一起由肠炎沙门菌引起食物中毒事件的病原学检验分析

目的 通过脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)技术分析一起食物中毒事件病原菌的相关性，从遗传学确定该起事件发生的原因。方法 参照《感染性腹泻诊断标准》(WS 271—2007),对采集的肛拭子和可疑食物等样品进行病原菌培养、分离和鉴定。利用脉冲场凝胶电泳对分离菌株进行分子分型，采用Bio Numerics 5.1软件开展相关性分析。药敏试验的方法为微量肉汤稀释法。结果 本起食物中毒事件共分离到4株肠炎沙门菌，分别分离自患者肛拭子(2株)、厨师肛拭子(1株)与可疑食物(1株)。4株分离菌对7种抗生素存在不同程度的耐药性；PFGE溯源性分析结果显示，4株分离菌呈现高度同源。结论 本起食物中毒事件由食用被肠炎沙门菌污染的食物所致。分离株的多重耐药性应引起相关部门的重视。PFGE分子分型从全基因组的层面分析菌株的遗传学关系，是病原菌溯源研究的重要手段。     

一起肠炎沙门菌引起的食物中毒事件的病原学检测及溯源

目的 通过实验室检测分析,查明某起食物中毒事件的原因,为今后防控细菌性食物中毒提供参考。方法 针对各县区送检的病人肛拭子或粪便、市场监督管理局送检的食品样本进行食源性致病菌PCR检测、分离培养、生化鉴定、血清学分型、药敏实验、脉冲场凝胶电泳（PFGE）,分析不同菌株之间的同源性。结果 61份临床及食品样本经荧光定量PCR检测,59份为沙门菌阳性,并分离鉴定到59株沙门菌,经血清分型确认均为肠炎血清型,59株肠炎沙门菌的药敏结果大致相同,PFGE带型完全一致。结论 本次食物中毒事件是由于患者食用了经相同肠炎沙门菌污染的食物引起的,通过PFGE基因分型技术,对本次肠炎沙门菌引起食物中毒事件成功溯源。     

一起肠炎沙门菌食物中毒事件病原学分析

目的对一起肠炎沙门菌引起的食物中毒事件开展病原菌分离鉴定及分型分析,为临床治疗和类似事件处置提供参考依据。方法收集中毒事件流行病学资料;采集患者排泄物、从业人员肛拭、可疑食品和环境样本,运用PCR方法快速筛查病原菌;采用实验室传统方法进行细菌分离和病原学鉴定;利用脉冲场凝胶电泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis, PFGE)对病原菌进行分子分型及同源分析。结果 23份可疑样本中检出8株肠炎沙门菌,其中可疑食品、患者排泄物和环境样本中分别检出4株、2株和2株。PFGE分型结果显示8株肠炎沙门菌DNA条带图谱完全一致,属同一克隆株。结论本起事件为肠炎沙门菌污染食品引起的食物中毒事件,PCR快速筛查和PFGE同源分析对食物中毒事件快速判定及有效控制提供技术支持。     

脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术在一起肠炎沙门氏菌食源性疾病暴发中的溯源分析

目的对一起食源性疾病暴发事件调查中采集的样本进行致病菌检验,使用脉冲场凝胶电泳(Pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)技术对菌株分子流行病学检测以确定引起暴发事件病原菌间的关联性。方法依据GB 4789方法对采集的样品进行病原菌分离、鉴定及药敏试验(K-B法),应用PFGE检测技术对检出的肠炎沙门氏菌进行分子分型,通过BioNumerics软件进行聚类分析。结果从4份病人肛拭子标本、1份剩余三明治和1份操作台擦拭物中均分离出肠炎沙门氏菌,经酶切后PFGE电泳聚类图谱相似性100%。结论经PFGE分子分型分析,确认这是一起由食用了肠炎沙门氏菌污染的食物后引起的食源性疾病。PFGE可有效应用于食物中毒溯源分析及分子流行病学研究。     

