妊娠中、晚期血清瘦素、β-hCG及ADAM12水平的变化及其与子痫前期发生的关系

目的：探讨妊娠中、晚期妇女血清瘦素、人绒毛膜促性腺激素β亚单位（β-hCG）及解整合素-金属蛋白酶12（ADAM12）的水平变化及这些指标对子痫前期（PE）发生的预测价值.方法：选择2007年6月-2008年5月在福建省妇幼保健院定期产检和住院分娩的189例妊娠妇女,分别测定妊娠中期（20～24周）和妊娠晚期（30～34周）血清瘦素、β-hCG、ADAM12的浓度,其中25例发展为PE者为病例组,164例正常妊娠者为正常组.根据受试者工作特征（ROC）曲线确定预测界限值.结果：①妊娠中期病例组血清β-hCG、ADAM12浓度显著高于正常组（P＜0.001）.②妊娠晚期病例组血清瘦素、β-hCG、ADAM12浓度明显高于正常组（P＜0.001）.③病例组妊娠晚期血清瘦素、β-hCG及ADAM12水平均较妊娠中期升高（P＜0.05）,正常组妊娠晚期血清瘦素水平较妊娠中期升高（P＜0.001）,而血清β-hCG与ADAM12水平2组间差异无统计学意义（P＞0.05）.④妊娠中期以血清β-hCG≥32 μg/L、血清ADAM12≥818 μg/L为预测界值,两者联合阳性预测值为82.61%,高于单项阳性预测值（P＜0.05）.两者联合ROC曲线下面积与单项ROC曲线下面积比较差异无统计学意义（P＞0.05）.⑤妊娠晚期以血清瘦素≥23 μg/L、血清β-hCG≥37 μg/L及血清ADAM12≥900 μg/L为预测界值,三者联合阳性预测值达92.31%,高于单项阳性预测值（P＜0.05）.三者联合ROC曲线下面积大于单项β-hCG及瘦素ROC曲线下面积（P＜0.05）,但与单项ADAM12曲线下面积差异无统计学意义（P＜0.05）.⑥联合妊娠中、晚期血清β-hCG预测PE发生的阳性率为81.25%;联合妊娠中、晚期血清ADAM12预测PE发生的阳性率为90.48%,均比单一指标的阳性预测值高.结论：检测妊娠中、晚期妇女血清β-hCG及ADAM12水平可作为PE发生的有效预测指标;联合多项指标并动态监测可进一步提高对PE发生的阳性预测值及准确率.     

长链非编码RNA与子痫前期相关机制的研究进展

子痫前期（preeclampsia）是妊娠20周后出现的特发性高血压综合征,其病因和发病机制至今仍未完全阐明。长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是指长度大于200个核苷酸,不参与编码蛋白质的一类RNA。研究表明,lncRNA在基因表达水平、转录后修饰以及表观遗传修饰等细胞事件中发挥着重要作用。最新研究发现子痫前期胎盘中存在大量异常表达的lncRNA,推测lncRNA可能影响胎盘生长及生育过程,在子痫前期的发生中发挥了重要作用,深入研究子痫前期相关lncRNA及其调节机制可能有助于阐明子痫前期的发病机制,进而为子痫前期的预防和治疗提供新思路。     

重度子痫前期患者胎盘合体滋养细胞凋亡的研究

目的 比较早发型与晚发型重度子痫前期患者胎盘合体滋养细胞凋亡水平变化,探讨其病因及发病机制的差异.方法 选择2008年11月至2009年5月在上海交通大学附属第六人民医院住院剖宫产分娩的早发型重度子痫前期患者15例(早发型组)、晚发型重度子痫前期患者15例(晚发型组)和健康妊娠妇女10例(对照组),采用酶联免疫吸附试验检测孕妇血浆中合体滋养细胞微粒(STBM)水平,蛋白印迹法检测胎盘组织中凋亡蛋白--半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达水平.结果 (1)STBM:早发型组孕妇血浆STBM水平为(71±21)μg/L,高于晚发型组的(42±30)μg/L和对照组的(26±11)μg/L,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);晚发型组血浆STBM水平与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)caspase-3蛋白:早发型组胎盘组织中caspase-3蛋白表达水平为0.85±0.61,晚发型组为0.77±0.46,对照组为0.32±0.15,早发型和晚发型组胎盘组织中caspase-3蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);但早发型组和晚发型组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 早发型与晚发型重度子痫前期可能存在不同的发病机制,早发型重度子痫前期可能是一种胎盘疾病,而晚发型则可能与母体因素有关.     

