16味中药炮制前后抗氧化活性的比较研究

目的:比较16味中药炮制前后的抗氧化活性。方法:采用氧自由基清除能力(ORAC)法测定样品的抗氧化活性。荧光素(FL)为荧光探针。2,2-偶氮-2-氨基氢氯化丙烷在37℃时以稳定的速率产生过氧化氢(H2O2),H2O2氧化FL从而造成其荧光衰减。抗氧化剂的存在可以清除H2O2,延迟FL的荧光衰减,动态记录样品35min内的荧光变化。以水溶性维生素E为标准品绘制标准方程,根据Trolox标准方程计算样品的ORAC值。表儿茶素为阳性对照。结果:16味中药炮制前、后均具有一定的ORAC值,酒黄芩的ORAC值最高,为4241μmol TE·g-1;炒薏苡仁的ORAC值最低,为17μmol TE·g-1。10味中药炮制品的ORAC值低于生品,其中7味有显著性差异(P<0.05);6味炮制品的ORAC值高于生品,其中3味有显著性差异(P<0.05)。结论:16味中药炮制前、后抗氧化活性的变化可能与其所含的化学成分含量改变有关。     

氯胺酮对HepG2细胞线粒体功能的影响

目的评价氯胺酮的线粒体毒性,从而探讨氯胺酮可能的毒性机制。方法 Hep G2细胞培养基中分别加入齐多夫定10~2000μmol·L-1培养7 d,或加入氯胺酮50~3000μmol·L-1培养24 h,CCK8细胞计数法测定细胞存活率。Hep G2细胞培养基中分别加入齐多夫定100μmol·L-1培养7 d后,或加入氯胺酮100和1200μmol·L-1培养24 h,化学发光法检测胞内ATP合成水平,荧光探针法检测胞内钙离子浓度、活性氧及线粒体膜电位(ΔΨm)的变化,同时设齐多夫定1000μmol·L-1用于实时荧光定量PCR检测线粒体DNA(mt DNA)表达水平的变化。结果与正常对照组相比,齐多夫定10~2000μmol·L-1可以抑制细胞存活,IC50为100μmol·L-1;氯胺酮1000~3000μmol·L-1抑制细胞存活,IC50为1200μmol·L-1。与正常对照组相比,齐多夫定100μmol·L-1组线粒体ATP合成水平显著下降(P<0.05),胞内钙离子浓度明显升高(P<0.05),活性氧水平显著升高(P<0.05),ΔΨm显著下降(P<0.05),而1000μmol·L-1可以明显干扰mt DNA表达水平(P<0.05)。氯胺酮100μmol·L-1组ATP合成水平明显下降(P<0.05),其他指标均无显著性差异;氯胺酮1200μmol·L-1组ATP合成水平显著下降(P<0.01),活性氧水平和胞内钙离子浓度显著升高(P<0.01),ΔΨm显著下降(P<0.05),mt DNA水平无明显改变。结论氯胺酮可以通过干扰线粒体代谢功能而诱导线粒体损伤。     

高效液相色谱法测定盐酸平阳霉素软膏的血药浓度

目的:建立人血浆中盐酸平阳霉素的HPLC测定方法,从而研究患者使用盐酸平阳霉素软膏后的透皮吸收程度.方法:500μL人血浆用150μL 10%的高氯酸沉淀后高速离心,取上清液进样20μL进行分析.流动相为甲醇-乙腈-0.002 mol·L-1戊烷磺酸钠(15:10:75),用1 mol·L-1硫酸调pH 3.5;色谱柱:ODS-C18(150 mm×4.6 mm,5μm);检测波长:254 nm;流速:1.0 mL·min-1.10名志愿受试的寻常性银屑病患者使用盐酸平阳霉素软膏后,用HPLC法测定血浆中药物浓度.结果:本实验建立的血浆中盐酸平阳霉素HPLC测定方法,血浆中杂质不干扰样品的测定,药物在0.20～0.5 mg·L-1的范围内线性关系好;最低检测为0.20 mg·L-1;回收率高于80%;高、中浓度的日间和日内变异系数均小于10.0%;低浓度的日间和日内变异系数均小于15.0%,符合生物样品分析要求.10名患者用药后血浆中盐酸平阳霉素的药物浓度均低于最低检测浓度.结论:受试者对盐酸平阳霉素的吸收在0.20 mg·L-1以下,发生药物不良反应的可能性较小,本研究中10名志愿受试者亦未出现不良反应.     

