川芎嗪对胶质瘤干细胞裸鼠皮下移植瘤生长、TGF-β信号通路和上皮-间质转化的影响

目的：探讨川芎嗪对胶质瘤干细胞（GSCs）裸鼠皮下移植瘤生长、转化生长因子β(TGF-β)信号通路和上皮-间质转化（EMT）的影响,为胶质瘤临床治疗药物的选择提供参考。方法：收集人脑胶质瘤细胞系U87细胞,培养、分离、富集并鉴定GSCs。40只雌性BALB/c裸鼠,建立GSCs裸鼠皮下移植瘤模型,成模后随机分为模型组和低、中及高剂量川芎嗪组,每组10只。低、中和高剂量川芎嗪组裸鼠每3 d腹腔注射给药1次,给药剂量分别为1.5、3.0和6.0 mg·kg-1,模型组裸鼠仅腹腔注射等量生理盐水,连续15 d。测量各组裸鼠移植瘤体积,称瘤质量,计算瘤质量抑制率,绘制肿瘤生长曲线。HE染色观察各组裸鼠肿瘤组织病理形态表现,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组裸鼠肿瘤组织中TGF-β1和TGF-β受体Ⅰ（TβRⅠ）mRNA表达水平,Western blotting法检测各组裸鼠肿瘤组织中TGF-β1、TβRⅠ、母亲DPP同源物2/3(Smad2/3)、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、TWIST家族bHLH转录因子1 (TWIST1)、波...     

抗OEA单抗-β-葡萄糖苷酶偶联物／苦杏仁甙前药系统对裸鼠结直肠癌移植瘤的疗效观察

目的观察β-葡萄糖苷酶／苦杏仁甙前药系统对裸鼠人结直肠癌移植瘤的靶向治疗作用。方法建立表达癌胚抗原(CEA)的人结直肠癌荷瘤裸鼠模型，将抗CEA单抗-β-葡萄糖苷酶偶联物于成瘤后以1000U／kg自尾静脉注射，72h后按50mg／kg给予苦杏仁甙前药，每周1次，共3次，6周后计算肿瘤体积、瘤重抑制率，并观察肿瘤组织的凋亡变化及该系统对裸鼠主要脏器的毒性。结果抗CEA单抗-β-葡萄糖苷酶偶联物／苦杏仁甙前药系统，能有效抑制裸鼠移植瘤的生长，在试验用的治疗剂量下未发现对主要脏器有明显的毒性作用。结论抗CEA单抗-β-葡萄糖苷酶偶联物能发挥良好的导向作用，有效激活苦杏仁甙前药发挥抗肿瘤作用，具有潜在的肿瘤治疗价值。     

Effect of Hedyotis Diffusa Willd Combined with Low-dose 5-fluorouracil on Antiangiogenesis in Hepatocellular Carcinoma

目的 探讨白花蛇舌草联合低剂量5-氟尿嘧啶(5-FU)对人肝癌HepG2细胞皮下移植瘤血管内皮生长因子(VEGF)及转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响. 方法 建立裸鼠皮下移植性肝癌模型,随机分为荷瘤对照组(灌胃生理盐水)、低剂量5-FU组(10mg/kg·d-1 5-FU)及联合组(10 mg/kg·d-1 5-FU+6 g/kg·d-1白花蛇舌草).连续给药4周后处死,检测肿瘤体积和重量,计算抑瘤率,免疫组织化学染色检测瘤组织VEGF和TGF-β的表达. 结果 较对照组而言,低剂量5-FU组和联合组抑瘤率明显升高,VEGF和TGF-β的表达强度明显减弱,以联合组作用效果更为明显,差异有统计学意义. 结论 白花蛇舌草能够增强低剂量5-FU对肿瘤血管生长因子VEGF和TGF-β的抑制作用,具有增强低剂量5-FU抗血管生成的作用.     

