoVo细胞的微卫星序列有趋于稳定的趋势。基因芯片和实时荧光定量PCR检测结果提示茶多酚能抑制MT2A、MAFA、HES1和JAG1基因的表达,治疗前后基因表达差异均有统计学意义。结肠癌相关基因检查发现,茶多酚能上调BAX和抑制P38基因,治疗前后基因表达差异有统计学意义,但是对于核因子-κB抑制不明显。结论:茶多酚有使LoVo的微卫星状态趋于稳定的趋势,并可抑制MT2...     

结直肠癌相关的DNA错配修复基因

结直肠癌 (ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ,ＣＲＣ)是消化系统常见的恶性肿瘤之一 ,可分为遗传性和非遗传性。遗传性结直肠癌有两种 :一种是家族性腺瘤息肉病 (ｆａｍｉｌｉａｌａｄｅｎｏｍａｔｏｕｓｐｏｌｙｐｏｓｉｓ,ＦＡＰ) ,另外一种是遗传性非息肉病性结直肠癌 (ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｎｏｎｐｏｌｙｐｏｓｉｓｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ,ＨＮＰＣＣ)。非遗传性结直肠癌即散发性结直肠癌 (ｓｐｏｒａｄｉｃｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ,ＳＲＣ)。研究发现 :在ＨＮＰＣＣ和部分ＳＲＣ发生的早期主要是ＤＮＡ错配修复 (ｍｉｓ ｍａ…     

结直肠癌发生发展的相关基因

目前,大肠癌的发生发展机制仍未清楚,一般认为是一个涉及多阶段、多步骤、多基因改变的复杂过程,包括癌基因的激活、抑癌基因的失活以及错配修复基因的突变等等。目前发现并证实多种与大肠癌的发生、发展有关的癌基因、抑癌基因。本文结合文献对APC、P^53、ras、DCC、微卫星不稳定性和转移相关基因的研究情况作一简述。     

遗传性非息肉病性结直肠癌的分子生物学研究现状

遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)不同于散发的结直肠癌,其发病机制至今仍未研究透彻。它的发病基础主要是DNA错配修复基因系统的缺陷,如hMLH1、hMSH2等,不能把复制过程中出现的DNA序列的错误纠正过来,从而引起了肿瘤的发生。另外,它还与微卫星不稳定性有关,如CpG岛的甲基化。转化生长因子β/Smad、Wntβ/-catenin信息通路参与了HNPCC的侵袭和转移过程。     

新疆维吾尔族 MT1XT20基因与微卫星不稳定结直肠癌相关性研究

检测临床手术切除43例新疆维吾尔族结直肠癌患者癌组织及相应癌旁正常组织中微卫星不稳定（MSI）状态,探讨 MT1XT20基因与新疆维吾尔族 MSI 结直肠癌发生的关系。通过聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）技术对新疆维吾尔族 MT1XT20基因与 MSI 结直肠癌检测及分析。在43例新疆维吾尔族患者中24例癌组织发生微卫星改变,总检出率为55.81%;8例发生一个微卫星位点改变,两个以上位点改变的有16例,癌旁正常组织中未检测到微卫星改变。在 MT1XT20位点上存在较高频率的微卫星改变,提示可能存在 MT1XT20基因与新疆维吾尔族 MSI 结直肠癌发病密切相关,为 MSI 结直肠癌的早期诊断提供了有意义的检测指标。     

Increased sensitivity of colorectal cancer cell lines with microsatellite instability to 5-fluorouracil in vitro

Objective To study the relationship between sensitivity to 5-FU and the status of a panel of microsatellite loci in three human colon cancer cell lines.Methods Cell viability in several concentrations of 5-FU was assessed by the MTT test. Expression of hMSH2 and hMLH1 in LoVo, SW480 and SW1116 cells were analyzed by immunocytochemical staining. Ten mononucleotide and dinucleotide microsatellite loci were analyzed by the PCR-SSLP-silver staining method. Results By MTT assay, it showed that LoVo cells were more sensitive than SW480 and SW1116 cells (0.8 μmol/L, 2.2 μmol/L and 1.9 μmol/L, respectively,P<0.05). By immunocytochemical staining, hMSH2 was expressed in SW480 and SW1116 cells but not in LoVo cells, while hMLH1 was positive in all three cell lines. The PCR-SSLP-silver staining of 10 microsatellite loci revealed that LoVo cells had a different pattern of electrophoretic bands compared with SW480 and SW1116 cells, manifesting both additions and band-shifts. Conclusion Together with hMSH2 and hMLH1, the status of a panel of microsatellite loci may be used as convenient predictors for drug-optimization or prognosis-assessment in colorectal cancer patients before chemotherapy.     