国产与进口盐酸屈他维林片剂的生物等效性评价

目的:评价国产曲他维林片剂的生物等效性.方法:20名健康男性志愿者双周期随机交叉口服单剂量80mg国产和进口盐酸曲他维林片,用高效液相紫外检测法测定血浆中曲他维林的浓度.结果:数据处理的结果表明单剂量口服国产盐酸曲他维林片剂和进口盐酸曲他维林片剂后,AUC的均值分别为2249.82±622.43μg·h·L-1 和2328.61±723.07μg·h·L-1,Cmax 的均值分别为469.39±109.92μg·L-1 和493.63±160.78μg·L-1.结论:双单侧检验表明国产盐酸曲他维林片剂和进口盐酸曲他维林片剂AUC,Cmax均具有生物等效性.     

国产西沙必利片在人体药代动力学及生物利用度研究

为研究被试制剂国产西沙必利片剂和参比制剂的药代动力学和人体生物等效性,用高效液相荧光检测法测定12名健康受试者口服15mg后,血浆中西沙必利的浓度,经3p97拟合,两者在体内的过程皆符合血管外给药二室开放模型, 被试制剂和参比制剂的: AUC为729.78±54.52μg.h·L-1和709.85±57.84μg.h·L-1 , Tpeak分别为1.47±0.18h和1.40±0.26h, Cmax分别为65.08±2.57μg·L -1 和64.00±3.96μg·L -1 , T1/2β分别为8.804±0.866h和8.475±0.932h,经配对t-检验,两者的AUC, Tpeak, Cmax ,T1/2β等主要药代动力学参数均无显著性差异(P>0.05).采用梯形法计算的两者的AUC0-t,实测Cmax、Tpeak值进行统计学分析,结果表明被试制剂和参比制剂具有生物等效性.国产西沙必利片的相对生物利用度为102.5%±5.0%.     

氢溴酸西酞普兰片在健康人体的药动学

目的:研究国产氢溴酸西酞普兰片在健康人体内的药动学.方法:19名健康男性志愿者单剂量口服40 mg氢溴酸西酞普兰片,采用高效液相色谱法测定血浆中氢溴酸西酞普兰浓度,并用3P97软件统计处理.结果:氢溴酸西酞普兰片的药-时曲线符合二室模型,其Cmax,Tmax,T1/2,AUC0-132,AUC0-∞分别为(47.3±11.5)μg·L-1,(3.3±1.6)h,(36.3±9.7)h,(1 892.8±388.2)μg·L-1·h,(2 069.9±428.7)μg·L-1·h.结论:为临床用药提供参考资料.     

国产替米沙坦片健康人体生物等效性评价

目的:评价国产和进口替米沙坦片剂在健康人体的生物等效性.方法:采用高效液相色谱-荧光检测法测定18名健康志愿者单次、交叉口服替米沙坦片80 mg后血浆替米沙坦浓度.用3P97药动学软件进行药动学参数计算及生物等效性评价.结果:两种替米沙坦片的药-时曲线均符合二室模型,参比制剂、受试制剂的主要药动学参数为:Cmax分别为(931.0±367.7)μg·L-1和(894.2±421.7)μg·L-1;Tmax分别为(1.0±0.6)h和(1.4±0.8)h;T1/2β分别为(28.1±14.1)h和(27.0±10.8)h;AUC0-t分别为(4 085±2 313)μg·L-1·h和(3 920±2 199)μg·L-1·h;AUC0-∞分别为(4 751±2 742)μg·L-1·h和(4 352±2 569)μg·L-1·h.国产替米沙坦片的相对生物利用度F0-t为(97.5±15.6)%,F0-∞为(96.5±15.8)%.结论:方差分析和双单侧t检验证明两制剂具有生物等效性.     

利鲁唑片健康人体药动学

目的:研究国产利鲁唑片在健康人体内的药动学.方法:20名健康男性志愿者单剂量口服100 mg利鲁唑片,采用高效液相色谱法测定血浆中利鲁唑浓度,并用3P97软件统计处理.结果:利鲁唑片药-时曲线符合二室模型,其Cmax,Tmax,T1/2,AUC0-24,AUC0-∞分别为(686.1±154.8)μg·L-1,(0.7±0.2)h,(7.9±3.2) h,(2302.8±620.7)μg·h· L-1,(2518.8±580.5) μg·h·L-1.结论:为临床用药提供参考资料.     