妊娠中、晚期血清瘦素、β-hCG及ADAM12水平的变化及其与子痫前期发生的关系

目的：探讨妊娠中、晚期妇女血清瘦素、人绒毛膜促性腺激素β亚单位（β-hCG）及解整合素-金属蛋白酶12（ADAM12）的水平变化及这些指标对子痫前期（PE）发生的预测价值。方法：选择2007年6月—2008年5月在福建省妇幼保健院定期产检和住院分娩的189例妊娠妇女,分别测定妊娠中期（20～24周）和妊娠晚期（30～34周）血清瘦素、β-hCG、ADAM12的浓度,其中25例发展为PE者为病例组,164例正常妊娠者为正常组。根据受试者工作特征（ROC）曲线确定预测界限值。结果：①妊娠中期病例组血清β-hCG、ADAM12浓度显著高于正常组（P＜0.001）。②妊娠晚期病例组血清瘦素、β-hCG、ADAM12浓度明显高于正常组（P＜0.001）。③病例组妊娠晚期血清瘦素、β-hCG及ADAM12水平均较妊娠中期升高（P＜0.05）,正常组妊娠晚期血清瘦素水平较妊娠中期升高（P＜0.001）, 而血清β-hCG与ADAM12水平2组间差异无统计学意义（P＞0.05）。④妊娠中期以血清β-hCG≥32 μg/L、血清ADAM12≥818 μg/L为预测界值,两者联合阳性预测值为82.61%,高于单项阳性预测值（P＜0.05）。两者联合ROC曲线下面积与单项ROC曲线下面积比较差异无统计学意义（P＞0.05）。⑤妊娠晚期以血清瘦素≥23 μg/L、血清β-hCG≥37 μg/L及血清ADAM12≥900 μg/L为预测界值,三者联合阳性预测值达92.31%,高于单项阳性预测值（P＜0.05）。三者联合ROC曲线下面积大于单项β-hCG及瘦素ROC曲线下面积（P＜0.05）,但与单项ADAM12曲线下面积差异无统计学意义（P＜0.05）。⑥联合妊娠中、晚期血清β-hCG预测PE发生的阳性率为81.25%;联合妊娠中、晚期血清ADAM12预测PE发生的阳性率为90.48%,均比单一指标的阳性预测值高。结论：检测妊娠中、晚期妇女血清β-hCG及ADAM12水平可作为PE发生的有效预测指标;联合多项指标并动态监测可进一步提高对PE发生的阳性预测值及准确率。     

Syncytin-2 mRNA及其受体MFSD2 mRNA在正常妊娠及子痫前期胎盘组织中的表达研究

目的检测syncytin-2 mRNA及其受体MFSD2 mRNA在正常妊娠及子痫前期胎盘组织中的表达及其与子痫前期发病的关系。 方法分析2010年3月至2011年12月就诊于广州医学院第三附属医院住院分娩46例孕妇资料,正常妊娠组(21例),子痫前期组(25例)。在剖宫产术中采集产妇胎盘组织,采用实时荧光定量PCR法检测胎盘组织中syncytin-2 mRNA及其受体MFSD2 mRNA的表达,两组表达水平的比较采用t检验。 结果Syncytin-2 mRNA及其受体MFSD2 mRNA在正常妊娠组及子痫前期组患者胎盘组织中均有表达。在子痫前期组,两种指标分别为5.59±0.29和0.79±0.08;在正常妊娠组,两种指标分别为6.99±0.62和0.83±0.10。两组中,syncytin-2 mRNA表达水平差异有统计学意义(t＝2.331,P＝0.029),MFSD2 mRNA表达水平差异无统计学意义(t＝0.258,P＝0.778)。 结论胎盘组织syncytin2 mRNA表达下调可能与子痫前期发病密切相关,其受体MFSD2 mRNA与子痫前期发生无相关性。     

