竹节参离体培养及植株再生

目的:探索竹节参离体培养与植株再生技术及优化培养条件。方法:以竹节参的胚、茎、叶作为外植体,应用正交的方法,筛选出竹节参最佳的愈伤组织诱导和分化培养基。结果:竹节参不同外植体的最优消毒方法分别为,种子消毒采用75%酒精浸泡60 s,0.1%氯化汞浸泡12 min;茎和叶片采用75%酒精浸泡15 s,5%次氯酸钠浸泡5 min。光照条件下愈伤组织诱导的最佳培养基配方是,胚用MS+1.5 mg/L NAA+1.5 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L KT;茎用MS+1.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L KT,叶为MS+1.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 2,4-D+0.2mg/L KT;黑暗条件下,胚为MS+1.0 mg/L NAA+1.5 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L KT,茎为MS+1.5 mg/L NAA+1.5mg/L 2,4-D+0.1 mg/L KT,叶为MS+1.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L KT。丛芽诱导最佳培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L GA3。生根诱导最佳培养基为MS+...     

超声波提取卷丹鳞茎中总黄酮研究

本文对超声波方法和传统方法提取卷丹鳞茎中总黄酮进行试验比较,同时对影响超声波提取卷丹鳞茎中总黄酮的多个因素进行正交实验分析。结果表明:超声提取总黄酮效果较好;超声波法提取的最佳方法条件为:80%乙醇,料液比1∶30,在80℃下提取40 min,连续提取2次,黄酮的总提取率可达到99.25%。     

华南忍冬离体快繁与植株再生的研究

目的 通过对华南忍冬离体培养快繁技术的研究,解决华南忍冬（山银花）产业化生产中种源质量参差不齐和短缺问题.方法 用茎尖为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素进行培养.结果 用MS+ 6BA 1.5 mg/L+ NAA0.5 mg/L诱导培养,40d可获得丛生芽,继代用MS+ BA 1.2 mg/L+ NAA 0.2 mg/L培养,增殖率达3.9％;在1/2MS+NAA 1.0 mg/L条件下,可获得的生根苗.结论 该试验结果为山银花药材优质种苗的产业化生产奠定了基础.     

洋金花离体再生枝中的甾类化合物

洋金花Datura metel L.不同部位均含莨菪碱和莨菪胺。有人试图从其愈伤组织和发根培养物中获取这些生物碱,但收率很低。作者研究了该植物幼叶不定枝的再生和从体外繁殖枝中生产甾族化合物。     

不同产地博落回离体培养与植株再生研究

目的:探索不同产地的博落回离体培养效果差异,为筛选最适博落回植株再生材料提供研究基础。方法:采用植物组织培养技术对博落回叶片组织进行愈伤诱导及胚状体分化,并对结果进行分析。结果:安徽祁门、湖南炎陵和湖南高坊产地分别在不同培养阶段与其他产地比诱导率和分化率最高。结论:湖南高坊和安徽祁门的愈伤组织和胚状体的诱导及分化能力优于其他产地的样本。因此,不同产地叶片离体培养效果差异显著。     

HPLC法测定百合、卷丹、细叶百合中3种甾体皂苷的含量

目的 HPLC法同时测定百合、卷丹、细叶百合中3种甾体皂苷的含量。方法采用HPLC法,色谱柱为Akzonobel Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸,检测波长210 nm,流速1.0mL/min。结果 (25R)-26-O-(β-D-吡喃葡萄糖)-呋甾烷-5-烯-3β,22R,26-三羟基-3-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷(简称皂苷1)在2～12μg呈良好线性关系(r=0.9998);(25R)-螺甾烷-5-烯-3β-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-O-[β-D-葡萄糖-(1→6)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(简称皂苷2)在3.125～18.75μg呈良好线性关系(r=0.9999);(25R)-3β,17α-二羟基-5α-螺甾烷-6-酮-3-O-α-L-鼠李糖-(l→2)-O-[α-L-阿拉伯糖-(l→3)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(简称皂苷3)在1.125～9μg呈良好线性关系(r=0.9997)。皂苷1、2、3的平均回收率分别为97.72%、99.27%、98.96%,RSD分别为1.96%、1.78%、1.31%。结论所建立的HPLC法简便快速、准确度高,可用于百合药材的质量控制。     

卷丹百合快繁技术研究初探

以卷丹百合叶片、珠芽、鳞茎为扦插材料,将材料分别放入3种不同基质、不同生根剂中浸泡不同时间,60 d后观察着生小鳞茎及生根的情况并进行统计分析。结果表明：三种材料中,以鳞片扦插繁殖效果最好,药剂处理以②号生根剂处理40 min效果最佳,基质以园土：河沙（1∶3）基质效果最好。     