健康志愿者恩替卡韦分散片的生物等效性研究

目的评价2种恩替卡韦制剂在健康人体的生物等效性。方法采用随机、双周期、自身交叉的试验设计。24例健康男性志愿者单次口服试验制剂(恩替卡韦分散片)或参比制剂(恩替卡韦片)1 mg,血浆样品采用HPLC-MS/MS法测定,计算两者的主要药物动力学参数,进行生物等效性评价。结果恩替卡韦血药浓度在0.05²0 mg·L-1与峰面积线性关系良好(r2=0.999 8),最低定量浓度为0.05μg·m L-1,批内及批间精密度RSD<15%;服用试验制剂或参比制剂后血浆中恩替卡韦的Cmax分别为(10.51±3.11)和(10.25±2.98)μg·L-1;tmax分别为(0.63±0.21)和(0.62±0.40)h;t1/2分别为(62.35±30.26)和(60.48±26.54)h;AUC020 mg·L-1与峰面积线性关系良好(r2=0.999 8),最低定量浓度为0.05μg·m L-1,批内及批间精密度RSD<15%;服用试验制剂或参比制剂后血浆中恩替卡韦的Cmax分别为(10.51±3.11)和(10.25±2.98)μg·L-1;tmax分别为(0.63±0.21)和(0.62±0.40)h;t1/2分别为(62.35±30.26)和(60.48±26.54)h;AUC0^∞分别为(35.22±9.50)和(34.61±7.90)μg·h·L-1;AUC0∞分别为(35.22±9.50)和(34.61±7.90)μg·h·L-1;AUC0^tn分别(28.91±6.63)和(28.58±5.73)μg·h·L-1;试验制剂的相对生物利用度F0tn分别(28.91±6.63)和(28.58±5.73)μg·h·L-1;试验制剂的相对生物利用度F0^tn、F0tn、F0^∞分别为(101.25±12.02)%和(102.99±20.40)%。结论试验制剂和参比制剂具有生物等效性。     

国产苯磺酸氨氯地平片健康人生物等效性研究

目的:以进口制剂为对照,评价国产苯磺酸氨氯地平片生物等效性.方法:采用2制剂双周期自身对照试验设计.18名男性健康志愿者随机分别服用单剂量苯磺酸氨氯地平试验片剂和参比片剂10mg,采用LC/MS/MS法检测,测定血浆苯磺酸氨氯地平的浓度.采用DAS 2.0程序计算药动学参数.结果:苯磺酸氨氯地平血药浓度在0.050～20.0μg·L-1范围内线性关系良好(r=0.994 9),最低定量浓度为0.050μg·L-1,日内及日间精密度RSD＜7.4%.参比制剂和试验制剂苯磺酸氨氯地平的AUC0～tn分别为(249.4 ±68.6)和(251.9±53.4)μg·h·L-1,AUC0～∞分别为(287.9-6 84.0)和(288.2.±67.5)μg·h·L-1;Cmax分别为(6.02 ±1.45)和(6.39±1.71)μg·L-1;Tmax分别为(7.90±2.94)和(8.00 ±3.40)h.以AUC0～tn与AUC00～∞计算相对生物利用度分别为(104.7 ±25.2)%和(103.5±25.7)%.结论:建立的分析方法准确灵敏,2种制剂生物等效.     

酒石酸唑吡坦口溶片的药动学及生物等效性研究

目的:研究酒石酸唑吡坦口溶片的药动学及生物等效性。方法:采用随机自身对照双周期交叉试验设计,18名健康受试者单剂量口服受试制剂7.5mg或参比制剂10mg后,用高效液相色谱-荧光法测定人血浆中的唑吡坦浓度,用非房室模型法估算唑吡坦的药动学参数。结果:受试制剂与参比制剂的主要药动学参数分别为:Cmax(117.62±24.39)、(126.30±35.27)μg·L-1,tmax(0.69±0.16)、(1.25±0.29)h,AUC0～τ(431.16±109.25)、(451.58±114.25)μg·h·L-1,AUC0～∞(450.79±108.03)、(465.34±121.89)μg·h·L-1。受试制剂相对于参比制剂的生物利用度为(97.9±10.7)%。结论:2种国产唑吡坦片剂吸收程度等效而吸收速度不等效。     