一起由肠炎沙门菌引起食物中毒的实验室检测分析

目的食物中毒的病原菌检测。方法分别采集当日食物中毒学生肛拭子45份,当日相关工作人员肛拭子55份,剩余食物共34份,当日砧板、刀等物表涂抹物5份,饮用水样品5份等,样品参照GB/T4789-2003、WS/T.9-1996、WS/T81-1996、GB17012-1997进行检测。结果45份学生肛拭子检出肠炎沙门菌14株,占31.11%,同时在剩余食物凉拌豆芽和海带检出肠炎沙门菌。结论此次食物中毒是由凉拌豆芽和海带引起的肠炎型沙门菌食物中毒。     

一起食用凉拌菜引起的食物中毒事件的病原学检测与溯源分析

目的 对一起食用凉拌菜引起的食物中毒事件进行流行病学调查、病原学检测、溯源分析和药物敏感试验，查找食物中毒事件原因，及时采取有效措施控制污染源。方法 采集病例粪便样本22份，食品样本30份，对采集样本进行分离鉴定、脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis, PFGE)、药敏试验。结果 采集的52份样本检测出肠炎沙门菌6株，1株在采集的食品样本芹菜拌花生和腐竹检出，5株在采集的病例粪便标本检出，经PFGE分子分型分析，6株肠炎沙门菌带型相似度均在95.3%以上，为高度同源，耐药结果显示6菌株耐药普一致。结论 此次食物中毒事件是食用被肠炎沙门菌污染的芹菜拌花生和腐竹引起，通过实验室细菌分离鉴定、PFGE对病原菌追溯，快速有效的处置食物中毒事件。     

PFGE分型技术在食物中毒溯源中的应用研究

目的对开封市某地区一起食物中毒事件的病原体进行分离鉴定及同源性分析,研究脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型技术在食物中毒溯源中的应用。方法参照GB 4789.4-2010的方法进行病原菌的分离鉴定;采用PFGE分型方法对食物中毒检出菌及实验室收集的其他血清型沙门氏菌进行分子分型;采用微量肉汤稀释法进行抗生素耐药性研究。结果流行病学调查及实验室病原学检测证实,开封市某地区的食物中毒事件是一起由肠炎沙门氏菌引起的食物中毒,共分离到3株肠炎沙门氏菌。分离自该事件病人肛拭子的肠炎沙门氏菌与在开封市某地区鸡肉中分离的肠炎沙门氏菌相似系数为100%。此食物中毒株对所检测药物敏感性较好,只对个别抗生素产生耐药性。结论此次食物中毒病原菌为开封市某地区鸡肉中检出率较高的肠炎沙门氏菌。PFGE分型技术在细菌性食物中毒中可以进行溯源分析。     

一起由山夫登堡沙门菌引起食源性聚集性病例的耐药性与病原学溯源分析

目的明确一起食源性聚集性病例的病原菌,并确认病原菌分离株的同源性。方法依据GB 4789和WS 271-2007进行病原菌分离鉴定,对分离鉴定的山夫登堡沙门菌采用脉冲场凝胶电泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis, PFGE)技术进行分子分型。结果 1份食物样品和2份肛拭子样品共检出3株山夫登堡沙门菌。3株分离菌均对头孢唑啉耐药,对四环素、红霉素和萘啶酸中介敏感,对其余11种抗生素敏感。3株分离菌经PFGE得到同一种带型,PFGE图谱相似度为100%。结论根据临床与流行病学调查资料,结合实验室检测结果,确认此次食源性聚集性病例是由同一克隆山夫登堡沙门菌污染导致。PFGE在食源性致病菌的追踪溯源中发挥着重要作用。     