百合鳞片离体快速繁殖技术研究

目的建立兰州百合的快速繁殖体系,为培育兰州百合优良种质资源奠定基础。方法以兰州百合鳞片和鳞茎为外植体,探讨消毒时间、接种方式、激素浓度、大量元素的用量对繁殖效率的影响。结果鳞片最佳消毒时间为75%酒精30 s和0.1%升汞溶液13 min;取鳞片基部且近轴面向上放置诱导率最高;优化培养基配方:诱导培养基:MS+0.6 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L蔗糖;增殖培养基:MS+0.8 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+30 g/L蔗糖;生根培养基:1/4MS+0.5 mg/L NAA+10 g/L蔗糖。结论兰州百合离体快速繁殖体系的建立能提高繁殖效率,避免病虫害的危害,为其优良种质的选育奠定了良好的基础。     

卷丹及主要食用百合EST-SSR鉴别体系的构建

目的开发卷丹Lilium lancifolium、兰州百合L. davidii var. willmottia、岷江百合L. regale、香水百合L. casa和龙牙百合L. brownie var. viridulum的EST-SSR分子鉴别体系,分析EST-SSR分子标记技术对百合近缘种的开发效率和鉴别能力。方法利用MISA.pl程序对NCBI公布的百合属EST基因序列进行SSR位点的识别,通过Primer3程序模块批量生成EST-SSR引物,经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳对引物进行初筛,用聚丙烯酰胺凝胶电泳验证初筛引物,标记并分析不同种质的特征泳带,构建鉴别体系。结果共设计了199对SSR引物,经过26对引物的筛选,获得了2对高效鉴别引物,其中引物JZ391构建的分子鉴别体系,可有效鉴别混掺的商品百合,具有一定的实用价值。结论基于研究材料具有极端的遗传特征,本实验鉴定标记开发非常高效,研究结果证实了物种的遗传基础是影响其EST-SSR分子标记开发效率的重要因素,同时,该案例可为其他类似百合遗传基础的中药材进行EST-SSR标记开发,提供参考尺度。     

怀山药的离体繁殖

怀山药带节茎段的ＭＳ＋６－ＢＡ１－２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．１－１ｍｇ／Ｌ的培养基上培养,均能直接形成多芽体,均芽数为３－５。将多芽体转和ＭＳ或ＭＳ＋ＫＴ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０２ｍｇ／Ｌ＋ＰＰ３３３０．１ｍｇ／Ｌ的培养基上均能诱导生根,形成再生植株。但后者形成的苗生长健壮。叶色浓绿,有较强的生活力。     

卷丹百合快繁技术研究初探△

以卷丹百合叶片、珠芽、鳞茎为扦插材料,将材料分别放入3种不同基质、不同生根剂中浸泡不同时间,60d后观察着生小鳞茎及生根的情况并进行统计分析.结果表明:三种材料中,以鳞片扦插繁殖效果最好,药剂处理以②号生根剂处理40 min效果最佳,基质以园土∶河沙(1∶3)基质效果最好.     

昆明山海棠离体胚培养的研究

昆明山海棠离体胚的萌发率是在光照强度为400lx,蔗糖浓度为3%,总氮量为230mg/L的怀特基本培养基上为最高。并由无菌苗切段获得完整植株再生,初步摸索到利用无菌苗快速植株的方法。     

巴戟天离体再生及农杆菌介导的遗传转化

目的 :在巴戟天离体再生的基础上 ,建立一套根癌农杆菌转化的有效方法 ,为巴戟天新品种选育、引入外源目的基因奠定基础。方法 :以巴戟天带节茎为材料 ,农杆菌菌株为EHA101,含有质粒载体pGA482GG ,质粒上插入了GUS、NPTⅡ基因。结果 :MT基本培养基附加BA 1mg·L^-1,外植体出芽率最高 (97.8%) ,BA浓度升高 ,出芽率下降。外植体在培养基上的接种方式 ,以竖放为好 ,出芽所需的时间短且出芽率高。根的诱导 ,以MT附加 0.2～0.5mg·L^-1NAA效果较好 ,生根率可达 80.0%以上。巴戟天带节茎进行遗传转化 ,卡那霉素作为选择试剂 ,浓度为 50mg·L^-1。头孢霉素用作抑菌剂 ,浓度为 300mg·L^-1。经感染的外植体 ,在选择培养基上筛选 1.5个月后 ,抗性芽发生率为 14.8% ,GUS基因表达检测结果 ,抗性植株中 ,GUS反应呈阳性所占比例为 22.2%。结论 :通过探讨巴戟天的离体培养及根癌农杆菌介导的遗传转化 ,获得了较高的离体再生频率 ,建立了有效的遗传转化系统。     