PMS2基因胚系突变结直肠癌患者免疫组化及微卫星不稳定的表达

目的 分析PMS2基因胚系突变结直肠癌患者的免疫组化及微卫星不稳定表达特征.方法 对符合Amsterdam Ⅱ、修订Bethesda标准、微卫星高度不稳定、免疫组化MMR蛋白表达阴性的结直肠癌患者使用二代测序进行MMR基因胚系突变检测.结果 共检测出PMS2胚系突变27例,其中致病性突变4例,意义未明突变23例.4例致病性突变均表现为PMS2免疫组化单独表达缺失及高度微卫星不稳定.意义未明突变患者中33.3%(7/21)表现为PMS2表达缺失,52.6%(10/19)表现为高度微卫星不稳定.结论 PMS2基因致病性胚系突变结直肠癌倾向于表现为相应蛋白单独表达阴性.PMS2基因意义未明突变相应的表型多变,致病性分类尚需更进一步资料.     

遗传性非息肉病性结直肠癌中环氧合酶2的表达及与错配修复基因表达和微卫星不稳定的相关性

目的 探讨遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)腺瘤及癌组织中环氧合酶2(COX-2)的表达及其与错配修复(MMR)基因蛋白表达、微卫星不稳定(MSI)之间的关系.方法 来源于33个HNPCC家系的大肠腺瘤28例、大肠癌14例,随机留取经病理确诊的32例散发大肠腺瘤和24例散发大肠癌标本作为对照;采用免疫组织化学和PCR技术,检测腺瘤及癌组织中COX-2、MMR基因(hMLH1、hMSH2、hMSH6)蛋白表达及BAT-25、BAT-26、D2S123、D5S346、D17S250 5个微卫星位点的MSI状态.结果 COX-2在HNPCC腺瘤及癌组织中高表达率分别为53.6%(15/28)、42.9%(6/14),在散发大肠腺瘤和大肠癌中高表达率分别为62.5%(20/32)、91.7%(22/24),HNPCC癌组织中的COX-2表达明显低于散发大肠癌(P＜0.05).HNPCC大肠癌中MMR蛋白表达缺失率、高度微卫星不稳定(MSI-H)发生率[均为71.4%(10/14)]明显高于散发大肠癌[均为12.5%(3/24),均P＜0.05].10例MMR蛋白表达缺失的HNPCC大肠癌中,8例为COX-2低表达;4例MMR蛋白表达阳性的HNPCC大肠癌全部为COX-2高表达.在MMR表达缺失的HNPCC大肠癌、HNPCC腺瘤、散发大肠癌中COX-2的表达均显著少于MMR表达阳性者(均P＜0.05).MSI-H的HNPCC大肠癌、HNPCC大肠腺瘤、散发大肠癌中COX-2低表达率分别为80.0%(8/10)、66.7%(12/18)、66.7%(2/3);与微卫星稳定(MSS)组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 与散发性大肠癌相比,COX-2在HNPCC大肠癌组织中表达明显减少;COX-2在大肠腺瘤及癌组织中的表达率与MMR蛋白表达缺失和MSI-H呈明显的负相关;COX-2、MMR蛋白表达、MSI的检测对于进一步研究大肠肿瘤的发病途径及干预治疗具有重要意义.     

顺铂及拓扑替康对卵巢癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 :了解顺铂 (DDP)、拓扑替康 (TPT)单独及联合应用对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法 :裸鼠右侧背部皮下接种人卵巢癌SKOV3细胞 ,2 1d后分 4组治疗 ,每组 6只动物。对照组 ,腹腔注射无菌生理盐水 ;DDP组 ,腹腔注射DDP 3mg·kg-1 ;TPT组 ,腹腔注射TPT 5mg·kg-1 ;DDP +TPT组 ,腹腔注射DDP 3mg·kg-1 ,6h后腹腔注射TPT 5mg·kg-1 ;上述药物均每 4d注射 1次 ,共注射 4次 ,于实验第 39d处死裸鼠。治疗期间观察并记录各组裸鼠皮下移植瘤的生长情况 ,计算肿瘤体积、肿瘤生长抑制率 ,绘制肿瘤生长曲线。结果 :各治疗组治疗后肿瘤体积和抑瘤率与对照组相比差异均具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。与DDP及TPT组比较 ,DDP +TPT联合用药组肿瘤体积明显减小 (P <0 .0 0 1 ) ,抑瘤率明显增高 (P <0 .0 0 1 )。结论 :DDP与TPT联合用药比 2药单独应用抑制肿瘤生长的作用更强 ,二者具有协同抗癌作用     