脉冲场凝胶电泳在沙门氏菌食物中毒病原学检测与溯源研究中的应用

目的对50例肠炎沙门菌引起的群体食物中毒病原学检测以及溯源进行研究分析。方法将剩余的食物标本以及患者的粪便标本进行采集后进行研究分析,对病原菌以及致病菌进行分离并鉴定,对50例标本中所分离出的5株肠炎沙门菌菌株使用脉冲场凝胶电泳进行同源性分析,同时对毒力基因invA、ipaB以及sefA使用PCR方式进行检测。结果在3份的患者粪便标本以及2份剩余的食物中标本中,均检测出肠炎沙门菌,血清型为9,12:g,m:-。同时5株肠炎沙门菌经过脉冲场凝胶电泳诊断出的图谱完全一致,同源性显示为100%,invA、ipaB以及sefA毒力基因均被检测出。结论本次食物中毒是由肠炎沙门菌引发,在对分子流行病学研究以及食物中毒溯源分析中,脉冲场凝胶电泳有显著作用。     

以PFGE分子分型技术对一起食物中毒事件病原追源

目的运源用脉冲场凝胶电泳（（Pulsed-Field Gel Electrophoresis,PFGE））技术对一起由奇异变形杆菌引起的食物中毒病原菌追源。方法在一起食物中毒事件中采集病人的肛拭子、剩余食物及用具容器的涂抹样共26份样本,按食品卫生微生物检验学方法《GB/T4789-2006）和变形杆菌食物中毒诊断标准和处理原则（WS/T9-1996》方法,并参考《卫生防疫细菌检验》进行检测,然后对分离菌株进行PFGE聚类分析。结果26份样品中有17份样本检出奇异变形杆菌,显示PFGE电泳聚类图谱分析显示,除4株菌外,其余13株菌的PFGE聚类图谱分析相似性〉95％,具有同源性。结论依据实验室分离培养出奇异变形杆菌,经进行PFGE分型,确认是一起由奇异变形杆菌污染了食物引起的食物中毒,显示PFGE技术对于变形杆菌引起的食物中毒索源具有重要意义。     

细菌性食物中毒患者病原学情况及微生物检验效果研究

目的 探讨细菌性食物中毒患者病原学情况及微生物检验效果。方法 选取2018年3月至2020年3月在我中心流调过程中接触的细菌性食物中毒患者29例,其中男21例,女8例。对29例患者的粪便、呕吐物、肛拭子、手拭子、食用的食品、食品操作间进行检测。统计检出的病原菌情况及血清病毒类型的分布情况。结果 全部食物中毒患者中,10例患者因致病性大肠埃希菌导致,3例因沙门杆菌导致,5例因变形杆菌导致,4例由副溶血性弧菌导致,4例由于金黄色葡萄球菌导致,2例由于志贺菌导致,1例由于蜡样芽孢杆菌导致。通过对微生物进行检测,肛拭子中测出48株菌株,呕吐物中测出27株菌株,手拭子中测出24株菌株,粪便中测出30株菌株,厨具中测出215株菌株,食品中测出118株菌株,合计462株。病原菌共测出58株,测出率最高的是粪便60.0%(18/30),之后是肛拭子43.8%(21/48),其次是呕吐物14.8%(4/27)。结论 对较多的样品有针对性的进行微生物检验,有助于临床中对细菌性食物中毒患者的病原菌种类和血清病毒类型的判断和治疗。     

细菌性食物中毒患者进行病原微生物检测的临床效果

目的探讨细菌性食物中毒患者进行病原微生物检测的临床效果。方法选取本院2016年7月至2019年12月收治的104例细菌性食物中毒患者,对所有研究对象采用病原微生物检测法进行检测,分析患者病原菌的检出情况和肛门周围检出病原菌的类型情况。结果患者病原菌的总检出率为43.88%,其中呕吐物中的病原菌检出率为15.78%,粪便为72.34%,食物为5.06%,手拭子为7.46%,肛拭子为54.03%;病原菌类型中副溶血性孤菌最为常见,共144株,其次是致泻性大肠埃希菌,共61株。结论对细菌性食物中毒患者采用病原微生物进行检测,可有效提高粪便、肛门周围及呕吐物的检出率,同时还可为临床医生判断病原菌的属性、血清类型提供关键性的指导,利于采取针对性的治疗方式,提高患者的临床效果,改善患者的预后,提高污染源控制效果。     