ACVR2A与子痫前期相关性研究进展

子痫前期是一种妊娠特异性疾病,是孕产妇和围生期死亡的主要原因。至今尚无任何一种假说可以彻底地解释子痫前期的病理变化,目前比较公认的特征是早期胎盘滋养细胞浸润和螺旋动脉重铸减少。ACVR2A(activin A receptor type 2A)是转化生长因子β(TGF-β)受体家族的成员,被认为是生殖功能的重要调节因子,尤其是在蜕膜化、滋养细胞浸润和胎盘形成过程中起重要作用。近些年的研究表明激活素A及其受体在子痫前期的发生、发展过程中有重要的调控作用。综述ACVR2A与子痫前期的关系,旨在为子痫前期的发病机制、早期诊断及治疗提供新的理论依据。     

同型半胱氨酸对滋养细胞基质金属蛋白酶2、9表达的影响

目的探讨同型半胱氨酸（Hcy）对早孕期滋养细胞基质金属蛋白酶（MMP）2、9表达的影响及其在子病前期发病过程中的作用。方法分离培养早孕期滋养细胞,用Hcy刺激早孕期滋养细胞48h,对照组Hcy刺激浓度为0mmol／L,实验组的刺激浓度为1mmol／L;以实时荧光定量RT-PCR检测早孕期滋养细胞MMP-2、MMP-9mRNA的表达变化;明胶酶谱分析法测定早孕期滋养细胞MMP-2、MMP-9酶活性变化,以积分吸光度值表示。结果实验组与对照组比较,早孕期滋养细胞MMP-2mRNA表达降低21％,MMP-9mRNA表达降低11％;实验组与对照组比较,MMP-2蛋白表达降低14％,MMP-9蛋白表达降低52％。结论Hey能够抑制早孕期滋养细胞MMP02、MMP-9的表达,从而影响滋养细胞侵袭性。     

RNA干扰技术抑制HLX1基因表达对滋养细胞生物学性能的影响

目的:研究小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制人类同源异型盒基因HLX1的表达对胎盘滋养细胞株HTR-8/SVneo细胞生物学性能的影响。方法:常规体外培养HTR-8/SVneo细胞,设实验组(转染HLX1基因的特异性siRNA)、阴性对照组(转染阴性对照siRNA)及空白对照组(除不含siRNA片段,余试剂与另两组相同)3组分别进行瞬时转染。用流式细胞术测定siRNA转染效率,应用实时定量PCR技术和蛋白印迹法测定转染后各组HTR-8/SVneo细胞中HLX1 mRNA和蛋白的表达;应用MTT比色实验、Matrigel侵袭实验分别检测转染后各组细胞的增殖能力与侵袭能力的变化。结果:(1)转染24h后测得siRNA转染效率达(86.3±2.6)%。(2)转染48h后HLX1 mRNA的表达水平下调(77.0±1.2)%(P<0.01),转染72h后HLX1蛋白的表达水平下调(82.6±1.2)%(P<0.01),与HLX1 mRNA的表达水平下调相一致。(3)转染HLX1 siRNA 24h后,HTR-8/SVneo细胞的增殖活性已受到抑制,转染72h后细胞增殖抑制最显著,抑制率达到(58.1±4.4)%(P<0.01)。(4)转染HLX1 siRNA后,HTR-8/SVneo细胞侵袭Matrigel基质胶的能力受到显著抑制,其穿膜细胞数为(29±3)个,与空白对照组(穿膜细胞数为[53±8]个)相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:HLX1基因表达水平的下降可以显著抑制滋养细胞的增殖活性与侵袭能力;HLX1基因表达异常可能通过影响滋养细胞增殖、侵袭等过程参与IFGR、子痫前期等疾病的发生。     