MSI、HGF 与大肠癌患者预后关系的初步研究

目的 探讨微卫星不稳定性（MSI）和肝细胞生长因子（HGF）对大肠癌患者预后的影响。方法选取2011 年4 月-2014 年7 月四川省巴中市中医医院收治的大肠癌患者80 例,记录MSI 患者和HGF 阳性患者的生存率,对患者的临床资料进行单因素和COX 回归分析。结果 MSI 患者14 例,1、3 和5 年生存率分别为92.86%、85.71% 和71.43% ;非MSI 患者14 例,1、3 和5 年生存率分别为92.42%、74.24% 和56.06%。HGF 阳性患者14 例,1、3 和5 年生存率分别为89.47%、73.68% 和54.39% ;HGF 阴性患者14 例,1、3 和5年生存率分别为100.00%、82.61% 和73.91%。不同大体类型、TNM 分期、分化程度、是否淋巴结转移、辅助化疗、MSI、HGF 阳性和阴性患者的5 年生存率比较,差异有统计学意义（P <0.05）。TNM 分期Ⅲ、Ⅳ,以及淋巴结转移、HGF 阳性是影响大肠癌患者生存状况的独立危险因素,辅助化疗和MSI 是患者生存的保护因素（P <0.05）。结论 MSI、HGF 与大肠癌患者预后密切相关,其中MSI 患者比非MSI 患者预后佳,而HGF 阳性患者预后较阴性患者差。     

茶多酚对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的：通过观察茶多酚在体内对人鼻咽癌细胞的抑制作用,探讨其可能的抗癌机制。方法以人鼻咽癌细胞株HONE1建立裸鼠皮下移植瘤模型,以茶多酚腹腔注射干预,在观察抑瘤率基础上,以实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测裸鼠移植瘤VEGF在mRNA及蛋白水平上的表达变化。结果茶多酚具有显著抑制鼻咽癌细胞 HONE1移植瘤生长的作用,与模型对照组相比,低、高剂量茶多酚组体内抑瘤率分别为18．82％、47．66％,呈浓度相关性（P＜0．05）;荧光定量 PCR及Western blot结果示,茶多酚可下调VEGF的mRNA和蛋白表达水平,且呈浓度依赖性,其中高剂量组变化明显,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论茶多酚对人鼻咽癌HONE1细胞裸鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用,机制可能与调节VEGF表达,从而抑制肿瘤血管生成等作用有关。     

Role of microsatellite instability in occurrence of colorectal carcinoma and its prognostic significance

Colorectalcarcinoma(CRC)isoneofthemostcommonmalignanttumorsinourcountryanditsmechanismisrathercomplicatedandmayberelatedtoaseriesofalterationsofmoleculargenetics.Recentstudieshaverevealedthattheoccurrenceofhereditarynon--polyposlscolorectalcancer(HNPCC)maybeassociatedwithmicrosatelliteinstability(MSI)causedbymutationinmismatch'LllHowever,noreportaboutithasrepairgenes.beenfoundinourcountry.Therefore,weexaminedMSIat6microsatelliteloci(D18S34,D175799,D55409.TCF--2,RbandP53)usingPCR--S…     

微卫星不稳定性在大肠癌发生中的作用及其与预后的意义

目的：探讨微卫星不稳定性在大肠癌发生中的作用及其与大肠癌预后的关系。方法：采用ＰＣＲ－ＳＳＬＰ法对５６例大肠癌Ｄ１８Ｓ３４，Ｄ１７Ｓ７９９，Ｄ５Ｓ４０９，ＴＣＦ－２，ｐ５３和Ｒｂ６个位点微卫星不稳定性进行了检测。结果：显示大肠癌ＭＳＩ总阳性率４４．６４％，其中，ＨＰＮＣＣ≥２个位点ＭＳＩ阳性率７５．００％，散发性大肠癌≥２个位点阳性率２８．８５％。ＭＳＩ阳性大肠癌患者３、５年生存率高于ＭＳＩ阴性患者。结论：ＭＳＩ可能为大肠癌发生的又一种分子机制。ＭＳＩ阳性大肠癌生物学行为较好，预后较佳，对其检测可能有助于大肠癌预后的判断