抗氧化能力指数(ORAC)测定原理及应用

目的介绍抗氧化能力指数测定方法的原理、应用及发展前景。方法被译为抗氧化能力指数的oxygenradicalabsorbancecapacity(ORAC)方法,是目前抗氧化研究领域中为人们所关注的一个评价方法。该方法以偶氮类化合物AAPH作为过氧自由基来源,SodiumFluorescein为荧光指示剂,维生素E水溶性类似物Trolox为定量标准,使用荧光微孔板分析仪进行分析。结果方法的专属性、线性、精密度、准确度及重复性等与其他抗氧化能力分析方法相比具有诸多显著的优点。结论该方法目前已成功应用于生物样品、植物或食品提取物和纯化合物等多种样品的体内外抗氧化能力分析,并有希望在研究氧化与疾病发生关系等方面发挥重要的作用。     

拉呋替丁胶囊的人体药动学研究

目的:研究拉呋替丁胶囊在健康人体内的药动学。方法:12名健康志愿者分为男、女2组,分别交叉单剂量口服拉呋替丁胶囊10、20mg后,用高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中拉呋替丁浓度,用DAS软件求算药动学参数。结果:口服拉呋替丁胶囊10、20mg后的主要药动学参数分别为:tma(x1.27±0.41)、(1.13±0.47)h,Cma(x165.98±43.01)、(344.22±70.70)μg·L-1,AUC0～16(673.96±196.84)、(1459.10±403.44)μg·h·L-1,AUC0～∞(752.82±196.84)、(1506.57±409.08)μg·h·L-1。结论:拉呋替丁胶囊口服后吸收迅速和完全,在健康受试者体内的药动学过程基本符合口服一级一室模型。     

人工合成胸腺素α1静脉注射或皮下注射在小鼠和大鼠体内的药动学研究

目的:研究人工合成胸腺素α1(sTα1)静脉注射或皮下注射在小鼠和大鼠体内的药动学特征。方法:取小鼠45只(sTα1,1mg·kg-1)、大鼠3只(sTα1,0.5mg·kg-1),尾静脉注射相应药物,分别于注射前及注射后6h内小鼠眼眶静脉采血和大鼠心脏采血;另取小鼠180只,随机分为高、中、低(sTα1,5、1、0.32mg·kg-1)剂量组,取大鼠9只,随机分为高、中、低(sTα1,2.5、0.5、0.16mg·kg-1)剂量组,皮下注射相应药物,分别于注射前及注射后10h内小鼠眼眶静脉采血和大鼠心脏采血,用酶联免疫吸附法检测各时间点的血药浓度,并计算其药动学参数。结果:sTα1静脉注射在小鼠体内的t1/2β为0.68h、AUC0～∞为554.32μg·h·L-1,在大鼠体内的t1/2β为(1.87±0.50)h、AUC0～∞为(1602.91±360.41)μg·h·L-1;sTα1高、中、低剂量组皮下注射在小鼠体内的t1/2分别为0.76、0.54、0.268h,AUC0～∞分别为3222.95、417.67、366.60μg·h·L-1,在大鼠体内的t1/2分别为(1.23±0.23)、(1.40±0.37)、(1.99±0.94)h,AUC0～∞分别为(22436.74±5641.94)、(1539.63±203.30)、(729.60±320.0)μg·h·L-1。结论:sTα1在大鼠和小鼠体内静脉注射的药动学过程属于一级二室开放模型,皮下注射的药动学过程属于一级一室开放模型。     

RP-HPLC法测定人血浆中烟酸的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中烟酸浓度的方法。方法:以咖啡因为内标,血浆样品用10%硫酸锌沉淀后进行分析,色谱柱为DiamonsilTM C18,流动相为乙腈-0.01mol·L-1磷酸二氢钾(内含0.01mol·L-1四丁基溴化铵,pH6.5)=15:85,流速为1.0mL·min-1,检测波长为262nm,柱温为40℃。结果:烟酸血药浓度在0.2～20.0μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),最低检测浓度为0.1μg·mL-1;低、中、高浓度的回收率在93.27%～102.65%之间,日内、日间RSD均<8%。结论:本方法准确、灵敏、重复性好,且不受他汀类药物的干扰,能为烟酸,尤其临床上与他汀类药物联合应用时的血药浓度监测及人体药动学研究提供检测手段。     