一起由金黄色葡萄球菌和路邓葡萄球菌引发食物中毒病原分析

目的 通过一起疑似葡萄球菌引发食物中毒进行葡萄球菌肠毒素检测,并结合检测出致病性葡萄球菌病原学分析,为下一步食物中毒处置提供诊断依据。方法 根据流行病学调查和国家标准《食品微生物学检验》GB4789,对可疑食物及患者呕吐物、肛拭子等进行了几种常见致病原菌分离培养,并直接采用实时荧光PCR方法对金黄色葡萄球菌肠毒素A~E基因进行分型,用全自动微生物鉴定分析仪进行系统生化鉴定,并做血浆凝固酶试验。结果 在食用剩余汉堡中分离出1株金黄色葡萄球菌、2名患者肛拭子中分离出2株金黄色葡萄球菌,1名患者呕吐物中分离1株血浆凝固酶阴性路邓葡萄球菌,利用PCR方法分别对其进行了肠毒素基因分型,结果显示,食用剩余汉堡中1株和2株患者肛拭子的金黄色葡萄球菌肠毒素均为SEA型,为同一型;1株患者呕吐物的路邓葡萄球菌的肠毒素为SEC型。 结论 该起食物中毒主要是由金黄色葡萄球菌产生SEA型肠毒素所导致,血浆凝固阴性路邓葡萄球菌跟金黄色葡萄球菌一样,也能产生肠毒素同样具有致病性作用,提示路邓葡萄球菌不单纯只是人类皮肤共生菌,或许还跟金黄色葡萄球菌同样具有侵袭性、产肠毒素等致病性,在进行公共卫生流行调查诊断时不能被忽视。     

关于气单胞菌混合感染引起食物中毒的病原学检测

目的探索引起细菌性食物中毒的病原学原因。方法采集饭店剩余食物、厨房用具及物表拭子、腹泻患者呕吐物和肛拭子样本进行鉴定及药敏试验,以生化分型方法和BD PhoenixTM-100凤凰全自动细菌鉴定系统鉴定菌株,用K-B法进行药敏试验。结果从采集的所有样本中检出3种气单胞菌,分别为温和气单胞菌、嗜水气单胞菌和豚鼠气单胞菌,其药敏结果分别为：嗜水气单胞菌对氨苄西林、头孢美唑、青霉素耐药,对其他抗生素敏感;豚鼠气单胞菌对氨苄西林、苯唑西林耐药,对其他抗生素敏感;温和气单胞菌对四环素、氨苄西林耐药,对其他抗生素敏感。结论这是一起罕见的3种气单胞菌混合感染引起的细菌性食物中毒。建议将气单胞菌属作为肠道感染性腹泻的常规致病菌,以免造成漏检,给临床诊断和治疗带来困难。     

荧光PCR技术批量快速筛查肠道致病菌混合样本的研究

目的：寻找从业人员肠道传染病菌的快速筛查技术方法。方法以参加健康体检的从业人员作为研究对象,采集健康体检从业人员的肛拭子标本,采用荧光PCR技术批量快速筛查肠道致病菌混合样本的方法进行沙门氏菌和志贺氏菌检测,并与国家标准方法进行对照,比较两种检测方法的检出率结果。结果58176份样本中,共检出52份沙门菌阳性标本,阳性率为0.89‰,检出51份志贺氏菌阳性标本,阳性率为0.88‰。合计共检出致病菌103份,检出率为1.77‰。荧光PCR对沙门菌和志贺氏菌的灵敏度达到了100%,特异性也保持在99%以上。结论采用荧光PCR技术进行肠道致病菌的快速筛查能缩短检验时间,检验准确性高,从而有效阻断肠道传染病的传播和食物中毒的发生。     