羊栖菜多糖对卵巢上皮癌裸鼠移植瘤TGF-β/Smad通路及癌细胞凋亡的影响

目的：探究羊栖菜多糖（SFPS）对卵巢上皮癌裸鼠移植瘤转化生长因子-β/Smad(TGF-β/Smad)通路及癌细胞凋亡的影响。方法：体外培养人卵巢上皮癌OVCAR3细胞,建立卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为模型组（M组）、SFPS低[SFPS-L,10 mg/(kg·d）]、中[SFPS-M,20 mg/(kg·d）]、高[SFPS-H,40 mg/（kg·d）]剂量组,每组10只,干预21 d。观察给药期间各组裸鼠瘤生长情况;给药结束后,原位末端标记法（TUNEL）检测移植瘤中癌细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测移植瘤组织中TGF-β(TGF-β)、Smad mRNA表达水平,免疫印迹（Western Blot）法检测移植瘤组织中Bax、Bcl-2、TGF-β1、Smad 4蛋白表达量。结果：随治疗时间延长,M组、SFPS-L组、SFPS-M组、SFPS-H组裸鼠移植瘤体积显著增加（P<0.05）;与M组比较,治疗后第3、7、14、21 d SFPS-L组、SFPS-M组、SFPS-H组裸鼠移植瘤体积均依次降低（P<0.05）。治疗结束后,与M...     

结直肠癌患者血清TGF—β1的检测及临床意义

目的：探讨结直肠癌患者血清转化生长因子β1（transforming growth factor-beta1,TGF-β1）含量变化的临床意义。方法：采用ELISA法检测185例结直肠癌,46例结直肠腺瘤息肉、33例炎症性肠病患者和30位正常对照者及结直肠癌术后随访组、复发组血清TGF-β1与CEA的含量,分析血清TGF-β1含量与结直肠癌病理特征的关系。结果：结直肠癌组及肿瘤复发组TGF-β1和CEA含量显著高于正常组（P〈0．001）;结直肠腺瘤息肉组及炎症性肠病组TGF-β1含量亦明显高于正常组（P〈0．05）而CEA含量无明显升高（P〉0．05）。术后各随访组TGF-β1与CEA含量较术前显著降低（P〈0．001）。结直肠癌组血清TGF-β1含量与肿瘤分化程度、病理分期均呈正相关（r分别为0．376和0．612,P〈0．01）,与肿瘤大小相关（t=2．210,P〈0．05）,而与肿瘤部位无关（P〉0．20）。结论：血清TGF—β1可作为结直肠癌具有一定临床价值的肿瘤标志物,检测其有助于对结肠癌的临床诊断与评价及对术后复发及高危对象的监测。     

敲除TSPAN1抑制人结肠癌细胞的生长和侵袭

目的 TSPAN1能够影响人结直肠癌细胞的增殖、扩散和侵袭。方法 用腺病毒同源重组的方法建立TSPAN1缺失的人结直肠癌HCT116细胞系,CCK-8、克隆形成、划痕和Transwell实验分别检测缺失TSPAN1的细胞生长速率、成瘤、迁移和侵袭能力。裸鼠成瘤实验检测TSPAN1对肿瘤扩散的影响。双荧光素酶实验验证TSPAN1对雌激素受体和TGF-β受体活性的影响。结果 缺失TSPAN1的HCT116细胞的生长速率、成瘤、迁移和侵袭能力显著降低。在裸鼠中分别注射野生型和缺失TSPAN1的HCT116细胞,后者肿瘤扩散变慢,并且裸鼠的成活率提高。过表达TSPAN1能够激活雌激素受体和TGF-β受体。结论 TSPAN1可能通过雌激素受体和TGF-β受体通路来调节细胞增殖和侵袭过程,并且为治疗结直肠癌提供了潜在的新靶标。     