HPLC法测定肾移植患者血清中内源性氢化可的松浓度

目的:建立测定肾移植患者血清中内源性氢化可的松浓度的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-水-甲醇(51∶136∶77),流速为1.2 mL·min-1,紫外检测波长为245 nm,柱温为30 ℃,进样量为30 μL。结果:氢化可的松血药浓度在50～300 μg·L-1范围内线性关系良好,最低检测限为8 μg·L-1;日内、日间RSD分别为4.04%～6.81%、4.09%～9.16%,低、中、高3种浓度的方法回收率分别为(103.12±4.53)%、(100.77±4.07)%、(101.61±6.92)%。肾移植患者内源性氢化可的松术后1～3、3～6、6～12、>12个月的浓度分别为(31.89±21.42)、(45.26±29.26)、(49.69±22.00)、(53.56±29.86)μg·L-1。结论:本法操作简便、灵敏度高、快速可靠,适用于肾移植患者血清中内源性氢化可的松浓度的测定。     

LC-MS法同时测定厄贝沙坦氢氯噻嗪片中2组分的血药浓度及其生物等效性研究

目的:建立同时测定人血浆中厄贝沙坦和氢氯噻嗪浓度的方法,并评价2种厄贝沙坦氢氯噻嗪片的生物等效性。方法:以L--替11醋22米酸.9沙。铵坦对缓为1冲8内液名标(健氨,康血水受浆调试样节者品pH随经值机沉至双淀9周法.0)期处=交理3叉后5∶单,6采5剂;用用量液于口-定质服量联相分用同析法剂的进量离行的子测受对定试厄,制色贝剂谱沙或柱坦参为m比/Wz制-at剂e4r2s厄7X.3贝T→e沙r-ra坦1R9氢P31.氯08,,噻氢流嗪氯动片噻相以嗪为考m乙/察z腈-其∶12生m96m物.0o→等l·效性。结果:厄贝沙坦和氢氯噻嗪血药浓度分别在2.00～5000μg·L-(1r=0.9984)和2.00～200μg·L-(1r=0.9988)范围内线性关系良好,最低定量限均为2.00μg·L-1,提取回收率均>90%,日内、日间RSD均<10%,厄贝沙坦、氢氯噻嗪方法回收率分别为96.3%～108.0%、98.2%～100.5%。2种制剂的cmax、AUC0～t、AUC0～∞制剂间和周期间均无显著性差异(P>0.05),对tmax进行非参数检验显示亦无显著性差异(P>0.05)。结论:本法特异性强、快速、准确,所需样本少且前处理简单,能同时对厄贝沙坦和氢氯噻嗪的血药浓度进行定量;2种制剂生物等效。     

非洛地平片在人体内药动学与药效学的相关性研究

目的:研究非洛地平片在人体内药动学与药效学的相关性。方法:采用液-质联用法测定10名健康受试者单剂量口服非洛地平10mg后的血药浓度,并以DAS2.0药动学模块程序处理药-时数据及计算药动学参数。分别于服药前及服药后不同时间对收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、心率(HR)、平均动脉压(MAP)进行监测。结果:平均药动学参数tmax、Cmax、AUC0～48、AUC0～∞、Ka、t1/2分别为(3.88±0.35)h、(5.94±1.45)μg·L-1、(61.73±15.54)μg·h·L-1、(67.62±16.09)μg·h·L-1、(0.73±0.33)h-1、(15.43±4.15)h,以不同时间血药浓度分别对SBP、DBP、HR和MAP进行回归分析,其相关系数分别为0.614 6、0.985 6、0.907 7和0.568 6。用药2～8 h内DBP下降明显(P<0.05或P<0.01)。结论:非洛地平血药浓度与药效相关,其有效血药浓度约为2.64～5.84μg·L-1,临床应用非洛地平应重点监测DBP、HR。     

RP-HPLC法测定人血浆中米氮平的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中米氮平浓度的方法。方法:色谱柱为KromasilC18,流动相为甲醇-水-1mol·L-1乙酸铵-5mol·L-1氨水(900:100:10:3),流速为1.0mL·min-1,内标为盐酸普萘洛尔,柱温为室温,检测波长为294nm。结果:米氮平血药浓度在20.0～500.0μg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9990);平均回收率为98.56%,日内、日间RSD分别为3.42%～4.87%、4.25%～5.88%。结论:本方法操作简便、回收率高、精密度好,可用于米氮平的治疗药物监测。