子痫前期患者滋养细胞浸润相关基因mRNA及蛋白表达的研究

目的研究子痫前期患者胎盘滋养细胞基质金属蛋白酶(MMP)9、2及其组织抑制物(TIMP)1、2,肿瘤转移抑制基因KiSS-1 mRNA、蛋白的表达变化及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR、免疫印迹(western blot)法对30例正常足月妊娠妇女(正常妊娠组)和10例妊娠期高血压患者(高血压组)及27例子痫前期(子痫前期组)患者胎盘滋养细胞中MMP-9、MMP-2、KiSS-1、TIMP-1和TIMP-2基因mRNA及蛋白表达水平[均以相对吸光度(A)表示]进行检测;应用明胶酶谱分析法,检测3组妇女胎盘孵育液MMP-9、MMP-2活性。结果(1)胎盘滋养细胞浸润相关基因mRNA表达水平:子痫前期组MMP-9、MMP-2 mRNA表达水平分别为0．39±0．05和0．71±0．16,均明显低于正常妊娠组的0．78±0．11和1．63±0．31,两组分别比较,差异有统计学意义(P均<0．05)。高血压组MMP-9 mRNA的表达水平明显高于重度子痫前期患者,差异有统计学意义(P<0．05)。子痫前期组胎盘滋养细胞KiSS-1 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达水平分别为1．97±0．21和1．11±0．18,均明显高于正常妊娠组的0．69±0．27和0．65±0．19,差异均有统计学意义(P<0．05);高血压组胎盘滋养细胞KiSS-1 mRNA表达水平低于子痫前期组,但与正常妊娠组比较,差异无统计学意义(P>0．05)。重度子痫前期患者胎盘滋养细胞TIMP-2 mRNA表达水平明显高于正常妊娠组,差异均有统计学意义(P<0．05)。(2)胎盘滋养细胞浸润相关基因的蛋白表达水平:子痫前期组MMP-9、MMP-2基因的蛋白表达水平分别为1．07±0．35和0．74±0．23,均明显低于正常妊娠组的2．43±0．92和1．48±0．78,差异均有统计学意义(P<0．05)。子痫前期组胎盘KISS-1和TIMP-1蛋白表达水平分别为2．46±0．39和1．51±0．40,均明显高于正常妊娠组的0．91±0．35和0．93±0．56,差异均有统计学意义(P<0．05)。子痫前期组胎盘滋养细胞TIMP-2蛋白表达水平与正常妊娠组及高血压组比较,差异均无统计学意义(P>0．05)。(3)胎盘MMP-9和MMP-2酶比活性:子痫前期组分别为(2．67±0．53)和(1．13±0．28)灰度·g-1·L-1,均明显低于正常妊娠组的(8．44±3．70)和(3．87±1．43)灰度·g-1·L-1,差异均有统计学意义(P<0．05)。结论子痫前期患者胎盘滋养细胞促进浸润基因。MMP-9、MMP-2表达降低和抑制浸润基因KiSS-1和TIMP-1表达升高,可能在子痫前期胎盘缺血缺氧中起重要作用。     

子痫前期胎盘组织差异表达基因ABCG_2的克隆和鉴定

目的:克隆和鉴定子痫前期胎盘组织差异表达基因,确定与子痫前期相关的基因。方法:应用荧光mRNA差异显示技术寻找并克隆子痫前期胎盘组织差异表达的基因,对其中的ATP结合盒转运子G_2(ATP binding cassette transporter G_2,ABCG_2)基因用半定量RT-PCR技术验证其表达。结果:ABCG_2基因在子痫前期胎盘组织中高表达,半定量RT-PCR结果与mRNA差异显示的结果相符合,ABCG_2基因在子痫前期胎盘组织中的表达高于正常胎盘组织,差异有显著性(P<0.05)。结论:荧光mRNA差异显示技术可用于筛选子痫前期胎盘组织差异表达基因,并应用此技术发现了ABCG_2基因在子痫前期患者胎盘组织表达水平增高。     