HES1、JAG1、MT2A和MAFA介导茶多酚抑制微卫星不稳定结直肠癌

目的:探讨茶多酚是否能特异性抑制结直肠癌微卫星不稳定及其可能机制。方法:使用茶多酚的水溶液处理LoVo细胞(MSH2基因缺失的结肠癌细胞株)和SW480细胞(错配修复基因正常的结肠癌细胞株),四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖,基因扫描法检测细胞的微卫星序列变化,基因芯片检测茶多酚处理后LoVo细胞基因表达的变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测有变化的基因。结果:茶多酚对LoVo细胞和SW480细胞的抑制率随着药物浓度的增加而增加,随着时间的延长也呈逐渐上升趋势,但茶多酚对LoVo细胞的抑制率高于SW480细胞,在24、72h和1周时间点测得二者抑制率的差异有统计学意义。经过茶多酚处理后,LoVo细胞的微卫星序列有趋于稳定的趋势。基因芯片和实时荧光定量PCR检测结果提示茶多酚能抑制MT2A、MAFA、HES1和JAG1基因的表达,治疗前后基因表达差异均有统计学意义。结肠癌相关基因检查发现,茶多酚能上调BAX和抑制P38基因,治疗前后基因表达差异有统计学意义,但是对于核因子-κB抑制不明显。结论:茶多酚有使LoVo的微卫星状态趋于稳定的趋势,并可抑制MT2...     

人结直肠癌细胞HCT116红色和绿色荧光标记肿瘤模型的建立

目的筛选表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白基因的人的单克隆结直肠癌细胞系,为体内监测肿瘤的早期生长建立一种新的肿瘤动物模型。方法以脂质体2000介导chickenβ-actin-GFP-neo和chickenβ-actin-DsRed-neo转染人结直肠癌细胞HCT-116,经梯度浓度G418筛选获得稳定表达红色和绿色荧光蛋白的细胞克隆并扩大培养。BALB/CA-nu裸鼠皮下接种1&#215;10^6个发光细胞使其成瘤,活体荧光成像系统观察肿瘤的生长情况。结果获得了稳定表达GFP、DsRed的人结肠癌细胞株,将其接种到裸鼠体内可成瘤,利用活体成像系统观察了肿瘤的生长过程,肿瘤的发光随着观察时间的延长而增加。结论红色和绿色荧光蛋白能够在人结直肠癌细胞HCT-116中长期稳定表达,用红色和绿色荧光蛋白标记的人结直肠癌细胞HCT-116建立的裸鼠肿瘤模型为进一步研究结肠肿瘤和相应的药物筛选提供了一种简便、可行的新方法。     

α 1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞RMG-1裸鼠体内致瘤性及血管生成因子表达的影响

目的 比较α1,2岩藻糖转移酶(α1,2-FT)基因转染前后卵巢癌细胞株RMG-Ⅰ的裸鼠体内致瘤性及移植瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及碱性成纤维生长因子(b-FGF)表达的变化.方法 我们在前期工作中利用基因转染技术将α1,2-FT基因转入人卵巢癌细胞株RMG-Ⅰ,建立了α1,2-FT及Lewis y高表达细胞株RMG-I-H.本实验将转染前后细胞种植裸鼠皮下建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,观察两组肿瘤生长情况.5周后处死动物,测量移植瘤质量,免疫组织化学方法检测肿瘤组织VEGF、TGF-β1及b-FGF的表达.结果 两组裸鼠均有皮下荷瘤形成,但转染组的成瘤时间(5.2±0.8d)早于未转染组(8.8±1.3d),且转染组的瘤质量和体积与未转染组相比亦明显增加(P<0.05).转染组裸鼠移植瘤组织VEGF、TGF-β1及b-FGF的表达均明显高于未转染组(P均<0.05).结论 α1,2-FT基因转染能增强卵巢癌细胞RMG-Ⅰ的体内致瘤性,上调裸鼠移植瘤组织VEGF、TGF-β1及b-FGF的表达.提示α1,2-FT及Lewis y抗原参与血管生成,其高表达在促进血管生成中可能发挥重要作用.     