卷丹甾体皂苷和酚类成分及其抗氧化活性研究

目的对卷丹Lilium lancifolium的鳞茎进行甾体皂苷和酚类成分及其体外抗氧化活性研究。方法应用多种柱色谱(包括正相、反相和凝胶柱色谱)分离和波谱分析方法对卷丹进行分离和结构鉴定,采用ABTS自由基和DPPH自由基清除法对化合物的抗氧化活性进行筛选研究。结果从卷丹中分离得到11个化合物,分别鉴定为顺-1-O-对香豆酰基甘油酯(1)、反-1-O-对香豆酰基甘油酯(2)、咖啡酰基甘油酯(3)、3,4-二羟基苯甲醛(4)、邻羟基苯甲酸(5)、(25R,26R)-26甲氧基螺甾烷-5-烯-3β-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-[β-D-葡萄糖-(1→6)]-β-D-葡萄糖苷(6)、(25R,26R)-3β,17α-羟基-26甲氧基螺甾烷-5-烯-3β-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-[β-D-葡萄糖-(1→6)]-β-D-葡萄糖苷(7)、薯蓣皂苷元3-O-{O-α-L-鼠李糖基-(1→2)-O-[β-D-木糖基(1→3)]-β-D-葡萄糖苷}(8)、(25R)-3β,17α-二羟基-5α-螺甾烷-6-酮-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷(9)、(25R)-3β-羟基-5α-螺甾烷-6-酮-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→2)-β-D-葡萄糖苷(10)、(25R)-螺甾烷-5-烯-3β-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)]β-D-吡喃葡萄糖苷(11)。体外抗氧化活性实验结果显示酚类化合物1～5对ABTS和DPPH自由基清除作用较强,抗氧化活性较强;而甾体皂苷类抗氧化活性比酚类化合物弱。结论化合物1～5和9、10为首次从该植物中分离得到。卷丹鳞茎中的酚类化合物和甾体化合物对不同自由基具有不同程度的清除作用,有一定的抗氧化活性。     

药用石斛离体培养研究概述

对石斛离体培养中外植体、基本培养基、生长活性物质的选择及培养过程中的细胞学特征方面的研究进行了简要概述,分析了其中存在的问题并提出了一些建议。     

地黄高效叶片离体再生系统的建立△

目的:通过分析不同浓度激素对地黄品种金九的愈伤诱导、再生芽分化等方面的影响,以期建立高效的地黄叶片再生系统,为地黄的快速繁殖和遗传转化研究奠定基础。方法:分析在添加不同浓度NAA、6-BA情况下地黄叶片的愈伤诱导率、再生芽分化率、再生芽生根率和增殖系数。结果:在多个激素浓度组合下均具有较高的叶片愈伤诱导率。最适于金九的叶片再生芽分化的激素浓度为NAA0.1mg·L-1、6-BA2.0mg·L-1。在适宜的激素浓度范围内,金九的再生芽分化率很高,最高可达96.67%。添加0.1mg·L-1的NAA有利于再生地黄植株壮苗和提高生根率。在含有NAA0.1mg·L-1、6-BA0.5mg·L-1的MS培养基上培养,则有利于再生芽的增殖。结论:NAA、6-BA的浓度对叶片再生芽分化、生根和增殖有显著影响。金九可作为地黄的分子生物学研究和遗传转化受体的良好材料。     

蜂王浆对离体蟾蜍及离体家兔小肠心肌收缩力、频率的影响

目的:观察蜂王浆对离体蟾蜍心肌和离体家兔离体小肠平滑肌收缩力、频率的影响并探讨其作用机制。方法:分别应用离体心脏灌流方法及体外麦氏浴管法观察蜂王浆对离体蟾蜍心肌及离体家兔小肠收缩力、频率的的影响。结果:①在1∶1000-1∶100范围,蜂王浆抑制离体蟾蜍心肌收缩力、心率,呈剂量依赖关系。阿托品(1μmol/L)可拮抗蜂王浆(1∶800)对离体蟾蜍心肌收缩幅度的抑制。②在1∶400-1∶100浓度之间,蜂王浆促进离体家兔小肠平滑肌的收缩幅度和收缩频率,呈剂量依赖关系。而在1∶1000,1∶800,1∶600浓度之间,蜂王浆确抑制离体家兔小肠平滑肌的收缩幅度和收缩频率;阿托品(1μmol/L)可拮抗蜂王浆(1∶100)对离体家兔小肠平滑肌心肌收缩幅度、频率的抑制,呈剂量依赖关系。③在低钙情况下,蜂王浆对离体蟾蜍心肌收缩力、心率的影响与正常钙情况下相类似。结论:蜂王浆对离体蟾蜍心肌及离体家兔小肠收缩力、频率的影响与蜂王浆中的乙酰胆碱的作用有关。     

浙贝母种胚的离体培养

本文报道了浙贝母Ｆｒｉｔｉｌｌａｒｉａ ｔｈｕｎｂｅｇｉｉ种胚，经ＭＳ＋２，４－Ｄ１．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋水解蛋白３００ｍｇ／Ｌ和ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ等培养基分化和脱分化后，形成小鳞茎和正常植株。