聚酰胺-胺介导耐药基因ABCG2沉默策略治疗宫颈癌侧群细胞

目的:检测纳米分子聚酰胺-胺(PAMAM)介导耐药基因-ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)沉默对宫颈癌侧群细胞的治疗效果。方法:从宫颈癌细胞中采用流式细胞术分离宫颈癌侧群细胞,检测ABCG2基因的表达,噻唑蓝(MTT)法检测多柔比星对细胞的抑制率;实验分为si RNA组、无义组和对照组,PAMAM介导ABCG2基因沉默后,蛋白质印迹法(western blot)检测ABCG2的表达,MTT法检测多柔比星对细胞敏感性的恢复情况;建立宫颈癌侧群细胞荷瘤鼠模型,给予多柔比星药物治疗,测量肿瘤体积。结果:宫颈癌侧群细胞ABCG2的蛋白水平高于非侧群细胞(P0.05);MTT耐药实验显示,多柔比星对非侧群细胞的抑制率高于侧群细胞(P0.01)。si RNA组在ABCG2表达沉默后,抑制率恢复到(69.4±11.3)%,与对照组及无义组比较差异均有统计学意义(P0.01);动物实验结果显示,si RNA组肿瘤体积小于对照组和无义组(P0.05)。结论:以PAMAM为介质可实现宫颈癌侧群细胞团中ABCG2基因表达沉默,恢复宫颈癌侧群细胞对化疗药物的治疗敏感性。     

hCG对卵泡及子宫内膜发育作用的研究进展

人绒毛膜促性腺激素(hCG)可以改善内膜容受性(ER)、延长种植窗口期,有利于胚胎着床,还可以调节子宫内膜的免疫耐受性,从而提高种植率;在卵泡早期或者中晚期添加低剂量的h CG可以提高卵子以及胚胎质量,从而获得更高的妊娠率。     

子宫肌壁间妊娠的临床分析

目的:探讨子宫肌壁间妊娠(intramural pregnancy,IMP)的临床表现、发病相关因素、鉴别诊断及诊疗手段。方法:回顾分析4例IMP患者的既往盆腔手术病史、临床表现、辅助检查、诊疗经过及病理结果,探讨IMP发病因素、鉴别和诊治手段。结果:4例均为宫角肌壁间妊娠(包块型)。超声及磁共振成像(MRI)误诊为宫角妊娠以及滋养细胞肿瘤不除外。4例均行宫腹腔镜联合探查术,治疗后随访血人绒毛膜促性腺激素(hCG)均降至正常范围。结论:临床上对于清宫不成功,清宫后血hCG持续不降并伴阴道出血,而超声、MRI等辅助检查提示子宫肌层占位且血流信号丰富的患者应高度警惕IMP,尽早诊治。     

MAPK1/ERK2通过SRF调控中性粒细胞弹性蛋白酶分泌在子痫前期发病中的研究进展

子痫前期是一种累及全身多脏器的妊娠期特发性疾病,是导致孕产妇及围生儿死亡的主要原因。发病机制包括过度氧化应激、炎症免疫过度激活、内皮细胞功能障碍等,其中中性粒细胞过度活化释放弹性蛋白酶,导致血管内皮细胞损伤是关键环节。研究发现子痫前期患者中性粒细胞中丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)及中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)水平显著升高。血清反应因子(SRF)是MAPK1途径下游靶蛋白,使活化的中性粒细胞黏附和迁移,导致内皮细胞损伤。MAPK1可能通过调控SRF从而导致中性粒细胞过度活化释放NE从而参与子痫前期的发病。本文将对MAPK1通过SRF调控NE分泌的相关作用机制进行综述。