^153sm—CEA单抗对结肠癌移植瘤裸鼠模型放射免疫治疗的实验研究

目的：观察^153Sm标记抗CEA单抗（^153Sm-CEA mAb)对肿瘤的抑制效应，探索^153sm-CEA mAb在荷人结肠癌移植瘤裸鼠模型中的放射免疫治疗作用。方法：体外培养的LoVo细胞株无菌接种于15只裸鼠前肢皮下，制备荷人结肠癌移植瘤裸鼠模型并分为3组，每组5只。在移植瘤接种后的第3天实施治疗，采用单次较大剂量治疗（11．1MBq/每鼠），治疗组注射^153Sm标记（DTPA环酐法）抗CEA单抗，单抗注射^153SmCl3的荷瘤裸鼠作为治疗对照组，非治疗对照组注射100μl生理盐水.给药后定期测量裸鼠的体质量和肿瘤生长体积并进行肿瘤的组织病理学观察。结果：^153Sm-CEA mAb治疗组对肿瘤有明显的抑制作用，治疗第4周肿瘤生长抑制率达到74．29％，而非治疗组与对照组相比，动物体质量没有显著性差异。组织病理学结果提示^153Sm-CEA mAb治疗组肿瘤组织有坏死改变，而对照组肿瘤细胞呈典型的癌细胞形态。结论：^153Sm-CEA mAb对人结肠癌的荷瘤裸鼠具有抑制增长作用。^153Sm-CEA mAb作为一种新核素的导向治疗剂，具有定位诊断和导向治疗结肠癌的双重作用，具有良好的应用前景。     

茶多酚对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的：通过观察茶多酚在体内对人鼻咽癌细胞的抑制作用,探讨其可能的抗癌机制。方法以人鼻咽癌细胞株HONE1建立裸鼠皮下移植瘤模型,以茶多酚腹腔注射干预,在观察抑瘤率基础上,以实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测裸鼠移植瘤VEGF在mRNA及蛋白水平上的表达变化。结果茶多酚具有显著抑制鼻咽癌细胞 HONE1移植瘤生长的作用,与模型对照组相比,低、高剂量茶多酚组体内抑瘤率分别为18．82％、47．66％,呈浓度相关性（P＜0．05）;荧光定量 PCR及Western blot结果示,茶多酚可下调VEGF的mRNA和蛋白表达水平,且呈浓度依赖性,其中高剂量组变化明显,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论茶多酚对人鼻咽癌HONE1细胞裸鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用,机制可能与调节VEGF表达,从而抑制肿瘤血管生成等作用有关。     

绿茶提取物EGCG对人肝癌细胞株HepG2裸鼠移植瘤超微结构的影响

目的通过复制人肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,观察绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）干预对HepG2移植瘤的作用及其超微结构的影响。方法瘤体接种复制HepG2移植瘤模型,荷瘤裸鼠随机分组,实验组给予EGcG干预3用后处死裸鼠,剥离移植瘤,称重、测量长短径,计算抑瘤率;运用透射电镜观察移植瘤超微结构。结果实验组HepG2移植瘤体积、重量均明显小于对照组（P〈0．05）,抑瘤率达31．63％士4．09％;透射电镜观察,实验组HepG2移植瘤组织见不同时期凋亡细胞,部分形成凋亡小体,可见坏死瘤细胞及崩解细胞碎片;对照组呈现细胞形态怪并,核大畸形、电子密度不均,染色质明显,线粒体丰富等恶性肿瘤特有超微结构特点。结论EGCG对人肝癌细胞株HepG2裸鼠皮下移植瘤具有生长抑制作用;对比实验组与对照组移植瘤超微结构特点,推测EGCG可诱导HepG2移植瘤细胞凋亡。     

盲肠造瘘联合小肠排列术治疗腹茧症体会

目的 观察盲肠造瘘联合小肠排列术治疗腹茧症的临床效果.方法 回顾性分析收治的5例腹茧症患者的临床资料并随访其临床疗效.结果 该组患者手术均获成功,无死亡病例.术后恢复良好,术后半个月拔除盲肠造瘘管,20d左右痊愈出院.全部病例随访,平均(23.4±19.3)个月,其中1例分别于术后6个月与14个月出现肠梗阻,经对症保守治疗后治愈;其余病例随访均未见明显手术相关并发症.结论 盲肠造瘘联合小肠排列术是治疗腹茧症行之有效的手术方式之一.     