江阴市2006-2010年细菌性食物中毒检测结果分析

目的掌握导致江阴市细菌性食物中毒的致病菌,为食源性疾病及食品污染物主动监测提供科学的依据。方法对2006-2010年细菌性食物中毒资料进行统计分析。结果细菌性食物中毒样本中致病菌的检出率为23.24%。中毒细菌主要为溶藻性弧菌、副溶血性弧菌、变形杆菌。二、三季度致病菌检出率较高。责任单位中,家庭和熟食店致病菌的检出率高于餐饮服务企业和集体食堂。各类样本中,肛拭的检出率最高。结论江阴市细菌性食物中毒中致病菌的检出率较低,应进一步提高食源性致病菌的检测能力,加强对条件致病菌的检测,为食物中毒的诊断提供实验室依据。     

改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157：H7

目的建立改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157：H7的快速方法。方法根据GenBank公布O157：H7的rfbE保守序列，设计一对引物和改良分子信标探针，用FAM荧光剂标记探针的5’端，建立改良分子信标实时PCR检测O157：H7的反应体系，应用于食物中毒快速诊断和食品微生物检测。结果共检测11种细菌。只有大肠杆菌O157：H7有荧光信号，其余10种全无荧光信号，且与其他细菌无交叉反应，DNA灵敏度为64fg，菌液灵敏度为59cfu／ml或2cfu／PCR反应体系。应用改良分子信标实时PCR反应体系检测10株O157：H7均出现特异的荧光信号，无干扰。对89份食品样品进行检测，5份O157：H7实时PCR阳性，其余样品为阴性，检测仅需2h。5份阳性样本，经传统方法培养，有3份检出大肠杆菌O157：H7。结论改良分子信标实时PCR检测体系快速、灵敏度高，特异性强，可用于大肠杆菌O157：H7食物中毒的快速诊断和食品微生物检测，为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。     

云南省鼠疫静息期家鼠鼠疫疫源地犬中致病耶尔森菌调查

目的 对云南省家鼠鼠疫疫源地鼠疫指示动物-犬中致病性耶尔森菌分布情况调查分析,以探求鼠疫菌微生态状况,为研究鼠疫的流行与静息提供更多线索。方法 2016年7月—2017年8月采用多重分层抽样法在云南省抽取不同时间进入流行静息期、不一样流行强度和不同地理位置的家鼠鼠疫疫源县共10个（历史疫区、近史流行区、复燃疫区、现疫区）作为调查点,采集犬肛门拭子置于改良PBS中,经4 ℃冷增菌15 d后,吸取混匀的培养液1 mL 提取DNA,采用PCR方法检测foxA、inv及caf1基因,并对基因阳性材料采用耶尔森选择培养基分离菌株,提取菌株的DNA并检测其ail毒力基因。结果 云南省10个疫源县共采集犬肛门拭子标本915份,foxA 基因检测阳性率为1.64%（15/915）,未检出inv基因与caf1基因阳性。小肠结肠炎耶尔森菌分离阳性率为1.3%（12/915）,其中2株具有ail 毒力基因;未分离到鼠疫耶尔森菌和假结核耶尔森菌。结论 云南省家鼠鼠疫疫源地犬中存在小肠结肠炎耶尔森菌的分布;未发现鼠疫菌线索,其原因值得进一步探讨。     

广州市越秀区2006-2011年疑似细菌性食物中毒的情况分析

目的探讨广州市越秀区2006—2011年细菌性食物中毒发生的特征及分布规律,为预防和控制细菌性食物中毒提供科学依据。方法对2006—2011年本中心对疑似细菌性食物中毒的样品进行细菌分离鉴定,资料采用Excel2003等软件进行统计分析。结果2006—2011年共发生疑似细菌性中毒事件112起,检出致病菌阳性69起（检出率为61．61％）。细菌性食物中毒全年均有发生,7—10月份检出频数最高的细菌性食物中毒的场所以餐饮业为主。检出的致病病原菌最常见的是副溶血性弧菌,其次是金黄色葡萄球菌、变形杆菌、沙门氏菌。副溶血性弧菌以污染环境为主;金黄色葡萄球菌以污染饭菜为主;变形杆菌以污染用具为主。结论本区细菌性食物中毒的防控重点应以餐饮业为主,应着重加强对环境、用具的卫生监管。