硒镉对裸鼠人肝癌细胞的协同影响作用

目的 研究微量元素硒镉对裸鼠人肝癌细胞的协同影响作用。方法 将SMMC-7721人肝癌细胞接种于BALB／C—nu／nu裸鼠。成瘤后，分组分别每日腹腔注射同体积不同浓度的硒镉溶液。分别于第5、10、15、20天观察肿瘤的变化。结果 腹腔注射镉组抑瘤率减小并变为负值。且随着镉浓度的增加抑瘤率负值的绝对值逐渐加大；而腹腔注射硒组。抑瘤率增大，且硒的抑瘤率与硒浓度成正相关。结论 镉可促进肝癌细胞在体内的生长，而硒可明显抑制机体肝癌细胞的生长。     

裸小鼠淋巴结的解剖和组织学特点

目的 研究裸小鼠淋巴结的解剖学和组织学特点。方法 使用手术显微镜解剖20只BALB/c裸小鼠和20只BALB/c小鼠,通过免疫组织化学方法比较了两者淋巴结中T淋巴细胞和B淋巴细胞表达的不同。结果 平均每只裸小鼠中包含23个淋巴结和一组大型淋巴结群。裸小鼠颈部淋巴结分布密度较高,其中颌下淋巴结及颈浅淋巴结在裸小鼠中大多数为2个(构成比分别为95%和90%),而在小鼠中大多数为4个(构成比分别为95%和90%),两者差异有统计学意义。无论小鼠还是裸小鼠的颈深淋巴结均为2个(构成比分别为100%和95%),两者差异无统计学意义。裸小鼠淋巴结中CD₃阳性的T淋巴细胞减少。细胞膜和细胞质着色的CD₃阳性表达的T细胞在裸小鼠的表达阳性率为15%,在小鼠的表达阳性率为100%,两者表达的差异有统计学意义。细胞膜阳性表达CD₂₀的B细胞在裸小鼠中的阳性率为95%,在小鼠中的阳性率为100%,两者表达的差异无统计学意义。结论 裸小鼠淋巴结分布的解剖图对于初学者有一定的帮助,裸小鼠颈部淋巴结密度较高的解剖学特点和缺乏CD₃阳性的T淋巴细胞将有助于更好地理解裸小鼠的淋巴结转移机制。     

双氢青蒿素对前列腺癌PC-3细胞体内生长及Caspase-3表达的影响

目的：研究双氢青蒿素（DHA）对前列腺癌PC-3细胞裸鼠种植瘤生长的抑制作用及对半胱天冬酶_3（Caspase-3）表达的影响,并探讨其可能的作用机制．方法：采用人前列腺癌PC·3细胞株建立裸鼠种植瘤模型,将20只模型鼠随机分为对照组,二甲基亚砜（DMSO）溶剂组,DHA0．1,0．2mmo/kg组．各组经13d干预后,计算抑瘤率;光镜及电镜观察肿瘤组织形态学变化,以Hoechst33258染色,荧光显微镜观察细胞凋亡,免疫组织化学法检测Caspase-3的表达水平．结果：DHA0．1,0．2mmol／kg组瘤质量明显〈对照组及DMSO溶剂组（P〈0．05）,DHA0．1,0．2mmol／kg组抑瘤率分别为69．221％,63．186％．光镜及电镜可观察到典型的凋亡细胞和凋亡小体;Hoechst33258染色可见DHA0．1,0．2mmol／kg组凋亡细胞明显增多,其凋亡细胞密度显著增大（P〈0．05）;免疫组化结果显示,DHA0．1,0．2mmol/fkg组Caspase-3表达明显升高（P〈0．05）．结论：DHA能够抑制前列腺癌PC．3细胞裸鼠种植瘤的生长,其机制可能与上调凋亡相关基因Caspase-3表达有关．     

Gene therapy with antisense c-myc adenovirus for human gastric carcino- ma cell line in vitro and for implanted carcinoma in nude mice

Sufficient infonnation has been accumulated to suggest that achvation and alnplilication of oncogenes and inachvation and fUnchonal failme of tUInor suPPressor genesare responsible for the inihation and deVelopment of human malignant disease lhrough a mulhstep PIDCess['].Gastric careinoma, one Of the most common inalig~t tUmors, can be successop ~ with sopry inthe early stage, but adVanced cases are usually refectoryto chemotherapy or ladiotherapy. COnSeopenily, genetherapy becomes an at…     

MG132联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的影响

目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的影响。方法:建立人宫颈癌裸鼠移植瘤模型,将荷瘤鼠分成4组,每组5只,分别给予腹腔注射。对照组:生理盐水0.2 ml,1次.d-1,共7 d。MG132组:5 mg.kg-1MG132,0.2 ml,1次.d-1,共7 d。顺铂组:3 mg.kg-1顺铂,0.2 ml,第3、5、7天,1次.d-1。MG132联合顺铂组:5 mg.kg-1MG132,0.2 ml,1次.d-1,共7 d;3 mg.kg-1顺铂,0.2 ml,第3、5、7天,1次.d-1。计算瘤体积,绘制瘤体生长曲线;称瘤重,计算抑瘤率及瘤体抑制率,比较各组荷瘤鼠瘤体积和瘤重的差异。结果:各组荷瘤鼠瘤体积两两比较差异均有统计学意义(P<0.001),MG132组、顺铂组以及MG132联合顺铂组的瘤体生长较对照组明显缓慢。荷瘤鼠瘤重各组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.001),各干预组的荷瘤鼠瘤重比对照组明显减轻。MG132组、顺铂组、MG132联合顺铂组荷瘤鼠抑瘤率分别为15%、48%和81%;MG132组、顺铂组、MG132联合顺铂组荷瘤鼠瘤重抑制率分别为9%、43%和69%。结论:MG132能抑制裸鼠体内Hela细胞移植瘤的生长,并增强顺铂对裸鼠Hela细胞移植瘤生长的抑制作用。     

硒茶与非硒茶对高胆固醇饮食小鼠血脂的影响

目的 :比较硒茶与非硒茶对脂质水平异常的动物个体血脂及脂蛋白代谢的影响。方法 :将高胆固醇饮食小鼠分为三组 ,分别常规饮水、饮用硒茶及非硒茶 ,14周后测定血浆TC、TG、LDL -C及HDL -C水平。结果 :高脂膳食 +非硒茶组TC、TG显著低于高脂膳食组 (P <0 .0 1) ,LDL -C及HDL -C与高脂膳食组无差异 ;而高脂膳食 +硒茶组TC、TG及LDL -C均显著低于高脂膳食组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,HDL -C高于高脂膳食组及高脂膳食 +非硒茶组 (P <0 .0 5 )。结论 :长期饮用硒茶能显著改善高胆固醇饮食小鼠血脂及脂蛋白代谢状况 ,且效果明显优于非硒茶。     

人眼眶横纹肌肉瘤动物模型的建立

目的:探讨建立人眼眶横纹肌肉瘤动物模型的方法. 方法:培养人胚胎型横纹肌肉瘤细胞株RD细胞,取对数生长期细胞分别接种于4周龄SCID鼠和60Co照射 (1 Gy) 后1 d 的BALB/c裸小鼠;选用成瘤BALB/c裸小鼠的瘤块移植入另一批4周龄BALB/c裸小鼠胁部皮下(组织块接种法).观察各组动物肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线;肿瘤组织行常规病理H-E染色并镜检. 结果:60Co照射后1 d裸小鼠成瘤时间约6～8周,SCID鼠组约3～4周,组织块接种法移植2周后裸小鼠瘤体较明显,3组动物的成瘤率均为100%;成功绘制出肿瘤生长曲线,肿瘤均呈进行性生长;病理检查示各组移植性横纹肌肉瘤与人体肿瘤标本所见类似.结论:成功建立了裸小鼠和SCID鼠人眼眶横纹肌肉瘤模型,组织块接种法可以缩短BALB/c裸小鼠成瘤时间,为进一步研究人眼眶横纹肌肉瘤奠定了基础.